邻氮菲分光光度法测铁专家讲座.pptx

二、试验原理1.方法原理方法原理 邻二氮菲邻二氮菲(phen)是光度法测定微量铁很好试剂。该法灵敏度高，稳是光度法测定微量铁很好试剂。该法灵敏度高，稳定性好，干扰易消除，故应用广泛。定性好，干扰易消除，故应用广泛。在在pH为为29（普通维持在（普通维持在pH=5-6）溶液中，）溶液中，Fe2+与邻二氮菲与邻二氮菲（phen）生成稳定桔红色）生成稳定桔红色Fe(phen)32+:Fe2+3(phen)=Fe(phen)3 其其lgk=21.3，摩尔吸光系数，摩尔吸光系数508=1.1104 Lmol-1cm-1。在还原剂。在还原剂存在下，存在下，Fe(phen)3桔红色可保持几个月不变。桔红色可保持几个月不变。Fe3+与邻二氮菲作用形成淡蓝色配合物稳定性较差，实际应用中加与邻二氮菲作用形成淡蓝色配合物稳定性较差，实际应用中加入还原剂盐酸羟胺使入还原剂盐酸羟胺使Fe 3+还原为还原为Fe2+，再与显色剂邻二氮菲作用显色。，再与显色剂邻二氮菲作用显色。邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第1页二、试验原理 2、光度法原理、光度法原理 本方法选择性高。本方法选择性高。Ca2+、Hg 2+、Zn2+及及Ag+等离子与邻二氮菲作用生等离子与邻二氮菲作用生成沉淀，干扰测定成沉淀，干扰测定;相当于铁量相当于铁量40倍倍Sn2+、Al3+、Ca2+、Mg2+、Zn2+、SiO32-，20倍倍Cr3+、Mn2V(V)、PO3-4，5倍倍Co2+、Ni2+、Cu2+等离子不干扰测定。等离子不干扰测定。共存金属离子量大需掩蔽或分离。共存金属离子量大需掩蔽或分离。邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第2页二、试验原理二、试验原理 3、条件试验、条件试验(略略)（1）入射光波长：普通情况下，应选择被测物质最大吸收波长光为入）入射光波长：普通情况下，应选择被测物质最大吸收波长光为入射光。射光。（2）显色剂用量：显色剂适当用量可经过试验确定。）显色剂用量：显色剂适当用量可经过试验确定。（3）溶液酸度：选择适合酸度，能够在不一样）溶液酸度：选择适合酸度，能够在不一样pH缓冲溶液中加入等量缓冲溶液中加入等量被测离子和显色剂，测其吸光度，作被测离子和显色剂，测其吸光度，作A-pH曲线，由曲线上选择适当曲线，由曲线上选择适当pH范围。范围。（4）有色配合物稳定性：有色配合物颜色应该稳定足够时间。）有色配合物稳定性：有色配合物颜色应该稳定足够时间。（5）干扰排除：当被测试液中有其它干扰组分共存时，必须采取一定）干扰排除：当被测试液中有其它干扰组分共存时，必须采取一定办法排除干扰。吸光光度法试验条件，如测量波长、溶液酸度、显色剂办法排除干扰。吸光光度法试验条件，如测量波长、溶液酸度、显色剂用量等，都是经过试验来确定。本试验在测定试样中铁含量之前，先做用量等，都是经过试验来确定。本试验在测定试样中铁含量之前，先做部分条件试验，方便初学者掌握确定试验条件方法。部分条件试验，方便初学者掌握确定试验条件方法。邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第3页二、试验原理 条件试验简单方法是：变动某试验条件，固定条件试验简单方法是：变动某试验条件，固定其余条件，测得一系列吸光度值，其余条件，测得一系列吸光度值，绘制吸光度绘制吸光度-某某试验条件曲线，依据曲线确定某试验条件适宜值试验条件曲线，依据曲线确定某试验条件适宜值或适宜范围。或适宜范围。邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第4页三、试验仪器1.721型分光光度计；型分光光度计；pH计；计；50mL-1比色管比色管2.铁标准溶液铁标准溶液 100ugmL-13.邻二氮菲邻二氮菲 15gL-14.盐酸羟胺盐酸羟胺 100gL-15.NaAc 1molL-16.NaOH 1molL-17.HCl 6molL-1邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第5页四、试验步骤四、试验步骤 样品铁含量测定样品铁含量测定1、铁标准曲线绘制、铁标准曲线绘制 标准贮备液配制标准贮备液配制：移取10.00mL100ugmL-1铁标准溶液于100mL容量瓶，加2mL6molL-1HCl溶液，加水至刻度，摇匀。溶液Fe3+浓度为10.00gmL-1。标准系列配制标准系列配制：分别移取0.0mL（试剂空白），2.0mL，5.0mL，8.0mL，10.0mL 10.00ugmL-1铁标准溶液于50mL比色管中分别加入1mL盐酸羟胺，摇匀，再加入2mL邻二氮菲（phen），5mLNaAc，加水至刻度，摇匀放置10min（显色）。吸光度测定吸光度测定：用1cm比色皿，以试剂空白为参比(调整吸光度A为0），在510nm波长下，测定各溶液吸光度A。标准曲线绘制标准曲线绘制：以铁质量为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。*注意：每加入一个试剂均需摇匀。下同。邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第6页四、试验步骤四、试验步骤2、样品铁含量测定、样品铁含量测定 移取适量铁样品液(5.00mL)于50mL比色管中，加入1mL盐酸羟胺，摇匀，再加入2mL邻二氮菲（phen），5mLNaAc，加水至刻度，摇匀放置10min，用1cm比色皿，以试剂空白为参比，在510nm波长下，测定样品溶液吸光度。从标准曲线上查出或由回归方程计算样品液中铁含量（mg/L）。3、光度计与比色皿使用、光度计与比色皿使用4、结束工作、结束工作 测量完成,关闭电源,取出吸收池,清洗晾干保留.清理工作台,罩上邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第7页五、数据统计与处理绘制工作曲线，从工作曲线上找出未知试绘制工作曲线，从工作曲线上找出未知试样含量，并计算水样中铁含量（样含量，并计算水样中铁含量（gmL-1）邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第8页六、注意事项1不能颠倒各种试剂加入次序。不能颠倒各种试剂加入次序。2每改变一次波长必须重新调零每改变一次波长必须重新调零3读数据时要注意读数据时要注意A和和T所对应数据。所对应数据。4最正确波长选择好后不要再改变。最正确波长选择好后不要再改变。5每次测定前要注意校正。每次测定前要注意校正。6试验汇报中要进行数据统计，并进行处试验汇报中要进行数据统计，并进行处理，最终要得出结论。理，最终要得出结论。邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第9页七、思索题1本试验量取各种试剂时应分别采取何种量本试验量取各种试剂时应分别采取何种量器较为适当？为何？器较为适当？为何？答：本试验所用溶液量都比较少，用移液管答：本试验所用溶液量都比较少，用移液管或吸量管比较适当。标准铁试样量取要尤其或吸量管比较适当。标准铁试样量取要尤其准确，而其它试剂，如准确，而其它试剂，如phen、NaAc等，都为等，都为过量，相对要求不是很严格。过量，相对要求不是很严格。邻氮菲分光光度法测铁专家讲座第10页