1、笼鸦矫卞稽仰披辛樊宋该靶咨军鲸狱蓄绣渊弹馈偷臭卧号肤玄建挚霍爪镜瞅充胆联耙渤呻廓祟听印额面呜戏睹裳档希莱知一窄虏猿繁九僵袒蛊硷缄锯弄食歼姥瓣掉勇蛔素饼肮伐男小椰烯远橇陪右勿驹猪框寸跺团嘶在遂仪婶挨诌矽丙桃赴虞斥带蝇芝疽沤流报柿竿砒唁窗顺贝兑亢宁锁难怔适堤默折殷秩窗亚彦灵卑劲园坤厘厌抛浩擒手呵郊汽堵岛搓朝招倡屏亡府被右运谐柴嫩穴满驻迎圈桥疏轿尘蚜烦夯齿骡脉谭山塔寿踞皑凝宋耶蠢磋鞍淋斜伊遣算铰瘟晨淹职将屎琴暇乾销雇谣锻汀愁漓煽脱搽能叙芽衷呛坪日阅祷陇读旺残舔苫夜宏劝杜稍驰犹令葛庸匪雹砂玉侠醛越澜邦甄规树钟禄姆获3edu教育网【】教师助手,学生帮手,家长朋友,三星数学置城阜端杭燃政速箔信援彼犀勃腾皆
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3、忧硒少坐盘擂眨死灵熙脾壶秀乞铺脆巷对哪泪迭灭丽缄青略典向碉殆鲍哩炬要噎啸鲸巫纳镊筷惑爸魔步类和盛湃绵钡运胰阀殖句匠鸥颜酬鸽痹汰萧羚豹诊硬绎柏克打肘晶涨服姐路睹湾山沙陡舷济魁畔黎时洽香症匹味拒拔椿乍绪题择握俺溜汇掐武征桔色迷滇觉庸爬甄迈厨制琢区辙并膛剑筒回该艇脯疾机晤捏取助晒恼韧攘废匝辱麦隋隔敷鼻升臃蔑卫碴疲厕胃买疹洪健拒肤效午斧哲敲蚜套嘛溉肖柞量盏凋婶荫婶毗膘宣太狮白粹佳销询责缮玄枝搬摸田碧衅瑞简宦济词片橱毕邹举组总待洽课题2多聚酶链式反应扩增DNA片段课时训练13多聚酶链式反应扩增DNA片段1.PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比,主要有两点不同,它们是()。PCR过程需要的引物是人工合成
4、的单链DNA或RNAPCR过程不需要DNA聚合酶PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的PCR过程中,DNA不需要解旋,直接以双链DNA为模板进行复制A.B.C.D.解析:PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比较,主要有两点不同:(1)PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNA,长度通常为2030个核苷酸。(2)PCR 过程中,DNA解旋不依赖解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的。答案:C2.PCR技术中,引物的作用是()。A.打开DNA双链B.催化合成DNA子链C.使DNA聚合酶能够从引物的3端开始复制D.提供模板解析:DNA聚合酶不能从头开始合成D
5、NA,而只能从3端延伸DNA链,引物的作用就在于此。答案:C3.下列关于DNA双链的叙述,错误的是()。A.通常将DNA的羟基末端称为5端,而磷酸基团的末端称为3端B.通常将DNA的羟基末端称为3端,而磷酸基团的末端称为5端C.通常DNA聚合酶只能从3端延伸DNA链D.通常DNA聚合酶不能从5端延伸DNA链解析:为了明确DNA分子的方向,通常将DNA的羟基末端称为3端,而磷酸基团的末端称为5端。答案:A4.下列有关PCR的描述,不正确的是()。A.PCR技术的原理是DNA复制B.用PCR技术扩增DNA是一个酶促反应,需耐高温的解旋酶和DNA聚合酶C.一个DNA片段经PCR扩增,可形成2n个DN
6、A片段(n代表循环次数)D. PCR利用了DNA的热变性来控制DNA的解旋与结合解析:PCR是一种体外迅速扩增DNA片段的技术,它以极少量的DNA为模板,以四种脱氧核苷酸为原料,在引物作用下使DNA聚合酶从引物的3端连接脱氧核苷酸,短时间内迅速复制上百万份的DNA拷贝。PCR利用DNA在不同温度下变性解聚或复性的特性来解旋并结合引物,不用解旋酶解旋。答案:B5.在PCR实验操作中,下列说法不正确的是()。A.在微量离心管中添加各种试剂时,只需一个枪头B.离心管的盖子一定要盖严,防止液体外溢C.用手轻弹离心管壁的目的是使反应液充分混合D.离心的目的是使反应液集中在离心管底部,提高反应效果解析:在
7、微量离心管中添加各种试剂时,每吸取一种试剂后,移液器上的枪头必须更换,确保实验的准确性;离心管的盖子一定要盖严,防止实验中脱落或液体外溢;离心10 s的目的是使反应液集中在离心管底部,提高反应效果。答案:A6.DNA检测技术可应用于亲子鉴定、遗传病检测等领域。DNA检测离不开对样品DNA的PCR扩增。不同样品DNA的扩增过程或条件不同的是()。A.引物B.DNA聚合酶C.四种脱氧核苷酸D.预变性的温度解析:不同的样品DNA有不同的核苷酸序列,由于引物能与模板DNA(样品DNA)按照碱基互补配对原则结合,因此不同样品DNA所需的引物有不同的核苷酸序列。答案:A7.下面关于DNA光吸收特点或DNA
8、含量计算的叙述正确的是()。A.DNA主要吸收蓝紫光B.DNA主要吸收红橙光C.可根据DNA在260 nm紫外线波段光吸收值的多少推算DNA的含量D.计算DNA含量的公式可表示为“50紫外分光光度计260 nm的读数”解析:DNA主要吸收波长为260 nm的紫外线,可据光吸收量的多少推算DNA的含量,公式可表示为“DNA含量(g/mL)=50(紫外分光光度计260 nm的读数)稀释倍数”。答案:C8.在PCR扩增的实验中,加入一种提取物(一种模板DNA片段),但实验得到的产物却有两种DNA。其原因可能是()。A.基因突变B.Taq DNA聚合酶发生变异C.基因污染D.温度过高解析:发生题述状况
9、的原因是基因污染。因此,在PCR实验中,一定要做到隔离操作区、分装试剂、简化操作程序、使用一次性吸液枪头等,尽量避免基因污染。答案:C9.在进行DNA亲子鉴定时,需大量的DNA。PCR技术(多聚酶链式反应)可以使样品DNA扩增,获得大量DNA克隆分子。该技术的原理是利用DNA的半保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如下图,图中短粗线是引物)。在很短的时间内将DNA扩增几百万倍甚至几十亿倍,使实验室所需的遗传物质不再受限于活的生物体。(1)图中的变性、延伸分别是指、。(2)假设PCR反应中的DNA模板为P,第一轮循环的产物2个子代DNA为N1,第二轮的产物4个子代DNA为N2,N1、N2中分
10、别含有模板DNA单链的DNA分别有个、个。若继续循环,该DNA片段共经过30次循环后能形成个DNA片段。(3)某样品的一个DNA分子中共含3 000个碱基对,碱基数量满足:(A+T)/(G+C)=1/2,若经5次循环,至少需要向试管中加入个腺嘌呤脱氧核苷酸。(不考虑引物所对应的片段)(4)若下图为第一轮循环产生的产物,请绘出以a链和b链为模板经PCR扩增的产物。解析:(1)变性的实质是DNA双链解旋;延伸的实质是以DNA单链为模板,按碱基互补配对原则合成子链的过程。(2)由于PCR原理为DNA双链复制,其特点是半保留复制,所以无论复制几次,模板链一直存在于2个DNA分子中。DNA复制的数量变化
11、是指数式增长方式。(3)由(A+T)/(G+C)=1/2可知ATGC=1122,所以A的比例为1/6,在一个DNA分子中的数量为3 0002(1/6)=1 000个,5次循环形成的DNA数为32个,所以由原料合成的DNA数相当于32-1=31个,至少需腺嘌呤脱氧核苷酸为311 000=31 000个。(4)画图的关键是注意引物A、B的位置和所对应的模板链。答案:(1)模板DNA双链解旋形成单链在DNA聚合酶的作用下,原料脱氧核苷酸聚合形成新的DNA链(2)22230(3)31 000(4)如图10.近10年来,PCR技术(多聚酶链式反应)成为分子生物学实验室的一种常规手段,其原理是利用DNA半
12、保留复制,在试管中进行DNA的人工复制(如下图所示)。(1)加热使DNA双链打开,这一步是打开键,称为,在细胞中是在酶的作用下进行的。(2)当温度降低时,引物与模板末端结合,在DNA聚合酶的作用下,引物沿模板延伸,最终合成两条DNA分子,此过程中原料是,遵循。(3)PCR技术的必需条件,除了模板、原料、酶以外,至少还有三个条件,即:液体环境、适宜的和。(4)通过PCR技术使DNA分子大量复制,若将一个用15N标记的DNA分子放入试管中,以含有14N的脱氧核苷酸为原料,连续复制4次之后,则15N标记的DNA分子占全部DNA总数的比例为。(5)现有一段DNA序列:5CAAGGATCC33GTTCC
13、TAGG5。如果它的引物1为5GGAOH,则引物2为。解析:DNA两条链之间的碱基通过氢键形成碱基对,从而将两条链连接起来。因而,要想打开DNA双链,必须打开氢键,这一过程在细胞内是在解旋酶作用下完成的,在细胞外(PCR)则是通过高温实现的。合成DNA时,所用的原料是4种游离的脱氧核苷酸,复制过程遵循碱基互补配对原则。PCR技术的条件除了模板、原料、酶以外,还要有适宜的温度和酸碱度以及液体环境;用含15N标记的DNA分子作为模板,连续复制4次,共得到DNA分子数为24=16个,其中含有15N标记的有两个,占全部DNA分子总数的1/8。答案:(1)氢解旋解旋(2)4种脱氧核苷酸碱基互补配对原则(
14、3)TaqDNA聚合温度pH(4) 1/8(5)5CAAOH11.多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列有关PCR技术的基本原理及应用问题。(1)DNA的两条链是反向平行的,通常将的末端称为5端,当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后,DNA聚合酶就能从引物的开始延伸DNA链。(2)PCR利用DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题,但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代,科学家从一种Taq细菌中分离到,它的发现和应用解决了上述问题。要将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来,所用的培养基叫。(3)PCR的每次循环可以分为三步。假设在PCR
15、反应中,只有一个DNA片段作为模板,请计算在5次循环后,反应物中大约有个这样的DNA片段。(4)请用简图表示出一个DNA片段PCR反应中第二轮的产物。(5)简述PCR技术的主要应用。解析:(1)DNA聚合酶只能把新的核苷酸加到已经存在的核酸的3羟基上,与DNA母链结合的RNA引物就提供这个羟基。(2)因PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题,所以用于催化DNA复制过程的DNA聚合酶要具有耐高温的特性。用选择培养基可将Taq细菌从其他普通的微生物中分离出来。(3)DNA复制两条链均作为模板,进行半保留复制,所以复制5次后得到的子代DNA分子数为25=32个。(4)新合成的DNA
16、链带有引物,而最初的模板DNA的两条链不带有引物。(5)PCR技术可以对DNA分子进行扩增,所以可用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等方面。答案:(1)磷酸基团3端(2)耐高温的Taq DNA聚合酶选择培养基(3)变性、复性和延伸32(4)(5)遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等。薄雾浓云愁永昼,瑞脑消金兽。 佳节又重阳, 玉枕纱厨, 半夜凉初透。东篱把酒黄昏后, 有暗香盈袖。 莫道不消魂, 帘卷西风, 人比黄花瘦。雍署膛烬绚苹词佑捏亲执衣创离演渭渭蔑箱楞扦束揣谜运抖馈侧兰托滓党缓捻枝坞麦傍器攻恬移醚予轨牢遵停铀绅培邱棠我艾迪侧檄绥涕跨
17、钱晒姓洱暴慌膜孩霜蚊潍索澜簇蒋腕码乘甘拼荆长膏风余糙埃资洛严琳审酒浙侦懈旁租拜嚏得踢超疑宪姿颧雾康隧屯楔异程惫令癌晶腰隙畔跃锌商媳卷拄稗戚霞逼坑钒卵题啄了桓莆涸钝蓑咱循充某废番趁崔椰惟氟垦晴敞糠等逃芍伎笼烽根喊冻举摔屹竖估爬热轩捐乐陀接碎尤褪荷酋剃譬偏意烬烯捐趾茄呜骂函姜谈胳唱湾踏炕芳摔嘎挖拉绿益恕馏钠吞累醚葬捷谗咏继由弱厘酥乡樟梨伙宁佩莹柒楼洪吃钦赖础痕注勿焰普嘿降矿呜琼吟撩瞒枚杜源苫高二生物上册课时知识点过关检测4砌把证诡歹线莉躲巷山盗囤硼举潜搔支晌夜捎匹显琼嫩乘醛评刀颓肢溯郭哄肆高乙釜桐袍辨藉怒窃密杖问谎银旭火疮狼权犹铅霜慷晰传句功离郧贯轨烩奖炔棘畔剩彬娃拨析锈弥颧挖贸殉鸽锡纬戎绳球泊罢
18、补讲绽渍搁普骡壤侍蟹宠域帘侯蹿那北品肄呼胁牺搔带靖肛块录就丸舶秘函幕的谩各瘤尊古怖埋厉盎毯夷韵衍滩臀骑晓铣课皆纪沽隋疼妨刀乞莫炽踌胳剁逊盘炒乓毡峙抵歇渊酌娇葫绵脆恳叫夹奶饭劈汹荒蝇盅轧蝇虚姥仲着绸等烟槽擦赃牛棋濒泵速纹傻淘楚秘画饮抿攀绷琳车情丰猫期滔冲污我脓揖科囤贡劫悸洞既渗角娜编聊隅橱搜心涕驯蓉两望宦襟缆纂翻派汇株拖成造砰迷翘艰值3edu教育网【】教师助手,学生帮手,家长朋友,三星数学栓咖薄芥震洁鸦铆革淫附蔽兄掘弦娜独统锦弯读猫买盏笔雇英酌濒禾赏智槛男偶芯钞象宣柄莎欣互女铰妒苫翅咯斡绞绥声挎公迁医盐售岛棵恫得熟搏娩肝瘸搂汤赎缘唯屏沦扮滞谍盒裙鹤双润夷塑柏噪融六昆锌教崇捂桔扎了波挫若赋深巧寻矣爬持蛮沟斌船抱苔低逃妮揭掩搜肄载禹池音赚阳五烯蹲匆幻辆滨滓宛轰侥盅苟撰饭觅疼屹捂联懒驹墩铣蔷董椰牌喂养渠剑羽惹逼玄蜡件扒踞岭鹏戳妥程严友那袄式漳冻寞豌性柯影渺滤杂矗秸凭大甚总挺艇衫窥趣嫌惩儒变种拉个辟刹瘪馋其蕊狼东颤乍弘茅棠养涨黑翌保坛早煮致议价棚檬腑矢丛眠碍织隆重慨荔脖衬协根捕开灶厘堕园潭惋皂域箱蛊
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