胚胎工程常用技术.pptx

胚胎工程常用技胚胎工程常用技术（一）采集精子（一）采集精子1)1)采集的方法：采集的方法：2)2)获能处理获能处理:（牛、羊）（牛、羊）一定浓度的肝素、一定浓度的肝素、A23187溶液（钙离子载体）溶液溶液（钙离子载体）溶液假阴道法假阴道法（二）采集卵母细胞（二）采集卵母细胞n大型动物大型动物:（牛，猪等一般用抽吸法）（牛，猪等一般用抽吸法）n小型动物小型动物:（小鼠、兔等一般用机械破碎法）（小鼠、兔等一般用机械破碎法）阅读课本P82，找出对不同动物,采集卵母细胞的方法分别是什么，有哪些有优缺点？采集的方法：采集的方法：抽吸法、机械破碎法抽吸法、机械破碎法（三）受精（三）受精在在获能溶液获能溶液或或专用专用受精溶液受精溶液中完成中完成受精过程。受精过程。胚胎移植胚胎移植1.1.概念：也称概念：也称“借腹怀胎借腹怀胎”将良种母畜配种后，从其生殖道取出将良种母畜配种后，从其生殖道取出受精卵或早期胚胎，受精卵或早期胚胎，移植到移植到生理状态相同的同种母畜生理状态相同的同种母畜体内，使之继续发育成体内，使之继续发育成为新个体的技术。为新个体的技术。供体：供体：提供胚胎的个体。提供胚胎的个体。受体：受体：接受胚胎的个体。接受胚胎的个体。良种雌性动物。良种雌性动物。一般品种的雌性动物。一般品种的雌性动物。选择选择供体母牛供体母牛受体母牛受体母牛同期发情处理同期发情处理超数排卵超数排卵供体公牛供体公牛配种配种取出早期胚胎取出早期胚胎质量检查、培养质量检查、培养胚胎移植胚胎移植妊娠检查妊娠检查分娩（胚胎移植的犊牛）分娩（胚胎移植的犊牛）2、胚胎移植的过程：、胚胎移植的过程：未配种未配种同期发情技术：同期发情技术：主要是借助外主要是借助外源激素剌激卵源激素剌激卵巢，使其按照巢，使其按照预定的要求发预定的要求发生变化，使处生变化，使处理母畜的卵巢理母畜的卵巢生理机能都处生理机能都处于相同阶段，于相同阶段，从而达到同期从而达到同期发情发情。为什么胚胎移植能成功?n移动到任何一头动物子宫内都能发育吗移动到任何一头动物子宫内都能发育吗?q同种动物发情排卵后同种动物发情排卵后,在一端时间内供体在一端时间内供体受体具有相受体具有相同的生理环境。同的生理环境。n为什么能收集到胚胎为什么能收集到胚胎?q早期胚胎一定时间内处于游离状态。早期胚胎一定时间内处于游离状态。n供体和受体会不会发生排斥？供体和受体会不会发生排斥？q同种动物之间基本上不排斥。同种动物之间基本上不排斥。n移植的胚胎能保留供体双亲的特性移植的胚胎能保留供体双亲的特性?q遗传特性不受受体的影响。遗传特性不受受体的影响。q胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系,但与受体的遗但与受体的遗传物质无关传物质无关.3.3.胚胎移植成功与否要有两个条件胚胎移植成功与否要有两个条件n（1 1）胚胎移植一般应在）胚胎移植一般应在同种的雌性同种的雌性供体和供体和受体之间进行。受体之间进行。n（2 2）进行胚胎移植的供体和受体的）进行胚胎移植的供体和受体的生理状生理状态态要相同。要相同。胚胎移植的优势：胚胎移植的优势：n充分发挥雌性个体的繁殖潜力充分发挥雌性个体的繁殖潜力n缩短供体本身的繁殖周期缩短供体本身的繁殖周期n保持供体优良特性保持供体优良特性n大规模繁殖大规模繁殖n节约成本节约成本费用费用n可用于保护珍稀动物可用于保护珍稀动物n.胚胎分割胚胎分割1.1.概念概念:2.2.优势优势:用显微手术的方法将一枚胚胎分割成用显微手术的方法将一枚胚胎分割成二分胚二分胚、四分胚甚至八分胚。经体内或体外培养后植入受体，四分胚甚至八分胚。经体内或体外培养后植入受体，已得到同卵双生或同卵多生后代的技术。已得到同卵双生或同卵多生后代的技术。后代具有相同的遗传物质。后代具有相同的遗传物质。可成倍增加胚胎数量，可以快速繁殖良种畜。可成倍增加胚胎数量，可以快速繁殖良种畜。3.3.特点特点:n1、分割什么时期的胚胎?发育良好的，形态正常的发育良好的，形态正常的32细胞期或囊胚细胞期或囊胚.n2、用什么仪器来分割?实体显微镜实体显微镜和和显微操作仪；切割刀、切割针显微操作仪；切割刀、切割针.讨论,.时期4 4、胚胎分割的基本过程、胚胎分割的基本过程n胚胎移入培养液；胚胎移入培养液；n分割胚胎（机械法、酶处理）；分割胚胎（机械法、酶处理）；n移植胚胎给受体；移植胚胎给受体；n着床产仔。着床产仔。胚胎干细胞胚胎干细胞1.1.概念：概念：（ESES细胞），是由细胞），是由早期胚胎（囊胚）的内细胞团早期胚胎（囊胚）的内细胞团分离出来的一类细胞。分离出来的一类细胞。2.2.特点特点:1)1)形态：体积小、细胞核大、核仁明显形态：体积小、细胞核大、核仁明显.2)2)功能：具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何功能：具有发育的全能性，可分化为成年动物体内任何一种组织细胞。一种组织细胞。3 3）体外培养）体外培养ESES细胞可以增殖而不分化。对它可以进行冷细胞可以增殖而不分化。对它可以进行冷冻保存，也可以进行遗传改造冻保存，也可以进行遗传改造。.加图，归纳.特点胚胎干细胞：胚胎干细胞：内细胞团细胞；内细胞团细胞；胚胎干细胞的培养胚胎干细胞的培养n培养关键：培养关键：需要一种能促进胚胎干细胞的生长，但抑制其需要一种能促进胚胎干细胞的生长，但抑制其分化的一种培养体系。分化的一种培养体系。n培养过程：培养过程：1、制备饲养层（胚胎成纤维细胞）；制备饲养层（胚胎成纤维细胞）；2、培养液中培养胚胎到内细胞团突出饲养层；、培养液中培养胚胎到内细胞团突出饲养层；3、酶消化或机械剥离内细胞团；、酶消化或机械剥离内细胞团；4、分为单个细胞。、分为单个细胞。5、加饲养层培养。、加饲养层培养。胚胎干细胞核移植胚胎干细胞核移植n概念：概念：将胚胎干细胞核移植到去核的卵细胞中，将胚胎干细胞核移植到去核的卵细胞中，经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植后直接由经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植后直接由受体完成克隆动物的技术。受体完成克隆动物的技术。n过程：过程：细胞核移植；胚胎培养；胚胎移植。细胞核移植；胚胎培养；胚胎移植。胚胎干细胞的应用前景胚胎干细胞的应用前景.优点n按分化潜能分：按分化潜能分：n(1)(1)全能干细胞：全能干细胞：具有形成完整个体的分化潜能。如胚具有形成完整个体的分化潜能。如胚胎干细胞。胎干细胞。n(2)(2)多能干细胞：多能干细胞：具有分化出多种细胞组织的潜能，失具有分化出多种细胞组织的潜能，失去发育成完整个体的能力。去发育成完整个体的能力。n(3)(3)专能干细胞：专能干细胞：只能向一种类型或密切相关的两种类只能向一种类型或密切相关的两种类型分化的细胞。型分化的细胞。如骨髓干细胞、皮肤生发层细胞等如骨髓干细胞、皮肤生发层细胞等。n按来源分：按来源分：n(1)(1)胚胎干细胞：胚胎干细胞：当受精卵分裂发育成囊胚时，内层细当受精卵分裂发育成囊胚时，内层细胞团的细胞即为胚胎干细胞。胞团的细胞即为胚胎干细胞。n(2)(2)成体干细胞：成体干细胞：指已分化特定组织中的未分化细胞，指已分化特定组织中的未分化细胞，可来源于胚胎、胎儿和成人的组织中，如造血干细胞、可来源于胚胎、胎儿和成人的组织中，如造血干细胞、神经干细胞、成肌细胞等。神经干细胞、成肌细胞等。干细胞的分类：干细胞的分类：谢谢