lncRNA MEG3调控mTOR介导的自噬在糖尿病心肌病中的作用.pdf

基金项目:浙江省医药卫生科技计划项目(2020KY390);浙江省中医药科技计划项目(2021ZB007)作者单位:310013杭州,浙江医院康复医学科通信作者:章睿,电子信箱:18968080080 lncRNA MEG3 调控 mTOR 介导的自噬在糖尿病心肌病中的作用章睿郑萤萤朱悦红摘要目的探究 lncRNA MEG3 调控 mTOR 介导的自噬在糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)中的作用。方法构建C57BL/6 DCM 小鼠模型,设置正常组和 DCM 组,心脏超声和 Masson 染色检测小鼠左心房功能结构变化。实时荧光定量聚合酶链反应(real-time quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测 lncRNA MEG3 在小鼠心肌组织中的表达水平,Western blot 法检测 p62、LC3-、Beclin1、p-mTOR、mTOR 表达量。分离 C57BL/6 小鼠乳鼠心肌细胞,高糖诱导心肌细胞损伤。转染 si-NC、si-MEG3 后高糖处理,设置为正常组、高糖组、高糖+si-NC 组、高糖+si-MEG3 组,RT-qPCR 检测 lncRNAMEG3 在心肌细胞的表达水平,Western blot 法检测 p62、LC3-、Beclin1、p-mTOR、mTOR、p-ERK、ERK 表达量。CCK-8、LDH、ROS、GSH-Px 试剂盒检测心肌细胞损伤。结果DCM 小鼠心功能出现异常。与正常组比较,DCM 组小鼠心肌细胞 p62表达显著升高,LC3-和 Beclin1 表达显著降低,p-mTOR 表达升高。细胞实验中,高糖诱导的心肌细胞比正常组 p62 表达显著升高,LC3-和 Beclin1 表达显著降低,p-mTOR 和 p-ERK 表达升高;细胞活力和 GSH-Px 活性降低,LDH 和 ROS 活性显著升高。下调 lncRNA MEG3 后,高糖+si-MEG3 组逆转了高糖+si-NC 组自噬相关蛋白以及细胞损伤指标的变化。结论下调 lncRNA MEG3 抑制了 ERK/mTOR 信号通路的激活,高糖诱导的心肌细胞自噬得以恢复,且糖尿病心肌损伤被缓解。关键词lncRNA MEG3mTOR自噬糖尿病心肌病中图分类号R587文献标识码ADOI 10.11969/j.issn.1673-548X.2024.03.022Role of lncRNA MEG3 in Regulating Autophagy Mediated by mTOR in Diabetic Cardiomyopathy.ZHANG Rui,ZHENG Yingying,ZHUYuehong.Department of Rehabilitation Medicine,Zhejiang Hospital,Zhejiang 310013,ChinaAbstractObjectiveTo explore the role of lncRNA MEG3 in regulating mTOR mediated autophagy in diabetic cardiomyopathy(DCM).MethodsA C57BL/6 DCM mouse model was established.The normal group and DCM group were set up.Cardiac ultrasoundand Masson staining were used to detect the changes of the functional and structure of the left atrium.The expression level of lncRNAMEG3 in mouse myocardial tissue was detected by real-time quantitative polymerase chain reaction(RT-qPCR),and the expressionlevel of p62,LC3-,Beclin1,p-mTOR and mTOR were detected by Western blot.Myocardial cells of C57BL/6mouse were isolated,and high glucose induced myocardial cell damage.The cells were transfected with si-NC and si-MEG3 and treated with high glucose,the normal,high glucose,high glucose+si-NC and high glucose+si-MEG3 groups were set up.The expression level of lncRNAMEG3 was detect by RT-qPCR.The expression levels of p62,LC3-,Beclin1,p-mTOR,mTOR,p-ERK and ERK were detectedby Western blot.The myocardial cell injury was detected by CCK-8、LDH、ROS、GSH-Px kits.ResultsAbnormal cardiac functionwas observed in DCM mouse.Compared with the normal group,the expression level of p62 in cardiomyocytes of DCM group was signifi-cantly increased,the expression levels of LC3-and Beclin1 were significantly decreased,and the expression level of p-mTOR was in-creased.In the cell experiment,the expression level of p62 in cardiomyocytes induced by high glucose was significantly higher than that inthe normal group.The expression levels of LC3-and Beclin1 were significantly decreased,and the expression levels of p-mTOR andp-ERK were increased;the cell viability and GSH-Px activity were decreased.The LDH and ROS activities were significantly in-creased.After downregulating lncRNA MEG3,the changes of autophagy related proteins and cell damage indexes in the high glucose+si-MEG3 group were reversed.ConclusionDown-regulation of lncRNA MEG3 inhibits the activation of ERK/mTOR signaling path-way,and the autophagy induced by high glucose can be restored.The myocardial damage of diabetes mellitus can be alleviated.Key wordslncRNA MEG3;mTOR;Autophagy;Diabetic cardiomyopathy011论著J Med Res,March 2024,Vol.53 No.3糖尿病心肌病(diabetic cardiomyopathy,DCM)一般是指无其他明显病因的糖尿病相关心肌功能障碍1。DCM 是 糖 尿 病 最 常 见 的 心 血 管 并 发 症 之一2。自噬功能异常是导致 DCM 心功能异常和心肌重构的重要机制之一3。研究表明,自噬与 DCM的发生及进展密切相关4。长链非编码 RNA(longnon-coding RNAs,lncRNAs)是一类转录本长度超过200nt 的不具备蛋白质编码功能的 RNA 分子,它在表观遗传调控、转录调控以及转录后调控等层面调控基因的表达及功能5。lncRNA MEG3 其定位于人类染色体 14q32.3,由 10 个外显子组成,通过可变剪切形成多种 lncRNA 亚型6。研究表明,MEG3 可能是抑制自噬水平的重要因素。MEG3 可以抑制成神经细胞瘤细胞的增殖、迁移、侵袭和自噬7。在肺癌细胞中,MEG3 上调显著抑制肺癌细胞的自噬水平,并与化疗抵抗密切相关8。但是,MEG3 与心肌细胞自噬的关系目前仍不明确。因此,本研究将探讨 lncRNAMEG3 调控自噬在 DCM 中发挥的作用。材料与方法1.实验材料:链脲佐菌素(STZ)购自美国 Sigma公司;RT-qPCR 试剂盒购自日本 TaKaRa 公司;ECL试剂盒购自美国 Protech 公司;PVDF 膜购自美国 Mil-lipore 公司;RIPA 裂解液、BCA 蛋白质定量试剂盒、Western blot 法一抗、二抗购自英国 Abcam 公司;ROS试剂盒购自上 海碧云天 生 物 技 术 股 份 有 限 公 司;CCK-8 试剂盒购自上海信裕生物科技有限公司;乳酸脱氢酶试剂盒购自美国 Beckman 公司;谷胱甘肽-过氧化物酶 试 剂 盒 购 自 南 京 建 成 生 物 工 程 研 究 所;DMEM 培养基、葡萄糖购自美国 Gibco 公司;甘露醇购自上海源叶生物科技有限公司。2.实验动物:6 周龄鼠,18 22g 的雄性 C57BL/6小鼠由杭州医学院实验动物中心提供,实验动物许可证号:SYXK(浙)2019-0011,饲养于温度约 25,湿度 55%的环境下,自由进食、进水。本动物实验方案经过笔者医院实验动物福利伦理委员会审核,符合动物保护、动物福利和伦理原则(伦理学审批号:ZJ-CLA-IACUC-20120014),符合国家实验动物福利伦理的相关规定。3.DCM 小鼠造模与分组:选取 40 只 C57BL/6 小鼠,使用普通饲料适应性喂养 1 周后,随机分为正常组(10 只)和 DCM 组(30 只)。正常组小鼠喂食普通饲料,DCM 组喂食高脂饲料,喂食 4 周后禁食 12h,DCM 组小鼠采用 100mg/kg 剂量的 STZ 腹腔注射,正常组小鼠腹腔注射等体积柠檬酸-柠檬酸钠缓冲液。5 天后尾静脉取血,血糖16.7mmol/L 则 2 型糖尿病小鼠造模成功。4.细胞转染与分组:分离 C57BL/6 小鼠乳鼠心肌细胞,分为正常组、高糖组、渗透压对照组。正常组和高糖组细胞分别加入低糖(5.5mmol/L)和高糖(33.3mmol/L)DMEM 培养基培养 48h。为排除渗透压影响,设置渗透压对照组,加入 27.5mmol/L 甘露醇的 5.5mmol/L 葡萄糖的 DMEM 培养基。此外,在心肌 细 胞 生 长 至 对 数 生 长 期 时,按 Lipofectamine2000 转染试剂说明书,将浓度为 100nmol/L 的 si-NC、si-MEG3 分别转染至细胞,转染培养 48h 后,收集心肌细胞进行高糖处理,分别为高糖+si-NC 组和高糖+si-MEG3 组。5.心脏超声检测:用超声仪探头在小鼠乳头肌水平位置用 M 型取样线检测,记录并分析小鼠左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,LVEF)、左心室短轴缩短率(fractional shortening,FS)、左心室舒张末期容积(left ventricular end-diastolic volume,LV-EDV)、左心室收缩末期容积(left ventricular end-systolic volume,LVESV)、左心室舒张期前壁厚度(leftventricular anterior wall thickness at diastole,LVAWd)数据值。6.Masson 染色:取小鼠心脏组织,4%多聚甲醛溶液固定,固定后制做石蜡病理切片,进行 Masson 染色,显微镜下观察组织纤维化程度。7.Western blot 法检测蛋白表达:RIPA 裂解液提取心肌细胞总蛋白,每孔加入 40g 蛋白样品后进行SDS-PAGE。采用常规湿转法转膜,PVDF 膜用 5%的脱脂牛奶 4 封闭过夜。将 PVDF 膜置于稀释的一抗 p62、LC3-、Beclin 1、p-mTOR、mTOR 溶液(1500)室温孵育 2h,GAPDH 蛋白为内参。PBST 洗膜;再将 PVDF 膜置于稀释的二抗溶液(1 1000)室温孵育1.5h,PBST 洗膜,ECL 化学发光显色剂显色并曝光成像。8.RT-qPCR 检测 lncRNA MEG3 相对表达量:TRIzol 法提取心肌细胞总 RNA,反转录为 cDNA 进行RT-qPCR 检测。以 -actin 为内参,使用 2-Ct法计算 lncRNA MEG3 相对表达水平。反应参数:955min,96 变性 30s,55 退火 30s,72 延伸 20s,35个循环。lncRNA MEG3 上游引物:5-AGGGAAG-CAGAGGTCGCCAAG-3,下 游 引 物:5-AGCA-CAGTGGAGCCAGGAGTC-3。-actin 上游引物:5-TATGCTCTCCCTCACGCCATCC-3,下游引物:111医学研究杂志 2024 年 3 月第 53 卷第 3 期论著5-GTCACGCACGATTTCCCTCTCAG-3。9.CCK-8 检测细胞活力:1 104个/毫升的细胞悬液,按每孔 100l 接种于 96 孔板中测定细胞活力并设置 5 个复孔。每孔加入 10l CCK-8 试剂,37 孵育 1.5h。在 450nm 处酶标仪测定吸光度。10.ELISA 检测细胞 LDH、ROS 及 GSH-Px 活性:1 104个/毫升的细胞悬液,按每孔 2ml 接种于 6孔板中,收集细胞,离心后取上清液,按 LDH、ROS、GSH-Px 试剂盒说明书进行操作。11.统计学方法:应用 Graph Pad Prism 8.0 统计学软件对数据进行统计分析,计量资料以均数 标准差(x s)表示,组间比较用 t 检验,以 P 0.05 为差异有统计学意义。结果1.DCM 小鼠心功能异常:正常组和 DCM 组小鼠进行心脏超声检测。与正常组比较,DCM 组小鼠左心室功能明显减退,心脏收缩和舒张功能显著下降,LVEF、FS、LVEDV、LVESV 显著降低,LVAWd 显著升高(P 均 0.05,图 1A 和表 1)。Masson 染色结果表明,DCM 组小鼠左心室胶原沉积增多,心肌纤维化程度增加(图 1B)。图 1正常组和 DCM 组小鼠心肌结构及组织纤维化A.小鼠心脏超声检测结果;B.小鼠心肌 Masson染色检测结果(200)表 1小鼠超声测量结果(x s)组别LVEF(%)FS(%)LVEDV(l)LVESV(l)LVAWd(mm)正常组65.51 3.8932.34 3.2167.13 4.2142.31 4.121.42 0.23DCM 组46.78 4.7817.89 5.4148.29 5.8921.12 7.311.97 0.11与正常组比较,P 0.05 2.DCM 小鼠心肌细胞中 lncRNA MEG3 上调,细胞自噬减弱,mTOR 信号通路被激活:与正常组比较,lncRNA MEG3 在 DCM 组小鼠心肌组织中表达水平显著上调(图 2A)。与正常组比较,DCM 组小鼠心肌细胞自噬相关蛋白 p62 表达量显著升高,LC3-,Beclin 1 蛋白表达量显著降低,DCM 组小鼠心肌细胞自噬受到抑制(图 2B)。同时,p-mTOR 蛋白表达水平升高,表明 mTOR 通路被激活(图 2C)。图 2lncRNA MEG3 在 DCM 小鼠心肌细胞表达上调,抑制细胞自噬,激活 mTOR 信号通路A.RT-qRCR 检测 lncRNA MEG3 表达量;B.Western blot 法检测 p62、LC3-、Beclin 1、GAPDH 表达量;C.Western blot 法检测 p-mTOR、mTOR、GAPDH 表达量3.lncRNA MEG3 在高糖诱导的心肌细胞中上调,抑制细胞自噬:相较正常组,高糖诱导的心肌细胞活力降低,渗透压对照组无显著变化(图 3A)。与正常组比较,高糖组 LDH、ROS 活性显著升高,渗透压对照组无显著变化;与正常组比较,高糖组 GSH-Px活性显著降低,渗透压对照组无显著变化(表 2)。与正常组比较,高糖组 lncRNA MEG3 表达水平显著上调,渗透压对照组 lncRNA MEG3 表达水平无显著变211论著J Med Res,March 2024,Vol.53 No.3化(图 3B)。与正常组比较,高糖诱导的心肌细胞自噬相关蛋白 p62 表达量显著升高,LC3-、Beclin 1蛋白表达量显 著降低,渗 透 压 对 照 组 无 显 著 变 化(图 3C),表明高糖诱导的心肌细胞自噬减弱。后续实验采用正常组作为对照。图 3lncRNA MEG3 在高糖诱导的心肌细胞中上调,抑制细胞自噬A.CCK-8 检测细胞活力;B.RT-qRCR 检测 lncRNA MEG3 表达量;C.Western blot 法检测 p62、LC3-、Beclin 1、GAPDH 表达量表 2各组细胞 LDH、ROS、GSH-Px 活性比较(x s)组别LDH(U/L)ROS(pg/ml)GSH-Px(nmol/ml)正常组83.23 2.8921.76 3.2361.34 4.23高糖组148.23 2.9898.20 4.92 22.31 3.87 渗透压对照组87.67 3.5620.78 2.1358.32 4.52与正常组比较,P 0.05,P 0.01 4.下调 lncRNA MEG3 恢复高糖诱导的心肌细胞自噬,进而缓解心肌细胞损伤:敲低 lncRNA MEG3 表达,其表达水平显著降低(图 4A)。与正常组比较,高糖诱导的心肌细胞 p62 表达量显著升高,LC3-降低,Beclin 1 蛋白表达量也显著降低;与高糖+si-NC组比较,高糖+si-MEG3 组 p62 表达量显著降低,LC3-和 Beclin 1 蛋白表达量显著升高(图 4B)。与正常组比较,高糖诱导的心肌细胞活力显著降低;与高糖+si-NC 组比较,高糖+si-MEG3 组细胞活力显著上调(图 4C)。与正常组比较,高糖诱导的心肌细胞 LDH,ROS 活性显著升高;与高糖+si-NC 组比较,高糖+si-MEG3 组 LDH,ROS 活性显著降低。与正常组比较,高糖组 GSH-Px 活性显著降低;与高糖+si-NC 组比较,高糖+si-MEG3 组 GSH-Px 活性显著升高(表 3)。表明下调 lncRNA MEG3 后,高糖诱导的心肌细胞自噬得以恢复,心肌细胞损伤被缓解。图 4下调 lncRNA MEG3 恢复高糖诱导的心肌细胞自噬,进而缓解心肌细胞损伤A.RT-qRCR 检测 lncRNA MEG3 表达量;B.Western blot 法检测 p62、LC3-、Beclin 1、GAPDH 表达量;C.CCK-8 检测细胞活力 5.下调 lncRNA MEG3 通过抑制 ERK/mTOR 信号通路的激活,恢复高糖诱导的心肌细胞自噬:ERK/mTOR 信号通路是调节细胞自噬的通路之一9。与正常组比较,高糖诱导的心肌细胞 p-mTOR 和 p-ERK 表达量显著升高;与高糖+si-NC 组比较,高糖+si-MEG3 组 p-mTOR 和 p-ERK 表达量显著降低,表明下调 lncRNA MEG3,抑制 ERK/mTOR 信号通路的激活(图 5)。311医学研究杂志 2024 年 3 月第 53 卷第 3 期论著表 3各组细胞 LDH、ROS、GSH-Px 活性比较(x s)组别LDH(U/L)ROS(pg/ml)GSH-Px(nmol/ml)正常组85.12 3.2322.16 4.1262.134 5.12高糖组155.12 2.94102.10 3.21 23.12 4.34 高糖+si-NC 组142.34 5.24103.21 4.1225.23 2.89高糖+si-MEG3 组 103.56 6.78#70.23 3.12#58.32 4.52#与正常组比较,P 0.05,P 0.01;与高糖+si-NC 组比较,#P 0.05图 5Western blot 法检测 p-mTOR、mTOR、p-ERK、ERK、GAPDH 表达量讨论近年来,lncRNA 在 DCM 中起到重要的调控作用。在 STZ 诱导的糖尿病小鼠动物模型中,上调 ln-cRNA AK081284 通过 TGF-信号通路促进糖尿病心脏组织纤维化10。特异性过表达 lncRNA H19 显著抑制糖尿病小鼠心脏组织氧化应激、炎症及凋亡,改善心脏功能11。lncRNA DCFR 则通过抑制心肌细胞自噬加剧了 DCM 的进展12。本研究探讨了 ln-cRNA MEG3 对 DCM 细胞自噬的影响。与之前的研究结果一致,DCM 组小鼠心脏舒张收缩功能减弱,胶原沉积增加,心肌细胞自噬减弱3,13。同时 lncRNAMEG3 在 DCM 组小鼠心肌组织和高糖诱导的心肌细胞中表达上调,表明 lncRNA MEG3 可能参与糖尿病心肌细胞自噬调控。有研究报道,高脂喂食通过激活 mTOR1 抑制糖尿病小鼠心脏自噬,表现为 LC3-表达下调和 p62表达上调。心脏组织自噬抑制,加剧了糖尿病小鼠心肌梗死后缺血性损伤14。高脂喂食小鼠心脏功能受损,心脏组织中 LC3-和 p62 表达增高,自噬体数量增加及降解受阻。自噬在 2 型糖尿病心脏损伤中扮演了重要的角色15。Beclin 1 调节自噬过程,是自噬体形成增加的重要指标16,17。mTOR 信号通路可以调控 LC3-/及 p62 表达变化,抑制自噬18。本研究发现在高糖诱导的心肌细胞中下调 lncRNAMEG3 表达后,p62 表达降低,LC3-和 Beclin 1 表达升高,mTOR 激活受到抑制,细胞自噬增强。mTOR是很多上游信号的关键靶基因,可抑制自噬过程。Cao 等报道 MEG3 可直接靶向 miR-7-5p 调控下游mTOR 信号激活,从而调控心脏自噬19。但在已有研究中,lncRNA MEG3 对自噬的调控主要为正调控,这种作用已在多种疾病和多种途径中得到验证。下调 MEG3 可导致高糖诱导的 INS-1 细胞自噬减少20。肺纤维化过程中,下调 MEG3 激活Hedgehog 信号通路,抑制 A549 细胞的自噬活性21。lncRNA MEG3 在心血管疾病中发挥重要作用。Wu 等22报道在缺氧的心肌细胞中,p53 通过直接结合 MEG3 上游基因来影响其表达。此外,p53 可上调MEG3 表达促进心肌细胞凋亡。lncRNA MEG3 在心肌成纤维细胞中明显富集。MEG3 沉默抑制转化生长因子表达,抑制 MMP-2 的活性,从而降低纤维化标志物的表达23。lncRNA MEG3 还可正向调节心肌肥厚24。综上所述,本研究发现下调 lncRNA MEG3 可能通过抑制 ERK/mTOR 信号通路的激活促进了心肌细胞自噬的发生,进而缓解了高糖诱导的心肌细胞损伤。本研究将为 DCM 的防治提供重要的理论基础。利益冲突声明:所有作者均声明不存在利益冲突。参考文献1 Jaquenod De Giusti C,Palomeque J,et al.Ca2+mishandling andmitochondrial dysfunction:a converging road to prediabetic and dia-betic cardiomyopathyJ.Pflugers Arch,2022,474(1):33-612 Shetty S,Stafkey-Mailey D,Yue B,et al.The cost of cardiovascu-lar-disease-related death in patients with type 2diabetes mellitusJ.Curr Med Res Opin,2018,34(6):1081-10873 Jin B,Shi H,Zhu J,et al.Up-regulating autophagy by targetingthe mTOR-4EBP1 pathway:a possible mechanism for improving car-diac function in mice with experimental dilated cardiomyopathy J.BMC Cardiovasc Disord,2020,20(1):564 Luo J,Yan D,Li S,et al.Allopurinol reduces oxidative stress andactivates Nrf2/p62 to attenuate diabetic cardiomyopathy in ratsJ.JCell Mol Med,2020,24(2):1760-17735 Joung J,Engreitz JM,Konermann S,et al.Genome-scale activationscreen identifies a lncRNA locus regulating a gene neighbourhoodJ.Nature,2017,548(7667):343-3466 Xu J,Wang X,Zhu C,et al.A review of current evidence about ln-cRNA MEG3:a tumor suppressor in multiple cancersJ.Front CellDev Biol,2022,10:9976337 Ye M,Lu H,Tang W,et al.Downregulation of MEG3 promotes neu-roblastoma development through FOXO1-mediated autophagy andmTOR-mediated epithelial-mesenchymal transitionJ.Int J BiolSci,2020,16(15):3050-3061(下转第 126 页)411论著J Med Res,March 2024,Vol.53 No.310Liu BY,Li L,Liu GL,et al.Baicalein attenuates cardiac hypertro-phy in mice via suppressing oxidative stress and activating autophagyin cardiomyocytesJ.Acta Pharmacol Sin,2021,42(5):701-71411Wang M,Pan W,Xu Y,et al.Microglia-mediated neuroinflamma-tion:a potential target for the treatment of cardiovascular diseasesJ.J Inflamm Res,2022,15:3083-309412Cadenas S.Mitochondrial uncoupling,ROS generation and cardiopro-tection J.Biochim Biophys Acta Bioenerg,2018,1859(9):940-95013Kim YM,Kim SJ,Tatsunami R,et al.ROS-induced ROS releaseorchestrated by Nox4,Nox2,and mitochondria in VEGF signaling andangiogenesis J.Am J Physiol Cell Physiol,2017,312(6):C749-C76414Gao HL,Yu XJ,Hu HB,et al.Apigenin improves hypertension andcardiac hypertrophy through modulating NADPH oxidase-dependentROS generation and cytokines in hypothalamic paraventricular nucleusJ.Cardiovasc Toxicol,2021,21(9):721-73615Zhang Q,Tan Y,Zhang N,et al.Polydatin prevents angiotensin-induced cardiac hypertrophy and myocardial superoxide genera-tionJ.Exp Biol Med(Maywood),2015,240(10):1352-136116Bhatti SN,Li JM.Nox2dependent redox-regulation of Akt andERK1/2 to promote left ventricular hypertrophy in dietary obesity ofmiceJ.Biochem Biophys Res Commun,2020,528(3):506-51317Wang Y,Branicky R,No A,et al.Superoxide dismutases:dualroles in controlling ROS damage and regulating ROS signalingJ.JCell Biol,2018,217(6):1915-192818Chabrashvili T,Kitiyakara C,Blau J,et al.Effects of ANG type 1and 2 receptors on oxidative stress,renal NADPH oxidase,and SODexpressionJ.Am J Physiol Regul Integr Comp Physiol,2003,285(1):R117-R12419Matsushima S,Sadoshima J.The role of sirtuins in cardiac diseaseJ.Am J Physiol Heart Circ Physiol,2015,309(9):H1375-H138920Zhang W,Huang Q,Zeng Z,et al.Sirt1 inhibits oxidative stress invascular endothelial cellsJ.Oxid Med Cell Longev,2017,2017:754397321Xu D,Liu L,Zhao Y,et al.Melatonin protects mouse testes frompalmitic acid-induced lipotoxicity by attenuating oxidative stress andDNA damage in a SIRT1-dependent manner J.J Pineal Res,2020,69(4):e1269022Singh V,Ubaid S.Role of silent information regulator 1(SIRT1)inregulating oxidative stress and inflammationJ.Inflammation,2020,43(5):1589-159823Xu Y,Li X,Liu X,et al.Neuregulin-1/ErbB signaling and chron-ic heart failureJ.Adv Pharmacol,2010,59:31-51(收稿日期:2022-12-20)(修回日期:2023-03-14)(上接第 114 页)8 Xia H,Qu XL,Liu LY,et al.LncRNA MEG3 promotes the sensitiv-ity of vincristine by inhibiting autophagy in lung cancer chemotherapyJ.Eur Rev Med Pharmacol Sci,2018,22(4):1020-10279 Song P,Wang Z,Zhang X,et al.The role of autophagy in asparagi-nase-induced immune suppression of macrophages J.Cell DeathDis,2017,8(3):e272110Zhang Y,Zhang YY,Li TT,et al.Ablation of interleukin-17 alle-viated cardiac interstitial fibrosis and improved cardiac function via in-hibiting long non-coding RNA-AK081284 in diabetic miceJ.JMol Cell Cardiol,2018,115:64-7211Li X,Wang H,Yao B,et al.lncRNA H19/miR-675 axis regulatescardiomyocyte apoptosis by targeting VDAC1 in diabetic cardiomyopa-thyJ.Sci Rep,2016,6:3634012Feng Y,Xu W,Zhang W,et al.LncRNA DCRF regulates cardio-myocyte autophagy by targeting miR-551b-5p in diabetic cardiomy-opathyJ.Theranostics,2019,9(15):4558-456613Zong M,Zhao H,Li Q,et al.Irbesartan ameliorates myocardial fi-brosis in diabetic cardiomyopathy rats by inhibiting the TGFbeta1/Smad2/3 pathwayJ.Exp Ther Med,2020,20(5):11714Ji M,Liu Y,Zuo Z,et al.Downregulation of amphiregulin improvescardiac hypertrophy via attenuating oxidative stress and apoptosisJ.Biol Direct,2022,17(1):2115Xu X,Hua Y,Nair S,et al.Akt2 knockout preserves cardiac func-tion in high-fat diet-in