食品工程与科学论文保健品中β胡萝卜素的含量分析.doc

目 录

摘要……………………………………………………………………………………………1
关键词…………………………………………………………………………………………1
Abstract………………………………………………………………………………………1
Key words………………………………………………………………………………………1
引言………………………………………………………………………………2
一、实验部分……………………………………………………………………………2
（一）仪器与试剂……………………………………………………………………………2
1．仪器 ………………………………………………………………………………2
2．检验试剂…………………………………………………………………………2
（二）测定方法……………………………………………………………………………3
1．色谱条件………………………………………………………………………………… 3
2. 标准品储备液的配制……………………………………………………………………3
3. 样品溶液的制备………………………………………………………………………… 3
4. 标准曲线………………………………………………………………………………… 3
5. 样品测定………………………………………………………………………………… 3
（三）讨论………………………………………………………………………………… 3
1. 样品的取样量………………………………………………………………………………3
2. 提取溶剂的选择………………………………………………………………………… 3
3. 流动相的选择…………………………………………………………………………… 3
二、结果与分析……………………………………………………………………………… 4
1. 标准曲线………………………………………………………………………………… 4
2. 精密度试验……………………………………………………………………………… 5
3. 回收率试验……………………………………………………………………………… 6
4. 对不同品牌的β-胡萝卜素胶囊测定…………………………………………………… 6
三、结论……………………………………………………………………………………… 6
致谢……………………………………………………………………………………………7
参考文献………………………………………………………………………………………8

保健品中β-胡萝卜素的含量分析

摘要：对不同品牌保健品中β－胡萝卜素的含量进行分析，拟建立HPLC快速测定保健品中β-胡萝卜素含量方法。方法：甲醇：氯仿=85：15(v/v)；Agilent—Cl8 柱(4.6 mm×300mm，5um)；流速1.0 mL／min，柱温　30℃，检测波长448nm，进样量10uL。结果β-胡萝卜素在10ug／mL～50ug／mL时，浓度与峰面积呈良好的线性关系(R2=0.9994)，加标回收率为98.2％～101.2％ ，最低检出限为1ug／mL，相对标准偏差RSD为0.23％ ～2.6％ 。结论：用该方法测定了多种保健品中的β-胡萝卜素，操作简单、快速、准确，结果令人满意。
关键词：β-胡萝卜素；RP—HPLC；保健品；含量分析

Health care products ofβ - carotene content analysis

Student majoring in Food science and Engineering Qing Gao
Tutor Yanxia Li
Abstract：To different brands of health products of β - carotene content carries on the analysis, proposed the establishment of health care products HPLC rapid determination of β - carotene content in method. Methods: methanol: chloroform =85:15 ( v/v ); Agilent Cl8 column ( 4.6 mm× 300mm, 5um ); the flow rate was 1 mL / min, column temperature was 30 ℃, the detection wavelength was 448nm, sampling quantity 10uL. Resultsβ - carotene in 10ug / mL ～50ug / mL, concentration and peak area showed a good linear relationship ( R2=0.9994 ), the recovery is 98.2% ～101.2%, the minimum detectable limit of 1ug / mL, the relative standard deviation is 0.23% ～2.6% RSD. Conclusion: this method was used to determination of a variety of health products of β - carotene, operation is simple, rapid, accurate, with satisfactory results.
Key words: Beta carotene；RP—HPLC；Health care products；Content analysis

引言 β-胡萝卜素，名字得自拉丁文的胡萝卜，属于天然化学物家庭的一员。β—胡萝卜素是缓解眼睛疲劳、保持正常视觉、保持上皮细胞健全和提高人体免疫力的主要营养素，会被人体转换成维生素A，被人们称为”维生素A原”，β-胡萝卜素具有维生素A所没有的较好的抗氧化作用和预防癌变的作用。和其他的类胡萝卜素一样，β-胡萝卜素是一种抗氧化物。食用富含β-胡萝卜素中的食物可以防止身体接触一种称为自由基的破坏分子。通过一个氧化的过程，自由基会对细胞造成伤害。长此以往，将有可能导致人体患上各种各样的慢性疾病。 一些研究表明从日常饮食中摄入足量的β-胡萝卜素可能减少患上两种慢性疾病的危险 ——心脏病和癌症。有研究表明高剂量的β-胡萝卜素会减少人们对太阳的敏感度，尤其对那些由于被太阳暴晒而引起皮肤病的人特别有帮助。他们可以在保健专业人士适当的指导下，有针对性地补充β-胡萝卜素。
缺乏β-胡萝卜素眼睛易疲倦，疼痛，视力下降，影响男性精子的生成，并使女性雌激素分泌的周期性变化消失，导致不能受孕,上皮细胞的正常分化受阻，这是引起癌变的基本原因、导致人体对某些化学性致癌物质的敏感性增加。
因此，适时、适当补充β—胡萝卜素是增强免疫力的有效途径，现在市场上含β-胡萝卜素保健品特别多，至2003年12月底，我国批准的以“β-胡萝卜素”化合物为功效成分的保健食品有63种，占保健食品总数的1.33%，这类保健产品具有以下特点：主要以免疫调节、血脂调节和抗疲劳等功效为主；产品形态以胶囊和片剂为最多，也包括口服液和营养液。以“β-胡萝卜素”化合物为功效成分开发保健品具有潜在的优势，β-胡萝卜素被许多保健品作为营养强化剂。目前分析保健品中β-胡萝卜素的方法有柱色谱法、纸色谱法、分光光度法、高效液相色谱法，前3种方法过程复杂，精密度差。高效液相色谱法简便、快速、准确、成本低，是目前检测β-胡萝卜素最理想的方法。

一 实验部分
（一）仪器与试剂
1. 仪器
Agilent 1200 高效液相色谱仪
Agilent 1200 紫外检测器
Agilent液相化学工作站
BS224S精密电子天平
2． 检验试剂
β-胡萝卜素标准品(中检所)
含β-胡萝卜素保健品(市面出售)
甲醇(色谱纯)
石油醚(分析纯)
丙酮(分析纯)
（二）测定方法
1. 色谱条件
色谱柱： Agilent-Cl8 (4.6 mm×300 mm，5um)，
流动相： 甲醇：氯仿=85：15(v/v)，
流速： 1.0 mL／min，
柱温： 30℃，检测波长： 448nm，进样量： 10uL。
2． 标准品储备液的配制
精密称取标准品20.0mg于烧杯中，加三氯甲烷溶解，再转移至100 mL容量瓶中，用三氯甲烷定容至刻线，摇匀，即成标准储备液(200.0ug／mL)。
3. 样品溶液的制备
称取适量试样于100mL分液漏斗中(如果试样中β-胡萝卜素量较少，取样量可以多些)，加入石油醚5mL,丙酮20mL混合液振摇提取，振摇10 min，静置5 min，将提取液转入盛有100 mL 5％硫酸钠液的250mL分液漏斗中，多次反复提取，将提取液并入250mL分液漏斗中,直至提取液无色为止。将上述提取液经5％硫酸钠溶液洗涤后，进行浓缩，并用氮气吹干，加入10mL甲醇溶解转移至100 mL容量瓶中，用甲醇定容至刻线。用0.45um 微孔滤膜过滤，滤液作HPLC分析用。
4． 标准曲线
精密吸取标准品储备液(0.50、1.00、1.50、2.00、2.50)mL，分别加于10 mL容量瓶中，加三氯甲烷释稀至刻线，即成浓度为(10、20、30、40、50)ug／mL标准品溶液。按上述色谱条件进样1OuL，以峰面积Y为纵坐标，标准品β-胡萝卜素的浓度x为横坐标绘制标准曲线。
5. 样品测定
按上述色谱条件，注入样品溶液1OuL，测得峰面积，按标准曲线计算即得。
（三）讨论
1.样品的取样量
由于市场上保健品中β-胡萝卜素含量相差较大，统一取样量在实际操作中并不理想，本实验根据样品中β-胡萝卜素含量多少，β-胡萝卜素的线性范围决定取样量，测定得的结果很满意。
2． 提取溶剂的选择
在样品提取过程中，用石油醚+丙酮、石油醚、丙酮、三氯甲烷分别进行振摇提取，再用不同配比石油醚+丙酮进行提取，经过比较以石油醚+丙酮(20+80)为溶剂进行提取，提取较为完全，且样品中有机杂质相对较少。
3． 流动相的选择
本试验用甲醇和乙腈、丙酮和水、甲醇：氯仿、乙腈：甲醇：二氯甲烷四种流动相反复进行试验，同时改变流动相的配比和流速，从分离效果进行比较，最终选定甲醇：氯仿=85：15(v/v)；流速10 mL／min，为本次试验的条件。

二 结果与分析
1.标准曲线
以标准品β-胡萝卜素的浓度x为横坐标，以峰面积Y为纵坐标绘制标准曲线，结果表明β-胡萝卜素在10～50ug／mL时，其峰面积与浓度有良好的线性关系(R2=0.9994)，回归方程为Y=5.O059X+0.0038。见图1

2. 精密度试验　
　精密吸取低、中、高三种浓度的标准品溶液1OuL，重复进样6次，本法的精密度符合分析要求。结果见表3-1。
表3-1 精密度试验结果( ug／mL)
标准液
测定值
X
S
RSD(%)
10

10.02
9.99
9.98
10.01
9.98
10.05
10.01
0.03
0.27
30
30.06
30.03
29.96
30.07
29.92
30.02
30.01
0.06
0.20
50
50.02
49.98
50.03
50.01
49.88
49.99
49.99
0.05
0.11

3. 回收率试验
本文对测定值为4.26mg的样品分别加入低、中、高含量的标准进行加标回收实验，回收率见表3-2。
表3-2 回收率试验结果
本底值(mg)
加标量(mg)
测定值(mg)
回收率(%)
4.26
3.00
7.18
7.23
7.20
7.21
7.24
7.21
99.31
4.26
4.00
8.12
8.13
8.11
8.13
8.10
8.09
98.22
4.26
5.00
9.39
9.36
9.35
9.38
9.40
9.37
101.24

4. 对不同品牌的β-胡萝卜素胶囊测定
测定结果见表3-3。
表3-3 β-胡萝卜素胶囊中β-胡萝卜素的含量

样品名称
取样量(g)
测定值(mg)
平均值
RSD(%)
含量(%)
海王β-胡萝卜素软胶囊
梅蒂亚β-胡萝卜素软胶囊
0.2573
0.1206
2.52
4.26
2.49
4.29
2.53
4.23
2.51
4.26
0.83
0.70
0.98
3.53
纽斯葆β-胡萝卜素软胶囊
0.5295
1.26
1.25
1.20
1.24
2.60
0.23
灵汇健β-胡萝卜素软胶囊
0.2639
2.35
2.37
2.30
2.34
1.54
0.89
倍健-β胡萝卜素胶囊
0.4986
4.30
4.32
4.31
4.31
0.23
0.86
尤维斯牌β－胡萝卜素软胶囊
0.4283
4.08
4.12
4.06
4.09
0.75
0.95
圣雪莲 β-胡萝卜素胶囊
0.5672
1.73
1.76
1.70
1.73
1.73
0.31
好及施β－胡萝卜素软胶囊
0.2248
4.25
4.28
4.23
4.25
0.59
1.89

三　结论
保健品中β-胡萝卜素的含量测定结果表明，不同品牌β-胡萝卜素含量相差比较大，含量在0.23%～3.53%，在1Oug／mL～50ug／mL范围内线性关系良好(R2=0.9994)，实验结果准确，回收率高，操作简单快速，能满足测定分析要求，可用于保健品中β-胡萝卜素的含量测定。

参考文献：

[1] 王新超 反相高效液相色谱法测定茶叶中β-胡萝卜素含量 中国农学通报 2006.9 91-93
[2] 谷静 保健食品中β-胡萝卜素的HPLC测定 中国卫生检验杂志2006.l2 1455-1458
[3] 雷绍荣 反相高效液相色谱法测定芦荟中β-胡萝卜素的含量 西南农业学报 2005.6 874-875
[4] 夏 薇 烟叶中β-胡萝卜素的分离纯化和测定 色 谱 2004.1 54-56
[5] 赵建国 奶粉中β-胡萝卜素的高效液相色谱法测定 分析测试技术与仪器 2005.12 307-309
[6] 涂一名 反相高效液相色谱法测定强化奶粉中β-胡萝卜素含量 分析测试技术与仪器 2006.3 15-18