1、微生物与免疫学复习重点一、名词解释1.抗原(Ag):是指能与淋巴细胞抗原受体(BCR/TCR)特异性结合,刺激机体免疫系统产生特异性免疫应答,并能与相应免疫应答产物(指抗体或致敏淋巴细胞)在体内、外发生特异性反应的物质。其两个基本特性:免疫原性和免疫反应性2.免疫原性:指抗原能刺激机体产生特异性抗体或致敏淋巴细胞的特性3.免疫反应性:指抗原能与相应免疫应答产物(抗体或致敏淋巴细胞)发生特异性结合的特性。4.完全抗原:同时具备免疫原性和免疫反应性两种特性的物质称为完全抗原。5.半抗原:仅具备免疫反应性而不具有免疫原性的物质被称为半抗原。6.抗原表位:抗原分子中决定抗原特异性的基本结构或化学基团称
2、为抗原表位,它是BCR/TCR及抗体特异性结合的基本单位,亦称为抗原决定基,通常由515个氨基酸残基、57个多糖残基或核苷酸组成。7.交叉抗原:某些特定抗原不仅可与其诱导产生的抗体或致敏淋巴细胞结合或相互作用,还可与其他抗原诱生的抗体或致敏淋巴细胞发生反应。这种抗原被称为交叉抗原。8.交叉反应:交叉抗原与其他抗原所诱生抗体、免疫细胞结合或相互作用被称为交叉反应。9.异嗜性抗原:指一类存在于人、动物、植物或微生物之间的共同抗原。10.超抗原:是一类特殊的抗原性物质,在极低量水平(110ng/ml)能活化大量(2%20%)T细胞或B细胞,并诱导强烈免疫应答。11.丝裂原:亦称有丝分裂原,可致细胞发
3、生有丝分裂,进而增殖。12.免疫球蛋白(Ig):即抗体,是血液和组织液中一类糖蛋白,由B细胞接受抗原刺激后增殖分化为浆细胞所产生,是体液免疫的重要效应分子。13.多克隆抗体:是指将抗原注入机体后,刺激多个B细胞克隆所产生的抗体是针对多种抗原决定基的混合抗体。其特点是来源广泛、制备容易。14.单克隆抗体:单一抗原表位特异性B细胞克隆经融合、筛选和克隆化而获得单克隆杂交瘤细胞,其所产生的同源抗体称为单克隆抗体。15.补体:是人和动物血清中的一组与免疫功能有关,经活化后具有酶活性的蛋白质。16.细胞因子:是由多种细胞分泌的具有多种功能的高活性小分子蛋白质,其在免疫细胞分化发育、免疫应答、免疫调节、炎
4、症反应、造血功能中发挥重要作用,还广泛参与机体其他生理功能和某些病理过程的发生、发展。17.MHC(主要组织相容性复合体):主要组织相容性抗原由一组紧密连锁的基因群编码。TCR(T细胞抗原受体):是T细胞表面特异性识别和结合抗原的结构,属于免疫球蛋白超家族,也是所有T细胞的特征性表面标志。18.BCR(B细胞抗原受体):是嵌入细胞膜类脂分子中的表面膜免疫球蛋白,是B细胞的特征性表面标志。(其功能是特异性识别不同抗原分子,使B细胞活化并分化为浆细胞,进而产生不同特异性的抗体,发挥体液免疫功能。)19.免疫应答:指机体受抗原刺激后,体内抗原特异性淋巴细胞识别抗原,发生活化、增殖、分化或失能、凋亡,
5、进而表现出一定生物学效应的全过程。20.抗原提呈:主要是指抗原提呈细胞(APC)将抗原肽通过MHC类分子和/或MHC类分子提呈给CD8T细胞和/或CD4T细胞的过程。其包括抗原的摄取、处理、运输至细胞膜表面以及供T细胞TCR识别等过程。21.免疫耐受:指机体免疫系统接触某种抗原后所表现出的特异性免疫无应答或低应答。22.超敏反应:是指机体再次接触相同抗原时,发生的生理功能紊乱和/或组织损伤。23.变应原:引起超敏反应的抗原称为变应原.24.人工主动免疫:是用疫苗接种机体,使之产生特异性免疫,从而预防感染的措施。25.人工被动免疫:选用免疫原性强的病原体,经人工大量培养后,用理化方法灭活制成。2
6、6.固有免疫:免疫类型之一,是种群长期进化进程中逐渐形成,是机体抵御病原体侵袭的第一道防线。27.适应性免疫:免疫类型之一,为个体接触特定抗原而产生,仅针对该特定抗原而发生反应。二、相关填空1.根据抗原与机体的亲缘关系抗原可分为几类?可分为:异种抗原、同种异型抗原、自身抗原、异嗜性抗原4种。2.5种免疫球蛋白及特性5种免疫球蛋白分别为:IgG、IgM、IgA、IgD、IgE。其特性分别为:IgG:IgG1、IgG2和IgG3能通过经典途径激活补体;血清含量最高(75%80%),也是丙种球蛋白的主要成分;半衰期较长(2023d);主要的抗感染抗体(具有抗菌、抗病毒、中和毒素和免疫调理作用),抗感
7、染主力军;参与II、III型超敏反应。 IgM:是个体发育中最早产生的抗体,胚胎晚期已能合成,新生儿脐带血中若IgM水平升高,提示胎儿曾有宫内感染;IgM是抗原刺激后出现最早的抗体,半衰期短,故检测IgM水平可用于传染病的早期诊断;mIgM是B细胞抗原受体(BCR)的主要成分;也可参与II、III型超敏反应。IgA:参与皮肤粘膜的局部抗感染作用;初乳中含有高浓度的sIgA-母乳喂养;通过替代途径激活补体;参与型超敏反应。 IgD:血清IgD浓度很低,仅占血清免疫球蛋白总量的0.2%;绞链区较长,易被蛋白酶水解,故半寿期很短(3d);IgD是B细胞的重要表面标志;B细胞的分化过程中首先出现mIg
8、M,mIgD的出现标志着B细胞成熟;对防止免疫耐受有一定作用。 IgE:血清中含量最低;可与肥大细胞、嗜碱性粒细胞上的高亲和力Fc受体(FcR)结合,引起型超敏反应;FcR分布于巨噬细胞、B细胞、嗜酸粒细胞。3.补体的三条途径及相应的激活物质补体的三条途径及相应的激活物质:包括经典激活途径(激活物质主要是与抗原结合的IgG1IgG3、IgM分子)、旁路激活途径(激活物质是为补体激活提供保护性环境和接触表面的成分)、MBL激活途径(激活物质是MBL、世界细菌甘露聚糖残基)。4.细胞因子的分类细胞因子的分类:白细胞介素、干扰素、肿瘤坏死因子、集落刺激因子、生长因子、趋化因子。5.Th的分类机功能T
9、h的分类:包括Th1细胞、Th2细胞。Th的功能:Th1细胞主要分泌IL-2、IL-12、IFN-和TNF-/等,介导与细胞毒和局部炎症有关的免疫应答,参与细胞免疫及迟发型超敏反应性炎症的形成。这种细胞在抗胞内病原体感染中发挥重要作用;Th2细胞主要分泌IL-4、IL-5、IL-6和IL-10,其主要功能为刺激B细胞增殖并产生抗体,与体液免疫相关。6.B细胞亚群及功能B细胞亚群及功能:包括B1细胞和B2细胞。B1细胞参与对多种细菌的抗感染免疫,属于一类承担非特异性免疫功能的重要细胞;B2细胞可产生高亲和力抗体,行使体液免疫功能。此外,它还具有抗原提呈和免疫调节功能。7.抗原提呈细胞的种类抗原提
10、呈细胞的种类:“专职”APC,包括巨噬细胞、树突状细胞和B细胞。“非专职”APC,包括内皮细胞、上皮细胞和激活的T细胞等。7.CTL杀伤靶细胞的两条途径CTL杀伤靶细胞的两条途径:穿孔素/颗粒酶途径;TNF与FasL途径。8.传统疫苗的主要种类和新型疫苗的主要种类传统疫苗的主要种类:灭活疫苗、减毒活疫苗、类毒素。新型疫苗的主要种类:亚单位疫苗、结合疫苗、合成肽疫苗、重组抗原疫苗、重组载体疫苗、DNA疫苗、转基因植物疫苗。9.免疫系统的主要功能免疫防御、免疫自稳、免疫监视。10.丝裂原的种类植物有丝分裂原ConA;动物有丝分裂原PHA。三、主要问答题1.免疫球蛋白的结构及生物学功能免疫球蛋白分子
11、的基本结构是一“Y”字形四肽链结构,由两条完全相同的重链和丙条完全相同的轻链以二硫键连接而成。免疫球蛋白的重链由450550个氨基酸残基组成,分为、和链,据此可将免疫球蛋白分为5类,即IgM、IgD、IgG、IgA和IgE。轻链含约210个氨基酸残基,分为和链,据此可将Ig分为和两型。Ig重链和轻链近氨基酸约110个氨基酸序列的变化很大,称为可变区,分别占重链和轻链的1/4和1/2。轻链和重链除V区以外的部分,位于肽段羧基端,其搭配序列相对恒定,称为恒定区,分别占重链和轻链的3/4和1/2。铰链区位于CH1与CH2之间。(该区富含脯氨酸而易伸展弯曲,能改变两个Y形臂之间的距离,有利于两臂同时结
12、合两个不同的抗原表位。)免疫球蛋白两条重链和两条轻链均可折叠为数个环形结构域,又称功能区。生物学功能主要有:特异性结合抗原,发挥中和毒素和病毒作用,介导体液免疫效应;激活补体;与细胞表面的Fc受体结合,介导吞噬调理作用、ADCC作用和型超敏反应;IgG可通过胎盘;SIgA可穿过呼吸道和消化道粘膜,参与粘膜局部免疫;抗体对免疫应答有正、负调节作用。2.简述基因工程疫苗的种类包括传统的疫苗,如灭活疫苗、减毒活疫苗、类毒素等;新型疫苗有亚单位疫苗、结合疫苗、合成肽疫苗、重组抗原疫苗、重组载体疫苗、DNA疫苗、转基因植物疫苗。3.体液免疫应答的一般规律病原体初次侵入机体所引发的应答称为初次免疫应答。在
13、初次应答的晚期,随着抗原被清除,多数效应T细胞和浆细胞发生死亡,同时抗体浓度逐渐下降。但是,应答过程中所形成的记忆性T细胞和B细胞具有长寿命而得以保存,一旦再次遭遇相同抗原刺激,记忆性淋巴细胞可迅速、高效、特异地产生应答,即再次免疫应答。四、微生物学基本理论要点1、微生物学概论:要点包括:微生物的定义、分类、作用、微生物学的研究内容、发展史微生物:是一群形体微小、结构简单、肉眼不能直接观察到,需借助显微镜才能看见的一群微小生物。微生物的分类:从细胞水平可将微生物分为三大类非细胞型微生物(病毒、类病毒等)原核细胞型微生物(细菌、放线菌、支原体、衣原体、立克次体、螺旋体等)真核细胞型微生物(真菌、
14、单细胞藻类、原虫等)微生物的作用:(与人类的关系)有益方面:参与物质循环、工业、农业、医药工业等方面的应用、正常菌群对人体的保护有害方面:物质的腐败、病原微生物的危害微生物学:是研究微生物的形态结构、生理、遗传变异,以及微生物的进化、分类和与人类、动植物、自然界之间的关系的一门科学。微生物学发展简史:显微镜的发明、巴斯德、郭霍等科学家对微生物学发展的贡献、现代微生物学发展的重要领域2、细菌的定义:细菌:是一类单细胞并以二分裂方式进行繁殖的原核细胞型微生物。3、细菌的形态结构与分类:要点包括:细菌的大小、细菌的基本形态、细菌的不规则形态、细菌的基本结构、细菌的特殊结构、细菌的分类细菌的大小:以微
15、米为测量单位,观察细菌通常使用放大1000倍的显微镜油镜镜头。细菌的基本形态:三大类:球菌、杆菌、螺形菌细菌的不规则形态:细菌的形态受温度、pH值、培养基、药物等因素的影响,可出现不规则形态。观察细菌的典型形态通常选用对数期的菌体。细菌的基本结构:细胞壁、细胞膜、细胞质、核质 了解各基本结构的主要功能,了解革兰阳性细菌和革兰阴性细菌细胞壁的主要区别,了解细菌细胞壁的主要化学成分肽聚糖的结构。细菌的特殊结构:荚膜、鞭毛、菌毛、芽孢 了解各特殊结构的主要功能、鉴定意义、与致病性的关系。如荚膜的抗吞噬作用、鞭毛的运动功能、菌毛的粘附作用、是否能杀灭芽孢可作为判断灭菌是否彻底的判断标准。细菌的分类:了
16、解细菌分类的依据,种、型、株的概念、命名4、细菌的营养与生长繁殖:要点包括:细菌的营养物质组成、细菌生长繁殖所需的基本条件、细菌培养方法、细菌生长曲线规律细菌的营养物质组成:水、碳源、氮源、无机盐、生长因子 了解这些营养物质对培养细菌的意义细菌生长繁殖所需的基本条件:充足的营养物质、合适的pH值、合适的温度、合适的气体条件细菌培养方法:了解培养基配制原则、培养基的用途和种类、平板、斜面、菌落等概念细菌生长曲线规律:细菌生长曲线体现细菌群体生长的规律。将一定量的细菌接种到新的培养基中,以细菌数的对数为纵坐标、以培养时间为横坐标绘得一条S形状的曲线叫细菌生长曲线。根据细菌生长曲线课将细菌的批培养分
17、为以下4个时期:迟缓期:是细菌适应新环境的时期,代谢活跃但细胞不分裂。制剂等的灭菌应选择在此期进行。对数期:是细菌快速生长的时期,代谢活跃、细胞数目呈对数增长、细胞形态和性状典型。此期的菌体适合用于研究,如观察细菌形态、药物敏感试验应选择此期的菌体。稳定期:是细菌积累大量代谢产物的时期,活菌数大致稳定,发酵工业通常以加糖、补料等方式延长此期以获得较高的发酵产量。衰亡期:是细菌死亡、菌体变形、自溶的时期,此期的菌体一般不适合研究或发酵生产。5、细菌的代谢:要点包括:细菌的酶、产能方式、代谢过程、代谢产物、代谢调控细菌的酶:组成酶、诱导酶 了解诱导酶的应用意义产能方式:有氧呼吸、发酵、无氧呼吸代谢
18、过程:结合生物化学加以学习代谢产物:分解代谢产物、合成代谢产物,了解分解代谢产物的鉴定意义,熟悉一些常见的细菌生化反应代谢调控:是微生物学研究中非常重要和具有很强实用性的知识,但理论课教材多数在此方面知识较为缺乏和零散,考虑到受课时限制和不加重学生负担,不在此作书面陈述。6、细菌的分布:要点包括:细菌在自然界的分布、在人体的分布细菌在自然界的分布:土壤(细菌的大本营)、水(大肠菌群数的检测意义)、空气(空气的净化意义)细菌在人体的分布:正常菌群的意义7、细菌的感染与致病性:要点包括:细菌的感染类型、细菌的毒力细菌的感染类型:隐性感染、潜伏感染、显性感染、带菌状态细菌的毒力:细菌的毒力构成:侵袭
19、力、毒素 细菌内毒素和外毒素性质的比较8、细菌的检查方法:要点包括:革兰染色的方法及其应用意义、病原菌的检验程序革兰染色的方法及其应用意义:方法:结晶紫初染(1分钟)-碘液煤染(1分钟)-95%乙醇脱色(适度)-沙黄复染(1分钟) 应用意义:有鉴别细菌的作用、有指导临床用药的作用。病原菌的检验程序:标本采集-直接镜检-分离培养-纯培养-生物学性状观察、细菌生化反应、血清学鉴定、动物试验、药物敏感试验等9、消毒灭菌:要点包括:消毒、灭菌概念、巴氏消毒法、高压蒸汽灭菌法、紫外线的杀菌作用、消毒剂消毒:用理化因素杀死物体中的病原微生物,以防止病原微生物的感染和传播。灭菌:用理化因素杀死物体中所有的微
20、生物,包括细菌的芽孢。巴氏消毒法:是一种对酒类、饮料等进行的低温消毒方法,有利保持食品的风味。联系高温瞬时法体会高温快速灭菌的原理。高压蒸汽灭菌法:掌握其操作要点(保持蒸汽流畅、排冷空气、零磅开盖)、一般的灭菌条件、理解湿热灭菌的优点。紫外线的杀菌作用:紫外线的杀菌作用特点(用于空气、物体表面的消毒);主要的杀菌机理(破坏核酸);光复活(使用紫外线杀菌要避免可见光的光复活的修复作用)消毒剂:了解化学消毒剂的主要种类、杀菌机制及其使用10、质粒:要点包括:质粒的概念、质粒的特性、常见的质粒类型质粒:细菌染色体外的遗传物质。(决定一些次要性状,可转移或消除)质粒的基本特性:小的环状DNA分子、自主
21、复制、决定一些次要性状、可消除或转移、相容性和不相容性常见的质粒类型:了解F质粒、R质粒等11、转座因子:要点包括:概念、三种类型、意义12、噬菌体:要点包括:噬菌体概念、温和噬菌体和毒性噬菌体的概念、前噬菌体、溶原性细菌、噬菌体感染的特异性、噬菌体的应用意义噬菌体:感染微生物细胞的病毒。毒性噬菌体:生活史中只有一个溶菌周期的噬菌体。温和噬菌体:生活史中有溶菌周期和溶原周期的噬菌体。前噬菌体:整合在细菌染色体上的噬菌体基因组。溶原性细菌:带有前噬菌体的细菌。噬菌体感染的特异性是噬菌体分型的依据 。噬菌体的应用意义:了解13、基因突变的规律:自发性、不对应性、可诱发性、独立性、可遗传性、可逆性
22、(性状回复而不是基因结构的恢复)14、DNA损伤的修复:4种修复机制及其意义15、营养缺陷型概念及其意义16、微生物基因转移和重组的方式:转化、转导、接合、噬菌体转变转化:受体菌吸收供体菌游离的DNA片段,并整合入受体菌基因组中,从而获得供体菌部分遗传性状的过程。转导:以噬菌体为媒介,将供体菌的部分遗传物质转移至受体菌,使受体菌获得部分供体菌的遗传性状。17、葡萄球菌:要点包括:是常见的化脓性球菌、革兰阳性球菌、据产色素情况分三类葡萄球菌(金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、腐生葡萄球菌)、SPA可用于协同凝集试验、耐药菌较为多见(如MRSA)致病性葡萄球菌的鉴定要点(金黄色、透明溶血环、血浆凝固酶
23、试验阳性、发酵甘露醇)18、链球菌:要点包括:据溶血现象分三类链球菌(甲型链球菌、乙型链球菌、丙型链球菌)、据抗原结构分A-V共20群,致病株大多是A群、抗链球菌溶素O试验辅助诊断链球菌感染(如风湿热)、链球菌感染易引起超敏反应性疾病(如急性肾小球肾炎)19、肺炎链球菌:胆汁溶菌试验阳性、菊糖发酵试验阳性(据此区别于甲型链球菌)20、奈瑟菌属:革兰阴性双球菌,致病菌主要有脑膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、培养常采用巧克力平板21、肠道杆菌:要点包括:大肠埃希菌、志贺菌属、沙门菌属大肠埃希菌:俗称大肠杆菌,是肠道的正常菌群、是环境卫生和食品卫生学的检测指标、是科研上最受到重视的一种细菌。生物学特性:革兰
24、阴性杆菌、兼性厌氧菌、易培养、代谢活跃、乳糖发酵试验阳性(产酸产气)(可区别于痢疾杆菌、伤寒杆菌,有鉴定意义)、IMViC试验:+-。了解致病的血清型(5种)。志贺菌属:俗称痢疾杆菌,是细菌性痢疾的病原菌沙门菌属:沙门菌感染的三种类型:肠热症(伤寒)、食物中毒(胃肠炎)、败血症。肠热症的二次菌血症(理解病原菌的感染情况)。肥达试验:血清学试验(试管凝集法)用沙门菌抗原检测患者血清中的特异性抗体 ,以辅助诊断疾病。肥达试验结果的解释有助理解血清学诊断的一般原理。22、弧菌属:霍乱弧菌(霍乱)、副溶血性弧菌 (海产品食物中毒)23、厌氧芽孢梭菌:破伤风梭菌(破伤风)、产气荚膜梭菌(气性坏疽、食物中
25、毒等)、肉毒梭菌(食物中毒)24、分枝杆菌属:结核分枝杆菌、麻风分枝杆菌结核分枝杆菌:结核病的病原菌、抗酸性细菌、生长缓慢、罗氏培养基、油菌免疫、结核菌素试验的应用意义、联合用药25、人畜共患病病原菌:布鲁菌属(动物流产、波浪热)、鼠疫耶氏菌、炭疽芽孢杆菌(炭疽病)26、放线菌感染的特征:硫磺样颗粒、瘘管27、支原体:支原体概念、肺炎支原体、溶脲脲原体(泌尿生殖系统感染)28、立克次体:概念、流行性斑疹伤寒、地方性斑疹伤寒、恙虫病。外斐反应的诊断意义29、衣原体:概念、独特的发育周期、和性病的关系30、螺旋体:概念、钩端螺旋体(钩体病)、梅毒螺旋体(梅毒)31、真菌的形态结构:霉菌、酵母的概念
26、;菌丝的三种类型(营养菌丝、气生菌丝、生殖菌丝)32、真菌的培养:沙保培养基、2228培养温度33、真菌的菌落类型:酵母型、类酵母型、霉菌型(菌落)34、真菌的繁殖方式:孢子繁殖、菌丝断裂繁殖35、病原性真菌:皮肤癣菌(嗜角质蛋白特性)、白色假丝酵母菌(最常见的条件致病性真菌)、新型隐球菌(深部感染) 36、病毒的概念(非细胞型微生物)和主要特点(极小、结构简单、细胞内寄生)37、病毒的基本结构:核衣壳38、病毒的对称类型:螺旋对称型、20面体对称型、复合对称型39、病毒的增殖过程:(复制周期)吸附、穿入、脱壳、生物合成、装配与释放40、干扰现象:两种病毒感染同一细胞时,可发生一种病毒抑制另一
27、种病毒增殖的现象称为干扰现象。41、干扰素的抗病毒作用机制:干扰素抗病毒蛋白抑制病毒复制42、病毒的致病机理:对细胞的作用、对免疫的作用43、病毒培养的三种方法:细胞培养、鸡胚培养、动物接种44、流行性感冒病毒:流感病毒变异和流感流行的关系(抗原漂移、抗原转换)45、麻疹病毒:急性呼吸道传染病、易感人群:6个月-五岁、飞沫传播、临床症状:发热、上呼吸道炎、结膜炎、口腔粘膜斑(koplic斑)、全身斑丘疹为特征。46、副流感病毒(轻型流感样症状)、腮腺炎病毒(腮腺炎)、呼吸道合胞病毒(婴幼儿细支气管炎、婴幼儿肺炎)、风疹病毒(风疹、新生儿先天性畸形)、腺病毒(流行性角膜结膜炎)、鼻病毒(50%以
28、上普通感冒)、冠状病毒(10-30%普通感冒)、呼肠病毒(轻度上呼吸道感染)47、肠道病毒:脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒、埃可病毒、新肠道病毒(主要经粪口途径传播)48、乙型肝炎病毒(HBV):(3. 5亿无症状携带者,我国10%)49、乙型肝炎患者主要的血清标志物有哪些,并说明其在乙型肝炎诊断中的意义:HbsAg:已感染乙肝病毒HbeAg:乙肝病毒复制的标志,强感染性指标抗-HBc:乙肝病毒复制的标志抗-Hbe:恢复的标志,病毒停止复制,传染性减弱抗-HBs:已感染过乙肝病毒,或接种疫苗后获得免疫力 50、HIV的致病机理:HIV通过损害CD4+T淋巴细胞以及影响其它免疫细胞功能导致免疫功能缺
29、陷,在此基础上发生各种机会性感染及淋巴系统的肿瘤。51、朊粒(Prion):传染性蛋白因子、在人和动物中引起以海绵状脑病(TSE)为特征的致死性的中枢神经系统的慢性退化性疾患。如搔痒病、疯牛病、库鲁病、克-雅病、新克雅病52、抗生素概念:抗生素是生物在其生命活动过程中产生的(以及用化学、生物化学方法衍生的),能在低微浓度下有选择性抑制或影响它种生物功能的有机化合物。研究开发新抗生素的工作步骤:土壤微生物的分离、筛选、早期鉴别、分离精制、临床前试验研究、临床试验54、抗生素发酵的一般流程:孢子制备、种子制备、发酵55、次级代谢产物的特点:(1)对微生物自身的生长、繁殖无显著功能(2)与初级代谢紧
30、密相连(3)在一定条件下能大量合成56、抗生素生物合成的调节与控制要点:(1)受产生菌生长速率的调节(2)受分解代谢物调节(3)需要合适的初级代谢基础抗生素的主要作用机制:抑制细胞壁的合成、影响细胞膜的功能、干扰蛋白质的合成、抑制核酸的合成、干扰细胞的能量代谢抗药性产生的遗传学机制:(1)自发突变加药物选择(2)抗药性基因的转移抗药性产生的生物化学机制:(1、)产生钝化酶(2)药物作用靶位改变(3)细胞对药物的透性改变60、抗药性的控制措施:(1)合理用药(2)新药开发(3)抗药机制研究61、抗生素效价的微生物学测定法:管碟法(二剂量法):计算公式、影响因素62、微生物在其他药物生产中的应用:
31、维生素C二步发酵法、氨基酸发酵的代谢调控、酶及酶抑制剂的生产意义、甾体转化的意义、微生态制剂等63、药物生产中的微生物来源:空气、水、人体、土壤、原料和包装、厂房和制药设备64、GMP:药品生产质量管理规范65、防止微生物污染药物的措施:(1)加强药品生产管理(2)进行微生物学检验(3)使用合适的防腐剂66、测定药物MIC、MBC的方法:(1)连续稀释法(2)琼脂扩散法67、常用的活菌计数法:(1)平板计数法(2)滤膜过滤法68、体外抗菌试验的影响因素:(1)试验菌(2)培养基(3)抗菌药物(4)对照试验69、药物制剂的微生物学检查:无菌检查、细菌总数和霉菌总数检查、控制菌检查等五、微生物学基
32、本技能要点1、显微镜油境镜头的使用要点:(1)低倍镜对光(2)聚光器上调(3)将油镜头降至最低(4)用粗调缓缓上调镜头至有物像一闪(5)用微调调至物象清晰2、革兰染色方法和应用意义:染色方法:结晶紫初染1分钟后细流水冲洗-碘液媒染1分钟后细流水冲洗-95%酒精脱色(滴加酒精1-2次、脱色时间15-30秒)-沙黄复染1分钟后细流水冲洗,甩干。应用意义:(1)细菌分类鉴定方面的意义:根据染色结果可将细菌分成革兰阳性细菌和革兰阴性细菌两大类。(2)指导临床用药方面的意义:革兰阳性细菌和革兰阴性细菌对药物的敏感性不同。3、标本片的制作过程:涂片(在玻片上将细菌标本均匀涂布成1平方厘米的薄层)-干燥(做
33、到涂片上水迹完全消失)- 固定(缓缓通过火焰3次)-染色(采用相应染色方法)4、观察细菌典型形态的方法:根据对细菌的不规则形态及其影响因素的理解,选择对数生长期的菌体进行观察。这样当拿到细菌标本后,通常一方面直接镜检,另一方面将标本中的细菌培养至对数生长状态后再镜检。5、细菌接种的无菌操作技术:接种环的握持方法、烧灼接种环的方法、试管的握持方法、火焰保护下接种的注意事项6、培养基制备过程:称量-溶解-过滤-调节酸碱度-分装-高压蒸汽灭菌7、细菌的接种培养方法及其主要用途:(1)平板划线的方法:分区划线法。主要用于分离细菌(2)斜面接种法:由下至上涂布。主要用于菌种的扩大培养、传代培养。(3)液
34、体接种法:将粘有菌接种环在培养基内的试管壁研磨,以使细菌均匀分布于培养基。主要用于观察细菌生长现象等研究。(4)半固体穿刺接种法:将粘有细菌的接种针穿刺与培养基中。主要用于观察细菌有无动力。8、细菌生长现象的观察:平板划线(观察及描述菌落的形态)、斜面接种(观察细菌的菌苔)、液体接种(观察均匀混浊生长现象、菌膜生长现象)、半固体接种(观察细菌有无动力)9、细菌的生化反应(糖发酵、IMViC、硫化氢、尿素酶)的原理、方法以及结果判断(理解其在细菌鉴定方面的意义) 10、高压灭菌锅灭菌方法的操作要点:蒸汽要流畅、排尽冷空气、零磅开盖11、紫外线灭菌的机理和特点:灭菌机理:主要是破坏细菌的核酸。作用
35、特点:穿透力低,主要用于物体表面以及无菌室空气的消毒。12、链霉菌菌落观察:菌落特点:小、致密、表面干躁、灰色孢子13、酵母菌菌落观察:菌落特点:大、厚、表面湿润、乳白色14、乙肝病毒表面抗原检测(ELISA):包被抗体-加待检血清-加酶标抗体-加底物-比色法判断结果15、病毒培养的3种方法:细胞培养、鸡胚培养、动物接种16、药物体外抗菌试验:纸片扩散法(药物敏感试验):(1)菌种:金黄色葡萄球菌、大肠杆菌3712-16小时普通肉汤琼脂斜面培养物(2)培养基:MH(肉汤)、MHA(肉汤琼脂)(3)方法:斜面培养物-接种MH-过夜(细菌处于对数生长期)-涂布于MHA-加抗生素滤纸片-37培养24小时-测量抑菌圈直径-对照表15-1判断药敏试验结果17、抗生素效价二剂量测定法计算公式: (UH+UL)-(SH+SL) H lg=- * lg- (SH+UH)-(SL+UL) L18、细菌总数测定方法:试液稀释-取两个合适稀释度试液1ml-平板-加15ml培养基-摇均-平板倒置37培养48小时-计数菌落-报告结果19、霉菌总数测定、无菌检查、热原质检查 (注:专业文档是经验性极强的领域,无法思考和涵盖全面,素材和资料部分来自网络,供参考。可复制、编制,期待你的好评与关注)
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