检验采集基础手册.doc

检查样本采集手册

护理部
山东省警官总医院 院感科 联合制定
检查科

患者准备
依照所采样本类型何所分析物质而定。样本采集前患者状态对检测成果有一定影响，不同检测项目对样本采集前患者状态有不同规定。许多非疾病因素，如与否空腹、精神状况、体力活动、使用药物等都也许影响检查成果。因而，在样本采集前，要依照需要对患者做好相应准备。
1、普通规定患者处在安静状态，晨起时精神、体力、情绪等因素影响较少，是大某些样本采集最佳时间。
2、患者最佳停服干扰检测药物。
3、许多检测对饮食和药物有特殊规定，如静脉采血前至少要空腹8小时。
4、血脂测定需禁食12-14小时后采血。
5、情绪紧张会使血糖升高。
6、吗啡、可卡因可使淀粉酶升高。
7、微生物培养最佳在使用抗生素前。
8、采血之前按摩前列腺可引起酸性磷酸酶、前列腺特异抗原升高。
9、尿液检查按不同项目分别留取晨尿、随机尿、计时尿。
10粪便潜血检查前要素食，禁食含动物血食物。
采集样本所用材料安全处置
为保证医务人员及患者生命安全，采集样本所用材料应安全处置。所用消耗材料如手套、棉签等应当作为医用垃圾解决，所用利器如针头应放入锐器盒当做医用垃圾解决，污染台面、器具应严格消毒解决。
真空采血管采血顺序
优先采嗜氧血液培养瓶，另一方面采厌氧血液培养瓶→血液生化管（红帽，无抗凝剂）→凝血实验管（蓝帽，柠檬酸钠1:9抗凝）→血粘度管（绿帽，肝素钠抗凝）→血沉管（黑帽，柠檬酸钠1:4抗凝）→血常规管（紫帽，EDTAK2抗凝）。
样本采集与标示
1、确认患者身份：在样本采集前必要确认患者身份与申请单一致，嘱咐患者做好采集样本前准备工作，并告知有关注意事项。
2、样本容器选取：按规定选用适合容器。采集抗凝血样时，应选取适当抗凝剂，抗凝剂与血液量务必精确。
3、样本标示：样本容器上须清晰标示与患者信息、检测目一致条形码。
4、样本采集：采集静脉血时，要对的使用真空采血管取血至刻度，在取下采血管同步，及时将含抗凝剂采血管轻轻颠倒混匀5-8次，不可激烈摇晃以免导致样本溶血。
5、复核样本：样本采集后，应再次核对条形码上患者信息、检查目与患者和样本管与否一致。
6、样本放置：已采集样本，若不能及时送检，要严格按检查规定储存条件暂存。未按规定采集、储存、运送样本将被视为不合格样本解决。
样本采集注意事项
1、对的采集样本是保证检查质量基本：
1.1避免干扰物污染，特别是定量分析样本。
1.2样本采集部位和办法要对的。
1.3样本标示清晰无误。
1.4无人为溶血和浑浊因素：如采集样本时抽血困难、收集样本时用力震荡等会导致溶血；餐后采血会浮现脂血导致血清、血浆浑浊。
1.5合理使用抗凝剂及防腐剂。
1.6微生物检查样本采集应严格无菌概念。
1.7样本采集后要尽快送至实验室。
2、样本采集时间：
2.1空腹样本：普通指空腹8小时后来采集样本。清晨空腹血液样本惯用于临床生化定量测定，受食物、体力活动、生理活动等影响较少，易于发现和观测病理状况，并且重复性较好。
2.2随时或急诊样本：指无时间限制或无法规定期间而必要采集样本，患者普通无法进行准备。随时或急诊样本重要用于体内代谢比较稳定以及受体内因素干扰少物质检查，或者急诊、急救患者必要做检查。
2.3指定期间样本：即指定采集时间样本。依照不同规定，有不同指定期间。如24小时尿蛋白定量、葡萄糖耐量实验等。
检查科样本拒收规定
1、样本属性不清、标记错误或无标记。
2、抗凝剂比例错误、抗凝血未及时混匀导致凝块产生。
3、样本收集管使用错误。
4、储存、运送不当。
5、痰、粪便样本已干。
6、尿培养样本未使用无菌管留取。
7、厌氧培养样本未按规定取材、送检。
8、其她无菌部位取材及送检时已被污染样本。
样本采集办法
血液检查样本采集办法
血液检查样本分为全血、血浆、血清等。全血样本重要用于临床血液学检查，例如血细胞计数和分类、形态学检查等；血浆样本适合内分泌激素、血栓和止血检查；血清样本多适合临床化学和免疫学检测。
按照血样本采集部位不同，分为静脉血、动脉血和毛细血管血三种。绝大多数检查采用静脉血，少数检查如血气分析、乳酸和丙酮酸测定等需要采集动脉血，毛细血管血重要用于各种微量法检查或大规模普查。
静脉血是最惯用实验室检查样本，真空采血法是最佳静脉血采集技术。基本原理是将双向针一端在持针器协助下刺入静脉，有回血后将另一端插入真空试管内，血液在负压作用下自动流入试管内。由于在完全封闭状态下采血，避免了血液外溢引起污染，并有助于样本转运和保存。原则真空采血管采用国际通用头盖和标签颜色显示采血管内添加剂种类和检测用途，可依照需要选取相应盛血试管。
静脉血采集办法、注意事项和采集样品所用材料安全处置：
静脉血采集办法及注意事项：
1.止血带或压脉器：采集静脉血时，止血带压迫静脉时间不适当过长，以不超过2分钟为宜，否则容易引起淤血、静脉扩张，并且影响某些指标检查成果，如乳酸升高、PH值减少、K+、Ca2+、肌酸激酶升高等。
2.采血时间与部位：大多数化验检查规定清晨、空腹，采集静脉血应尽量避免在输液同步取血，输液不但使血液稀释，并且对实验室检查成果发生严重干扰，特别是血糖和电解质。如果因病情需要，输液患者静脉血采集应在未输液侧肢体采集。任何状况下，都不能在留置管中采集血样。
3.避免溶血、杂质污染：采血器具必要无菌、干燥、干净。避免特别用力抽吸和推注、避免化学污染和细菌污染、避免因激烈震荡引起溶血。由于红细胞某些成分与血清（浆）不同，样本溶血可使红细胞某些成分释放，影响实验室检查成果。
4.血样采集：血样规定在每一天同一时间采集，抱负时间时上午7:00到8:00，特别是监测为目时，更要保证样本采集时间统一。最后一次食物和液体摄入应在前一天下午6:00到7：00（急诊检查例外）。血样采集应在不服药期间，如在上午服药前。血样采集时，患者应仰卧位，采血点应在同一静脉区，普通为手臂静脉。
5.样本采集后须及时送检，放置过久影响检查成果。当取血不顺利时，切忌在同一处重复穿刺，易导致样本溶血或有小凝块，影响检测成果。
6.采集血培养样本时，如果用注射器采血，应将血液先注射厌氧瓶，尽量减少接触空气时间。如果是用负压采血瓶，应先用嗜氧瓶采血，再用厌氧瓶采血。
采集样品所用材料安全处置：
使用后采血针、注射器针头等锐器物应当直接放入不能刺穿利器盒内或毁型器内进行安全处置，禁止对使用后一次性针头复帽，禁止用手直接接触使用过针头、刀片等锐器物；注射器针筒、棉签等其她医疗废物放入黄色医疗废物袋中，医疗废物和生活垃圾分类收集存储。消毒毁形后医疗废物必要交给指定医疗废物解决厂，不得擅自废弃。
一、临床化学、免疫检查样本
临床化学/免疫检查多用于非抗凝血样本，最佳使用真空负压采血管。
样本采集重要注意事项有：
1、 化学项目大多数需要空腹采静脉血，各种单项化学检测项目组合检查时普通可采1管血
2、 采血量视检查项目多少不同而异，普通为4.0-5.0ml;
3、 各种组合检测项目同步采血时应按下列顺序采血：
血培养→无添加剂管→有添加剂管
有添加剂管顺序为：枸橼酸盐管（如凝血四项、血沉等）→肝素管（如血流变）→EDTA管（如血常规）→草酸盐/氟化钠管
4、无论是抗凝血还是非抗凝血，为了缩短血清或血浆与红细胞接触时间，血液样本收集后，须尽量早将血清或血浆从全血中分离出来，避免由此而影响检查成果精确性。从血液样本采集开始，必要在2h内将全血解决为血清或血浆。
1）血清（非抗凝血）：采血后样本于22-25℃（室温）15-30min后可自行（自发）完全凝固禁用木棍和玻璃等玻璃凝块：冷藏样本凝集较慢，加促凝剂者凝集加快。
2）血浆（抗凝血）：应采用抗凝管采血，采血后及时颠倒混合5-10次，采血后数分钟内可离心分离血浆。
3）冷藏样本：用于稳定血液中温度依赖性成分（抑制细胞代谢）检测项目，样本于2-8℃冷藏（样本采集后及时置于冰箱中，冷藏必要充分）；样本需冷藏测定项目有：儿茶酚胺、胃泌素、甲旁素、PH/血气、NH3、乳酸、丙酮酸等。全血样本普通不冷藏，血钾测定样本冷藏不得＞2h。全血样本牢记冷冻。
4）代谢抑制剂和防腐剂应用：用于抑制细胞代谢。血样本中加入氟化钠后，血细胞未分离状况下血样本中GLU，22-25℃稳定24h,2-8℃稳定48h；氟化钠不合用于新生儿及小朋友GLU测定（因小朋友PCV高，细胞糖酵解难以控制）；氟化钠-麝香草酚混合剂不适合酶学检测（因氟化钠-麝香草酚混合剂抑制酶活性）；甲醛草酸钾抗凝保存剂不适应于血糖测定。
二、红细胞沉降率（血沉，ESR）检测样本
静脉采集枸橼酸钠抗凝血，黑帽管
采血注意事项：
1、 单独采1管血，精确采血至两个刻度线之间（抗凝剂：全血=1:4）
2、 采血后及时上下颠倒混合5-10次
3、 采血后应尽快送检（必要2h内检测）
三、血常规（全血细胞分析）检查样本
普通用EDTA1.5-2.2mg/ml抗凝，紫帽管
采血注意事项：
1、 采血后及时上下颠倒混匀，5-10次，不可用力震荡：

2、 应按抗凝管刻度采血至2ml，可不用空腹；
3、 采血后应尽快送检（需显微镜观测形态样本采血后应及时推片固定，由于超过2小时时WBC形态会发生变化）；
4、 血型、网织红细胞计数与血常规可采1管血。
四、75克葡萄糖耐量实验（OGTT）/胰岛素释放实验、C-肽释放实验
1、 病人准备：实验前3日，每日进食碳水化合物量不低于250-300克，且维持正常活动，影响实验药物（如：咖啡因、口服避孕药、水杨酸盐等）应在3日前停用，实验前病人应10-16小时不进食。
2、 标本采集：临床上惯用办法是清晨抽空腹血后，口服75克葡萄糖，再于给糖后1、2、3小时各采血2ml/1次（共4次）。
3、 标本保存：采血后1小时内分离血清并及时冷藏送检。
4、 注意事项：胰岛素测定受溶血影响较大，采血时应避免溶血。
尿液常规检查采集
尿标本种类
按检查目，常可用下列标本：
1、 晨尿：最佳，安静状态下留取清晨第一次尿，该标本为浓缩尿。其细胞、管型等形态完整，适合做各种有型成分检查和尿蛋白、尿糖等项目测定。
2、 随机尿：较惯用，合用于门诊和急诊人常规检查。成果易受各种因素影响。
3、 空腹或餐后尿：合用于糖尿病、尿胆原、尿蛋白等检查。
4、 24h尿:用于尿液成分定量检查分析，需精确量取24小时混合尿液量。
1）24h尿采集办法：留尿当天上午8时排空尿液，之后每次排尿均收集与一大容器内。至次日上午8时最后一次尿液共24小时之间所有尿液所有收集与干净容器内。在收集期内每次尿液标本均应放冰箱（2℃-8℃）或阴凉处保存。所有收集完毕测量并记录24h总尿量，混匀后取20-30毫升置于有盖容器内送检即可。
2）24h尿可用于检测Cr、Bun、K、Na、CL、Ca、蛋白、UA、P等。
5、特殊实验尿（如3h、8h、12h等计时尿和餐后尿等），则应按医嘱规定进行留尿，并注明用药时间，便于分析对比。
6、清洁尿（中段尿、导管尿、膀胱穿刺尿）：用于病原微生物培养、鉴定和药敏。、
尿液标本收集容器规定
1、 清洁、干燥、有盖、便于标记和转送、一次性使用，有较大开口便于收集；
2、 避免阴道分泌物、精液、粪便等污染，还应注意避免烟灰、纸屑等异物混入；
3、 无干扰化学物质（如表面活性剂、消毒剂）混入，不可使用未经洗涤装药物或试剂器皿收集标本；
4、 能收集足够尿液，最佳不不大于50ml，如收集定期尿，容器应足够大，并加盖，必要时加防腐剂；
5、 如需培养应在无菌条件下，用无菌容器收集中段尿液。
尿液采集办法
尿液常规检查标本应按照如下原则进行采集：
1、 尿液检查最佳留取新鲜标本及时检查，否则尿液生长细菌，使其中化学成分发生变化。新鲜晨尿最佳，以清晨第一次尿为宜，较浓缩，条件恒定，便于对比。门、急诊患者亦可随后留取。在留取24h小时或12h尿液时尿液标本最佳至冰箱保存，也可依照检测目加入防腐剂。
2、 尿标本采集办法多采用自然排尿法，需要注意避免阴道分泌物、精液、粪便等污染；对自然排尿困难或需细菌培养者，可在无菌操作下用导尿法或膀胱穿刺法采集。
3、 尿中某些化学物质及有形成分不稳定，一经排出后易发生物理、化学变化；而原尿中原有或污染细菌生长也可导致成分变化，如葡萄糖被分解。因而，采集尿应加盖后就尽快送检，在采集后2h内完毕关于检查。
4、 如不能及时送检或收集较长时段尿样，可采用化学防腐（不能用于微生物检查）、冷藏等保存办法；尿液标本冰箱可保存6-8h，但细胞等有形成分会有破坏，会有结晶析出。
5、 依照不同检测目选取不同防腐剂：临床最多尿液防腐剂为：
1） 甲醛，用于尿液有形成分检查，浓度为400mg/L尿液，即40%；
2） 甲苯，惯用于尿糖和尿蛋白等化学成分定性或定量检查，5-20ml/L尿液；
3） 浓盐酸，用于定量测定尿醛固酮、儿茶酚胺等，浓度为1ml/L尿液。
6、 沉渣检查：清晨空腹第一次尿，应在1h内送检。标本置于干燥、干净容器尿杯中，至少10ml。普通状况下，由患者自己采集中段尿。女性患者应清洗外阴部后留取。
7、 特殊实验外，晨尿或随机尿要留取中段尿送检，女性在经期不适当做尿液检查。
尿液采集注意事项
1、 尿液标本必要新鲜，并按规定留取。从排出到检测应在2h内完毕，否则会影响尿化学成分及有形物质变化。如不能及时分析，应置4℃下冷藏保存，但冷藏时间最长不得超过8h。有时冷藏后某些结晶析出会影响成果，因而从冰箱取出尿标本应在室温中放置一定期间，使尿标本温度平衡到温室后再进行混匀，然后取样检测。尿标本不能冰冻，否则会影响某些成分检测。如无特殊规定，均应采集清晨起床第一次尿，即晨尿检查。对于门诊和急诊患者，可采集随后尿，易受食物、体位、活动等影响。
2、 标本留取后应及时送检，以免细菌繁殖、细胞溶解或被污染等。送检标本时要置于有盖容器内，以免尿液蒸发影响检测成果。
3、 常规检查留取中段尿送送检。细菌检查尿标本留取办法见后述。
4、 特殊检查项目的本留取请随时与检查科联系。
5、 尿总蛋白测定注意避免血红蛋白污染，否则会使尿总蛋白假性升高；尿液中如具有免疫球蛋白链会使蛋白假性减少；应用多肽类药物治疗病人，血液中多肽会排泄入尿，可导致尿蛋白假性升高，如怀疑尿中有成分，建议将尿液浓缩后作蛋白电泳。
粪便常规检查标本采集
粪便常规检查标本采集办法及注意事项
1、 采集粪便标本办法因检查目不同而有差别，普通检查留取新鲜自然排出粪便3-5g,必要时可肛拭子采用，放入干燥、清洁、无吸水性有盖容器内，贴好标记送检。标本容器最佳用内层涂蜡硬纸盒便于检查后焚毁。细菌检查粪便标本应收集于灭菌封口容器内，勿混入消毒剂及其她化学药物。
2、 盛粪便标本容器必要有盖，有明显标记。要选用粪便脓、血、黏液等异常成分进行检查，表面无异常时应从粪便表面、深处及粪便多处取材；采用标本后及时送检否则可因PH及消化酶等影响，而使粪便中细胞成分破坏分解。
3、 不应留取尿壶或便盆中粪便标本。若标本中混入尿液，可导致某些项目检测成果浮现错误。粪便标本中也不可混入植物、泥土、污水等异物，易混淆实验成果。不应当从卫生裤或衣裤、纸尿裤等物品上留取标本，不能用棉签有棉絮端挑取标本。
4、 做大便隐血实验时，应嘱患者于检查前3d内禁食肉类、含动物血食物、某些蔬菜，禁服铁剂和维生素C等对实验有干扰作用药物。选用外表及内层粪便收集于合格容器内及时送检，长时间放置可使反映敏感度减少。
5、 检查蛲虫卵需用透明塑料薄膜于半夜12pm或上午排便前，于肛门周边皱襞处拭取标本，并及时送检。
6、 检查血吸虫卵时应取黏液、脓、血某些，如须孵化毛蚴应留取不少于30g粪便，并尽快送检，必要时留取整份粪便送检。
7、 检查痢疾阿米巴滋养体时，应床边留取新排出粪便，从脓血和稀软某些取材，并及时保温送实验室，并且实验室接受标本后应及时进行检查。
8、 细菌检查用标本应所有用无菌操作收集于灭菌封口容器内。特殊检查项目留取标本时请预先联系。
浆膜腔积液检查标本采集
浆膜腔积液检查标本
1、 浆膜腔积液标本普通由临床医生行无菌穿刺术采集标本。
2、 送检标本量：理学检查、化学检查、细胞学检查各留取2ml；细菌学检查用无菌管采集标本，厌氧菌培养留取1ml，结核菌检查留取10ml。
3、 标本采集后必要及时送检（否则可浮现细胞变性，标本凝集，细菌溶解）。
4、 用于细胞学检查时，可在标本中加适量EDTA-2K盐抗凝。但还需留取1管不加抗凝剂标本用于观测积液凝固性；化学检查标本宜用肝素抗凝。
脑脊液标本采集
1、 由临床医师行腰椎穿刺术采集标本。
2、 采集后脑脊液分别收集于3个无菌试管中，每管 1-2ml，第一管做细菌培养，第二管做化学分析和免疫学检查，第三管做普通性状及显微镜检查（脑脊液常规）。
3、 标本必要及时送检，放置过久影响成果，如细胞破坏、变性或细胞包裹于纤维蛋白凝块中，使细胞计数减少，分类不精确等；存储脑脊液葡萄糖会分解，使检测成果减少。
胸、腹水标本采集
1、有临床医师行无菌穿刺术，最佳留取中段液体于消毒容器内，及时送检。
2.为防止浮现凝块、细胞变性、细菌破坏自溶等，标本中应加入抗凝剂。常规及细胞学检查宜用EDTA-2K抗凝，生化检查标本宜用肝素抗凝。
3、胸、腹水常规检测需采集两管各10ml,一管抗凝，另一管不抗凝。
关节腔穿刺液
标本采集后第1管作微生物及普通性状检查，第2管用肝素抗凝作细胞学及化学检查。
前列腺和精液检查
前列腺液标本应由临床医师进行前列腺按摩术采集，可直接滴在玻片上；若按摩不出前列腺液，可检查按摩后尿液。疑为前列腺结核、脓肿或肿瘤患者禁忌前列腺按摩。一次按摩失败或检查成果阴性，而明确有临床指征者，可隔3—5天后重新复查。
精液采集最佳在实验室附近，室温应控制在20-35℃，采集标本前禁欲3-7天，采集精液前排净尿液。可用手淫法或其她办法，将一次射出所有精液直接排入干净、干燥容器内。因精子生成日间变动较大，不能仅凭一次检查成果做诊断。普通应间隔1-2周检查一次，持续检查2-3次。
细菌培养之脑脊液、胸腹水穿刺液、关节腔穿刺液标本采集
1、 应在用药前采集，由临床医生以无菌条件下进行腰椎穿刺采集脑脊液3-5ml，因脑膜炎球菌易自溶，流感嗜血杆菌也易死亡，故盛于无菌试管或小瓶中保温及时送检。或将脑脊液5ml直接注射于血培养小朋友瓶中送检即可。
2、 穿刺液涉及胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液。普通由临床医生穿刺抽取。标本采集应在患者用药之前，或停药1-2天后进行。胸水、腹水可抽取5-10ml，心包液、关节可抽取2-5ml,将所得穿刺液分盛于具有和不具有抗凝剂无菌试管或小瓶中，充分混匀后，及时送检。
微生物检查标本采集
微生物学检查标本对的采集、运送及解决，与细菌培养、鉴定成果有十分密切关系；对可疑烈性呼吸道传染病患者采集标本时，必要按国家规范化规定严格注意生物安全；医生、护士、检查人员均应注重微生物检查标本对的采集关于问题，并有责任向患者及其家属进行对的采集标本宣传和指引。
微生物学检查标本采集、运送、验收和解决事项
1、 标本采集
1） 申请单标记必要清晰（姓名、性别、年龄、病历号、临床诊断、标本来源、采集时间、检查项目、抗生素应用状况等），以便实验室可以合理选取培养环境和培养基；
2） 尽量在抗生素应用前采集标本，以提高阳性检出率和避免漏检；
3） 标本采集应严格执行无菌操作；
4） 咽拭、肛拭、伤口拭子等拭子标本，应插入运送培养基送检；
5） 痰、尿液、伤口拭子等混有正常菌群标本，不可放入肉汤培养基内送检；
6） 采集标本容器必要经灭菌解决，但不可用消毒剂。
2、 标本运送
1） 标本采集后应尽快送到微生物实验室；
2） 标本采集后在室温下超过2h未送达实验室，可视为不合格样本。
3、 注意事项
1） 微生物检查样本必要按规定采集转运，否则将影响检查成果，并给评价其意义带来麻烦甚至误导。
2） 微生物样本极易被污染，污染样本杂菌大量繁殖抑制病原菌生长，条件致病菌也是致病菌，如污染条件致病菌将误导临床，导致对患者损害以及经济和时间挥霍。
3） 某些标本离体极易死亡，应在床边采用和接种或及时保温送至实验室检查。室温放置或延迟送检，可使检出阳性率减少；不能使用冷藏样本检查。
微生物检查标本采集和解决
1、 尿液标本采集和解决
普通留取晨起第一次尿液；尿液采集后要及时送检，并保证2h内接种；不能及时送检和接种时，尿液应置4-8℃冰箱保存；冷藏标本应于8h内接种；淋球菌培养标本不能冷藏。怀疑沙门氏菌感染时，应于发病2w左右采集尿液，怀疑钩端螺旋体感染时，应于发病后2w采集尿液，上述时间此时阳性率高。尿液微生物学检查标本采集办法如下：
1） 中段尿采集法：成年男性和女性分别用肥皂水或1：1000高锰酸钾水溶液清洗尿道口和外阴部，再用灭菌水冲洗尿道口，无菌生理盐水冲去消毒液，然后排尿弃去前段尿液，收集中段尿5-10ml盛于带盖无菌容器内送检。
2） 导尿法：用导尿管导取10-15ml尿液，置灭菌容器内送检；长期留置导尿管者应更换新导尿管留尿；留置导尿时，用无菌消毒法消毒导尿管外部及导尿管口，用无菌注射器通过导尿管抽取尿液送检。
3） 集尿法：怀疑结核分枝杆菌感染时，于清洁容器内留取24h尿液，取其沉渣10-15ml送检。
4） 耻骨上膀胱穿刺法：培养成果与临床病情矛盾时可采用此法，普通较少用。
5） 肾盂尿采集法：必要由临床医生采集
注意事项：正常人尿液是无菌，除外尿道有正常菌群外，尚有条件致病菌，而这些细菌又是尿路感染中常用致病菌，故应当注意无菌采集。
2、 粪便标本采集和解决
1） 采集时间
① 腹泻患者于急性期，尽量在用药前采集粪便；
② 伤寒患者于发病2w后来采集粪便
③ 怀疑霍乱时及时采集粪便送检。
2） 采集办法：
① 自然排便法：取新鲜粪便黏液、脓血、或絮状物等故意义成分，2～3g或1～2ml,盛无菌容器内或置于保存液或增菌液内送检;若疑似霍乱者应置于碱性蛋白胨水中(ph8.6)。
② 直肠拭子法：难以获得粪便或排便困难患者及幼儿可采用此法，将拭子前端用无菌甘油或生理盐水湿润，然后插入肛门约４～５ｃｍ（幼儿２－３ｃｍ），轻轻在直肠内旋转。擦取直肠表面黏液后取出，盛于无菌试管中或保存液中送检。
３、痰及下呼吸道标本采集和解决
1）自然咳痰法：①晨痰为佳;②先冷开水洗漱、清洁、口腔和牙齿；③再用力咳出呼吸道深部痰，吐至无菌容器内；④痰量不得少于1ml；⑤痰咳出困难时可先雾化吸入NaCl溶液使痰容易咳出。查结核分枝杆菌，应留取24小时痰。

2）小儿取痰法：用弯压舌板向后压舌，将拭子进一步咽部，小儿因压舌板刺激引起咳嗽，喷出肺或气管分泌物粘在拭子上即可送检。
3）支气管镜、支气管穿刺、支气管肺胞灌洗等采集法，此采集法必要由医生操作。
①气管导管法：气管插管吸取下呼吸道痰液。
②气管镜采集法：用气管镜在肺内病灶附近用导管吸取或用支气管刷直接获得。
4）呼吸道标本采集办法：鼻咽拭子法，先用清水漱口，对光做，头向上仰，口张大，用压舌板轻压舌根，用棉拭子在病人咽后壁，悬雍垂后侧涂抹多次，及时放入无菌试管中。
注意事项：痰通过口腔，因此患者应用清水漱口多次，尽量排除口腔内大量杂菌。痰液标本规定涂片镜检，达到低倍镜视野中≤10个鳞状上皮细胞，以及≥25个白细胞方可送检。
4、血液及骨髓培养标本
1）血培养标本采集指征：
对入院危重患者未进行系统性抗生素治疗前，应及时进行血培养，患者浮现如下体征可作为血培养重要指征：
① 发热（≥38℃）或低热（≤36℃）
② 寒热
③ 白细胞增多（＞10x109/L,特别是在有“核左移”未成熟或带状白细胞增多时）
④ 粒细胞减少（成熟多核白细胞＜1x109/L
⑤ 血细胞减少
⑥ 皮肤黏膜出血
⑦ 昏迷
⑧ 多器官衰竭
2）最惯用办法为血液增菌培养法。培养瓶分为需氧瓶和厌氧瓶两种。每瓶需要8-10ml血液。小朋友瓶为需氧瓶每瓶需血液1-3ml，此外，脑脊液和胸腹水也可用血液增菌培养瓶，但仅需要小朋友瓶，标本量与血液相似。
A.抗生素治疗前，严格无菌静脉采血8-10ml（小朋友1-4ml）;不同步间或不同部位采用2-3份血液标本
B.无菌注入专用培养瓶（成人、小朋友、需氧瓶、厌氧瓶、L型菌需要不同培养瓶）中送检
C.如已用抗生素不能停用时，可于48h分别于下次用抗生素之前，采用不同步间3份血液标本送检
D.必要时可需氧瓶，厌氧瓶（占10﹪）和L型菌同步培养
E.疑为心内膜炎时，为提高阳性检出率，可酌情不同部位、不同步间，多次采血或动脉采血进行培养
F.必要时可取骨髓1-2ml，无菌注入专用培养瓶中送检。
注意事项：血液在正常状况下为无菌标本，应严格按照无菌操作，避免杂菌污染。普通病人在发病初期1-2天或发热高峰期时采集血液标本，用一次性注射器在肘静脉采血，采血前局部皮肤应彻底消毒。对亚急性细菌性心内膜炎等病人，应从肘动脉或股动脉采血为宜。
5、脑脊液
1）采集时间：怀疑脑膜炎时应及时采集脑脊液，最佳是在应用抗生素之前采集脑脊液。
2）采集办法：无菌腰穿采集脑脊液3-5ml分装到3个无菌小瓶中。用于细菌和病毒检测时脑脊液量不少于1ml；用于真菌和抗酸杆菌检测脑脊液量不少于2ml。
6、穿刺液培养标本
1）穿刺液培养标本涉及胸水、腹水、心包液、关节液、鞘膜液等。
2）采集时间：普通在用抗生素等抗菌药物治疗前，或在停止使用抗菌药物之后2-3d采集标本。
3）采集办法
①无菌操作穿刺抽取标本或外科手术采集标本；
②标本采集量应＞1ml（结核分枝杆菌培养时应为1-5ml）
③可在盛器中先加入灭菌肝素然后再加入穿刺液，以防止穿刺液凝固。
7、胃液及胆汁培养
标本抽取空腹胃液5ml，置无菌管内送检；胆汁培养标本由十二指肠引流法或胆囊穿刺法或手术中留取胆汁，采集胆汁量为5ml，置无菌试管中送检；胃液和胆汁采集后必要及时送检。
8、脓汁和病灶分泌物培养
标本采集前局部消毒后无菌采用脓汁或病灶分泌物或组织。标本采集后及时置无菌管内送检。
9、眼、耳、口、鼻、咽拭子培养标本
1） 采集眼分泌物：先用无菌生理盐水冲洗眼部，然后用棉拭子拭干，再用无菌棉拭于采集分泌物
2） 采集咽分泌物：先用清水漱口，用压舌板将舌向下向外压，将咽拭子在咽后壁或悬雍垂后侧涂抹多次，切勿接触口腔和舌粘膜。
3） 采集耳、鼻或鼻咽分泌物：直接用拭子涂抹病灶部位，切勿接触周边粘膜或皮肤。标本采集过程中应注意避免粘膜上正常菌群污染，标本采集后连同拭子一起置无菌管内送检。
10、泌尿生殖道培养标本
1） 尿道分泌物：清洗尿道、采用尿道、溢出脓性等分泌物，或用无菌拭子插入尿道2-4cm处轻轻转动后取出，置无菌试管中送检。
2） 阴道、宫颈分泌物、通过阴道扩张器，用灭菌拭子采用阴道口或宫颈管1-2cm处分泌物，置无菌试管中送检。避免阴道分泌物污染拭子。
3） 宫腔分泌物：在必要时用外套保护膜灭菌导管抽取。
4） 前列腺液：清洗尿道、冲洗膀胱后用前列腺按摩法采用前列腺液于无菌容器内送检。
5） 精液：受检者应5天未排精，清洗尿道后手淫或体外排精法，射精于无菌容器内送检。
6） 溃疡分泌物：灭菌生理盐水溶液清洗患处，用无菌拭子取其边沿或基底某些泌物，置无菌试管中送检。
11、皮肤（重要指伤口、创面脓液等）标本采集办法
1） 对采集标本部位应一方面清除污垢，再以碘酒或酒精消毒，防止皮肤表面污染菌混入影响成果，盛放标本器皿应无菌。
2） 封闭性脓肿：病灶局部消毒后，以无菌干燥注射器穿刺抽取。将采集脓液注入灭菌试管。对疑似厌氧菌脓液，抽取脓液后及时排出注射器内空气，同步将针头插入灭菌橡皮塞，防止空气进入。
3） 开放性脓肿及脓性分泌物：先做局部消毒再用无菌棉拭子采用脓液及病灶深某些泌物，并置无菌容器内送检。
4） 大面积烧伤创面分泌物因创面部位不同，细菌种类不同，故应用棉拭子多部位采集脓液及分泌物，置于无菌试管。注意事项：烧伤12小时内创面及分泌物中细菌检出率较低。
12、空气培养标本采集办法
1） 采样时间：选取消毒解决后与进行医疗活动之前采样。
2） 采样高度：与地面垂直高度80-150cm。
3） 布点办法：室内面积≤30㎡，设一条对角线上取三点，即中心一点，两端各距墙1m处取一点；室内面积＞30㎡，设东西南北中5点，其中东南西北距墙1m。
4） 采样办法：用9㎝直径培养琼脂平板在采样点暴露5分钟后送检培养。
5） 标本保存
① 采样后必要尽快送检。
② 在平皿上注明各采自哪个室及布点位置，用胶布把平皿和平皿盖子固定好以免在送检途中平皿和平皿盖子分离而导致污染。
13、样本运送流程
1、常规样本运送流程：检查科卫生员08：10分开始到各临床病区收集血样、尿/粪样等常规样本，现场登记样本类别、患者姓名、样本数量，不合格样本填写拒收单并由病区护士签字确认。卫生员将各病区样本收集完毕后，送达检查科门诊化验室。
2、急诊样本运送程序：各病区急诊样本由病区护士/护工送至检查科门诊化验室，由检查科接受人员负责登记“急诊样本接受登记表”，送检人员签字确认。

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