抗Hp治疗对溃疡性结肠炎患者肠道菌群及疾病活动的影响.pdf

陆筱祎,段超勤,华婷琰.抗 Hp 治疗对溃疡性结肠炎患者肠道菌群及疾病活动的影响J.中南医学科学杂志,2023,51(5):720-723.收稿日期 2022-09-30修回日期 2023-08-18基金项目 苏州市“科教兴卫”青年科技项目(KJXW2022035)作者简介 陆筱祎,硕士,主治医师,研究方向为消化道肿瘤、炎症性肠病的诊治,E-mail 为 zhaingqiong 。通信作者华婷琰,硕士,副主任医师,研究方向为消化道肿瘤的诊治,E-mail 为 。临床医学DOI:10.15972/ki.43-1509/r.2023.05.024抗 Hp 治疗对溃疡性结肠炎患者肠道菌群及疾病活动的影响陆筱祎,段超勤,华婷琰苏州市立医院消化内科,江苏苏州 215008摘 要 目的 观察抗幽门螺杆菌(Hp)治疗对溃疡性结肠炎(UC)患者肠道菌群及疾病活动的影响。方法选取 UC 患者 60 例,根据 Hp 检查结果分为 Hp(+)组和 Hp(-)组各 30 例,同时纳入健康体检者 30 例为对照组。比较各组 UC 疾病活动状态和不同活动状态下的肠道微生物分布;评估抗 Hp 治疗对 UC 患者严重活动状态及肠道微生物的影响。结果 治疗前和治疗后 UC 患者 Hp(+)与 Hp(-)的疾病活动程度存在差异(P0.05)。治疗前后不同 Hp 检测结果和治疗前不同疾病活动度 UC 患者酵母菌(SM)、拟杆菌(BD)、乳杆菌(LC)、双歧杆菌(BF)、消化球菌(PC)菌群数量明显高于对照组,而真杆菌(EU)菌群数量明显低于对照组(P0.05);且治疗前随疾病活动度增加,上述变化更明显,治疗前 Hp(-)UC 患者较 Hp(+)UC 患者上述变化更明显(P0.05)。结论 抗 Hp 治疗可能会诱发及加重 Hp(+)的 UC 疾病活动。关键词 幽门螺杆菌;炎症性肠病;肠道菌群;四联疗法中图分类号 R574.62文献标识码 AEffects of anti-Hp treatment on intestinal flora and disease activity in patients withulcerative colitisLU Xiaoyi,DUAN Chaoqin,HUA TingyanDepartment of Gastroenterology,Suzhou Municipal Hospital,Suzhou 215008,Jiangsu,ChinaABSTRACT Aim To observe the effect of Helicobacter pylori(Hp)and anti-Hp treatment on intestinal flora anddisease activity in patients with ulcerative colitis(UC).MethodsA total of 60 UC patients were selected anddivided into Hp(+)group and Hp(-)group with 30 cases in each group according to Hp test results.30 healthy sub-jects were included as control group.The status of UC disease activity and the distribution of intestinal microorganismsunder different status were compared.The effects of anti-Hp therapy on severe activity status and intestinal microbiome inUC patients were evaluated.Results There is a difference in disease activity between Hp(+)and Hp(-)in UC pa-tients before and after treatment(P0.05).The number of yeast(SM),Bacteroides(BD),Lactobacillus(LC),Bifidobacterium(BF),and Enterococcus(PC)microbiota in UC patients with different disease activity levels before andafter treatment was significantly higher than that in the control group,while the number of Escherichia coli(EU)microbiota was significantly lower than that in the control group(P0.05);And as the disease activity increases beforetreatment,the above changes are more significant.Before treatment,the above changes are more significant in Hp(-)UC patients than in Hp(+)UC patients(P0.05;表 1),具有可比性。纳入标准:病理确诊为 UC,根据文献7标准诊断为 UC 疾病活动期;均行14C 尿素呼气试验检测 Hp;1 个月内未使用抗生素、抗炎、糖皮质激素及免疫抑制药物;临床资料齐全。排除标准:克罗恩病;对四联疗法药物过敏;严重心、肝、肾功能障碍;妊娠、哺乳期女性;恶性肿瘤;系统性红斑狼疮、类风湿性关节炎;不能配合完成研究。表 1 各组一般情况的比较(n=30)指标对照组Hp(-)组Hp(+)组年龄/岁42.324.3244.385.2345.305.04男/例(%)14(46.47)11(36.67)12(40.00)体质指数/(kg/m2)23.420.8423.890.9924.671.03吸烟饮酒史/例(%)9(30.00)8(26.67)7(23.33)高血压/例(%)7(23.33)6(20.00)6(20.00)糖尿病/例(%)4(13.33)5(16.67)4(13.33)1.2 常规治疗和抗 Hp 治疗方法参照 炎症性肠病诊断与治疗的共识意见(2018 年北京)7标准对所有 UC 患者进行常规治疗,轻中度患者采用 5-氨基水杨酸制剂(美沙拉嗪肠溶片,Losan Pharma GmbH,H20100261)口服(每次 2 片,每天 3 次,或遵医嘱)联合或不联合灌肠(每晚 1 次,每次 1 支,或遵医嘱)。进行诱导缓解及维持治疗,效果不佳则改用糖皮质激素,根据患者实际情况联合免疫抑制剂或 5-氨基水杨酸等维持治疗。Hp(+)UC 患者进行抗 Hp 四联疗法,即阿莫西林(哈尔滨制药集团,H23020932)、克拉霉素(扬子江制药集团有限公司,H19990376)、托拉唑钠肠溶胶囊(海南双河药业有限公司,H20093903)、柠檬酸铋剂钾片(丽珠集团制药厂,H10900084),疗程2 周。1.3 UC 疾病活动性的评估UC 病变范围采用蒙特利尔分型8。E1 型:病变分布于直肠,肠镜下所见病变最大范围局限于直肠而未达乙状结肠;E2 型:病变分布于左半结肠,肠镜下所见病变最大范围局限于左半结肠;E3 型:广泛病变。UC 疾病活动性评估采用改良 Mayo 评分系统9。根据患者排便次数、便血程度、内镜结果及病情评价 4 个维度评分,每个维度 0 4 分,计算总分。临床缓解:2 分,且无单项评分1 分;轻度活动:3 5 分;中度活动:6 10 分;重度活动:11 12 分。1.4 肠道菌群的检测在无菌条件下获取新鲜粪便 10 g(治疗前及治疗后),按照日本光冈知足法的原则10,选择肠杆菌(enterobacter,EB)、肠球菌(enterococcus,EC)、酵母菌(saccharomycetes,SM)、葡萄球菌(staphylococcus,SP)、拟 杆 菌(bacteroidetes,BD)、乳 杆 菌(lactobacillus,LC)、双歧杆菌(bifidobacterium,BF)、消化球菌(peprococcus,PC)、小梭菌(clostridiu,CD)及真杆菌(eubacterium,EU)共 10 种肠道微生物作为肠道菌群的评估指标。将0.5 g 新鲜粪便放入装有4.5 mL 稀释液和4粒玻璃珠的无菌安培瓶中,旋涡混匀器上振荡1 min(300 r/min),梯度稀释后滴种于培养基,常温干燥10 min,厌氧菌平板倒置于 37 厌氧培养箱中培养72 h,需氧菌平板倒置于 37 恒温培养箱中 24 h。所有菌落数据的结果均取 lgN(CFU/g)。1.5 统计学处理本研究均采用 SPSS 22.0 统计软件进行统计学处理。计量资料采用 xs 的形式表示,进行 t 检验及方差分析;计数资料采用例(%)的形式表示,进行卡方检验和秩和检验。以 P0.05 为差异具有统计学意义。127CN 43-1509/R 中南医学科学杂志 2023 年第 51 卷第 5 期2 结 果2.1 不同 Hp 检测结果 UC 患者疾病活动程度的比较Hp(+)组与 Hp(-)组治疗前和治疗后 UC 患者疾病活动程度均存在差异(P0.05;表 2)。表 2 不同 Hp 检测结果 UC 患者疾病活动程度的比较(n=30)例(%)分组临床缓解轻度活动中度活动重度活动Hp(-)组 治疗前012(40.00)13(43.33)5(16.67)治疗后 10(33.33)b15(50.00)5(16.67)b0bHp(+)组 治疗前021(70.00)a6(20.00)a3(10.00)a治疗后1(0.33)c14(46.67)b10(33.33)bc5(16.67)bc 注:a 为 P0.05,与 Hp(-)组治疗前比较;b 为 P0.05,与同组治疗前比较;c 为 P0.05,与 Hp(-)组治疗后比较。2.2 不同疾病活动程度患者肠道菌群的比较治疗前,临床缓解 0 例,轻度活动 32 例,中度活动 20 例,重度活动 8 例,与对照组 30 名人群进行对比,结果显示,不同疾病活动度 UC 患者 SM、BD、LC、BF、PC 菌群数量明显高于对照组(P0.05),EU 菌群数量明显低于对照组(P0.05;表 3)。随疾病活动度增加,上述变化更明显(P0.05;表 3)。表 3 不同疾病活动程度患者肠道菌群的比较肠道菌群对照组(n=30)临床缓解(n=0)轻度活动(n=32)中度活动(n=20)重度活动(n=8)EB9.341.29-8.901.219.211.239.181.05EC8.901.03-8.451.119.031.208.891.15SM3.320.28-6.530.46a8.430.84ab9.381.16abcSP5.420.57-5.330.425.040.415.370.38BD4.030.52-6.920.63a8.330.74ab9.941.31abcLC2.210.20-6.420.50a7.770.63ab7.840.83abcBF3.890.37-8.320.81a8.670.73ab8.780.92abcPC6.030.78-8.880.87a8.910.90ab9.321.11abcCD4.010.57-5.020.624.330.495.430.48EU4.230.48-2.320.23a1.020.07ab1.420.10abc 注:a 为 P0.05,与对照组比较;b 为 P0.05,与轻度活动比较;c 为 P0.05,与中度活动比较。2.3 不同 Hp 检测结果 UC 患者肠道菌群的比较治疗前后 Hp(+)和 Hp(-)UC 患者 SM、BD、LC、BF、PC 菌群数量明显高于对照组(P0.05),EU 菌群数量明显低于对照组(P0.05;表 4)。治疗前,Hp(-)UC 患者较 Hp(+)UC 患者上述变化更明显(P0.05;表 4)。表 4 不同 Hp 检测结果 UC 患者治疗前后肠道菌群的比较(n=30)lg CFU/g肠道菌群对照组Hp(-)组治疗前治疗后Hp(+)组治疗前治疗后EB9.341.29 9.041.21 9.111.30 9.041.109.311.21EC8.901.03 8.790.87 9.010.91 8.610.899.031.17SM3.320.28 8.350.56a8.440.64a6.740.42ab8.880.39aSP5.420.57 5.260.34 5.200.31 5.210.385.180.30BD4.030.52 8.590.47a8.620.44a6.980.37ab8.420.48aLC2.210.20 7.500.40a7.820.38a6.620.33ab7.840.49aBF3.890.37 8.580.62a8.520.58a8.410.68ab8.820.72aPC6.030.78 8.970.67a8.990.57a8.940.77ab8.890.78aCD4.010.57 4.970.42 5.010.38 4.720.555.020.43EU4.230.48 1.590.19a1.480.20a1.940.21ab1.030.10a 注:a 为 P0.05,与对照组比较;b 为 P0.05,与 Hp(-)组治疗前比较。3 讨 论Hp 感染与包括炎症性肠病、系统性红斑狼疮及肾病等多种自身免疫性疾病相关,特别是 Hp 感染所引起的肠道微生态的失调也与炎症性肠病患者的疾病转归具有密切的关联,相关研究是当前的热点问题11。目前对于 UC 与 Hp 的关系尚没有统一的定论,不少研究在结论上完全相反,Owyang 等12研究显示,Hp 基因组存在一种特殊的免疫调节序列,幽门定居的 Hp 可以将 DNA 释放到肠腔中,肠固有层树突状细胞受到 Hp 免疫调节序列的影响后,通过介导人 Toll 样受体-9 信号途径而导致 I 型干扰素生成减少,肠黏膜炎症程度降低。Engler等13研究显示,在动物实验中,Hp 感染可以一定程度缓解葡聚糖硫酸钠诱导的慢性结肠炎和 T 细胞转移诱导的结肠炎大鼠的临床症状。可见 Hp 在肠道微生态改变中的作用,而临床常用的抗 Hp 四联疗法也可以在一定程度上改变肠道微生态。本研究发现,Hp(+)UC 患者较 Hp(-)UC 患者具有相对更轻的疾病活动度,这可能是 Hp 存在对肠道微生态或肠道免疫反应具有良好的调节作用。随后进一步分析发现,轻度活动、中度活动及重度活动的 UC 患者 SM、BD、LC、BF、PC 菌群数量明显227ISSN 2095-1116 Medical Science Journal of Central South China,Vol 51,No 5,2023高于健康人群,EU 菌群数量明显低于健康人群,一些条件致病菌如 EC 和 SM 的增多,使肠黏膜屏障功能减退,容易引发肠道炎性改变,而诸如 BF、LC 等肠道保护细菌也增多,这可能是一种肠道自我保护机制,而真杆菌的数量显著下降,这些微生物的动态改变与当前对 UC 的研究结果较为一致14。本文进一步研究显示,治疗前 Hp(+)UC 患者 SM、BD、LC 菌群数量均低于 Hp(-)UC 患者,EU 菌群数量明显高于 Hp(-)UC 患者,说明 Hp(+)对肠道微生态的影响有助于缓解 UC 患者的活动状态。抗 Hp治疗后,Hp(+)组中重度活动患者由 9 例增加到 15例,Hp(-)组中重度活动患者由 18 例下降到 5 例,进一步表明 Hp(+)对 UC 疾病的保护作用,提示Hp(+)可降低 UC 病变区域的炎症反应而缓解病情。综上所述,Hp(+)是 UC 的一个保护性因素,而抗 Hp 治疗可能会诱发或加重 UC 的疾病进展。同时本研究也注意到自身存在样本量少的缺陷,可能对本研究的结论造成一定的影响,有待后续进一步研究证实。参考文献1 HEDIN C R H,VAVRICKA S R,STAGG A J,et al.The patho-genesis of extraintestinal manifestations:implications for IBD re-search,diagnosis,and 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