1、课题2用纸层析法分离用纸层析法分离FeFe3+3+和和CuCu2+2+第第1页页一、色谱分析法色谱分析法:1 1、介绍:介绍:基于混合物各组分在体系中两相物理、化学性能基于混合物各组分在体系中两相物理、化学性能差异(如吸附、分配差异等)而进行分离和分析方法。差异(如吸附、分配差异等)而进行分离和分析方法。国际公认俄国国际公认俄国M.C.M.C.茨维特为色谱法创始人。茨维特为色谱法创始人。第第2页页 色谱法体系中两相作相对运动色谱法体系中两相作相对运动时,通常其中一个相是固定不动,时,通常其中一个相是固定不动,称为称为固定相固定相;另一相是移动,称;另一相是移动,称为为流动相流动相;滤纸或其它载
2、体作为滤纸或其它载体作为惰性支撑物惰性支撑物第第3页页菠菜叶绿体中色素提取和分离菠菜叶绿体中色素提取和分离 2、色谱法应用展示:、色谱法应用展示:第第4页页(1)按流动相和固定相不一样,色谱法分为)按流动相和固定相不一样,色谱法分为气相色谱法气相色谱法和和液相色液相色谱法谱法。气相色谱法流动相是气体,液相色谱法流动相是液体。气相色谱法流动相是气体,液相色谱法流动相是液体(2)按吸附剂及其使用形式可分为)按吸附剂及其使用形式可分为柱色谱、纸色谱和薄层色谱柱色谱、纸色谱和薄层色谱。(3)按吸附力可分为)按吸附力可分为吸附色谱、离子交换色谱、分配色谱吸附色谱、离子交换色谱、分配色谱(4)按色谱操作终
3、止方法可分为)按色谱操作终止方法可分为展开色谱和洗脱色谱展开色谱和洗脱色谱。(5)按进样方法可分为)按进样方法可分为区带色谱、迎头色谱和顶替色谱。区带色谱、迎头色谱和顶替色谱。3、色谱法分类:、色谱法分类:第第5页页纸色谱纸色谱,以滤纸为载体,是以滤纸纤维及其结合水作为固定相,以滤纸为载体,是以滤纸纤维及其结合水作为固定相,以有机溶剂作为流动相分配色谱分离。纸上色谱分离含有设备以有机溶剂作为流动相分配色谱分离。纸上色谱分离含有设备简单、操作方便、分离效率高、所需样品量少等优点,但分离简单、操作方便、分离效率高、所需样品量少等优点,但分离量少、回收困难,分离速度慢等;量少、回收困难,分离速度慢等
4、第第6页页柱色谱柱色谱,含有进样量大,回收轻含有进样量大,回收轻易等优点,但其分辨率不如纸上色易等优点,但其分辨率不如纸上色谱和薄层色谱高;谱和薄层色谱高;第第7页页薄层色谱分离薄层色谱分离,将固定相在玻璃平板上铺成薄层而进将固定相在玻璃平板上铺成薄层而进行分离一个分离技术。薄层色谱是柱色谱和纸上色谱行分离一个分离技术。薄层色谱是柱色谱和纸上色谱二者结合。二者结合。第第8页页二、试验原理二、试验原理 含有含有CuCu2 2和和FeFe3 3溶液溶液涂涂在滤纸一端,丙酮作展开在滤纸一端,丙酮作展开剂,在滤纸剂,在滤纸毛细作用毛细作用下,下,展开剂携带展开剂携带CuCu2 2和和FeFe3 3沿
5、沿滤纸纤维向上移动因为速滤纸纤维向上移动因为速度不一样(吸附和溶解能度不一样(吸附和溶解能力不一样),一段时间后,力不一样),一段时间后,CuCu2 2和和FeFe3 3距起点距离会距起点距离会不一样,从而到达分离目不一样,从而到达分离目标。标。第第9页页三、试验操作关键点及主要试验现象三、试验操作关键点及主要试验现象 1操作关键点(1)裁纸(2)点样(3)展开(4)显色(5)分离第第10页页四:试验方案设计四:试验方案设计装置制作装置制作点层析试样点层析试样配展开剂配展开剂层析操作层析操作显色反应显色反应操作步骤:操作步骤:操作关键操作关键点:点:滤纸剪成约滤纸剪成约1cm1cm宽,宽,10
6、cm10cm长长(确保下端能浸入展开剂中确保下端能浸入展开剂中1cm)1cm)滤纸条,一端固定在橡胶塞上,在距滤纸条一端滤纸条,一端固定在橡胶塞上,在距滤纸条一端2cm2cm处用铅笔画一小圆点。处用铅笔画一小圆点。配试样后,用毛细管蘸取试样在配试样后,用毛细管蘸取试样在“原点原点”处点直径处点直径0.3-0.3-0.5cm0.5cm斑点,晾干后再点。重复斑点,晾干后再点。重复3-53-5次。也在滤纸下方距次。也在滤纸下方距离底边离底边2cm2cm处画出混合液细线代替点样。处画出混合液细线代替点样。用丙酮用丙酮9mL,6mol/L9mL,6mol/L盐酸盐酸1mL1mL配成展开剂。配成展开剂。展
7、开剂不可沾到试管壁,点样后滤纸条不可接触试管展开剂不可沾到试管壁,点样后滤纸条不可接触试管内壁,滤纸条下端浸入展开剂中内壁,滤纸条下端浸入展开剂中1cm,1cm,注意不要让试样注意不要让试样点触及展开剂。点触及展开剂。注意观察滤纸条上色带改变,滤纸条取下后用氨气注意观察滤纸条上色带改变,滤纸条取下后用氨气熏,观察颜色改变;氨熏应在通风橱中进行熏,观察颜色改变;氨熏应在通风橱中进行第第11页页(1)层析过程中试验现象(2)氨熏后试验现象五、试验操作关键点及主要试验现象五、试验操作关键点及主要试验现象 用小烧杯代替大试用小烧杯代替大试管。用铁丝横穿过滤纸,管。用铁丝横穿过滤纸,架在烧杯上方(如图)
8、架在烧杯上方(如图)。调整完滤纸高度后,盖调整完滤纸高度后,盖上培养皿形成气室。上培养皿形成气室。氯化铁层,颜色较深氯化铁层,颜色较深 硫酸铜层,颜色稍浅硫酸铜层,颜色稍浅 第第12页页用纸层析法分离铁离子和铜离子用纸层析法分离铁离子和铜离子 第第13页页六、试验注意事项六、试验注意事项1 1、为预防水解,饱和、为预防水解,饱和FeClFeCl3 3和和CuSOCuSO4 4可加少可加少许许HClHCl或或H H2 2SOSO4 4酸化,不影响试验效果。酸化,不影响试验效果。2 2、氨熏需在通风试验室内进行。、氨熏需在通风试验室内进行。3 3、层析速度开始较快,后逐步减慢,大约、层析速度开始
9、较快,后逐步减慢,大约1010分钟即可分离完全。分钟即可分离完全。第第14页页第一课时完成.4.11第第15页页拓展课题拓展课题1 12 2菠菜叶绿体中色素提取和分离菠菜叶绿体中色素提取和分离 第第16页页1 1、药品准备:、药品准备:菠菜叶菠菜叶4 45 5克;石英砂克;石英砂1 1克(可用细砂代替);克(可用细砂代替);丙酮丙酮;层析液按石油醚层析液按石油醚9 9份、丙酮份、丙酮1 1份(体积比)配制,也可用份(体积比)配制,也可用2020份石油醚、份石油醚、2 2份丙酮、份丙酮、1 1份苯配制,或用汽油代替份苯配制,或用汽油代替2、试验现象、试验现象第第17页页3 3、用圆滤纸改进试验试验现象、用圆滤纸改进试验试验现象5 5分钟分钟1515分钟分钟菠菠菜菜 5 5分钟分钟 2020分钟分钟 青青菜菜 第第18页页拓展课题拓展课题1 13 3 用粉笔进行层析分离用粉笔进行层析分离第第19页页






