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临床常用免疫学检查课件.ppt

1、文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。临床常用免疫学检查临床常用免疫学检查l血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白(immunglobulin,Ig)测定测定l血清补体测定血清补体测定l细胞免疫检测细胞免疫检测l感染免疫检测感染免疫检测l自身免疫检查自身免疫检查l肝炎病毒标志物检测肝炎病毒标志物检测l肿瘤标志物检测肿瘤标志物检测文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血清免疫球蛋白分类血清免疫球蛋白分类lIg通常是指具有抗体活性和(或)抗体样结构通常是指具有抗体活性和(或)抗体样结构的球蛋白。的球蛋白。l应用免疫电泳与超速离心

2、分析可将应用免疫电泳与超速离心分析可将Ig分分5类:类:IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。lIgG:含量最多或最主要的:含量最多或最主要的Ig(75%),唯一),唯一能够通过胎盘的能够通过胎盘的Ig。主要由脾脏和淋巴结中的。主要由脾脏和淋巴结中的浆细胞合成与分泌。浆细胞合成与分泌。lIgA:约占:约占10%,SIgA在局部免疫中起重要作在局部免疫中起重要作用。主要由肠系淋巴组织中的浆细胞产生。用。主要由肠系淋巴组织中的浆细胞产生。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白lIgM:分子量最大,由:分子量最大,由5个个IgM单

3、体通过单体通过J链连接。是最早出现的链连接。是最早出现的Ig,是抗原刺激,是抗原刺激后最早出现的抗体,其杀菌、溶菌、溶后最早出现的抗体,其杀菌、溶菌、溶血、促吞噬以及凝集作用比血、促吞噬以及凝集作用比IgG高高5001000倍。倍。l测定方法:单向免疫扩散法(测定方法:单向免疫扩散法(RID)或免)或免疫比浊法。疫比浊法。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血清免疫球蛋白血清免疫球蛋白测定参考值测定参考值l参考值:参考值:IgG:7.616.6g/L(RID法)法)IgA:7103350mg/LIgM:0.482.12g/L文档仅供参考,不能作为科学依

4、据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。.l临床意义临床意义免疫球蛋白增高免疫球蛋白增高多克隆增高多克隆增高:常见于各种慢性感染、慢性肝常见于各种慢性感染、慢性肝病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性病、肝硬化、淋巴瘤和某些自身免疫性疾病,如疾病,如SLE、类风湿关节炎等。、类风湿关节炎等。单克隆增高单克隆增高:主要见于免疫增殖性疾病,如主要见于免疫增殖性疾病,如多发性骨隋瘤、原发性巨球蛋白血症等。多发性骨隋瘤、原发性巨球蛋白血症等。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。l免疫球蛋白降低:免疫球蛋白降低:常见于各类先天性免疫缺陷常见于各类先天性免疫

5、缺陷病、获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病及长病、获得性免疫缺陷病、联合免疫缺陷病及长期使用免疫抑制剂的病人。期使用免疫抑制剂的病人。l血清血清IgD测定测定免疫扩散法:免疫扩散法:062mg/L已发现有些抗核抗体、抗基底膜抗体、抗甲状已发现有些抗核抗体、抗基底膜抗体、抗甲状腺抗体和抗腺抗体和抗“O”抗体等均属抗体等均属IgD,但活性甚低。,但活性甚低。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血清血清IgE:主要由鼻咽部、支气管、胃肠主要由鼻咽部、支气管、胃肠道等粘膜固有层的浆细胞分泌,为亲细道等粘膜固有层的浆细胞分泌,为亲细胞抗体,能与肥大细胞、嗜碱性粒细

6、胞胞抗体,能与肥大细胞、嗜碱性粒细胞膜上的膜上的FceR结合,产生结合,产生I型变态反应。型变态反应。ELASA:0.10.9mg/L临床意义:临床意义:1.I型变态反应型变态反应 2.IgE型骨髓瘤、寄生虫感染等型骨髓瘤、寄生虫感染等3.慢性肝炎、慢性肝炎、SLE、类风湿性关节炎等。、类风湿性关节炎等。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。l是一种单克隆是一种单克隆B淋巴细胞异常增殖时产生的淋巴细胞异常增殖时产生的IgG分子分子或片段,一般不具有抗体活性。或片段,一般不具有抗体活性。l参考值:参考值:蛋白电泳法,免疫电泳法:阴性蛋白电泳法,免疫电泳法:

7、阴性l意义:意义:1.多发性骨髓瘤(多发性骨髓瘤(MM),占),占35%65%,其,其中中IgG型占型占60%左右;左右;IgA型占型占20%左右;左右;轻链型轻链型占占15%左右;左右;IgD、IgE型罕见。型罕见。2.巨球蛋白血症。巨球蛋白血症。3.重链病(重链病(HCDs)。)。4.半分子病。半分子病。5.恶性淋巴瘤。恶性淋巴瘤。6.良性良性M蛋白血症。蛋白血症。血清血清M蛋白测定蛋白测定(M protein,monoclonal immunoglobulins)文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血清补体测定血清补体测定l补体是具有酶活性的一种

8、不耐热球蛋白,分补体是具有酶活性的一种不耐热球蛋白,分3组:组:9种补体成分(种补体成分(C1C9););B、D、P、H、I因子;补体调节蛋白,如因子;补体调节蛋白,如C1抑制物、抑制物、C4结合结合蛋白、促衰变因子等。蛋白、促衰变因子等。l总补体溶血活性(总补体溶血活性(CH50)测定)测定l参考值参考值试管法:试管法:50000100000U/L意义:意义:增高增高见于急性炎症、急性组织损伤、恶见于急性炎症、急性组织损伤、恶性肿瘤及妊娠。性肿瘤及妊娠。降低降低见于急性肾小球肾炎、见于急性肾小球肾炎、自身免疫性疾病、亚急性感染性心内膜炎、慢自身免疫性疾病、亚急性感染性心内膜炎、慢性肝病、肝硬

9、化、性肝病、肝硬化、AIDS、严重烧伤等。、严重烧伤等。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血清补体测定血清补体测定l血清血清C3:主要由巨噬细胞和肝脏合成,在经典主要由巨噬细胞和肝脏合成,在经典激活途径与旁路激活途径中发挥重要作用。激活途径与旁路激活途径中发挥重要作用。参考值:参考值:免疫比浊法免疫比浊法0.851.70g/L增高增高作为急性时相蛋白,在急性炎症、传染病作为急性时相蛋白,在急性炎症、传染病早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、抑制物排斥早期、急性组织损伤、恶性肿瘤、抑制物排斥反应时增高。反应时增高。降低降低补体合成能力降低;合成原补体合成能力

10、降低;合成原料不足;消耗或丢失太多;先天性补体缺乏。料不足;消耗或丢失太多;先天性补体缺乏。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血清补体测定血清补体测定l血清血清C4测定:测定:由肝脏、吞噬细胞合成,由肝脏、吞噬细胞合成,参与补体的经典激活途径。参与补体的经典激活途径。l参考值:参考值:单向免疫扩散法:单向免疫扩散法:0.197+/-0.109/L。l临床意义临床意义基本与基本与C3相似,降低还见于多相似,降低还见于多发性骨髓瘤、发性骨髓瘤、IgA肾病、遗传性肾病、遗传性C4缺乏症缺乏症等。等。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请

11、联系网站或本人删除。血清补体测定血清补体测定l补体补体C1q测定测定l参考值:参考值:0.1790.04g/Ll临床意义:临床意义:与与C3相似,降低还见于活动相似,降低还见于活动性混合性结缔组织病、重度营养不良、性混合性结缔组织病、重度营养不良、肾病综合征、重度联合免疫缺陷病等。肾病综合征、重度联合免疫缺陷病等。lB因子测定因子测定-C3激活剂前体激活剂前体文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。细胞免疫检查细胞免疫检查l淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测lT淋巴细胞表面标志物检测:淋巴细胞表面标志物检测:E玫瑰花玫瑰花形成试验、免疫荧光法(形

12、成试验、免疫荧光法(IFA)、荧光激)、荧光激活细胞分类法(活细胞分类法(FACS)、免疫金银法以)、免疫金银法以及免疫酶染色法等。及免疫酶染色法等。lE玫瑰花形成试验玫瑰花形成试验SRBC+CD2l参考值参考值Et64.4%6.7%l免疫荧光法免疫荧光法文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。T淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测l意义意义可用于可用于T淋巴细胞计数,淋巴细胞计数,T淋巴细胞亚淋巴细胞亚群的分类以及判断群的分类以及判断T淋巴细胞的活化程度。淋巴细胞的活化程度。lCD3分子表达于所有成熟分子表达于所有成熟T淋巴细胞的表面,淋巴细胞的

13、表面,是总是总T淋巴细胞的重要标志,淋巴细胞的重要标志,CD3+常见于甲状常见于甲状腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无腺功能亢进、淋巴细胞性甲状腺炎、重症肌无力以及器官移植后排斥反应。力以及器官移植后排斥反应。CD3+主要见于主要见于免疫缺陷病,如免疫缺陷病,如AIDS、先天性胸腺发育不全、先天性胸腺发育不全综合征以及联合免疫缺陷病等。亦可见于恶性综合征以及联合免疫缺陷病等。亦可见于恶性肿瘤、肿瘤、SLE、免疫抑制剂治疗等。、免疫抑制剂治疗等。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。T细胞分化抗原测定l白细胞分化抗原(白细胞分化抗原(clusterd

14、ifferentiation,CD)lCD3代表总代表总T淋巴细胞,淋巴细胞,CD4是是辅助、诱导辅助、诱导T细胞的标细胞的标志,志,CD8是抑制、杀伤性是抑制、杀伤性T细胞的标志。应用单抗和荧细胞的标志。应用单抗和荧光标记二抗反应在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数光标记二抗反应在荧光显微镜下或流式细胞仪中计数CD的百分率。的百分率。l参考值参考值:免疫荧光法(:免疫荧光法(IFA):):CD3为为63.1%10.8%;CD4为为42.8%9.5%;CD819.6%5.9%;CD4/CD8为(为(2.20.7)/1。流式细胞术:流式细胞术:CD361%85%;CD428%58%;CD819%48

15、%;CD4/CD80.92.0/1。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。T细胞分化抗原测定细胞分化抗原测定l临床意义临床意义lCD3lCD4+T细胞下降细胞下降常见于某些病毒感染性疾病,如常见于某些病毒感染性疾病,如AIDS、MCV、严重创伤、全身麻醉、大手术、应用、严重创伤、全身麻醉、大手术、应用免疫抑制剂等;免疫抑制剂等;升高升高见于类风湿性关节炎活动期。见于类风湿性关节炎活动期。lCD8+T细胞下降细胞下降常见于类风湿性关节炎、常见于类风湿性关节炎、Sjogren综合综合征、重症肌无力、征、重症肌无力、DM(II型)以及膜型肾小球肾炎等;型)以及

16、膜型肾小球肾炎等;升高升高见于传染性单核细胞增多症急性期、见于传染性单核细胞增多症急性期、MCV以及慢以及慢性乙肝。性乙肝。lCD4+/CD8+比值下降,比值下降,常见于常见于AIDS、瘤型麻风病、恶、瘤型麻风病、恶性肿瘤进行期和复发时。也见于部分感染性疾病如传性肿瘤进行期和复发时。也见于部分感染性疾病如传染性单核细胞增多症、染性单核细胞增多症、MCV、血吸虫病等;、血吸虫病等;增高增高见于见于类风湿性关节炎活动期、类风湿性关节炎活动期、SLE、Sjogren综合征、重症综合征、重症肌无力、膜型肾小球肾炎以及器官移植后排斥反应等。肌无力、膜型肾小球肾炎以及器官移植后排斥反应等。文档仅供参考,不

17、能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。淋巴细胞功能检测淋巴细胞功能检测lT细胞转化试验细胞转化试验l形态学法:形态学法:T细胞转化率细胞转化率60.1%7.6%l3H-TdR掺入法:掺入法:培养淋巴细胞用液体闪乐培养淋巴细胞用液体闪乐烁仪测量,记录每分钟脉冲数(烁仪测量,记录每分钟脉冲数(cpm)。)。lSI(刺激指数)(刺激指数)=PHA刺激管刺激管cpm均值均值/对照管对照管cpm均值均值lSI2为有意义,为有意义,2为淋巴细胞转化率降低。为淋巴细胞转化率降低。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。T细胞转化试验细胞转化试验l

18、临床意义临床意义l判断机体细胞免疫功能水平,降低判断机体细胞免疫功能水平,降低常见常见于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下者,于细胞免疫缺陷或细胞免疫功能低下者,如恶性肿瘤、淋巴瘤、重症结核、肝硬如恶性肿瘤、淋巴瘤、重症结核、肝硬化等。化等。增高增高常见于常见于Down综合征。综合征。l估计疾病的疗效与预后估计疾病的疗效与预后文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。B淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测l表面抗原:表面抗原:CD19、CD20、CD21、CD22和和CD40等等l表面受体:表面受体:B细胞抗原受体(细胞抗原受体(BCR)、细胞因)、细胞

19、因子受体(子受体(CKR)、补体受体()、补体受体(CR)与)与Fc受体受体等。等。lB细胞表面免疫球蛋白(细胞表面免疫球蛋白(BCR,SmIg)是)是B细细胞的特征性表面标志。将荧光标记的抗不同类胞的特征性表面标志。将荧光标记的抗不同类型型Ig的单克隆抗体进行检测,可将的单克隆抗体进行检测,可将B细胞分为细胞分为SmIgG、SmIgM、SmIgA、SmIgD、SmIgE。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。B淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测l参考值:参考值:免疫荧光法(羊抗人)(以携带该标免疫荧光法(羊抗人)(以携带该标志的细胞百分数表示

20、)志的细胞百分数表示)lSmIg+细胞总数:均值细胞总数:均值21%(16%28%)lSmIgG+细胞:均值细胞:均值7.1%(4%13%)lSmIgM+细胞:均值细胞:均值8.9%(7%13%)lSmIgA+细胞:细胞:均值均值2.2%(1%4%)lSmIgD+细胞:细胞:均值均值6.2%(5%8%)lSmIgE+细胞:细胞:均值均值0.9%(0%1.5%)文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。B淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测l临床意义临床意义lSmIg+细胞增高细胞增高:常与常与B细胞恶性增殖有细胞恶性增殖有关,主要见于慢淋、毛细胞白血

21、病以及关,主要见于慢淋、毛细胞白血病以及巨球蛋白血症等。巨球蛋白血症等。lSmIg+细胞减低:细胞减低:主要与体液免疫缺陷有主要与体液免疫缺陷有关,常见于性联丙种球蛋白缺乏症、严关,常见于性联丙种球蛋白缺乏症、严重联合免疫缺陷病等。重联合免疫缺陷病等。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。B淋巴细胞表面标志物检测淋巴细胞表面标志物检测lB细胞分化抗原细胞分化抗原CD19、CD20、CD21、CD22测定测定l参考值:参考值:FACS:CD19+细胞细胞11.74%3.73%l临床意义临床意义CD19为全部为全部B细胞共有的表面细胞共有的表面标志,标志,增

22、高增高见于见于B细胞系统的恶性种瘤,细胞系统的恶性种瘤,减低减低见于体液免疫缺陷病。见于体液免疫缺陷病。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。NK细胞活性测定细胞活性测定lNK细胞细胞能直接杀伤效应细胞,具有抗肿瘤、能直接杀伤效应细胞,具有抗肿瘤、抗感染和和免疫调节等功能,亦参与移植物排抗感染和和免疫调节等功能,亦参与移植物排斥反应、自身免疫病和超敏反应的发生。斥反应、自身免疫病和超敏反应的发生。lLDH释放法释放法l参考值参考值细胞毒指数:细胞毒指数:27.5%52.5%l51Cr释放法释放法l参考值参考值NK细胞活性(自然杀伤率):细胞活性(自然杀伤

23、率):47.6%76.8%文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。NK细胞活性测定细胞活性测定l临床意义临床意义l活性升高活性升高常见于病毒感染的早期,常见于病毒感染的早期,Down综合征,接综合征,接受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增强剂治疗患受器官移植、骨髓移植的患者等及免疫增强剂治疗患者。者。l活性降低活性降低常见于恶性肿瘤、重症联合免疫缺陷病,常见于恶性肿瘤、重症联合免疫缺陷病,AIDS和免疫抑制剂治疗者等。和免疫抑制剂治疗者等。l肿瘤疗效观察及预后评价肿瘤疗效观察及预后评价l免疫调节功能免疫调节功能NK细胞可释放细胞可释放INF-、INF-和和

24、GM-CSF等细胞因子。等细胞因子。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。病毒性肝炎的实验诊断病毒性肝炎的实验诊断我国属病毒性肝炎高发区,全国有肝炎病人我国属病毒性肝炎高发区,全国有肝炎病人2700万万人,每年新发病例人,每年新发病例900万人,万人,HBsAg携带者达一亿二千携带者达一亿二千万人。慢性肝炎中有万人。慢性肝炎中有5070有活性性病毒复制,有活性性病毒复制,30发展为肝硬化,发展为肝硬化,510发展为肝癌,故我国又是原发展为肝癌,故我国又是原发性肝细胞癌的高发国家,慢性发性肝细胞癌的高发国家,慢性HBV携带者患肝癌危携带者患肝癌危险性较非携

25、带者高险性较非携带者高100倍。倍。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。HBV的形态结构的形态结构形态:形态:球形颗粒,直径约球形颗粒,直径约42nm外膜:外膜:厚约厚约7nm,HBsAg+脂类脂类内核(核衣壳):内核(核衣壳):直径直径27nm,HBcAg、DNAP、病毒病毒DNA、少量来源于宿主的磷酸激酶、少量来源于宿主的磷酸激酶文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。HBV在血清中的存在形式在血清中的存在形式完整的病毒颗粒完整的病毒颗粒(Dane颗粒颗粒),如前述,能复制,有传染,如前述,能复制,有传染 性;

26、性;乙肝表面抗原颗粒,为乙肝表面抗原颗粒,为22 nm的小球型颗粒,由的小球型颗粒,由HBsAg和脂类组成,不含和脂类组成,不含DNA,不能复制,不能复制,不具有传染性不具有传染性*,数,数量最多;量最多;管型颗粒,长管型颗粒,长30-40 nm的,由的,由HBsAg和脂类组成,和脂类组成,不含不含DNA,不能复制,不能复制,不具有传染性不具有传染性*,血清中数量最少。,血清中数量最少。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。HBV的基因结构的基因结构 HBV基因组由一个双链缺口环型基因组由一个双链缺口环型DNA组成,约组成,约有有3,200个核苷酸,含有

27、个核苷酸,含有4个开放读码框个开放读码框(ORF),分,分别为别为ORF S/PreS、ORF C、ORF P、和、和ORF X,分别编码外膜蛋白分别编码外膜蛋白(根据起始位点不同分别为根据起始位点不同分别为HBsAg、前、前S1、前、前S2)、核壳蛋白、核壳蛋白(HBcAg、HBeAg)、DNA聚合酶和聚合酶和X蛋白蛋白(X抗原,抗原,HBxAg)。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。基因型基因型1979年年 第一个第一个HBV DNA全序列全序列1988年年 日本学者将日本学者将HBV分为分为A、B、C、D四个基因型。四个基因型。(Okamoto

28、H,et al.J Gen Virol,1988;69:2575)1992年年 增加增加E、F两型两型 (Norder H,et al.Virol,1992;73:3141)临床意义临床意义 不同的基因型可能致病性不同,我国以不同的基因型可能致病性不同,我国以B、C型为主,台型为主,台湾发现:湾发现:50岁以上的肝硬化和肝细胞癌的患者岁以上的肝硬化和肝细胞癌的患者C型较多,而型较多,而50岁以下的肝细胞癌患者岁以下的肝细胞癌患者B型较多型较多(Kao JH,et al.Gastroenterology,2000;118:554)。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网

29、站或本人删除。目前实验室常用的至少有四对抗原抗体系统:目前实验室常用的至少有四对抗原抗体系统:HBsAg和抗和抗HBsHBcAg和抗和抗HBcHBeAg和抗和抗HBePre-S2和抗和抗Pre-S2。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。HBsAg阳性的意义阳性的意义(1)HBV感染的潜伏期;感染的潜伏期;(2)乙型肝炎急性期;)乙型肝炎急性期;(3)慢性或迁延性乙型肝炎活动期;)慢性或迁延性乙型肝炎活动期;(4)肝炎后肝硬化或原发性肝癌;)肝炎后肝硬化或原发性肝癌;(5)无症状)无症状HBsAg长期携带者。长期携带者。(6)HbsAg阴性不能完全排除慢

30、性乙型肝炎。阴性不能完全排除慢性乙型肝炎。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。注意注意!一、血清分离不佳或用肝素抗凝血常导致一、血清分离不佳或用肝素抗凝血常导致HBsAg假阳性假阳性 ;二、二、HBsAg假阴性假阴性 常见的原因为:常见的原因为:5%的急性感染者肝炎的急性感染者肝炎症状出现后仍阴性,极少数的慢性感染者也为症状出现后仍阴性,极少数的慢性感染者也为HBsAg阴性,这阴性,这种情况需要检测抗种情况需要检测抗HBc-IgM及及HBV DNA;S基因突变导致基因突变导致HBsAg的氨基酸结构改变,由于多数商用试剂盒检测系统采用的氨基酸结构改变,由

31、于多数商用试剂盒检测系统采用的为多克隆抗体检测的为多克隆抗体检测HBsAg的的a决定簇,这一区域的点突变即决定簇,这一区域的点突变即可导致临界测定值或阴性结果;可导致临界测定值或阴性结果;由于慢性病毒携带者(低水由于慢性病毒携带者(低水平平HBsAg携带者)或携带者)或HBV感染潜伏期,感染潜伏期,HBsAg浓度低于检测浓度低于检测水平的下限。水平的下限。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。血清抗血清抗HBs检测的意义检测的意义(1)在在乙乙型型肝肝炎炎感感染染率率调调查查时时,HBsAg、抗抗-HBs和和抗抗-HBc均均为为感感染染率率的的指指标标。

32、在在这这三三项项指指标标中中,只只要要其其中中一一项项阳阳性性,表示受过表示受过HBV感染。感染。(2)抗抗HBs是是对对HBV免免疫疫的的指指标标,抗抗HBs阳阳性性率率和和滴度表示人群的免疫状况。滴度表示人群的免疫状况。(3)乙乙型型肝肝炎炎的的诊诊断断和和鉴鉴别别诊诊断断,在在HBV感感染染后后3个个月月,血血清清中中出出现现抗抗HBs。采采集集双双份份血血清清(急急性性期期和和恢恢复复期期)同同时时检检测测,抗抗HBs阳阳转转,或或恢恢复复期期与与急急性性期期比比较较,抗抗体体滴滴度有度有4倍或倍或4倍以上增长倍以上增长,表示这次感染为表示这次感染为HBV感染。感染。(4)乙乙型型肝肝

33、炎炎疫疫苗苗免免疫疫效效果果考考察察。在在疫疫苗苗免免疫疫前前后后,采采集集血血清清检检测测抗抗HBs,如如抗抗HBs阳阳转转或或抗抗体体滴滴度度明明显显提提高高,表示疫苗免疫效果良好。否则免疫效果不佳。表示疫苗免疫效果良好。否则免疫效果不佳。(5)对对乙乙型型肝肝炎炎预预后后的的判判断断。抗抗HBs的的出出现现表表示示疾疾病病处于恢复期,预后较佳。处于恢复期,预后较佳。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。同时可检出抗同时可检出抗HBs及及HBsAg见于以下几种情形:见于以下几种情形:1.急性急性HBV感染时一过性存在,两者浓度均很低(以感染时一过性存

34、在,两者浓度均很低(以免疫复合物的形式出现),以后再采血检测仅有抗免疫复合物的形式出现),以后再采血检测仅有抗HBs;2.前后或同时感染两种亚型前后或同时感染两种亚型HBV,HBsAg短暂或持续短暂或持续存在反映其中一种亚型感染,抗存在反映其中一种亚型感染,抗HBs及及HBsAg同时同时检出通常要持续很久,且浓度均很高;检出通常要持续很久,且浓度均很高;3.抗抗HBs假阳性;假阳性;4.编码编码HBsAg的基因变异使得的基因变异使得HBsAg抗原性改变,抗原性改变,原型抗原型抗HBs不能将其清除。不能将其清除。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。抗抗抗

35、抗HBcHBc检测的意义检测的意义检测的意义检测的意义(1 1)HBcAgHBcAg是是是是HBVHBV感染和复制的标志之一,高滴度的抗感染和复制的标志之一,高滴度的抗感染和复制的标志之一,高滴度的抗感染和复制的标志之一,高滴度的抗HBcHBc表示表示表示表示HBVHBV现症感染,低滴度的抗现症感染,低滴度的抗现症感染,低滴度的抗现症感染,低滴度的抗HBcHBc表示过去感染,常表示过去感染,常表示过去感染,常表示过去感染,常与抗与抗与抗与抗HBsHBs并存。并存。并存。并存。(2 2)高滴度的抗高滴度的抗高滴度的抗高滴度的抗HBc-IgMHBc-IgM是诊断急性肝炎的金指标,低度是诊断急性肝炎

36、的金指标,低度是诊断急性肝炎的金指标,低度是诊断急性肝炎的金指标,低度的抗的抗的抗的抗HBc-IgMHBc-IgM表示慢性肝炎急性发作。表示慢性肝炎急性发作。表示慢性肝炎急性发作。表示慢性肝炎急性发作。(3 3)血中血中血中血中HBcIgAHBcIgA的滴度与病毒复制不相关,与肝组织病的滴度与病毒复制不相关,与肝组织病的滴度与病毒复制不相关,与肝组织病的滴度与病毒复制不相关,与肝组织病变有明显的相关性,随病情恢复,变有明显的相关性,随病情恢复,变有明显的相关性,随病情恢复,变有明显的相关性,随病情恢复,HBcIgAHBcIgA消失,持续不降提消失,持续不降提消失,持续不降提消失,持续不降提示慢

37、性化和病情进展。示慢性化和病情进展。示慢性化和病情进展。示慢性化和病情进展。(4 4)在献血员的筛选中是一项辅助指标。从血源血中检出在献血员的筛选中是一项辅助指标。从血源血中检出在献血员的筛选中是一项辅助指标。从血源血中检出在献血员的筛选中是一项辅助指标。从血源血中检出高滴度的抗高滴度的抗高滴度的抗高滴度的抗HBc,HBc,表示有传染性表示有传染性表示有传染性表示有传染性,此血源不能作输血用。此血源不能作输血用。此血源不能作输血用。此血源不能作输血用。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。注意注意!A、临界阳性一般是假阳性,是由于临界阳性一般是假阳性,是

38、由于IgM型引起的交叉反应。型引起的交叉反应。B、抗抗HBc阴性而阴性而HBsAg阳性一般发生在免疫缺陷病例,这时存阳性一般发生在免疫缺陷病例,这时存 HBV复制的其他标志如复制的其他标志如 HBeAg及高滴度的及高滴度的HBV DNA。C、对抗对抗HBc单独阳性,排除假阳性后,美国单独阳性,排除假阳性后,美国CDC有以下解释:有以下解释:急性感染后的恢复早期(窗期)急性感染后的恢复早期(窗期)在在HBV急性感染消退时,急性感染消退时,HBsAg减少甚至消失,抗减少甚至消失,抗HBs尚未出现,抗尚未出现,抗HBc是唯一能检出是唯一能检出 的特异性指标,此时抗的特异性指标,此时抗HBc IgM也

39、为阳性。也为阳性。被动转移:被动转移:HBsAg携带者母亲所生的婴儿可因母体抗体被携带者母亲所生的婴儿可因母体抗体被 动转移(抗动转移(抗HBc可通过胎盘)而呈现抗可通过胎盘)而呈现抗HBc单独阳性。单独阳性。远期感染伴抗远期感染伴抗 HBs消失,这种情况通常在感染后多年才会消失,这种情况通常在感染后多年才会 发生,且相当少见(发生,且相当少见(0.5%)。)。远期感染伴有低水平远期感染伴有低水平HBsAg。HDV重复感染继发重复感染继发HBsAg产生下降产生下降文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。抗抗HBc始终不出现或延迟出现者占一定比例,可能系始终

40、不出现或延迟出现者占一定比例,可能系1.与抗原复合与抗原复合2.种族差异种族差异3.免疫缺陷,如化疗后免疫缺陷,如化疗后4.基因变异基因变异文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。HBeAg:A.传染性:传染性:HBeAg是临床上表示病毒复制较为实用的指标,因是临床上表示病毒复制较为实用的指标,因此也反映了血清的感染性。慢性此也反映了血清的感染性。慢性HBsAg携带者中,携带者中,HBeAg及及HBV-DNA检测可以用来评估其传染危险性,特别是对医务界的检测可以用来评估其传染危险性,特别是对医务界的HBsAg携携带者,非常有必要了解他是否会传染给他的病人,

41、带者,非常有必要了解他是否会传染给他的病人,90%HBeAg阳性阳性HBsAg携带者可以传染给她们的新生儿,而携带者可以传染给她们的新生儿,而HBeAg阴性或抗阴性或抗HBe阳阳性的孕妇中只有性的孕妇中只有10%会传染给婴儿。会传染给婴儿。B.预后:急性期预后:急性期HBeAg的消失通常伴随的消失通常伴随ALT的降低,预示着疾病的降低,预示着疾病的好转;的好转;HBeAg持续阳性超过持续阳性超过12个星期提示个星期提示HBV感染趋向慢性;感染趋向慢性;HBeAg阳性的无症状者很少见;如果在慢性感染期阳性的无症状者很少见;如果在慢性感染期HBeAg阳性,一阳性,一般为慢性急性化或病人免疫缺陷,这

42、种情况的病人如果又出现般为慢性急性化或病人免疫缺陷,这种情况的病人如果又出现HBeAg的消失,则被认为是预后好的信号。的消失,则被认为是预后好的信号。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。注意注意!前前C区基因变异(如区基因变异(如1896位位gua变为变为-arg导致终止密码导致终止密码子的出现干扰了子的出现干扰了HBeAg的翻译)导致不能生成和分泌的翻译)导致不能生成和分泌HBeAg,血清中,血清中HBeAg阴性,但这种突变并不影响乙肝病毒的复制,阴性,但这种突变并不影响乙肝病毒的复制,仍可形成完整的病毒颗粒,该种情况下尽管检测不到仍可形成完整的病毒

43、颗粒,该种情况下尽管检测不到HBeAg,慢性,慢性HBV感染炎症反应也相当强。感染炎症反应也相当强。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。抗抗-HBe:A、反映血清感染性:通常情况下反映血清感染性:通常情况下HBsAg(+)、抗)、抗HBe(+)病例的传染性较低,但有部分病例尽管抗病例的传染性较低,但有部分病例尽管抗HBe(+)也具有很高的传)也具有很高的传染性,因此,要评价染性,因此,要评价HBeAg阴性血清的传染性,推荐用检测阴性血清的传染性,推荐用检测HBV DNA,1/3的病例能达到大于的病例能达到大于106基因组基因组/mL;B、监视急性和慢性

44、、监视急性和慢性HBV感染:血清感染:血清HBeAg消失、抗消失、抗HBe出现出现对监视急慢性对监视急慢性HBV感染很有诊断价值,特别是抗感染很有诊断价值,特别是抗HBe出现更有预见价出现更有预见价值,在干扰素治疗中出现表明疾病状况的改善;值,在干扰素治疗中出现表明疾病状况的改善;C、预后:抗、预后:抗 HBe阳转出现在阳转出现在HBeAg阴转后早期(阴转后早期(2周内),可周内),可能预示急性肝炎恢复顺利;如出现在晚期(能预示急性肝炎恢复顺利;如出现在晚期(HBeAg阴转后阴转后6周以上)周以上)或不出现抗或不出现抗HBe,则提示病程迁延,可能发展为慢性迁延性肝炎或慢,则提示病程迁延,可能发

45、展为慢性迁延性肝炎或慢性活动性肝炎。性活动性肝炎。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。注意注意!HBeAg(-)/抗抗HBe(-)的慢性)的慢性HBV感染有不同感染有不同的感染状态:有的表示复制病毒已清除,但无抗的感染状态:有的表示复制病毒已清除,但无抗HBe应应答;有的复制病毒一时减少,答;有的复制病毒一时减少,HBeAg消失后可再现;消失后可再现;有的由于前有的由于前C区变异不能编码合成区变异不能编码合成HBeAg。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。前前S2抗原及抗体抗原及抗体 pre-S2抗原检测可作为

46、判断抗原检测可作为判断HBV复制的一项指复制的一项指标,同时可对标,同时可对HBV复制作出定量的推断,动态测定复制作出定量的推断,动态测定pre-S2抗原的变化,有助于急、慢性乙型肝炎的治抗原的变化,有助于急、慢性乙型肝炎的治疗预后的判断。疗预后的判断。抗抗pre-S2在急性乙型肝炎恢复早期出现,并发在急性乙型肝炎恢复早期出现,并发挥其保护性抗体的作用,对观察乙型肝炎病情进展、挥其保护性抗体的作用,对观察乙型肝炎病情进展、预后及疫苗免疫效果均有一定的作用。预后及疫苗免疫效果均有一定的作用。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。常规检测常规检测HBV抗原抗

47、体的基本解释抗原抗体的基本解释1.HBsAg 急慢性急慢性HBV感染;可能具有传染性;浓度降低表明感染;可能具有传染性;浓度降低表明感感 染恢复染恢复2.HBeAg 反映反映HBV复制;有传染性;其消失表明急慢性复制;有传染性;其消失表明急慢性HBV感染正在恢复感染正在恢复3.抗抗-HBs 感染后免疫;对疫苗的免疫应答感染后免疫;对疫苗的免疫应答4.抗抗-HBe 表示表示HBV低复制或不复制低复制或不复制5.抗抗-HBc 低滴度表示过去感染,高滴度表示现行感染低滴度表示过去感染,高滴度表示现行感染6.抗抗HBc-IgM 高滴度是诊断急性高滴度是诊断急性HBV感染最好的指标,监视感染最好的指标,

48、监视慢性慢性HBV感染。感染。文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。不同厂家和方法不同厂家和方法HBV标志物测定的比较标志物测定的比较HBsAg抗抗-HBsHBeAg 抗抗-HBe抗抗-HBc进口进口349222742A349121837B348131437C328331537n=44PCR:+26-18前前S1:+20-24抗前抗前S1:+12-32文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。国产国产“两对半两对半”试剂与进口试剂比较(阳性符合率试剂与进口试剂比较(阳性符合率%)A B C HBsAg 100(34/3

49、4)100(34/34)94.1(32/34)抗抗-HBs 100(9/9)88.9(8/9)88.9(8/9)HBeAg 54.5(12/22)59.1(13/22)(33/22)抗抗-HBe 66.7(18/27)51.9(14/27)55.6(15/27)抗抗-HBc 88.1(37/42)88.1(37/42)88.1(37/42)文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。乙型肝炎病毒血清标记物检测乙型肝炎病毒血清标记物检测lHBeAgHBeAg,Anti-HBeAnti-HBe或抗或抗HbeHbelHBeAgHBeAg,Anti-HBcAnti-H

50、Bc或抗或抗HbcHbc 测定方法:测定方法:ELASAELASA,RIARIAHBsAgHBsAg,Anti-Anti-HBsHBs或抗或抗HBsHBs文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模仿;如有不当之处,请联系网站或本人删除。乙型肝炎病毒血清标记物检测乙型肝炎病毒血清标记物检测lHBsAg(+)表示肝中有表示肝中有HBV见于:见于:乙型肝炎潜伏期和急性期。乙型肝炎潜伏期和急性期。慢性迁延性肝炎,慢性活动性肝炎,肝硬化,慢性迁延性肝炎,慢性活动性肝炎,肝硬化,肝癌。肝癌。慢性慢性HBsAg携带者。携带者。Anti-HBs或抗或抗HBs:中和抗体中和抗体文档仅供参考,不能作为科学依据,请勿模

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