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实验名称： ABO血型鉴定
实验人员：
实验日期： 年 月 日 室温：27℃ 大气压：1个标准大气压
（一） 实验目的
学习ABO型血的鉴定原理和方法。观察红细胞凝集现象，了解抗原抗体反应。
（二）实验原理
血型就是红细胞膜上特异抗原的类型。在ABO血型系统中，红细胞膜上抗原分A和B两种抗原，而血清抗体分抗A和抗B两种抗体。A抗原加抗A抗体或B抗原加抗B抗体，则产生凝集现象。血型鉴定是将受试者的红细胞加入标准A
2、型血清（含有抗B抗体）与标准B型血清（含有抗A抗体）中，观察有无凝集现象，从而测知受试者红细胞膜上有无A或/和B抗原。在ABO血型系统，根据红细胞膜上是否含A、B抗原而分为A、B、AB、O四型。
（三）实验材料
消毒采血针；载玻片；消毒棉签；抗A、抗B血型定型试剂；75%乙醇；受检者血液
（四）实验步骤
（1）取双凹玻片一块，用干净纱布轻拭使之洁净，在玻片两端用腊笔标明A及B，并分别各滴入A及B标准血清一滴。
（2）细胞悬液制备从指尖或耳垂取血一滴，加入含1ml生理盐水的小试管内，混匀，即得约5％红细胞悬液。采血时应注意先用75％酒精消毒指尖或耳垂。
（3）用滴管吸取红细胞悬液
3、分别各滴一滴于玻片两端的血清上，注意勿使滴管与血清相接触。
（4）竹签两头分别混合，搅匀。
（5） 10～30min后观察结果。如有凝集反应可见到呈红色点状或小片状凝集块浮起。先用肉眼看有无凝集现象，肉眼不易分辨时，则在低倍显微镜下观察，如有凝集反应，可见红细胞聚集成团。
（6）判断血型根据被试者红细胞是否被A，B型标准血清所凝集，判断其血型。
（五）实验结果：
表1 实验情况
标准A血清 标准B血清
人血凝集情况
4、 不凝集 凝集
从上表可知：人血与标准A血清（含抗B抗体）混合后不发生凝集；人血与标准B血清（含抗A抗体）混合后发生凝集。
（六）讨论：
血型通常是指红细胞膜上特异性抗原的类型。若将血型不相容的两个人的血液滴加在玻片上并使之混合，则红细胞可凝集成簇，这一现象称为红细胞凝集。在补体的作用下，可引起凝集的红细胞破裂，发生溶血。当给人体输入血型不相容的血液时，在血管内可发生红细胞凝集和溶血反应，甚至危及生命。红细胞凝集的本质是抗原-抗体反应。红细胞膜上抗原的特异性取决于抗原决定簇，这些抗原在凝集反应中被称为凝集原。能与红细胞膜上的凝集原起反应的
5、特异抗体则称为凝集素。凝集素为γ-球蛋白，存在于血浆中。发生抗原-抗体反应时，由于每个抗体上具有2～10个抗原结合位点，因此抗体可在若干个带有相应抗原的红细胞之间形成桥梁，使它们聚集成簇，从而发生凝血。根据红细胞膜上是否存在A抗原和B抗原可将血液分为四种ABO血型：红细胞膜上只含有A抗原者为A型；只含B抗原者为B型；含有A与B两种抗原者为AB型；A和B两种抗原均无者为O型。不同血型的人的血清中含有不同的抗体，但不会含有与自身红细胞抗原相对应的抗体。在A型血的血清中，只含有抗B抗体；B型血的血清中只含有抗A抗体；AB型血的血清中没有抗A和抗B抗体；而O型血的血清中则含有抗A和抗B两种抗体。
表
6、2 ABO血型中的抗原和抗体
血 型 红细胞膜上所含的抗原 血清中所含的抗体
O 无A也无B 抗A和抗B
A A 抗B
B B 抗A
AB A和B
7、 无抗A也无抗B
正确鉴定血型是保证输血安全的基础。常规ABO血型的定型包括正向定型和反向定型。正向定型是用抗A与抗B抗体检测来检查红细胞上有无A或B抗体；反向抗体是用已知血型的红细胞检测血清中有无抗A或抗B抗体，结果见表10-3.同时进行正向定型和反向定型是为了相互印证。
表3 红细胞常规ABO定型（＋为发生凝集；－为不凝集）
正向定型 反向定型 血型
B型血清 A型血清 O型血清 A型 B型 O型
（抗A） （抗B） (抗A，抗B)
8、 红细胞 红细胞 红细胞
－ － － ＋ ＋ － O
＋ － ＋ － ＋ － A
－ ＋ ＋ ＋ － － B
＋ ＋ ＋ － － － AB
（七）结论：
待检血液的血型为A型
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