土壤有效磷的测定PPT文档.ppt

土壤有效磷的测定0.5mol/L NaHCO3 浸提钼锑抗分光光度法（Olsen法）崔玉玲黑龙江省农垦科学院测试中心0454-8359872 136445451581目录一、概述二、Olsen方法原理三、主要仪器设备四、试剂五、操作步骤六、结果计算七、质量控制2一、概述土壤有效磷是土壤肥力的重要指标之一，表明土壤的供磷水平，可以作为判断施用磷肥的指标，为推荐施肥提供依据。3一、概述土壤有效磷含量只是一个相对的指标，同一土壤用不同方法测得的有效磷量可以相差很多，即使用同一浸提剂，由于浸提条件如土液比、温度、时间、振荡方法不同其结果有很大差异，在相同条件下测得的结果才有相互比较的意义。41、浸提方法浸提剂的选择主要根据各种土壤的性质而定。土壤有效磷测定采用的提取剂种类很多，目前应用的主要测定方法有三种：Olsen法、Bray法和Mehlich3法。51、浸提方法在目前使用较广的几种浸提剂中，一般认为以 0.03mol/L NH4F-0.025mol/LHCl(Bray法)浸提剂比较适合于风化程度较高的酸性土壤；61、浸提方法石灰性土壤通常用 0.5 mol/L NaHCO3(pH值为8.5)(Olsen法)浸提比较理想；对于中性和酸性水稻土NaHCO3法也有应用。7 1、浸提方法Mehlich3法是近年来研究较多并逐步推广应用的一种测试方法，其优点主要是一次浸提可测定土壤中大部分有效养分，便于大批量分析；缺点是应用时间不长，尚未建立土壤的丰缺指标体系，需要进行试验确定。82、指标体系即使简单地以“高”、“中”、“低”来分档,不同提取方法的结果分起档来其数值相差很远;而且同一提取方法的结果对不同土壤,不同作物还应该有不同的分档标准。9 2、指标体系 单位：单位：mg/kg 测定方法测定方法评价标准评价标准0.03mol/L NH4F-0.025mol/LHCl 法法0.5 mol/L NaHCO3法法低低156中中15-306-10高高3010102、指标体系因此，在报告有效磷结果时必须同时说明所用的测定方法。113、Olsen法的影响因素浸提时间：Olsen法连续提取测定土壤有效磷的结果表明，0.5 mol/L NaHCO3溶液浸提出的土壤有效磷量随振荡时间而增加。将各次连续测定值与各参比标准进行相关性分析，结果表明Olsen法对土壤有效磷进行一次提取已经能够反应土壤的有效磷水平，无需进行多次提取。123、Olsen法的影响因素温度：Olsen法不同温度浸提土壤有效磷的试验结果表明：提取温度对Olsen法测定土壤有效磷的结果影响极大，在1030范围内，有效磷测定值随温度升高而增加，温度每升高1所增加的磷的平均值为0.44mgkg，且随着土壤含磷量不同，其影响程度也不同。13二、Olsen方法原理石灰性土壤由于大量游离碳酸钙存在，不能用酸溶液来提取有效磷。一般用碳酸盐的碱溶液。由于碳酸根的同离子效应，提取液中的 HCO3-可和土壤溶液中的 Ca2+生成 CaCO3 沉淀，从而抑制了 Ca2+的活度而使某些活性较大的 CaP(磷酸钙盐)被提取出来。14二、方法原理酸性土壤中的磷主要是以FeP（磷酸铁盐）、Al-P（磷酸铝盐）的形态存在，碳酸盐的碱溶液在酸性土壤中因 pH 提高而使 Fe-P、Al-P 水解而部分被提取，也降低了铝和铁离子的活性，在浸提液中由于 Ca、Fe、Al 浓度较低，不会产生磷的次生沉淀。15二、方法原理此外，碳酸氢钠碱溶液中存在着OH-、HCO3-、CO32-等阴离子，有利于吸附态磷的置换。因此NaHCO3不仅适用于石灰性土壤，也适应于中性和酸性水稻土壤中速效磷的提取。16三、主要仪器设备1、可控温的往复振荡机：本法浸提温度对测定结果影响很大。因此必须严格控制浸提时的温度条件，本方法要求是251 ，用恒温振荡机进行提取。17三、主要仪器设备2、分光光度计波长为880nm或700nm波长不能达到880nm时可用700nm，浸出液有颜色时可用活性炭脱色。18 物质颜色和吸收光颜色的关系物质颜色和吸收光颜色的关系 吸吸 收收 光光 物质颜色物质颜色 颜颜 色色 波波 长长(nm)黄黄 绿绿 紫紫 400 450 黄黄 蓝蓝 450 480 橙橙 绿绿 蓝蓝 480 490 红红 蓝蓝 绿绿 490 500 紫紫 红红 绿绿 500 560 紫紫 黄黄 绿绿 560 580 蓝蓝 黄黄 580 600 绿绿 蓝蓝 绿绿 600 650 蓝蓝 绿绿 红红 650 75019三、主要仪器设备3、酸度计可准确调节pH到8.520四、试剂1、0.5 mol/L NaHCO3浸提液 称取42.0g NaHCO3 于800mL水中，稀释定容至1L。以50%（m/V）NaOH 溶液调节浸提液的pH至8.5（用pH计测定）。贮存于聚乙烯或玻璃瓶中，用塞塞紧。此溶液曝于空气中可因失去CO2而使pH增高，使用前应检查pH是否改变并校准。21四、试剂2、无磷活性炭 活性炭常含有磷，应做空白试验，检验有无磷存在。如含磷较多，须先用HCl（11）浸泡过夜，在平板漏斗上抽气过滤，用蒸馏水冲冼多次至无 Cl-为止；再用0.5 mol/L NaHCO3浸泡过夜，在平板漏斗上抽气过滤，每次用少量蒸馏水淋洗多次，并检查到无磷为止，烘干备用。如含磷较少，则直接用NaHCO3 处理即可。22四、试剂3、钼锑抗贮备液 称取酒石酸锑钾0.3g，溶于100毫升水中，制成0.3的溶液。()称取10.0g 钼酸铵溶于约60 300mL 水中，冷却。()另取181mL 浓硫酸缓缓注入约800mL水中，搅匀冷却。()23四、试剂将稀硫酸溶液()注入钼酸铵溶液()中，边加边搅动；再将100mL 0.3的酒石酸锑钾溶液()加入到钼酸铵液中，最后用水稀释至2L，贮于棕色瓶中，此贮备液钼酸铵浓度为0.5%，硫酸浓度为3.26mol/L(1/2H2SO4)。24四、试剂4、钼锑抗显色剂称取0.50g 抗坏血酸(左旋)溶于100mL钼锑抗贮备液中。(有效期24小时，如贮于2-8冰箱中，则有效期7天。)25四、试剂5、磷标准贮备溶液（100 mg/L）称取0.4394g KH2PO4(105烘2小时)溶于约200mL 水中，加入5mL 浓H2SO4，转移入1L 容量瓶中，用水定容，可较长时间保存。26四、试剂6、磷标准工作溶液（5 mg/L）取磷标准贮备溶液用0.5 mol/L NaHCO3准确稀释20倍即为磷标准工作液，此液不宜久存。27五、操作步骤1、称取通过1mm(18号筛)筛子的风干土样2.50g（精确0.01g）于干燥的200或250mL塑料瓶中，加入0.5 mol/L NaHCO3溶液50mL，塞紧瓶塞，在振荡器上振荡30min(速率为每分钟180次，251 )，28然后立即用无磷滤纸过滤，滤液承接于干燥的三角瓶中，最初78ml滤液弃去，同时做空白试验。29常用标准筛对照数据表国际标准ISO美国筛制标准中国药典筛标准2.00mmNo.10一号筛1.00mmNo.180.841mmNo.20二号筛0.355mmNo.45三号筛0.250mmNo.60四号筛0.150mmNo.100七号筛30五、操作步骤2、如发现滤液的颜色较深，应向土壤悬浊液中加入约0.3-0.5g 无磷活性炭粉，摇匀后立即过滤，也可在振荡前加入活性炭。活性炭和滤纸是否含磷可进行空白试验来验证。31五、操作步骤3、吸取滤液10.00mL于三角瓶中（含磷量高时少吸，同时应补加0.5 mol/L NaHCO3溶液至10.00mL）（注1），然后加入钼锑抗显色剂5.00mL，慢慢摇动，使CO2逸出，再准确加入10.00mL水，充分摇匀，逐尽CO2，在室温高于15 处放置30min后，进行比色。32五、操作步骤4、以空白溶液为参比液，使用1cm比色皿，在分光光度计上，用880nm或700nm波长进行比色，测读吸光度。33五、操作步骤注1:如果吸取滤液10mL于50mL容量瓶中，加水和钼锑抗试剂后，会产生大量的CO2气体，由于容量瓶瓶口小，CO2气体不易逸出，在摇匀过程中，常造成试液外溢，导致测定误差。为了克服这个缺点，可以准确加入提取液、水和钼锑抗试剂于三角瓶中，混匀，显色。34五、操作步骤5、标准曲线绘制：(1)分别准确吸取5mg/L磷标准使用溶液0、2.50、5.00、10.00、15.00、20.00、25.00mL于50mL容量瓶中，用0.5 mol/L NaHCO3溶液定容。此标准系列中磷的浓度依次为0、0.25、0.50、1.00、1.50、2.00、2.50mg/L。35五、操作步骤(2)吸取标准系列溶液各10.00mL于三角瓶中，同样品处理显色（五、3），测读吸光度。(3)以上述标准系列的磷浓度为横坐标，相应的吸光度为纵坐标绘制曲线。36六、结果计算1、样品的吸取体积为10mL时：有效P(mg/kg)=C20 C从标准曲线求得查得浓 度，mg/L；20浸提时的液土比 50mL/2.50 g。37六、结果计算2、样品的吸取体积小于10mL时：有效P(mg/kg)=C2010/V C从标准曲线求得查得浓度，mg/L；20浸提时的液土比，50mL/2.50 g；V吸取体积，mL。38七、质量控制质量控制的基本要素：1、人员的技术能力；2、合适的仪器设备；3、好的实验室和好的测量操 作；39七、质量控制4、合适的测量方法、标准的 操作规程；5、合格的试剂及原材料；6、正确的采样及样品处理；7、合乎要求的原始记录和数 据处理；40谢谢 大家！41