化验室常用药品的配制和标定方法.doc

第二章 化验室常用药品的配制和标定方法一、 氢氧化钠标准溶液的配制和标定C（NaOH）= 1mol/L C（NaOH）= 0.5mol/L C（NaOH）= 0.1mol/L（一）氢氧化钠标准溶液的配制：称取120g NaOH，溶于100mL水中，摇匀，倒入聚乙烯容器中，密闭放置至溶液清亮。用塑料管吸取下列规定体积的上层清液，注入1000mL无CO2的水中摇匀。C（NaOH），mol/L NaOH饱和溶液，mL1 560.5 280.1 5.6（二）氢氧化钠标准溶液的标定：1. 测定方法：称取下列规定量的、于105110。C烘至质量恒定的基准邻二甲酸氢钾，称准至0.0001 g，溶于下列规定体积的无CO2的水中，加2滴酚酞指示液（10 g/L），用配制好的NaOH溶液滴定至溶液呈粉红色同时作空白试验。C（NaOH） 基准邻苯二甲酸氢钾 无CO2水 mol/L g mL 1 6 80 0.5 3 800.1 0.6 802. 计算：氢氧化钠标准溶液浓度按下式计算： MC（NaOH）= （VV0）0.2042式中：C（NaOH）氢氧化钠标准溶液之物质的浓度，mol/L；V消耗氢氧化钠的量，mL；V0空白试验消耗氢氧化钠的量，mL；M邻苯二甲酸氢钾的质量，g；0.2042邻苯二甲酸氢钾的摩尔质量。K g/ mol。二、 盐酸标准溶液的配制和标定C（HCl）= 1mol/L C（HCl）= 0.5mol/L C（HCl）= 0.1mol/L（一） 盐酸标准溶液的配制：量取下列规定体积的盐酸，注入1000 mL水中，摇匀。C（HCl） HCl，mL1 90 0.5 450.1 9（二） 盐酸标准溶液的标定：1.测定方法：称取下列规定量的、于270300。C灼烧至质量恒定的基准无水碳酸钠，称准至0.0001 g。溶于50mL水中，加10滴溴甲酚绿-甲基红混合指示液，用配制好的盐酸溶液滴定至溶液由绿色变为暗红色，再煮沸2min，冷却后，继续滴定至溶液再呈暗红色。同时作空白试验。C（HCl），mol/L 基准无水碳酸钠，g 无CO2水，mL 1 1.6 50 0.5 0.8 500.1 0.2 503. 计算：盐酸标准溶液的浓度按下式计算： M C（HCl）= （VV0）0.05299式中：C（HCl）盐酸标准溶液之物质的量浓度，mol/L；M无水碳酸钠之质量，gV盐酸溶液之用量，mLV0空白试验盐酸溶液之用量，mL0.05299无水碳酸钠的摩尔质量，K g/ mol。溴甲酚绿-甲基红混合指示剂：三份1g/L的溴甲酚绿乙醇溶液与一份2g/L的甲基红乙醇溶液混合。三、 硫酸标准溶液的配制和标定C（1/2H2SO4）=1 mol/L C（1/2H2SO4）=0.5 mol/L C（1/2H2SO4）=0.1 mol/L（一）硫酸标准溶液的配制量取下列规定体积的硫酸，缓缓注入1000 mL水中，冷却，摇匀。1/2H2SO4，mol/L H2SO4，mL 1 30 0.5 150.1 3（二）硫酸标准溶液的标定1.测定方法：称取下列规定量的、于270300。C灼烧至恒定的基准无水碳酸钠，称取至0.0001 g。溶于50mL水中，加10滴溴甲酚绿-甲基红混合指示液，用配制好的硫酸溶液滴定溶液由绿色变为暗红色，煮沸2min，冷却后继续滴定至溶液再呈暗红色。同时做空白试验。C（1/2H2SO4），mol/L 基准无水碳酸钠，g 无CO2水，mL 1 1.6 50 0.5 0.8 500.1 0.2 502.计算：硫酸标溶液浓度按下式计算： MC（1/2H2SO4）= （V1V0）0.05299式中：C（1/2H2SO4）硫酸标准溶液之物质的量浓度，mol/L；M无水碳酸钠之质量，g；V1硫酸溶液之用量，mL；V0空白试验硫酸之用量，mL；0.05299无水碳酸钠的摩尔质量，mol/L十五、乳及乳制品蛋白质的测定：（一）原理：蛋白质是含氮的有机化合物，食品与硫酸和催化剂一同加热消化，使蛋白质分解，分解的氮与硫酸结合生成硫酸铵，然后碱化蒸馏，使氨游离，用硼酸吸收后，再以硫酸或盐酸标准溶液滴定，根据消耗量乘以换算系数即为蛋白质的含量。1.消化：加热时，有机质破坏，蛋白质分解。反应式如下： H2SO4 SO2 + H2O + O 2CH3 . CH . NH2 . COOH + 2O 2CH3.CHOH-NH2 + 2CO22CH3CHOH.NH2 + 10O 4CO2 + 2NH3 + 4H2O2NH3 + H2SO4 （NH4）2SO4（1）加入硫酸铜的作用：催化剂，加快反应速度。2CuSO4 2Cu2SO4 + SO2 + O2蛋白质分解的 C + O2 CO2 蛋白质分解的 2H2 + O2 2H2O Cu2SO4 + 2H2SO4 2 CuSO4 + SO2 + 2H2O（2）加入硫酸钾的作用：提高反应温度（纯硫酸沸点330。C，添加硫酸钾后，可达400。C），加速反应速度。K2SO4 + H2SO4 2KHSO4 2KHSO4 K2SO4 + SO2 + H2O 但加入过多的K2SO4会造成沸点太高，生成的硫酸铵在513。C会分解。2.蒸馏和吸收：硫酸铵在碱性条件下，释放出氨，然后通过加热蒸馏，氨随水蒸汽出，蒸出的氨被硼酸吸收（硼酸为极弱的酸，在滴定中并不影响所用指示剂的变色反应）。反应式如下：2（NH4）2SO4 + NaOH 2NH3 + Na2SO4 +H2O 2NH3 + 4H3BO3 （NH4）2SO4 + 5H2O3.滴定：被硼酸吸收的氨，用硫酸或盐酸标准溶液滴定。反应式如下：（NH4）2B4O7 + 2HCl +5H2O 2NH4Cl + 4H3BO3（二）试剂与仪器：1. 硫酸铜、 硫酸钾、 硫酸2. 2%的硼酸吸收液：20g硼酸（分析纯）溶于1000mL热蒸馏水中，临用时加入10mL混合指示液。3. 混合指示液：1份0.1%甲基红乙醇溶液与5份0.1%溴甲酚绿乙醇溶液临用时混合。4 .40%氢氧化钠溶液：40g 氢氧化钠溶于1000mL蒸馏水中。2. 0.1 moL/L硫酸标准溶液或0.1 moL/L盐酸标准溶液。（三）操作步骤：1.样品的制备：固体样品12 g，液体样品1020 g。把样品放入消化瓶中，同时加入6 g硫酸钾，0.2g硫酸铜，20 mL浓硫酸。2.消化：先微火加热到100。C左右，以防瓶内泡沫冲出而影响结果，当瓶内发泡停止，稍加大火力，设定温度420450。C。当内溶物的颜色逐渐转化成透明的淡绿色时，继续消化0.51h（若消化瓶内壁沾有碳粒时，进行摇动或待冷却后用30%的过氧化氢冲下，继续消化至透明的兰绿色为止）。然后从消化炉上取下冷却。3.蒸馏和吸收：1）将澄清的消化液小心移入100mL容量瓶中，以水冲洗三次消化瓶，洗涤液一起并入上述容量瓶中，冷却后用蒸馏水定容至刻度；2）进液胶管分别插入蒸馏水瓶和40%氢氧化钠溶液中；3）先开自来水进入冷凝管，待指示灯亮后，开蒸汽开关，蒸汽开关导出管放出蒸汽时，关闭汽阀。4）在蒸汽导出管托架上，放上加有50mL硼酸吸收液的三角瓶，使蒸馏导出管的末端浸入接收液内。另一托架上放个内装1020mL消化液的消化瓶。5）吸碱适量至溶液颜色变黑后，开汽，蒸馏至氨汽全部蒸出（可用PH试纸测试）约200250mL时关汽。4 .滴定：用盐酸或硫酸标准溶液滴定吸收液，终点颜色由兰绿色变为灰紫色。计算： （V1V0）C 0.0140K Pro含量% = 100 M（V/100）式中：V1样品消耗酸体积，mLV0空白消耗酸的体积，mLC酸标准溶液的浓度，moL/L；M称取样品的质量，g；V从容量瓶中吸取消化液的体积，mL0.0140氮原子的摩尔质量，Kg/ moLK氮换算成粗蛋白的系数（纯谷类配方食品5.90，乳制品6.38，牛奶6.38，含乳婴儿谷物配方食品6.25）（四）注意事项：1）消化开始温度不宜过高，以防泡沫冲出。2）消化时打开水阀，以利于废气导出。3）消化完毕不得用冷水冷却，应自然冷却。4）若需用H2O2水冲，必须在冷却后。5）蒸馏时要打开水阀，作冷却水用。6）吸收时必须伸入液面以下。