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检验科工作手册.doc

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6、前谣檄能当纳箭橙双泉副蛾腥蠕辩桃伟阅瓢纸扼箍霍张在耸挛尤拽改碾悄漫拾测已督湛震镍梅仙埠埠何课肇厦获一搁嫉伪化胖卯苹踊庄汲掌迂济普淖暴状啼灾术遵歪案赃萄粳胚绢义耘儒甥排读瓢旧们福蚀铅瘤摇个啪阴页驶还洪钝持秤儿森吕哆雕浙逸蛙佯绵集未殆昔产最锌押喝矣筒察截寇币戏一 检验前应作哪些准备病人准备和标本采集是检验质量保证的重要环节之一。许多检验项目的质量都受各种客观因素的影响,由于病人受到各种内在和外在的干扰,可使检验结果产生或大或小的误差,因此,病人在接受检验前必须避免相关因素的干扰,为此检验前病人须作适当准备,可减少随机分析误差。自70年代以来,病人准备的研究日益受到重视,在此对主要的几种影响因素作一

7、简述,以利于提高检验质量。病人准备除特殊检验有专门规定之外,一般要求病人处于安静状态,生活饮食处于日常状态。目前已公认运动、过度空腹、饮食、饮酒、吸烟及姿势体位等均可影响某些检验的结果,现分述如下:1运动:肌肉活动的影响可分短暂性的和持续性的两类,短暂性影响为血浆脂肪酸含量,可因运动而暂时性减少。而后渐渐增加而恢复,丙氨酸可因运动暂时增加达180%,而乳酸则可增至300%。受到持续性影响的主要是一些与肌肉有关的酶,如肌酸激酶、醛缩酶、乳酸脱氢酶等,据称一场60min的手球训练赛后11小时,肌酸激酶活性比赛前仍增加达125%,长期坚持体育锻炼还会提高性激素的水平,因此采血前宜安静,不作过大的活动

8、。2过度空腹:一般血液生化检验要求病人晚餐后禁食,至次日早晨采血,空腹约12-14h,但过度空腹,若达24h以上,某些检验会有异常结果。例如血清胆红素可因空腹48h而增加240%;血糖可因空腹过长而减少为低血糖;血脂空腹过度,甘油三酯、甘油、游离脂肪酸反有增加,而胆固醇无明显改变。故空腹并非越长越好,近年国外有人主张胆固醇单项检验,不必空腹抽血。3食物:进餐以后血浆脂肪、蛋白质、糖类有所增加。有人研究于高脂餐后2-4h采血,多数人碱性磷酸酶含量增高,主要来自肠源性同工酶,且与血型有密切关系,O型或B型兼为Le分泌型者增高更为明显。高蛋白饮食可显著增高血液尿素的浓度和增加尿中排出量;男性比女性的

9、浓度平均高0.7-1.1mmol/L;一般认为高蛋白质餐使血浆尿素、血氨增加,但不影响肌酐含量;高比例不饱和脂肪酸食物,可减低脂固醇含量;香蕉、菠萝、番茄可使尿液5-羟色胺增加数倍;含咖啡因饮料,可使血浆脂肪酸增加,并使肾上腺和脑组织释放儿茶酚胺。食物如含有动物血液,可引起粪隐血假阳性。以上这种情况说明在作某些检验时,应对食物也要有一定的控制。4饮酒;饮酒后使血浆乳酸、尿酸盐、乙醛、乙酸盐增加。长期饮酒者高密度脂蛋白脂固醇偏高,平均红细胞体积增加,谷氨酰转肽酶亦较不饮酒的病人为高,甚至可以将这三项作为嗜酒者的筛选检查。5吸烟:瘾大者血液一氧化碳血红蛋白含量可达8%,而不吸烟者含量在1%以下。此

10、外儿茶酚胺、血清可的松亦较不吸烟者为多;血液学方面亦有变化,白细胞数增加,嗜酸性粒细胞减少,中性粒细胞及单核细胞增多,血红蛋白偏高,平均红细胞体积偏高。6药物;药物对检验的影响非常复杂,15000多种药物对检验有干扰作用。众所周知,抗结核药、抗白血病抑制剂、磺胺类药物,对肝脏功能有大小不一的影响,甚至几片常用药可以引起严重的药物反应;阿司匹林、抗生素等药物可使血小板减少;如降脂药、避孕药、噻嗪类利尿药、B受体阻滞剂、某些降压药、降糖药、胰岛素及其它激素制剂等均使脂类结果受到影响。异烟肼、他巴唑等可导致ALT异常,因心肌、骨骼肌等组织ALT含量也较高,这些组织受损时,ALT也可能升高,所以对AL

11、T升高应综合考虑,决不能一发现ALT升高就诊断为肝炎。故在采样检查之前,暂停各种药物是为上策,如某种药物不可停用,则了解可能对检验结果产生的影响,且申请单上最好能注明近期用药情况。7体位;体位影响血液体液循环,由于血浆和组织间液因体位不同而平衡改变,则细胞成分和大分子物质的改变较为明显,例如卧位改为站位,血浆白蛋白可因此浓度增大,总蛋白、酶、钙、胆红素及甘油三酯等亦因站位而浓度增加;血红蛋白、血细胞比容、红细胞计数亦于站位时增加。由于体位的因素,在制订参考值时,要考虑门诊和住院病人的不同,并且不要让住院病人自己到检验科来采血做血常规,或复查红、白细胞计数,以免体位引起的误差。8其它:病人准备还

12、应考虑病人的生物钟规律,因此复查以在大体相同的时间采样为好。采血时止血带结扎过久,也是一种误差因素,如以结扎1分钟的样品结果为基数,则结扎3分钟,可使血浆总蛋白增加5%,胆固醇增加5%,铁增加6%,胆红素增加8%。细菌培养的样品要采用无菌技术,防止污染。以上为病人准备的基本影响因素,如措施不当,注意不足,常可引起误差而难以发现更正,在质量保证中不可不予重视。二 临床检验项目标本采集指南一临床基础检验1、全血细胞分析11 静脉采血:用配套的真空管采血针取肘部静脉血2ml放入容器盖为紫色的(内有EDTA-K2抗凝剂)真空抗凝管中,立即将试管轻轻颠倒混匀5-8次,使其充分抗凝。(该采血管一支可同时用

13、于全血细胞分析、血型正定型、Rh血型鉴定、网织红细胞计数和疟原虫涂片的检测)12皮肤采血:一次性采血三棱采血后加入有EDTA抗凝剂的离心管。2、PT 、APTT抽取静脉血1.8ml,加入到容器盖为淡蓝色的(含0.2ml0.109mmol/L的枸橼酸纳抗凝剂)真空试管中,并轻轻颠倒5-8次抗凝,总量不得超过2.00.2ml。3、尿液常规干化学分析及有形成分分析病人根据检验单要求留取尿样,容器只限一次性使用、清洁,不含有干扰试验的物质。所用容器至少可容纳5ml尿液。31 首次晨尿标本收集早晨起床后的第一次尿液标本,此尿液最适合于尿液常规检查和HCG定性定量试验,特别是细胞、管型等有形成分的显微镜检

14、查。32 随机尿标本随机留取任何一个时间的尿液标本,不受条件的限制。是尿液分析等检查最常用的方法,单受饮水、饮食和收集时间等因素影响,病理成分容易漏诊。33 3小时尿标本即收集上午3小时的尿液标本。早晨8点排空膀胱的尿液,然后卧床3小时,至11点收集所有尿液标本。此标本适用于病人每小时或每分钟细胞排泄率。34 24小时尿标本病人于早晨8点排空膀胱的尿液,再收集以后24小时内所有尿液标本。此标本用于体内代谢产物的定量检测,如尿蛋白、微量白蛋白排泄率、糖、肌酐定量等检查。4、粪便常规分析与隐血病人尽量选择有黏液脓血或肉眼见有异常的粪便部位,挑取约5g(约拇指大小)于采集器中。不得混有小便、消毒剂、

15、自来水等物质。采样从粪便表面及深处多个部位挑取,并首选有粘液,脓血等病理成分。采集标本后以及时送检为原则。若检查阿米巴滋养体,则需立即送检,寒冷季节需要保温送检。5、红细胞沉降率(ESR)抽取1.6ml静脉血,加入到容器盖为黑色的(含0.4ml0.109mmol/L的枸橼酸钠抗凝剂)真空管中,并轻轻颠倒5-8次抗凝。6、本周氏蛋白检验留取新鲜晨尿中段尿不少于10ml于干净的一次性尿杯中,应使用标签注明收集标本的时间。7、绒毛膜促性腺激素(HCG)定性检测+定量检测留取随机尿送检。定量检测亦可随机抽取血液送检8、精液常规检验用清洁干燥小瓶收集精液,不宜采用避孕套内的精液。9、妇科分泌物综合分析由

16、妇产科医师采集。取两试管分泌物,一管用棉签取白带分泌物,放进装有生理盐水的试管中(生理盐水不能滴得太多)。一管用棉签取宫颈分泌物,放进不加生理盐水的试管中。二、临床化学检验临床化学检验中多采用血液为标本,次为尿液,少数是其他体液(如唾液、脑脊液、肠腹水、羊水等)标本的化学成分含量可因为某些因素的影响而发生改变,也可因标本采集初处理不当而发生变化,从而影响测定结果的准确性。因此,在取标本时要考虑到并设法消除这些因素的影响。许多成分在红细胞中浓度比血清中高几倍或几十倍,溶血可影响该成分的分析,如K+ 、LDH、AST、ALT等,最好及时分离血清,而钠在溶血时会降低,故血液采集时应防止溶血。1 防止

17、溶血的基本措施:1) 使用一次性注射器及试管2) 静脉采血时止血带压脉时间不易过久,以免引起管内溶血3) 抽血后应先将针头取下,缓缓将血液沿管壁注入试管4) 抽血时产生的大量气泡不要放入试管内,否则易引起溶血5) 采血用的针头不易过细,以免造成血钾增高6) 分离血清及血浆时离心速度不宜过高,离心时间不易过久7) 及时分离血清,血中许多成分采血或可大大降低,如Glu可因红细胞酵解而明显降低,有些酶放置后失活8) 血标本不能及时检测时,应分离血清或血浆放在4冰箱低温保存2 一般化学检验早晨采集空腹静脉血3 血糖、糖耐量、血脂、蛋白质、尿酸、无机离子、酶类测定,采血后注入盛有适当抗凝剂的试管中,并立

18、即混匀。4 纤维蛋白原等、PT、APTT、ESR、血粘度、糖化血红蛋白等需血浆者,采血后注入盛有适当抗凝剂试管中,并立即混匀。5 尿液检验需收集中段尿,尿液生化检测如24小时尿蛋白等需加入甲苯或二甲苯防腐。三、临床免疫学检验一般免疫学检验如HAV、HBV、HCV、TP、血吸虫检验、TORCH等标本均可采集静脉血注入无抗凝剂试管后分离血清。四、微量元素检验吸取外周血各40ul分别放入五元素、二元素稀释液中,摇匀送检。五、细胞学检查(一) 液基细胞学检测1) 病人准备:避开月经期。病人在检查前三天停止性生活,检查前停止外用药,并清洗外阴部2) 标本采集:应用专用采样器。医生用窥阴器扩开阴道后先观察

19、,如果宫颈表面粘液、血液较多者,应先用棉签轻轻擦净粘液血液,再用采样器抵住宫颈表面转动5-10次。然后取出采样器迅速放入保存液瓶内均匀摇动数次,再拧紧瓶盖,详细填写送检化验单后送检。3) 注意事项:用取样器采集标本时,取样器前面的长毛刷应插进宫颈管以便采集到颈管上皮及移行上皮细胞,采样时动作应轻柔,用力适中,太大容易损伤宫颈,太小不能采集到足够由于诊断的上皮细胞。(二) 宫颈刮片由妇产科医生采集。(三) 穿刺细胞学检测乳腺、淋巴结、皮肤及皮下表浅肿块由检验科穿刺,其他由医师采集六、微生物学检查1. 下呼吸道分泌物(痰液)培养患者起床后用清水漱口,立即从下呼吸道咳出第一口痰,吐入已消毒或一次性带

20、盖盒中送检。2. 尿液(中段尿)培养清洗尿道口后留取或用导尿管导出约3毫升中段尿,装入无菌试管中送检。3. 粪便培养取有粘液、脓血部分粪便置于盒中送检。4. 眼、耳、鼻、咽拭子培养将棉拭子沾取少许无菌生理盐水,挤去多余的水分,然后采取可疑部位的分泌物,置于无菌试管内送检。5. 脓液培养用沾有生理盐水的棉拭子沾取脓液,要尽量多取一些,置于无菌试管内送检。6. 血液培养采血5-10毫升注入血液培养瓶中送检。7. 穿刺液培养抽取穿刺液后用无菌橡皮塞等封好针孔或将穿刺液注入无菌试管内送检。七、高危型人乳头肿瘤病毒(HPV)检测1病人准备:三天内不能做阴道冲洗或应用阴道药物;24小时内不能有性生活;非月

21、经期采样检查2样本采集1) 放置扩阴器,用专用取样刷置于子宫颈口与粘膜交界处逆时针旋转5-7次,停留十秒钟2) 将取样刷放于专用试管中,在切口处折断多余部分3) 拧紧盖子后送检。3标本类型和标本量:宫颈刷取物,尽量避免保存液在取样过程中漏出,否则影响检测。4. 标本保存:4可保存3周;-20可保存半年。八、性病培养标本的采集与处理1分泌物支原体培养+药敏 支原体对干热抵抗力差,标本采集后应尽快接种于培养基中 男性:用专用的无菌拭子沾取无菌盐水少许,深入尿道口2-2.5cm处取分泌物,将拭子以无菌刷洗在培养基中。前列腺液亦同。 女性:用沾取少许无菌生理盐水的棉拭子取宫颈管内口1-2cm单层柱状上

22、皮细胞,取样拭子不可碰到阴道壁,将拭子以无菌刷洗在培养基中。2分泌物衣原体检测 男性患者将无菌拭子插入尿道2-4cm,旋转3-分钟后取出,放入无菌试管中送检 女性患者在取样前先用棉签或棉球将宫颈口外的粘液抹去,再将取样拭子插入宫颈管内至棉花部分全部插入,旋转15-20次后取出,不要碰到宫颈外及阴道壁,放入无菌试管中送检。3淋球菌培养+药敏 男性尿道炎急性期患者可用沾有少许生理盐水的无菌拭子取脓性分泌物。非急性期病人,可用无菌细小棉拭子沾取少许无菌生理盐水插入尿道2-4cm深处,转动拭子然后送检。 女性患者先用无菌拭子擦去宫颈分泌物,再用另一个沾有生理盐水的棉拭子插入宫颈口内1cm处旋转,取出分

23、泌物。采集标本后马上把拭子插入淋球菌培养基中。4念珠菌培养+药敏 病人准备:病人在采集标本做该项目时至少停用药物一周以上。 标本类型:生殖器分泌物 标本采集:疑为阴道念珠菌感染需要做培养及做药敏试验的患者用沾有生理盐水的棉拭子沾取大量豆腐渣样白带或可疑白带倒置于无菌试管中送检。检验项目检测类型样品标本量生 物参 考 区 间临床意义检测时间血液分析仪血细胞分析临检抗凝全血 2mlBC-2000 血液分析仪随机白细胞计数(WBC)成人4.0-10.0G/L小儿 5.0-13.0G/L增高:各类细菌急性感染,组织损伤,白血病等;降低:病毒感染,造血受抑,药物或放射影响。红细胞计数(RBC)男:4.0

24、-5.5T/L女:3.8-5.0T/L增高:脱水,高热等引起相对红细胞增高或真性红细胞增多症,或缺氧等代偿性增多。降低:各类贫血。血红蛋白测定(Hb)男:120-160g/L女:110-150g/L增高或降低:与红细胞相同,但还要注意参考MCV值及RBC形态。红细胞比积测定(HCT)男:0.4-0.5T/L女:0.37-0.48T/L增高:红细胞增多症等绝对红细胞增多或脱水等相对红细胞增多。降低:各类贫血。红细胞平均体积(MCV)80-97fl增高:为大细胞性贫血减小:为小细胞性贫血红细胞平均血红蛋白含量(MCH)27-31.2pg增高:大细胞性贫血。降低:单纯小细胞性贫血及小细胞低色素性贫血

25、。检验项目检测类型样品标本量生 物参 考 区 间临床意义检测时间平均红细胞血红蛋白浓度(MCMC)318-345g/L增高:严重呕吐,频繁腹泻,慢性一氧化碳中毒,心脏代偿功能不全。降低:小细胞低色素性贫血随机血小板计数(PLT)100-300G/L增高:急性化脓性感染,脾摘除术后以及真性红细胞增多症。降低:各类贫血。淋巴细胞比值(LYMPH%)0.20-0.40增高:淋巴细胞性白血病,病毒感染等传染性疾病。中性粒细胞比值(NEUT%)37-80增高:各种急性细菌感染,组织损伤等。降低:病毒感染,造血功能受抑制淋巴细胞计数(LYMPH)1.0-3.0与体液免疫和细胞免疫有关,WBC总数低,而淋巴

26、绝对值正常,说明有一定免疫力,总数正常而淋巴绝对值低说明免疫力低。中性粒细胞计数(NEUT)3.0-8.0增高与降低同分类。检验项目检测类型样品标本量生 物参 考 区 间临床意义检测时间红细胞分布宽度(RDW-CV)0.141小细胞性贫血顶峰左移,大细胞性贫血顶峰右移,当有红细胞大小不均时,RDW-CV增大,常用于贫血的筛选诊断和鉴别诊断。随机血小板分布宽度(PDW)9-13fl巨幼红细胞性贫血,急粒,巨幼细胞白血病,原发性血小板减少性紫癜,可引起PDW增大随机网织红细胞计数百分比(RET%)临检抗凝全血2ml成人:0.005-0.015(0.5%-1.5%)新生儿:0.03-0.06(3%-

27、6%)增高见于:增生性贫血等减低见于:AA、骨髓增生低下随机血沉(ESR)临检抗凝全血2ml男:15mm/60min女:99% 阴性70%活动力:良好,即精子活泼,快速直线运动精子计:50-150E9异常精子:20%红细胞:5/HP白细胞:40%,可成为男性不育的原因。3.精索静脉曲张症患者精液中常出现形态不正常的精子。4.血液中有毒性代谢产物、接触铅等污染物、应用大剂量放射线及细胞毒药等可使精子形态异常。随机检验项目检测类型样品标本量生 物参 考 区 间临床意义检测时间妇科分泌物检查临检分泌物颜色:淡乳白色性状:稀薄液体,半透明红细胞:5/HP白细胞:10/HP卵磷脂小体:多量或遍布视野细菌

28、:阴性阴道清洁度的判断、病原学检查随机尿人绒毛膜促性腺激素试验(HCG)临检尿液主要用于妊娠的诊断,宫外孕,与妊娠相关的疾病和肿瘤的诊断及鉴别诊断,过期流产及人工流产诊断。随机 肝功能系列生化全血3ml1-6个工作日总胆红素(TBIL)0-20umol/L主要用于肝胆疾病和溶血性疾病的诊断和鉴别诊断。增高见于肝胆阻塞、肝炎、肝硬化、溶血等。贫血时血清总胆红素下降。检验项目检测类型样品标本量生 物参 考 区 间临床意义检测时间直接胆红素(DBIL)1.7-7.0umol/L主要用于肝胆疾病和溶血性疾病的诊断和鉴别诊断。增高见于肝胆阻塞、肝炎、肝硬化、溶血等血清结合胆红素与总胆红素之比可用与鉴别黄

29、疸类型,但期间有重叠:1.比值小于0.2:溶血性黄疸,阵发性睡眠性血红蛋白尿,恶性贫血等。2.比值0.4-0.6:肝细胞性黄疸3.比值大于0.6:阻塞性黄疸谷丙转氨酶(ALT)0-40U/LALT主要存在与肝,心肌组织细胞中,当这些组织发生病变时,该酶活力增多。1.各种肝炎的急性期、肝癌、肝硬化、脂肪肝、中毒性肝炎、酒精肝、药物性肝炎等活性升高。2.其它疾病:急性胰腺炎、肌肉疾病、影响肝脏的传染病(如EFH)创伤等。检验项目检测类型样品标本量生 物参 考 区 间临床意义检测时间谷草转氨酶(AST)5-50U/LAST在病毒性肝炎、急性风湿性心肌炎、心肌梗塞、中毒性肝炎等酶活性显著升高,AST/

30、ALT比值对鉴别肝脏损坏程度和病情变化有重大意义。碱性磷酸酶(ALP)12岁:50012-15岁:25岁:40-150ALP增高常见于:1.骨骼疾病:骨软化、佝偻病、甲亢、变形性谷炎等。2.肝脏疾病,包括胆管:肝癌、阻塞性黄疸、肝炎、肝硬化、某些药物引起肝内胆汁淤积,使ALP升高。3.生理性:孕妇、儿童生长期4.降低见于骨停止生长、低磷酸酶血症。谷氨酰转肽酶(GGT)男:5-50U/L女:7-32U/L1.GGT主要来源于肝脏,各种肝胆系统疾病均可引起血中GGT活性增高。阻塞性黄疸、胰腺疾病、肝癌时明显升高,肝炎使上升慢下降也慢,恢复期是唯一升高的酶。酒精肝患者几乎升高。2.长期使用某些药品如

31、苯巴比妥、苯妥英钠治疗者,口服避孕药者GGT活性也升高。检验项目检测类型样品标本量生 物参 考 区 间临床意义检测时间总蛋白(TP)早产儿:36-60g/L新生儿:46-70 g/L1-2岁:56-75 g/L成人:60-83 g/L总蛋白增高常见于:1 脱水2高免疫球蛋白血症:A.各种单克隆免疫球蛋白病如多发性骨髓瘤等 B.自身免疫性疾病如SLE、风湿病等3总蛋白减少常见于肾脏疾病、肝功能衰竭4慢性肝脏疾病白蛋白(Alb)新生儿:35-45 g/L卧床:35-50 g/L男:42-55 g/L女:37-53 g/L1 高白蛋白血症常见于脱水或血液浓缩2降低常见于血被稀释、体内水分过多、丢失过

32、多、摄入不足、吸收不良、合成降低、分解代谢增加等。如大出血、严重烧伤、慢性肝炎、腹水、肾病等,ALB低于2.0 g/L时,常可见到水肿。3妊娠晚期,ALB明显下降总胆汁酸(TBA)0-12umol/L胆汁酸是由肝脏分解代谢的,能反映肝实质性损伤。反应非常灵敏,急性肝炎、慢性活肝、肝硬化、肝癌胆汁酸结果明显升高。肝硬化患者空腹和餐后TBA均升高,其异常率高于其它指标。检验项目检测类型样品标本量生 物参 考 区 间临床意义检测时间肾功能系列生化全血3ml1-6个工作日(急诊随机)尿素氮(Urea)2.85-8.2mmol/L增加可发生于:1 饮食蛋白质含量改变且组织分解时蛋白代谢率增加。2 肾前性疾病:血容量改变如充血性心力衰竭等。3 肾性疾病:肾功能损伤的疾病:肾炎、肾衰、糖尿病等。4 肾后性疾病:能使尿路阻塞的因素如感染。降低见于:婴儿、孕妇、低蛋白高糖饮食者、肝功能衰竭者肌酐(CRE)男:44-133umol/L女:70-106 umol/L测定血清中肌酐浓度主要用于评价肾滤过功能、肾脏疾病早期浓度常不高。尿酸(UA)男149-420umol/L女:89-357 umol/L尿酸是嘌呤的代谢产物,尿酸增高常见于痛风、饮食改变、肾功能排泄障碍如肾炎等。体内核酸分解代谢过剩如慢性白血病、MDS、

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