中图版必修一细胞凋亡省公共课一等奖全国赛课获奖课件.pptx

细细 胞胞 凋凋 亡亡第1页细胞凋亡细胞凋亡CellularApoptosis一、概论一、概论伴随生物学研究深入，生物学家越来越意识到细胞死亡，尤其是细胞凋亡含有特殊生物学意义，对于一个多细胞生物来说，要维持完整性和保持平衡性，凋亡是一个非常主要生物学过程。多细胞生物诞生、生长、发育、存活以及死亡，无一不伴伴随细胞凋亡过程。第2页细胞死亡是组织病理学中心议题，细胞死亡现象也是生命新陈代谢固有本质。比如胚胎发育(embryonicdevelopment)正常组织更新（Normaltissueturnover），以及在增殖淋巴细胞群体中选择适当克隆（selectionofappropriateclones），这种细胞生理性死亡是种系发育史中早就存在，有利于动物发育中许多生命功效。第3页 1972年Keer依据细胞发生了与坏死完全不一样死亡过程而提出了细胞凋亡（Apoptosis）概念。80年代末，细胞凋亡成为新医学研究热点。正是因为发觉了细胞凋亡规律，三位科学家取得了诺贝尔医学或生理学奖。他们是英国西德尼布伦纳、美国 H罗伯特霍维茨和英国约翰 E苏尔斯顿。第4页二、凋亡概念：二、凋亡概念：细胞凋亡是细胞循本身程序结束其生命主动死亡过程，含有特征形态和生化改变，是由基因控制个别细胞发生自主有序死亡。即是由基因控制细胞有目标，有选择性自我消亡过程，这种淘汰机制是确保生命进化基础。第5页三、三、凋亡形态特征凋亡形态特征凋亡发生过程表现为细胞死亡（dyingprocess）和被去除(eliminationprocess)（细胞缩小致密染色质边集核碎片凋亡小体）1、丧丧失失了了特特殊殊表表面面结结构构（微微绒绒毛毛等等）和和接接触触区区，形成光滑轮廓，从周围活细胞中分离出来；形成光滑轮廓，从周围活细胞中分离出来；2、细胞缩小、细胞缩小：胞浆细胞器集中（squeeze）胞膜出芽或起泡（bleb）细胞皱缩（shrinkage）；第6页3、保持胞浆细胞器完整性、保持胞浆细胞器完整性扫描电镜下，细胞表面呈奇特火山口样外观，线粒体不肿胀，内膜不破裂；短暂滑面内质网（SEN）扩张，扩张间隙与细胞表面融合；有时有聚积排例半结晶状核糖体；可有与细胞表面平行微丝束。4、形成调亡小体（、形成调亡小体（Apoptoticbodies）由凋亡细胞裂解为若干个由质膜包绕小体，每个凋亡小体有自己一簇细胞器。周围不引发炎症反应。第7页5、核内染色质结构改变（这是最引人注意改变、核内染色质结构改变（这是最引人注意改变）染色质（chromatin）凝集于核膜下表现为：核质固缩（condenation）；边集（margination）；核浆紧实（compaction）；核膜皱折（fold）。第8页HE1000，小鼠凋亡肝细胞第9页HE1000，小鼠凋亡肝细胞第10页在透射电镜下，染色质浓缩在一起呈颗粒状，半月形磨茹，或完整捻珠形；核孔集中于少数区域，浓缩染色质并不贴附在核膜上；转录复合物从核仁中脱落到核浆中呈一簇嗜锇酸小体。残留核仁蛋白关键移到周围染色质特征性部位。核扭曲，断裂呈若干片断，全部片断开始时都有质膜包绕。第11页6、凋亡细胞、凋亡小体被识别与吞噬、凋亡细胞、凋亡小体被识别与吞噬：凋亡细胞或凋亡小体快速被吞噬同质或异质细胞吞噬体（phagosome）深入变性溶酶体残留小体（lysosomalresidualbodies）偶然凋亡小体逃避被吞噬，如凋亡导管上皮掉入管腔。第12页几点说明：几点说明：1、形态学改变告诉我们凋亡细胞发生早期细胞体积缩小（凋亡,第49页第50页增加凋亡能干预肿瘤发生与发展，许多肿瘤凋亡指数（ApoptoticindexAI）与肿瘤进展、预后相关。如：基底细胞癌（baselcellcarcinoma）就癌细胞来说其异型性和分化程度应为高度恶性肿瘤，但其生物学行为为低度恶性表现，仅为局部浸润极少转移。研究发觉该肿瘤中细胞凋亡显著，这对降低肿瘤浸润与转移有一定关系。乳腺癌：作为激素控制靶器官，乳腺细胞凋亡受激素控制，细胞凋亡调控异常是乳癌发生原因之一。ER/PR（+）乳腺癌抗雌激素治疗,或卵巢切除去势疗法能使瘤细胞发生凋亡。BCl-2阳性乳癌，产生耐药主要是抑制化疗药品阿霉素诱发细胞凋亡作用。第51页前列腺癌是男性常见肿瘤，伴随前列腺特异性抗原（prostaticspecificantigen）应用，新发觉前列腺癌急剧增多。雄激素依赖型前列腺癌(AndrogendrpendentprostaticcarcinomaADPC)BCl-2（）时，性腺切除、雄激素拮抗剂治疗有效，其机制是对雄激素敏感癌细胞在缺乏雄激素后凋亡。雄激素非依赖型前列腺癌（AndrogenIndependentprostaticcarcinomaAIPC）BCl-2（+）时，治疗效果差。转移性前列腺癌70%病人只有短暂疗效，3年内复发转变为AIPC，新研究发觉抗寄生虫药“苏拉明（suramin）可诱导AIPC中癌细胞凋亡。第52页膀胱癌也是一个常见肿瘤，复发率高，10-25%浸润，预后差。研究结果显示，从正常移行上皮演变为级、级膀胱癌时BCl-2表示显著低于级膀胱癌，提醒BCl-2可能在肿瘤进展和转移中起一定作用。小细胞肺癌BCl-2、BCl-XL表示为主；而非小细胞肺癌以BCl-XL为主，BCl-I基因家族表示失衡对肺癌细胞凋亡有主要作用。总之增加癌细胞凋亡能干扰肿瘤生物学过程。第53页（二）肿瘤细胞凋亡与基因调控（二）肿瘤细胞凋亡与基因调控依据调控基因功效分为两大类，这两类基因相互作决定细胞生死命运。细胞增殖抑制基因p35、p53、RB、DOC（与粘附分子类似基因）、WT-11、促进细胞凋亡基因（wimlstumortype-1）、DAD1、等自杀基因（suicidalgene）凋亡蛋白，凋亡基因细胞凋亡促进基因（APO-1/Fas、TGF-、SP2、Bax、c-rel、Bel-XS、Bak）2抑制细胞凋亡基因促进细胞增殖基因（c-myc、c-eld1、ras、v-src）（生长基因/抗凋亡基因）抑制细胞凋亡基因（Bcl-2、EIB、LMW-5-HL、C-Kit、Bel-XL）第54页（三）凋亡相关基因有三类：（三）凋亡相关基因有三类：1、细胞凋亡过程表示基因，多数抑癌基因；2、促细胞凋亡基因，多数抑癌基因；3、抑制细胞凋亡基因，多数癌基因。第55页凋亡与细胞增殖有许多潜在联络。从细胞形态学上看，细胞凋亡与有丝分裂超微结构事件，如核膜消失、染色体凝集、细胞膜内陷等有许多共同之处；从分子水平上看，有许多原癌基因和抑癌基因与细胞增殖和凋亡相关，它们经过各自通道参加细胞凋亡调控，研究较多基因有BCL2、Caspase家族、IAP家族、Fas、P53、Cmyc等。第56页1.Bcl-2家族家族Bcl-2家族包含一组相关蛋白，它们分别与Bcl-2在4个保守区含有同源结构域(BH1-4)，并以此作为结构基础，形成同源性或异源性二聚体，经过蛋白蛋白之间相互作用，调整细胞凋亡，在细胞凋亡路径上游远端，组成一个主要细胞内凋亡调控点。第57页（1）Bcl-2家族组成家族组成第58页第59页细胞内Bax高表示时，细胞对死亡信号敏感，加速细胞凋亡，当Bcl-2高表示，Bcl-2可与Bax形成异源性二聚体，抑制细胞凋亡。所以Bcl-2Bax百分比对决定细胞凋亡敏感性起主要作用，抑制凋亡因子/促进凋亡因子总比率，最终决定细胞生存或死亡。第60页（4）Bcl-2在肿瘤中表示与肿瘤发生在肿瘤中表示与肿瘤发生：Bcl-2在各种肿瘤中表示已得到证实。普通来说，Bcl-2阳性肿瘤要比Bcl-2阴性肿瘤预后差。在一些比较常见恶性肿瘤中，Bcl-2表示经常阳性有：慢性淋巴细胞白血病、慢性髓白血病伴有原始细胞危象者和急性髓白血病几乎l00阳性，滤泡淋巴瘤80阳性，T、B非霍奇金淋巴瘤65阳性，霍奇金淋巴瘤40阳性，乳腺癌80阳性，神经母细胞瘤40阳性，鼻咽癌80阳性，前列腺癌75阳性，肺鳞癌25阳性，肺腺癌10-15阳性。第61页 在85滤泡型恶性淋巴瘤，存在t(14；18)(q32；q21)。这一染色体易位使位于14号染色体长臂免疫球蛋白重链基因和位于18号染色体bcl2基因转录活性位点拼接，造成bcl2基因过分表示，使B淋巴细胞免予凋亡而长久存活，并可能附加其它基因突变而发展成淋巴瘤。Bcl-2免疫染色最惯用于区分反应性滤泡性淋巴瘤。在甲状腺中，Bcl-2抗体还不能用于区分桥本甲状腺炎和低分化MALT淋巴瘤。第62页Bcl-2第63页Follicular lymphoma(Bcl-2 immunostaining)第64页Follicular lymphoma:Bcl-2第65页反应性增生淋巴结第66页Bcl-2 免疫染色第67页在生发中心Bcl-2 阳性:怎样判断?第68页同时做CD3 免疫染色证实为生发中心T细胞浸润第69页2.Caspase家族家族Caspase家族是一组蛋白酶，介导即将死亡细胞高效而特异蛋白水解作用，是细胞凋亡执行者。Caspase蛋白水解酶有2个特征：、都是半胱氨酸蛋白酶；、作用部位都在天冬氨酸残基后位点.第70页Caspase家族家族功能凋亡其它caspase-4(TX/ICH-2/ICEref-)炎症caspase-5(TY/ICEref-)炎症caspase-13(ERICE)mcaspase-11(ICH-3)mcaspase-12炎症caspase-1(ICE)炎症caspase-14(MICE)caspase-3(CPP32/apopain/Yama)效应者酶caspase-7(Mch3/ICE-LAP3/CMH-1)效应者酶caspase-6(Mch2)效应者酶caspase-8(MACH/FLICE/Mch5)开启者酶caspase-10(Mch4)开启者酶caspase-2(ICH-1/mNedd2)开启者酶caspase-9(ICE-LAP6/Mch6)开启者酶CED3第71页Caspase家族组成家族组成至今已发觉有14种Caspase，分为3组。1、Caspase-2，-8，-9，是细胞凋亡起始Caspase，2、Caspase-3，-6，-7，执行细胞凋亡，是效应Caspase。这两组Caspase在细胞凋亡中缺一不可。3、由Caspase-1，-4，-5组成，与细胞凋亡关系不是很亲密，可能与各种炎症因子成熟相关。第72页(2)Caspase活化路径活化路径Caspase家族蛋白都是以非活性酶原非活性酶原方式存在于胞质中，当它们经过一定路径被活化活化后，依据一定次序，裂解裂解一些主要蛋白底物，造成对应底物活化或灭底物活化或灭活活，最终可能需经过信号转导路径信号转导路径，产生凋亡凋亡细胞一系列形态和生物化学改变。第73页3.IAP家族家族IAP家族是抑制细胞凋亡作用一组蛋白。在人类已确认有6种IAP相关蛋白(NAIP、c-IAP1hIAP-2、c-IAP2hIAP-1、XIAP/hICP、Survivin和BRUCE)，有研究表明，以上蛋白过表示，都能够不一样程度地抑制各种原因如TNFR、Fas受体介导、柔红霉素、VP16诱导以及去除生长因子后所引发细胞凋亡。有研究表明在酵母和哺乳动物细胞中，IAP家族蛋白抑制家族蛋白抑制caspase活活性，抑制细胞凋亡，作用强度为性，抑制细胞凋亡，作用强度为XIAPc-IAP2c-IAPlSurvivin。第74页5种种IAP在人体内不一样组织中分布不一样在人体内不一样组织中分布不一样。XIAP分布较广，除外周血白细胞以外，成人或胚胎其它组织中都有表示；clAPl、cIAP2在肾、小肠、肝、肺和神经系统（低级）表示较高。NAIP在成人肝、胎盘中有所表示，脑中亦有微量表示，RTPCR方法可检测到。Survivin在正常细胞中，除了正在分裂细胞之外，它在成熟终末分化组织中基本无表示，而在胚胎发育过程中和人部分肿瘤组织中表示，是一个新肿瘤标识，有报道说，Survivin与肿瘤细胞抗药性、肿瘤转移过程中血管生成以及一些肿瘤如神经母细胞瘤等预后不良相关。第75页4、Fas：也称为APO-1（CD95），是1989年两家试验室同时发觉在细胞株表面介导凋亡蛋白分子，属于NTFR（肿瘤坏死因子受体）和NGFR（N生长因子受体）家族，分子量45000，细胞膜抗原，能抑制肿瘤细胞增殖，诱导凋亡，许多耐药与复发肿瘤中CD95和Fasl突变，尤其在淋巴瘤、白血病和肠癌病人中常有FasAPO-1表示，对预后有一定影响。Fasl为T淋巴细胞上Fas天然配基（ligant），Fasl与表示Fas细胞结合、即造成后者走向凋亡。第76页5、P53：对P53认识分三个阶段，在80年代初一经发觉就认为是一个肿瘤基因，以后发觉主要表现在癌中所以称为癌基因，经过相当一段时间后，伴随对凋亡研究深入，89年才证实P53为抑癌基因（肿瘤基因癌基因抑癌基因）。正常细胞内存在野生型P53对细胞增殖有抑制作用。研究发觉细胞在转化过程中表示P53有三种情况：无改变；细胞停滞在G1期；细胞凋亡。第77页第78页第79页第80页6、c-myc：转录调整因子c-myc在各种肿瘤中高表示，对增殖和凋亡都有调控作用，它能够促进细胞增殖、诱导细胞凋亡和抑制细胞分化，即使在有肿瘤细胞(如HL-60白血病细胞)不能直接促进凋亡，它也能增加细胞对各种凋亡诱导原因敏感性。当一些抑癌原因存在时（抗癌因子，低浓度血清，抑止细胞周期因子）、c-myc蛋白促进细胞凋亡。当有致癌原因存在时c-myc蛋白促进癌细胞增殖。第81页7、其它与细胞凋亡相关基因：、其它与细胞凋亡相关基因：死亡基因死亡基因ced3、ced4.ICE(interleukin-lp-convertingenzyme)是哺乳动物细胞凋亡蛋白酶，与线虫凋亡基因ced3同源，在细胞凋亡中起“刽子手”作用，能够诱导各种类型凋亡；不过ICE介导细胞凋亡受BCL2所抑制。吞噬基因吞噬基因参加凋亡细胞吞噬，并非造成细胞死亡，如ced1、ced2、ced6、ced7、ced8；核酶基因核酶基因Nmc-1第82页第83页(四四)凋亡与肿瘤治疗研究凋亡与肿瘤治疗研究鉴于凋亡是肿瘤细胞死亡一个形式，又有如此众多癌基因和抑癌基因参加凋亡调控，因而人为地施加影响以激发凋亡诱导基因活性和降低凋亡抑制基因活性，可激发凋亡诱导基因活性和降低凋亡抑制基因活性，可能是治疗肿瘤有效路径能是治疗肿瘤有效路径。实际上，当前临床上所采取各种抗肿瘤治疗方法如化疗、放疗、物理治疗、生物治疗、促细胞分化治疗甚或基因治疗多是经过诱导细胞凋亡，以求到达治疗肿瘤目标。第84页肿瘤疗效判定应考虑到肿瘤疗效判定应考虑到：、是否经过治疗后发生凋亡，这是肿瘤化疗效果好坏关键之一；、增加凋亡指数（ApoptosisIndex）与增生指数(proliferatoryIndex)比值AI/PI，已成为新治疗目标；、同时能否诱导细胞凋亡已成为筛选抗癌药品新标准；、诱导细胞凋亡治疗将是对肿瘤治疗方法主要补充与革新。第85页当前治疗肿瘤新构想在肿瘤治疗中诱导凋亡在肿瘤治疗中诱导凋亡。1、导入P53（野生型WT）抑制肿瘤增生；2、下调突变型P53,BCl-2活性与表示，减弱其对细胞凋亡抑制；3、抑癌基因引入瘤细胞，降低致瘤性，使肿瘤细胞逆转为正常细胞；4、引入一些细胞因子，抑制肿瘤恶性表型，使细胞丧失致瘤性；5、应用点突变技术，使异常表示癌基因失活或修复突变基因；6、导入药品敏感基因，有利于细胞凋亡；第86页九、凋亡与其它疾病九、凋亡与其它疾病1、细胞凋亡异常增加（不该死死了）、细胞凋亡异常增加（不该死死了）神经系统退行性变：a、老年性痴呆；b色素性视网膜炎；c、帕金氏综合征骨髓发育不良综合征（恶性贫血）缺血性损伤：心肌梗死；缺血缺氧性脑病；肾小球肾炎肝病变：病毒性肝炎和酒精性肝炎AIDS第87页2、细胞凋亡过分降低（该死不死）：、细胞凋亡过分降低（该死不死）：本身免疫性疾病：a、系统性红斑狼疮（SLE）；b、肾小球肾炎（GN）等肿瘤：a、激素依赖性肿瘤（乳腺癌、前列腺癌、卵巢癌）；b、造血系统肿瘤（淋巴瘤、白血病）等各种病毒感染：腺病毒、疱疹病毒、痘病毒等第88页十、凋亡检测方法十、凋亡检测方法1972年keer提出细胞凋亡概念，1980年用电泳检测细胞凋亡，并证实了DNA断裂特征。1986年在秀丽降杆线虫（caeovhabditiselegan）中观察1090个体细胞，其中131个细胞在发育过程中经过凋亡而消失，并找到两个基因ced3、ced4，他们表示与细胞凋亡亲密相关，故称为死亡基因。所以细胞凋亡检测经历以下几个过程；从单纯形态学辩认从单纯形态学辩认形态与生化结合形态与生化结合形态、生化、分子形态、生化、分子生物学技术相结合各种伎俩。生物学技术相结合各种伎俩。第89页（一）凋亡检测要处理问题是：（一）凋亡检测要处理问题是：1、被研究体系中是否有凋亡发生，即定性。2、凋亡发生率，显示群体细胞量度。这是一个相正确概念，应同时结合细胞群体增殖率来分析，则更客观，更能反应细胞群体生长状态。3、了解细胞凋亡严重度，以反应凋亡阶段。第90页（二）检测细胞凋亡各种形态学方法比较（二）检测细胞凋亡各种形态学方法比较检验方法检验方法可判定凋亡细胞特征可判定凋亡细胞特征光学显微镜（LM）细胞缩小、核浓缩、细胞周围透明圈相差显微镜（PCLM）细胞鼓泡，凋亡小体透射电镜（TEM）微绒毛消失、核染色质沿核膜分布新月体形成、凋亡小体激光共聚焦（CLSM）凋亡细胞固缩染色质及核碎片定位扫描电镜（SEM）细胞表面泡状突起流式细胞仪（FCM）低前向散射光、高侧向散射光缩时摄影术（TLP）凋亡细胞形成过程第91页2、流式细胞仪检测、流式细胞仪检测细胞凋亡时膜通透性增加介于正常细胞与坏死细胞之间，用荧光素染色细胞悬液，利用流式细胞仪测量细胞悬液中细胞荧光强度来区分正常细胞、凋亡细胞、坏死细胞。惯用Hoechs-PI染色，正常细胞对染料拒染，荧光着色淡。凋亡细胞主要摄取Hoechs染料呈强蓝色荧光。坏死细胞DNA有强嗜PI性呈强红色荧光。第92页3、核酸电泳检测细胞凋亡、核酸电泳检测细胞凋亡（DNA片断检测细胞凋亡）片断检测细胞凋亡）细胞凋亡和坏死时，细胞中DNA发生断裂，小分子DNA片断增加，高分子DNA降低，胞浆内出现DNA片断，然而凋亡细胞DNA断裂是由内源性内切酶作用，断点都是规律性发生在核小体之间，所以出现180-200bp及其倍数DNA片断。坏死细胞DNA片断是无特征杂乱片断。在凝胶电泳中出现特征性泳带能够判断凋亡细胞，这方法缺乏定位特征，无法确定哪个细胞发生凋亡。第93页4、酶联免疫吸附法、酶联免疫吸附法(ELISA法法)ELISA方法检测细胞凋亡后形成由组蛋白及DNA片断组成核小体。此方法敏感性高，所需细胞数少，可检测低至5102/mL凋亡细胞。另外，此方法不需特殊仪器，比较适合基层工作。缺点:(1)不能准确测定凋亡发生绝对量;(2)适合单一成份细胞检测，对于多细胞成份组织或细胞混合物，不能判定凋亡发生在哪种细胞;(3)不能提供单个细胞或相关细胞组织学定位。第94页5、DNA片断原位标识片断原位标识1993年Wifsman等提出DNA片断末端标识法，Fehsel等1994年提出原位缺口转移检测细胞凋亡方法。这些方法提出把凋亡研究带进了新阶段，尤其是这些技术发展为原位凋亡检测试剂盒，早期凋亡检出早期凋亡检出TUNELTUNEL。缺点缺点:(1)坏死细胞亦有DNA 裂点形成，也可展现TUNEL反应阳性，因而特异性较差。(2)TUNEL结合免疫组化检测时，固定过程对检测影响较大，切片大小、薄厚会直接影响到固定效果，从而产生结果差异。第95页Tunel反应：探针靶核酸DNA-DNA为间接法杂交体探针半抗原标识物标识探针靶核酸杂交体酶标特异性抗体显色间接法原位杂交示意图第96页第97页DAB镜下控制显色水洗75酒精85酒精95酒精无水酒精（Tunel检测法检测法）第98页灌注固定大鼠肝，Tunel反应阳性，DAB显色，血管内无红细胞背景染色。125 第99页非灌注固定大鼠肝，Tunel反应阳性，肝细胞核BCIP/NBT显色呈紫黑色，血管内红细胞呈桃红色。250第100页RNA酶酶(RNase)保护试验保护试验 这种高度敏感试验技术起源于对一些噬菌体DNA依赖性RNA聚合酶研究，这种酶是从DNA模板上合成高度特异性RNA探针理想工具，用来检测和定量研究mRNA。这么，cDNA片断能够被克隆到含有噬菌体引物质粒中，并可用来合成放射性标识反义RNA探针。应用人类凋亡模板试剂盒中32P标识反义RNA探针与从标本中分离RNA 杂交，再行RNA酶处理。最终用放射自显影或吸光度分析法分析翻译产物。此试验优点是敏感性高，可在一份总RNA 标本中同时定性不一样种类mRNA第101页用用RT-PCR方法进行方法进行mRNA半定量分析半定量分析 提取细胞RNA，与逆转录酶、RNA酶抑制剂(RNA sin)和dNTP孵育合成cDNA，然后在特异性cDNA引物诱导下进行PCR反应，最终琼脂糖凝胶电泳测定PCR 反应产物大小。试验灵敏性很高，不过对于细胞组成不单纯组织或细胞悬液说来，不能确定与凋亡相关基因mRNA起源于哪类细胞，所以还应该进行蛋白表示研究。第102页截止当前为止，凋亡检测方法已经有许各种，但任何一个方法都有本身缺点和应用不足，影响检测结果判断和意义分析。假如需要处理这些问题，在检测中已测出有凋亡发生时，怎样解释结果？怎样与疾病和肿瘤发生发展联络起来呢？第103页首先我们必须建立正常时该体系凋亡状态，正常对照组，以判断检测组凋亡是生理性，还是病理性。同时检测该体系细胞增殖状态，对照该体系增殖指数和凋亡指数，以判断该体系细胞周转率。建立致病原因对被测体系影响对照组，确定该致病原因与被测体系细胞增殖、凋亡相关性（对照组控制）。怎样定量与排除其它干扰。第104页十一、凋亡生物学意义十一、凋亡生物学意义细胞凋亡是生物体内无用、老化、或一些损伤细胞死亡一个形式，不引发局部组织损伤或炎症反应，主要意义在于生物进化需要。竞争性选择机制，是确保个体发育、成熟、和维持正常生理过程所必需。1、去除多出细胞、去除多出细胞2、去除无用细胞、去除无用细胞3、去除有害细胞、去除有害细胞4、去除衰老细胞、去除衰老细胞5、有选择性地去除细胞、有选择性地去除细胞第105页十二、存在问题与展望十二、存在问题与展望即使发觉细胞凋亡现象已经近40年，但人们真正认识到其重大理论和实际意义，还是近几年事。细胞凋亡分子机制研究说明细胞凋亡过程是受基因调控，是主动连续程序化反应，在细胞凋亡研究中还有许多关键问题末处理。第106页1、在细胞发育过程中、在细胞发育过程中细胞凋亡终究是何时，又是怎样开始？（时间与方式）；机体是怎样决定一个细胞将要走向死亡；在细胞有丝分裂和成熟之间有没有能激活细胞凋亡开关点基因（Switchpointgene）存在？第107页2、机体内有没有真正杀手基因（Killergene）存在?死亡相关基因是怎样调控？3、细胞凋亡终究是经过哪些信号传导路径起作用？4、哪些疾病与细胞凋亡规律失常相关？能否经过调控细胞凋亡来到达治疗目标？5、细胞凋亡与衰老关系怎样？是否有活命基因（survivalgene）存在?第108页假如能发觉凋亡特异性基因或其产物，或其它特异性标志物，就可能成为检测凋亡指标。当前对凋亡认识是一个连续过程，深入研究可能会发觉凋亡存在不一样阶段，而不一样阶段可能会出现不一样标志物，从而发觉凋亡阶段性标识物。凋亡机制在细胞生长、发育过程中所含有独特生物学效应，能够经过增加或降低一些特定细胞对凋亡敏感性来发展治疗疾病新方法和药品。阻断凋亡可能有利于艾滋病治疗，一些N激素基因替换疗法可能对中枢N系统退行性病变有益。第109页应该认可对细胞凋亡研究还刚才开始，怎样利用分子生物学和细胞生物学等当代最新技术，从分子水平上深入揭示细胞凋亡开启，发生和发展规律，为研究胚胎发生、发展、个体形成、器官细胞平衡稳定、本身免疫性疾病、肿瘤形成原因等增加新理论内容，并以此来指导医疗实践，还有很多工作要做。第110页