不同发情处理方案对梅花鹿同期发情效果的影响.pdf

Chinese Journal of Wildlife 2024，45（2）：262-268Chinese Journal of Wildlifehttp：/不同发情处理方案对梅花鹿同期发情效果的影响崔鹤馨1，陈琦2，呼延含蓉3，苑冬梅1，尚丽元1，宋延来1，刘沂霖1，孙兴忠1，郝良玉1，冯凯1，田来明1*（1.吉林省畜牧兽医科学研究院，长春，130062；2.长春市农业科学院，长春，130111；3.吉林省动物疫病预防控制中心，长春，130062）摘 要为探索梅花鹿（Cervus nippon）最佳同期发情方案，在吉林省双阳鹿业良种繁育有限公司挑选163只健康、发情周期正常、繁殖机能良好的供试母鹿随机分为3组：A组采用国产阴道孕酮栓（CIDR），B组采用进口CIDR，C组采用二次前列腺素（PG），均辅以孕马血清促性腺激素（PMSG）法处理。另挑选100只供试母鹿随机均分为4组，采用筛选出的较优方案结合不同剂量PMSG法处理（组100 IU、组300 IU、组500 IU、组700 IU），探析不同发情处理方案对梅花鹿母鹿发情效果、发情时间分布、受胎率和双胎率的影响以及不同PMSG剂量对母鹿发情受胎的影响。结果表明：A、B组同期发情率差异不显著，但A、B组同期发情率分别较C组高23.5%和33.3%（p0.01），且A组掉栓率较B组高8.8%（p0.05）；3种处理方案对发情时间分布的影响极显著（p0.05），双胎率分别高13.4%和17.6%（p0.05）；采用进口CIDR辅以不同剂量PMSG法对梅花鹿进行同期发情处理，发现组、组、组同期发情率较组分别高36.0%、40.0%和48.0%（p0.05），但发情时间均集中在2448 h，组、组、组和组受胎率分别为46.2%、61.9%、59.1%和50.0%，呈先升高后下降的趋势（p0.05）。综上所述，阴道埋栓的发情方案显著好于二次PG法，进口CIDR优于国产CIDR；进口CIDR+PMSG法的母鹿发情率和受胎率随PMSG剂量的增加而升高，但发情时间不受PMSG剂量的影响，PMSG适宜剂量为300 IU。稿件运行过程收稿日期：2022-10-27修回日期：2023-09-15关键词：梅花鹿；同期发情；阴道孕酮栓；前列腺素；孕马血清促性腺激素Key words：Cervus nippon；Synchronous estrus；CIDR；PG；PMSG中图分类号：Q954.4；S865.4+2文献标识码：A文章编号：2310-1490（2024）-02-0262-07DOI：10.12375/ysdwxb.20240204基金项目：吉林省重点科技研发项目（212GN01）第一作者简介：崔鹤馨（1985），女，高级兽医师；主要从事梅花鹿疫病防治和繁育研究。E-mail：*通信作者：田来明，E-mail：崔鹤馨等：不同发情处理方案对梅花鹿同期发情效果的影响第2期The Influence of Different Estrus Treatment Schemes on the Synchronous Estrus Effect of Cervus nipponCUI Hexin1，CHEN Qi2，HUYAN Hanrong3，YUAN Dongmei1，SHANG Liyuan1，SONG Yanlai1，LIU Yilin1，SUN Xingzhong1，HAO Liangyu1，FENG Kai1，TIAN Laiming1*（1.Academy of Animal Husbandry and Veterinary Sciences，Changchun，130062，China；2.Changchun Academy of Agricultural Sciences，Changchun，130111，China；3.Jilin Provincial Animal Epidemic Prevention and Control Center，Changchun，130062，China）Abstract：In order to explore the optimal estrus synchronization plan for Cervus nippon，163 healthy，normal estrus cycle，and well reproducing female deer were selected from Shuangyang Deer Industry Breeding Co.，Ltd.in Jilin Province and randomly divided into three groups：Group A was treated with domestic vaginal progesterone suppositories（CIDR），Group B was treated with imported CIDR，and Group C was treated with secondary PG supplemented with pregnant horse serum gonadotropin（PMSG）.Another 100 female deer were randomly divided into four groups，and the selected optimal plan was combined with different doses of PMSG treatment（100 IU in Group，300 IU in Group，500 IU in Group，and 700 IU in Group），to explore the effects of different estrus treatment plans on the estrus effect，estrus time distribution，conception rate，and twin lambing rate of C.nippon，as well as the effects of different PMSG doses on the estrus conception of female deer.The results showed that there was no significant difference in the synchronous estrus rate between Group A and Group B，but the synchronous estrus rate in Group A and Group B was 23.5%and 33.3%higher than those in Group C，respectively（p0.01），and the thrombus shedding rate in Group A was 8.8%higher than that in Group B（p0.05）.The three treatment schemes had a significant impact on the distribution of estrus time（p0.05），the twin rate is higher than 13.4%and 17.6%（p0.05）.Adopting imported CIDR combined with different doses of PMSG for synchronous estrus treatment of C.nippon revealed that the estrus rate in the Groups ，and was 36.0%，40.0%，and 48.0%higher than that in Group （p0.05），but the estrus time was concentrated between 24-48 hours.The conception rates of Groups，and were 46.2%，61.9%，59.1%，and 50.0%，respectively，showing a trend of first increasing and then decreasing（p0.05）.In summary，the estrus plan of vaginal embedding is significantly better than the secondary PG method，and imported CIDR is better than domestic CIDR.The estrus rate and conception rate of imported CIDR+PMSG female deer increase significantly with the increase of PMSG dose，but the estrus time is not affected by PMSG dose.The appropriate dose of PMSG is 300 IU.我国东北地区梅花鹿（Cervus nippon）资源虽然较丰富，但由于母鹿个体发情时间分散且难以鉴定，其繁衍一直沿用传统配种方法，无法最大限度发挥优良种公鹿的效能，因此严重制约梅花鹿产业的发展。产业发展良种先行，人工授精和胚胎移植等先进繁殖技术的推广应用是加快梅花鹿良种化进程的有效途径，而同期发情是必需的程序。同期发情技术是采用外源激素使母畜自然发情周期改变，让母畜集中发情、配种和妊娠。国内外对鹿类同期发情技术均进行了探索研究110，但国内对梅花鹿同期发情的试验效果1，3，56，11均不理想。因此，本试验通过研究不同发情处理方案对梅花鹿母鹿发情效果、发情时间分布、受胎率和双胎率的影响，以及不同孕马血清促性腺激素（PMSG）剂量对母鹿发情受胎的影响，旨在探索最佳同期发情方案，为进一步提高和推广梅花鹿人工繁殖技术奠定基础。263野 生 动 物 学 报第45卷1材料与方法1.1试验动物选择健康、发情周期正常和繁殖机能良好的试验梅花鹿母鹿263只，年龄59岁。选择性器官发育良好、情欲充沛、膘肥体壮和胆小温顺的试情梅花鹿公鹿25只，年龄35岁。上述梅花鹿均由吉林省双阳鹿业良种繁育有限公司提供。1.2试验药品麻药眠乃灵、解药苏醒灵均购自吉林省华牧动物保健品有限公司，国产和进口阴道孕酮栓（cyclogest intravaginal device release，CIDR）分别购自河南法牧农业科技有限公司和新西兰哈密尔顿公司，前列腺素（PG）和孕马血清促性腺激素（PMSG）购自宁波第二激素厂，优质高产梅花鹿冷冻精液（0.25 mL/管）购自吉林省双阳鹿业良种繁育有限公司。1.3试验设计从 263 只供试母鹿中随机挑选 163 只，分为 3组：A组（58只）采用国产CIDR，B组（65只）采用进口CIDR，C组（40只）采用二次PG，均结合PMSG进行处理，筛选出较优处理方案。然后将剩余100只供试母鹿随机均分为4组，采用较优处理方案，结合不同剂量PMSG，组100 IU、组300 IU、组500 IU、组700 IU。1.4试验方法1.4.1同期发情处理在发情季节里任选一天，分批次麻醉供试母鹿。A、B组，植入CIDR，计为第0天，处理后用苏醒灵解麻醉，在第12天取CIDR时肌内注射PMSG 350 IU。C组，第1次注射PG 0.5 mg/只，计为第0天，第10天第 2 次注射 PG 0.5 mg/只，第 11 天肌内注射 PMSG 400 IU。较优方案+PMSG不同剂量处理组，较优方案处理第1天计为第0天，之后按较优方案PMSG注射时间分别注射PMSG 100、300、500、700 IU，筛选出最优处理方案。1.4.2发情鉴定采用公鹿试情法鉴定母鹿是否发情。同期发情处理后的12 h，将带试情布的试情公鹿按1 151 20与供试母鹿混群，每隔 24 h 试情 1 次，每次持续0.51.0 h，持续观察 96 h。当母鹿静止站立、稳定接受公鹿爬胯时，记录发情时间和母鹿耳号，并统计024 h、2448 h、4872 h和7296 h的母鹿发情数量。1.4.3人工输精供试母鹿经同期发情处理后，采用直肠把握法予以人工输精，每只用量为1管解冻精液（精子活力保持在0.3以上），仅输精1次。1.4.4妊娠诊断人工输精后第10天，将试情公鹿放入配种后的母鹿群进行观察，返情的母鹿判定为未受孕，未返情的母鹿判定为受孕。1.5统计分析利用SPSS 23.0软件中的2检验和精确检验比较分析不同组之间的差异；采用Z检验邦弗仑尼法对不同发情时间母鹿发情比例的多重比较作显著性分析。以p0.05表示差异显著，p0.01表示差异极显著。2结果2.1不同发情处理方案对母鹿同期发情效果的影响A、B两组的同期发情率较C组分别高23.5%和33.3%（p0.05）；B组掉栓率较A组低8.8%（p0.05）（表1）。表1不同发情处理方案对母鹿发情率的影响Tab.1 Effects of different estrus treatments on estrus rate in female deer组别GroupABC供试母鹿/只Tested female deer586540掉栓数量Number of dropped bolts610掉栓率（%）Bolt dropping rate10.3a1.5b发情母鹿/只Deer in heat475923同期发情率（%）Simultaneous estrus rate81.0a90.8a57.5b注：同列数据后不同字母标注表示差异显著（p0.05）。下同。Note：Different letters within the same column indicate significant difference（p0.05）.The same below.264崔鹤馨等：不同发情处理方案对梅花鹿同期发情效果的影响第2期2.2不同发情处理方案对母鹿同期发情时间分布的影响3种处理方案对发情时间分布的影响差异极显著（p0.05）；2448 h的发情率分别为74.1%、84.6%和40.0%，A、B两组间无显著差异（p0.05），C 组和 A、B 组间均差异极显著（p4872 h的发情率分别为 19.0%、3.1%和 35.0%，A、C 组间无显著差异（p0.05），B和A、C组间均差异极显著（p7296 h 的发情率分别为 1.7%、0 和20.0%，A、B组间无显著差异（p0.05），C和A、B组间均差异极显著（p0.05）。2.4不同剂量PMSG对母鹿繁殖效果的影响采用进口 CIDR 辅以不同剂量 PMSG 法对梅花鹿进行同期发情处理，经多重比较，发现、组间无显著差异（p0.05），但各组均与组差异显著（p2448 h。各组间受胎率差异均不显著（p0.05）（表4）。表2不同发情处理方案对母鹿同期发情时间分布的影响Tab.2 Effects of different estrus treatments on simultaneous estrus time distribution in female deer组别GroupABC不同发情时间母鹿的发情比例（%）The estrus proportion of different estrus time distribution024 h5.2a12.3a5.0a2448 h74.1a84.6a40.0b4872 h19.0a3.1b35.0a7296 h 1.7a0a 20.0b表3不同发情处理方案对母鹿受胎率、产仔率和双胎率的影响Tab.3 Effects of different estrus treatments on conception rate，puerperal rate and twin rate in female deer组别GroupABC输精母鹿/只Infected female deer475923受胎母鹿/只Pregnant female deer243411产仔母鹿/只Newborn female deer243411双胎母鹿/只Twin female deer160受胎率（%）Conception rate51.157.647.8产仔率（%）Birth rate51.157.647.8双胎率（%）Twin rate4.217.60表4不同剂量PMSG对母鹿繁殖效果的影响Tab.4 Effects of different doses of PMSG on reproduction of female deer组别Group供试母鹿/只Tested female deer25252525同期发情率（%）Simultaneous estrus rate48.0a84.0b88.0b96.0b不同发情时间分布的发情比例（%）The estrous female deer with different estrus time distributions024 h8.39.513.612.52448 h75.085.786.479.24872 h16.74.808.37296 h0000受胎率（%）Conception rate46.261.959.150.0265野 生 动 物 学 报第45卷3讨论3.1梅花鹿同期发情效果分析母鹿在未受精条件下，卵泡期（性兴奋期）和黄体期（性静止期）交替循环出现，构成完整的发情周期。若要母鹿进入卵泡期同时发情，关键是调控黄体期，使其同时终止，为引起同时发情创造一个共同的基准线。同期发情辅助药物采用PMSG。本研究采用延长和缩短黄体期的2种方案，3种处理方式进行同期发情处理，得到同期发情率：国产CIDR组为81.0%，进口 CIDR 组为 90.8%，二次 PG 处理组为57.5%。不同CIDR处理组之间差异不显著，但均显著高于二次PG处理组（p0.05）。国产和进口CIDR处理组的掉栓率分别为 10.3%和 1.5%，差异显著（pA 组（国产 CIDR）C 组（二次 PG处理）。Willard等9应用CIDR结合PMSG处理梅花鹿，于CIDR取出后（34.61.9）h发情。魏海军等20应用进口 CIDR 和 PMSG 诱导梅花鹿同期发情，于CIDR取出后（33.37.0）h发情。以上研究表明，进口CIDR结合PMSG诱导梅花鹿发情时间集中程度高，绝大多数集中在 2448 h，与本试验结果相符。二次PG处理法同期发情时间比较分散，主要是因为鹿是季节性发情动物，每年春季产仔，秋季发情，循环往复。在发情季节，一般也仅有13个发情周期，由于PG具有高效溶解黄体的作用21，而此时卵巢上可能尚未形成黄体。另外鹿存在个体差异，对PG的反应易造成发情时间分散。受胎率和产仔率是衡量生产效率的重要指标，其高低直接影响养鹿业的经济效益。吕津等22报道，孕酮可减少早期胚胎的退化进而提高受胎率。本研究应用不同药物对母鹿进行同期发情处理，发现各组受胎率略有差异但不显著，这与韩志强等23研究报道的不同方法对同期发情后妊娠率无显著影响的结果相似。赵列平等11研究发现，CIDR放置11 d，将梅花鹿深度麻醉，用直肠把握法将冻精进行输精，受胎效果较好，平均受胎率为58.6%，与本试验结果基本符合。蒋涛等24利用CIDR+PMSG对天山马鹿（C.e.songaricus）做同期发情处理，获得57.5%的受胎率，与本试验相近。王全凯等25应用进口CIDR结合PMSG对梅花鹿进行同期发情处理，发现母鹿平均受胎率为62.45%；向振博等26采用相同方式进行同期发情处理，鹿受胎率达 71.8%。刘丽娟等15利用二次 PG 结合 PMSG 处理马鹿，取得了73.3%的受胎率。以上研究的受胎率绝大多数均高于本试验，此差异除受鹿体膘情、经产与否和输精时间等因素的影响外27，也可能与输精技术熟练程度有关24。梅花鹿自然发情的双胎率为2.99%28，本试验CIDR+PMSG处理组获得的梅花鹿母鹿双胎率均高于自然发情，进一步证实CIDR+PMSG具有诱发母鹿排双卵的作用，与赵列平等11的研究结果相符。虽然激素药物的使用能提高双胎率，但同期发情的3组间双胎率均不理想，可能是供266崔鹤馨等：不同发情处理方案对梅花鹿同期发情效果的影响第2期试母鹿自身卵巢机能所限，每个发情周期内成熟的卵泡数量较少。3.2PMSG剂量对母鹿繁殖效果的影响PMSG可促进卵泡生长发育、成熟排卵和黄体形成，生产中广泛应用于母畜繁殖和生殖系统疾病的治疗。本研究利用进口CIDR结合肌内注射不同剂量的PMSG对梅花鹿进行同期发情处理，结果显示发情时间趋势大致相同，2448 h内各组发情率分别为 75.0%、85.7%、86.4%和 79.2%，发情时间相对集中，与魏海军等20的研究结果相似。张振良等29采用相同方法对同为季节性发情的动物巴什拜羊进行处理后，发现其发情时间主要集中在2448 h，与本研究结果相符。本试验对、组分别肌内注射PMSG 100、300、500、700 IU，发现供试母鹿同期发情率有增高的趋势，这与魏海军等20的结论相符。佟敬宾等12在CIDR结合不同剂量PMSG对马鹿发情影响的研究中，也得出相同结论。本研究同期发情率除、组与组差异显著外，其他各组间差异不显著，这可能是梅花鹿自身体质对激素刺激不敏感导致。本试验中，随着PMSG剂量的增加，受胎率出现先升高后下降的趋势，但各组之间差异不显著，这可能是 PMSG 对卵巢发育存在最适阈浓度30。当PMSG剂量过低时，PMSG无法有效促进卵泡生长，提高繁殖力；当 PMSG 剂量过高时，由于其半寿期长，体内残留时间长，易引起卵泡过度生长，诱发卵巢囊肿，从而阻碍胚胎的发育着床。4结论在繁殖季节里，综合比较母鹿同期发情率、掉栓率、发情时间集中程度、受胎率、产仔率和双胎率，阴道埋栓的发情方案显著好于二次PG法，进口CIDR优于国产CIDR。进口CIDR+PMSG法的发情率和受胎率随PMSG剂量的增加而升高，但发情时间不受PMSG剂量的影响，PMSG适宜剂量为300 IU。参考文献：1 白景煌，葛明玉，王仁恒，等.孕激素及促性腺激素诱发母鹿同期发情的试验 J.吉林农业大学学报，1981（2）：54-57.BAI J H，GE M Y，WANG R H，et al.Progesterone gonadotropin induced estrus in female deerJ.Journal of Jilin Agricultural University，1981（2）：54-57.2 ADAM C L，MOIR C E，ATKINSON T.Plasma concentrations of progesterone in female red deer（Cervus elaphus）during the breeding season，pregnancy and anoestrus J.Journal of Reproduction and Fertility，1985，74（2）：631-636.3 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