冰糖橙皮上曲酸高产菌的选育及发酵工艺研究模板.doc

冰糖橙皮上曲酸高产菌选育及发酵工艺研究发酵工程， ， 硕士【摘要】 曲酸(Kojic acid),化学名5-羟基-2-羟甲基-1,4-吡喃酮,是由真菌好氧发酵产生一个弱酸性次级化合物,其含有酪氨酸酶抑制能力、抑菌能力、对氧化酶抑制作用和对金属离子螯合作用等,可作为美白祛斑剂、食品防腐剂和保鲜剂、止痛剂、杀虫剂、香料等应用于食品、化妆品、医药、农业等相关领域全部有很大应用价值。另外,曲酸还能够作为香料合成和可降解塑料合成中间体等。因为现在中国外曲酸发酵生产技术尚不够成熟,市场上曲酸供不应求,价格昂贵,所以必需大力开展曲酸发酵生产研究。本文以冰糖橙皮作为材料,从霉变冰糖橙皮上筛选优良曲酸生产菌,经过不一样物理方法对其进行逐层诱变,同时对曲酸发酵生产工艺进行了研究,最终对曲酸提取方法进行了系统研究,研究关键结果以下：1.从霉变冰糖橙皮中筛选择得一株含有优良性状曲酸生产菌,曲酸产量达成15.68g/L,经过比较菌株菌落特征和显微特征,判定此菌株为米曲霉,本研究将其编号为米曲霉A-55。2.以米曲霉A-55作为出发菌株,对其进行UV、微波和60Co三轮诱变：一,20W紫外灯距离30 cm照射20 mmin条件下取得米曲霉突变株UV-7.更多还原【Abstract】 Kojic acid, a weak acid, whose chemical name is 5-hydroxyl-2-hydroxymethyl-1,4-pyrone is a secondary compounds produced by the aerobic fungus. It has the ability of inhibiting tyrosinase, bacteria and oxidase as well as the effect of chelating to metal ions, and it has great application value in the field of food, cosmetics, medicine, agriculture and other related fields as freckle whitening agent, preservative and preservation agents, analgesics, pesticides, etc. In addition, kojic acid also ca.更多还原 【关键词】 曲酸； 筛选； 诱变； 响应面； 优化； 提取； 【Key words】 kojic acid； screening； mutation； response surface； optimization； extract； 摘要 4-6 ABSTRACT 6-7 缩略词表 8-9 目录 9-13 1 绪言 13-24 1.1 曲酸结构及其性质 13-15 1.1.1 曲酸分子结构 13-14 1.1.2 曲酸理化性质 14 1.1.3 曲酸生理活性 14-15 1.1.4 曲酸毒理学 15 1.2 曲酸应用 15-18 1.2.1 曲酸在食品方面应用 15-17 1.2.2 曲酸在化妆品中应用 17-18 1.2.3 曲酸在医药方面应用 18 1.2.4 曲酸在农业中应用 18 1.2.5 曲酸在其它方面应用 18 1.3 曲酸发酵法生产 18-21 1.3.1 曲酸生产菌种 19 1.3.2 曲酸发酵生产工艺条件 19-21 1.3.3 曲酸提取 21 1.4 曲酸研究现实状况 21-22 1.5 曲酸研究目标意义及关键内容 22-24 1.5.1 本课题研究意义 22 1.5.2 研究内容 22-24 2 曲酸生产菌筛选及其判定 24-31 2.1 序言 24 2.2 材料和方法 24-27 2.2.1 材料和试剂 24 2.2.2 关键试验仪器 24 2.2.3 培养基及染色液 24-25 2.2.4 曲酸含量测定 25-26 2.2.5 菌株筛选 26-27 2.2.6 菌种判定 27 2.3 结果和分析 27-30 2.3.1 菌种筛选 27-28 2.3.2 菌种判定结果 28-30 2.4 小结 30-31 3 曲酸生产菌诱变选育 31-42 3.1 序言 31-32 3.2 材料和方法 32-34 3.2.1 菌种 32 3.2.2 关键试剂及诱变剂 32 3.2.3 关键试验仪器 32 3.2.4 培养基 32 3.2.5 诱变方法 32-33 3.2.6 诱变剂量和时间确实定 33 3.2.7 突变株筛选 33-34 3.2.8 遗传稳定性试验 34 3.2.9 突变株保藏 34 3.3 结果和分析 34-40 3.3.1 UV诱变 34-37 3.3.2 微波诱变 37-38 3.3.3 (60)Co诱变 38-40 3.4 小结 40-42 4 曲酸发酵工艺研究 42-58 4.1 序言 42 4.2 材料和方法 42-47 4.2.1 菌种 42 4.2.2 试剂 42-43 4.2.3 关键试验仪器 43 4.2.4 培养基 43 4.2.5 分析方法 43-45 4.2.6 促进剂对曲酸生成影响 45 4.2.7 单原因试验 45 4.2.8 Plackett-Burman试验设计 45-46 4.2.9 最陡爬坡试验设计 46 4.2.10 响应面试验设计 46-47 4.3 结果和讨论 47-56 4.3.1 不一样促进剂对曲酸产量影响 47-48 4.3.2 单原因确实定 48-49 4.3.3 Plackett-Burman设计法筛选影响产曲酸主效因子 49-51 4.3.4 最陡爬坡试验 51-52 4.3.5 响应面分析法优化培养基 52-56 4.4 小结 56-58 5 曲酸提取 58-65 5.1 序言 58 5.2 材料和方法 58-60 5.2.1 试剂 58 5.2.2 关键仪器 58-59 5.2.3 分析方法 59 5.2.4 曲酸粗制晶体制备 59 5.2.5 活性炭脱色处理 59-60 5.2.6 离子交换树脂去除杂质 60 5.3 结果和分析 60-63 5.3.1 曲酸粗制晶体制备 60-61 5.3.2 活性炭脱色参数确实定 61-63 5.3.3 离子交换树脂去除杂质效果 63 5.3.4 曲酸精制晶体取得 63 5.4 小结 63-65 6 结论和展望 65-67 6.1 结论 65-66 6.2 展望 66 6.3 创新点 66-67 参考文件