新药研究中的动物实验方法.ppt

新药研究中的动物实验方法实验动物实验动物：是指经：是指经人工饲育人工饲育，对其携带的，对其携带的微生物实行微生物实行控制控制，遗传背景明确或来源清，遗传背景明确或来源清楚，用于楚，用于新药新药研究、教学、生产、鉴定以研究、教学、生产、鉴定以及其他科学实验及其他科学实验的动物。的动物。通过对通过对动物动物本身生命现象的本身生命现象的研究研究，进，进而推用到人类，探索人类的生命奥秘，而推用到人类，探索人类的生命奥秘，控控制人类的疾病和衰老，延长人类的寿命制人类的疾病和衰老，延长人类的寿命。重要性重要性常用实验动物常用实验动物 大鼠大鼠小小鼠鼠兔兔Beagle犬犬小型猪小型猪猴猴By Chen Min-li1 动物实验前的准备动物实验前的准备左手拇指和食指左手拇指和食指抓住小抓住小鼠的两耳和颈部皮肤鼠的两耳和颈部皮肤右手右手抓取鼠尾抓取鼠尾左手无名指左手无名指按住鼠尾按住鼠尾小指小指按住后腿按住后腿1.1 实验动物的抓取与固定实验动物的抓取与固定小鼠的抓取与固定小鼠的抓取与固定1.2 编号和标记方法编号和标记方法 标记的方法应保证号码清楚、耐久、简便、易认和标记的方法应保证号码清楚、耐久、简便、易认和适用适用。现介绍几种常见标记方法：现介绍几种常见标记方法：染色法染色法、标牌法、烙印、标牌法、烙印法、耳孔法。法、耳孔法。编号原则编号原则是：是：先左后右，从前到后先左后右，从前到后。1.3 实验动物的麻醉实验动物的麻醉动物的麻醉方法动物的麻醉方法 1全身麻醉全身麻醉 （1）吸入法）吸入法 （2）腹腔腹腔和静脉给药麻醉法和静脉给药麻醉法 2局部麻醉局部麻醉1.4 实验动物被毛的去除方法实验动物被毛的去除方法去除被毛去除被毛的方法有四种：的方法有四种：剪毛剪毛拔毛拔毛剃毛剃毛脱毛脱毛2 实验动物的给药途径和方法实验动物的给药途径和方法经口给药：经口给药：饲料、饮水、灌胃饲料、饮水、灌胃注射给药：注射给药：皮下注射皮下注射 静脉注射静脉注射 腹腔注射腹腔注射 脑内注射等脑内注射等吸入给药：吸入给药：鼻腔吸入鼻腔吸入鞘内注射鞘内注射小鼠的腹腔注射小鼠的腹腔注射小鼠的灌胃小鼠的灌胃小鼠的皮下注射小鼠的皮下注射皮下注皮下注射射大鼠尾静脉大鼠尾静脉3 人类疾病动物模型人类疾病动物模型 医学研究中建立的医学研究中建立的具有人类疾病模拟表具有人类疾病模拟表现的动物实验对象和相关材料现的动物实验对象和相关材料。认识生命科学客观规律的实验方法和手段认识生命科学客观规律的实验方法和手段。人类疾病的动物模型的研究，实质上是生人类疾病的动物模型的研究，实质上是生物比较医学的应用科学。物比较医学的应用科学。使用动物模型的意义使用动物模型的意义提提 供供 疾疾病病 材材 料料避避避避 免免免免 人体人体人体人体 实实实实 验验验验 造造造造 成成成成危危危危 害害害害增增 加加可比性可比性样品易得样品易得简化实验简化实验动物模型动物模型设计原则设计原则相似性相似性重复性重复性易行性易行性经济性经济性可靠性可靠性适用性适用性可控性可控性动物背景动物背景动物背景动物背景资料完整资料完整资料完整资料完整3再现再现再现再现所要研究所要研究所要研究所要研究的人类疾病的人类疾病的人类疾病的人类疾病14能在能在能在能在2 2种动物种动物种动物种动物重复重复重复重复产生该疾病产生该疾病产生该疾病产生该疾病2动物模型的评估动物模型的评估价价价价廉廉廉廉便于便于便于便于运送运送运送运送实例：缺氧缺血性脑损伤疾病动物模型大鼠左侧颈总动脉大鼠左侧颈总动脉结扎结扎2-3h后左眼睑后左眼睑裂变小裂变小缺缺氧氧时时大大鼠鼠出出现现登登高高、相互挤靠等现象相互挤靠等现象4周龄，周龄，SD大大鼠麻醉、备皮鼠麻醉、备皮 游离左颈总游离左颈总动脉，结扎动脉，结扎 术后休息术后休息2-3h，苏醒后以，苏醒后以8O2和和92N2、1.5-2L/min的的流量持续通气流量持续通气2.5h 大鼠左颈总动脉已大鼠左颈总动脉已游离游离HE染色观察脑组织病理变化经心脏灌流经心脏灌流4%多聚甲多聚甲醛固定取脑醛固定取脑 脱水脱水透明透明浸蜡浸蜡包埋包埋行常规行常规HE染色染色不同时间点的脑组织病理变化图（HE100）4 各种检验标本采集方法各种检验标本采集方法 其他检验标本采集方法其他检验标本采集方法 脑脊液采集脑脊液采集 腹水采集腹水采集 断头采集断头采集 断头取脑断头取脑 血液采集方法血液采集方法 尾侧静脉采血：尾侧静脉采血：大鼠，大鼠，0.5-1 mL 尾静脉切口采血：尾静脉切口采血：小鼠、大鼠，小鼠、大鼠，0.1-0.2 mL粪、尿液采集方法粪、尿液采集方法5 实验动物的处死方法脊椎脱臼法脊椎脱臼法断头法断头法击打法击打法急性大失血法急性大失血法(心脏灌心脏灌注注)化学致死法化学致死法心脏灌注心脏灌注资料整理仅供参考,用药方面谨遵医嘱