二聚体检测和临床应用.ppt

二聚体二聚体检测和和临床床应用用内容提要内容提要内容提要内容提要一、概述一、概述二、二、D-二聚体的检测二聚体的检测三、三、D-二聚体的临床应用二聚体的临床应用四、四、D-二聚体的结果解释二聚体的结果解释PPT模板下载：行业PPT模板：节日PPT模板：PPT素材下载：PPT背景图片：PPT图表下载：优秀PPT下载：PPT教程：Word 教程：Excel教程：资料下载：PPT课件下载：范文下载：试卷下载：教案下载：概 述D-DimersD-Dimers ：是纤维蛋白单体经活化因子：是纤维蛋白单体经活化因子XIIIXIII交联后，交联后，再经纤溶酶水解所产生的一种特异性降解产物再经纤溶酶水解所产生的一种特异性降解产物。D-D-二聚体来源于纤溶酶溶解的交联纤维蛋白凝块，是二聚体来源于纤溶酶溶解的交联纤维蛋白凝块，是一个特异性的纤溶过程标记物。一个特异性的纤溶过程标记物。概述在凝血过程中，凝血酶使纤维蛋白原水解，释放出纤在凝血过程中，凝血酶使纤维蛋白原水解，释放出纤维蛋白维蛋白FPAFPA和和FPBFPB，然后形成纤维蛋自单体（，然后形成纤维蛋自单体（SFMSFM），），SFMYSFMY链之间形成链之间形成（谷氨酰胺）谷氨酰胺）赖氨酸交联，然赖氨酸交联，然后形成纤维蛋白。这种后形成纤维蛋白。这种 链之间的共价交联是形成链之间的共价交联是形成DDDD的结构基础。交联纤维蛋白在溶解过程中，释放出的结构基础。交联纤维蛋白在溶解过程中，释放出XX、YY、DD、EE等碎片，这些碎片进一步降解等碎片，这些碎片进一步降解为最小的片段为最小的片段DDDD、DD/EDD/E、YD/YDYD/YD、YY/DDYY/DD等复合等复合物。物。DDDD分子量约分子量约62000D62000D，在体内半衰期，在体内半衰期3h3h，主要经肾脏，主要经肾脏排泄。排泄。D-Dimer的产生概 述D-二聚体的特点二聚体的特点1 1 敏感性高敏感性高:92%-100%:92%-100%当血浆当血浆D-D-二聚体低于某一临界值时（通常为），可基本除外二聚体低于某一临界值时（通常为），可基本除外急性急性PTE(PTE(肺血栓栓塞症肺血栓栓塞症 )，其阴性预测值大于，其阴性预测值大于90%90%。2 D-Dimer2 D-Dimer特异性低：老年、孕妇、外周血管疾病、肿瘤和感染性特异性低：老年、孕妇、外周血管疾病、肿瘤和感染性疾病等可增高。疾病等可增高。二、二、D-二聚体的检测方法二聚体的检测方法检测方法检测方法乳胶凝集法（乳胶凝集法（LATEX）酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验(ELISA)免疫比浊法（免疫比浊法（Latest）胶体金免疫渗透法胶体金免疫渗透法乳胶凝集法乳胶凝集法普通乳胶颗粒吸附普通乳胶颗粒吸附D-二聚体特异性抗体二聚体特异性抗体,与血浆中与血浆中D-二聚二聚体结合后形成肉眼可见的凝集块时体结合后形成肉眼可见的凝集块时,判定为阳性结果判定为阳性结果mg/Lmg/L),将标本倍比稀释将标本倍比稀释,则可进行半定量测定则可进行半定量测定,结果为阳性的最大稀结果为阳性的最大稀释度乘以释度乘以0.5即为检测结果。即为检测结果。胶乳凝集法检测胶乳凝集法检测D-二聚体具有操作简单、快速的特点，适二聚体具有操作简单、快速的特点，适用于急诊快速检测。但采用定性或半定量方式报告，结果差用于急诊快速检测。但采用定性或半定量方式报告，结果差异大，不适用于大批量检测。异大，不适用于大批量检测。酶联免疫吸附试验酶联免疫吸附试验将包被抗将包被抗D-D-二聚体抗体与待测血浆中的二聚体抗体与待测血浆中的D-D-二聚体结合，二聚体结合，加入酶标抗体后形成复合物，后者与底物作用呈现显色反加入酶标抗体后形成复合物，后者与底物作用呈现显色反应，应，492 nm 492 nm 处测得的吸光度值与待测血浆处测得的吸光度值与待测血浆D-D-二聚体含量成二聚体含量成正比。正比。该方法对血栓栓塞有较高的敏感性和阴性预测值以及中该方法对血栓栓塞有较高的敏感性和阴性预测值以及中等的特异性。但检测时间长，不适用于急诊快速检测。等的特异性。但检测时间长，不适用于急诊快速检测。快速酶联免疫吸附试验具有快速、定量、敏感性高和适快速酶联免疫吸附试验具有快速、定量、敏感性高和适合个体检测等特点合个体检测等特点,近年来发展较快近年来发展较快,其中其中VIDAS DD VIDAS DD 法是法是目前国内外临床研究最多的一种方法目前国内外临床研究最多的一种方法免疫比浊法免疫比浊法每个乳胶微粒直径每个乳胶微粒直径(0.1(0.1 0.02)0.02)m m 吸附吸附2 2 个个D-D-二聚体特异性抗二聚体特异性抗体体,此颗粒的直径小于检测光束波长此颗粒的直径小于检测光束波长(540nm),(540nm),因而当光束穿过乳因而当光束穿过乳胶颗粒悬液时仅有微量的光波被吸收。溶液中的待测抗原胶颗粒悬液时仅有微量的光波被吸收。溶液中的待测抗原(D-(D-二二聚体聚体)与胶乳颗粒吸附抗体结合成聚合体与胶乳颗粒吸附抗体结合成聚合体,此聚合体的直径远大此聚合体的直径远大于入射光波长于入射光波长,因而入射光被吸收的量大大增加因而入射光被吸收的量大大增加,增加的吸光度增加的吸光度可反映待测抗原在受检样品的含量可反映待测抗原在受检样品的含量该方法检测快速、稳定、灵敏度高，合理运用可为临床提供该方法检测快速、稳定、灵敏度高，合理运用可为临床提供准确可靠的数据准确可靠的数据胶体金免疫渗透法胶体金免疫渗透法 胶体金免疫渗透法为包被有抗胶体金免疫渗透法为包被有抗D-D-二聚体单克隆二聚体单克隆抗体的多孔薄膜，单抗上偶朕着胶体金。当待检标抗体的多孔薄膜，单抗上偶朕着胶体金。当待检标本中的本中的D-D-二聚体与单抗结合后所产生的红色强度在二聚体与单抗结合后所产生的红色强度在540 nm 540 nm 由仪器识别，强度与血浆中由仪器识别，强度与血浆中D-D-二聚体水平成二聚体水平成比例，可定量检测比例，可定量检测。胶体金免疫渗透法采用胶体金免疫渗透法采用D-D-二聚体特异性抗体捕二聚体特异性抗体捕获血浆中的获血浆中的D-D-二聚体，具有简便、快速、定量的优二聚体，具有简便、快速、定量的优点，可及时检测单个或成批标本，特别适用于点，可及时检测单个或成批标本，特别适用于D-D-二二聚体的急诊检测聚体的急诊检测。三、D-二聚体的临床应用二聚体的临床应用临床应用临床应用深静脉血栓、肺栓塞（早期排除诊断）深静脉血栓、肺栓塞（早期排除诊断）DICDIC的早期诊断和动态监测的早期诊断和动态监测溶栓治疗评估及血栓复发的监测溶栓治疗评估及血栓复发的监测外科手术后的血栓监测外科手术后的血栓监测妊高症、先兆子痫的监测妊高症、先兆子痫的监测恶性肿瘤、白血病恶性肿瘤、白血病 早期识别、抗凝治疗早期识别、抗凝治疗肝脏疾病（重症肝炎、肝硬化）肝脏疾病（重症肝炎、肝硬化）肾脏疾病（肾病综合征、肾移植术后）肾脏疾病（肾病综合征、肾移植术后）心血管疾病病情评估心血管疾病病情评估脑梗死鉴别和治疗监测脑梗死鉴别和治疗监测 1、DVT和和PE的排除的排除 D-D-二二聚聚体体检检测测最最大大的的临临床床价价值值是是用用于于排排除除DVTDVT和和PEPE。循循证证医医学学证证实实其其VTEVTE和和PEPE的排除性诊断价值的排除性诊断价值。目目前前临临床床结结合合验验前前概概率率（pretest pretest probability,probability,PTPPTP）同同时时检检测测患患者者D-D-二二聚聚体体浓浓度度，来来排排除除DVTDVT和和PEPE。当当PTPPTP评评估估为为低低、中中风风险险，D-D-二二聚聚体体检检测测cutoffcutoff值值为为阴阴性性（）,即即可可排排除除DVTDVT和和PEPE，无需再做进一步的影像学检查无需再做进一步的影像学检查。DVT和和PE的排除的排除DVT和和PE的排除的排除 研究发现静脉造影证实为研究发现静脉造影证实为DVT DVT 的患者血浆的患者血浆D-D-二聚体二聚体水平均升高水平均升高,若采用以若采用以D D 二聚体而为阳性二聚体而为阳性,则检查的敏感则检查的敏感性和特异性分别为性和特异性分别为95%95%和和77%,77%,阴性预测值为阴性预测值为92%92%。文献报道检测文献报道检测D-D-二聚体的结果二聚体的结果(以以0.5ug/ml0.5ug/ml为阳性界值为阳性界值)对段以上肺栓塞的敏感性为对段以上肺栓塞的敏感性为98%98%、阴性预期值、阴性预期值99%99%，段以，段以下肺栓塞的敏感性为下肺栓塞的敏感性为76%76%、阴性预期值为、阴性预期值为94%94%。2、DIC 早期诊断和动态监测早期诊断和动态监测 DIC DIC 是一种复杂的病理生理过程和严重的获得性、是一种复杂的病理生理过程和严重的获得性、全身性血栓全身性血栓-出血综合征。其特点是体内凝血和抗凝机制出血综合征。其特点是体内凝血和抗凝机制失衡导致失衡导致血小板聚集，病理性凝血酶生成，纤维蛋白在血小板聚集，病理性凝血酶生成，纤维蛋白在微血管沉积，形成广泛性微血栓微血管沉积，形成广泛性微血栓和继发性纤维蛋白溶解和继发性纤维蛋白溶解亢进。亢进。DIC 早期诊断和动态监测早期诊断和动态监测 血液高凝状态血液高凝状态广泛血管内凝血广泛血管内凝血 消耗凝血因子消耗凝血因子（I II VIII X XII）凝血机制障碍凝血机制障碍 出血倾向出血倾向PLT粘粘附聚集附聚集PLT减少减少消耗消耗继发性继发性纤亢进纤亢进Fib降解降解FDP 低纤维蛋低纤维蛋白质血症白质血症血液低凝状态血液低凝状态抗凝作用抗凝作用促凝物质入血或其它因素促凝物质入血或其它因素DIC 早期诊断和动态监测早期诊断和动态监测 作为继发性纤溶亢进的标志性物质，作为继发性纤溶亢进的标志性物质，D-D-二聚体在二聚体在DICDIC的诊断和病程监测上具有良好的应用价值。在的诊断和病程监测上具有良好的应用价值。在DICDIC形成早期即有形成早期即有D-D-二聚体升高，而且随病程的发展，二聚体升高，而且随病程的发展，D-D-二聚体可持续升高达二聚体可持续升高达1010倍以上。因此，倍以上。因此，D-D-二聚体可作为二聚体可作为DICDIC早期诊断和病程监测的主要指标。早期诊断和病程监测的主要指标。D-D-二聚体与二聚体与FDPFDP同时测定，可大大提高其诊断效率。同时测定，可大大提高其诊断效率。DIC 早期诊断和动态监测早期诊断和动态监测血小板计数：血小板计数：100109/L100109/L，或进行性下降，或进行性下降血浆纤维蛋白原：血浆纤维蛋白原：1.5 g/L 4.0 g/L,4.0 g/L,或进行性下降或进行性下降D-D-二聚体、二聚体、FDPFDP：进行性增高：进行性增高,3P,3P实验阳性实验阳性凝血酶原时间（凝血酶原时间（PTPT）：缩短或较正常对照延长）：缩短或较正常对照延长 3 sec3 sec以上，以上，肝病超过肝病超过 5 sec5 sec纤溶酶原（纤溶酶原（PLGPLG）：含量、活性降低）：含量、活性降低抗凝血酶（抗凝血酶（ATAT）：含量、活性降低（肝病不适用）：含量、活性降低（肝病不适用）FF活性：活性：50%50%（肝病必备）（肝病必备）DIC 早期诊断和动态监测早期诊断和动态监测鉴别原发性纤溶和继发性纤溶（鉴别原发性纤溶和继发性纤溶（DIC）：前者）：前者FDPs，D-D/N；后者；后者FDPs和和D-D 都都。DIC 早期诊断和动态监测早期诊断和动态监测3、溶栓治疗的评估与检测、溶栓治疗的评估与检测 国内外学者均有报道，国内外学者均有报道，D-二聚体可作为血栓性疾病溶栓治二聚体可作为血栓性疾病溶栓治疗的特异性监测指标。在溶栓治疗中，疗的特异性监测指标。在溶栓治疗中，D-二聚体含二聚体含 量变量变化一般有以下特点：化一般有以下特点：溶栓后溶栓后D-D-二聚体含量在短期内明显上升，而后逐渐下降，提二聚体含量在短期内明显上升，而后逐渐下降，提示治疗有效；示治疗有效；溶栓后溶栓后D-D-二聚体含量持续升高或下降缓慢，提示溶栓药物用二聚体含量持续升高或下降缓慢，提示溶栓药物用量不足量不足；溶栓治疗应持续到溶栓治疗应持续到D-D-二聚体含量下降至正常范围。恢复正常二聚体含量下降至正常范围。恢复正常的的D-D-二聚体是停止溶栓的指征。二聚体是停止溶栓的指征。溶栓治疗的评估与检测溶栓治疗的评估与检测不同疾病的溶栓治疗，不同疾病的溶栓治疗，D-D-二聚体峰值变化的时间有所不同。二聚体峰值变化的时间有所不同。在急性心梗、脑梗溶栓后在急性心梗、脑梗溶栓后1 16h D-6h D-二聚体达到峰值，二聚体达到峰值，24h24h降降至溶栓治疗前水平；至溶栓治疗前水平；在在DVTDVT溶栓治疗时，溶栓治疗时，D-D-二聚体峰值常出现在二聚体峰值常出现在24h24h或以后。或以后。慢性期慢性期DVTDVT患者，溶栓前患者，溶栓前D-D-二聚体含量高于正常，而溶栓二聚体含量高于正常，而溶栓后后D-D-二聚体含量不升高，或迅速下降至正常范围，说明此时仅二聚体含量不升高，或迅速下降至正常范围，说明此时仅有少量新鲜血栓形成，大部分为机化的陈旧血栓，溶栓常不能收有少量新鲜血栓形成，大部分为机化的陈旧血栓，溶栓常不能收到满意效果。到满意效果。4 4、妊高症、先兆子痫的监测、妊高症、先兆子痫的监测妊娠期间血液系统中的凝血因子活性和浓度会发生改变，血妊娠期间血液系统中的凝血因子活性和浓度会发生改变，血浆浆D-二聚体水平显著增高，表明孕妇的纤维蛋白溶解活性增二聚体水平显著增高，表明孕妇的纤维蛋白溶解活性增强，机体正处于一定程度的高凝状态。强，机体正处于一定程度的高凝状态。有研究表明，正常孕产妇的孕早期有研究表明，正常孕产妇的孕早期D-二聚体含量略高于非孕二聚体含量略高于非孕成年人的疾病界定值。随着孕期的增长，其含量也会有明显成年人的疾病界定值。随着孕期的增长，其含量也会有明显的上升，孕晚的含量为孕早期的倍。在产后第一天浓度会急的上升，孕晚的含量为孕早期的倍。在产后第一天浓度会急剧上升到达一个峰值，三天之内恢复至较低水平。剧上升到达一个峰值，三天之内恢复至较低水平。妊高症、先兆子痫的监测妊高症、先兆子痫的监测近年来，许多学者发现近年来，许多学者发现妊娠期高血压综合症（妊娠期高血压综合症（PIN）的）的发生与发生与D-二聚体有一定的相关性，其异常升高是二聚体有一定的相关性，其异常升高是PIN的的独立危险因素，对独立危险因素，对PIN具有显著的预测价值。研究表明，具有显著的预测价值。研究表明，重度重度PIN患者其血浆患者其血浆D-二聚体含量明显高于正常妊娠者，二聚体含量明显高于正常妊娠者，且其水平与疾病严重程度成正相关。且其水平与疾病严重程度成正相关。妊高症、先兆子痫的监测妊高症、先兆子痫的监测围产期围产期D-D-二聚体：二聚体：持续增高提示持续增高提示下肢静脉血栓形成风险下肢静脉血栓形成风险。位置：位置：左下肢发病显著多于右下肢。左下肢发病显著多于右下肢。人群：人群：高龄产妇围产期静脉血栓的监测。高龄产妇围产期静脉血栓的监测。重度子痫前期重度子痫前期病理基础：病理基础：血管内皮广泛损伤。血管内皮广泛损伤。病理过程：病理过程：慢性慢性DICDIC的病理过程的病理过程实验室检查：实验室检查：D-D-二聚体二聚体、FIBFIB、ATAT监测目的：监测目的：D-D-二聚体持续增高提示终止妊娠。二聚体持续增高提示终止妊娠。5 5、恶性肿瘤的监测、恶性肿瘤的监测恶性肿瘤：恶性肿瘤：恶性肿瘤：恶性肿瘤：对于止凝血系统具有对于止凝血系统具有促凝效应促凝效应促凝效应促凝效应，无论恶性实体，无论恶性实体瘤或白血病都会导致患者出现严重的高凝状态或血栓。瘤或白血病都会导致患者出现严重的高凝状态或血栓。文献：文献：文献：文献：恶性肿瘤患者血栓发病率约恶性肿瘤患者血栓发病率约1030，以腺癌，以腺癌并发血栓最为常见。并发血栓最为常见。临床：临床：临床：临床：癌症患者常见术后肺栓塞发癌症患者常见术后肺栓塞发生。生。四、四、D-二聚体的结果解释二聚体的结果解释介入科介入科血管外科血管外科呼吸科呼吸科ICU普通外科普通外科老年科老年科肿瘤科肿瘤科骨科骨科内分泌内分泌神经科神经科肾病肾病科科儿科儿科妇产科妇产科血栓血栓动脉及静脉动脉及静脉外科和内科外科和内科心脏科心脏科神经外科神经外科血液科血液科泌尿外科泌尿外科创伤外科创伤外科心胸外科心胸外科 流行病学调查及国内外大量临床研究显示，临床大多数学科流行病学调查及国内外大量临床研究显示，临床大多数学科的疾病都有可能引发血栓性疾病的疾病都有可能引发血栓性疾病D-D-二聚体结果解释二聚体结果解释p，结合验前概率评估，中、低风险的疑似患者可排除，结合验前概率评估，中、低风险的疑似患者可排除DVT和和PE，无需再做进一步检查。，无需再做进一步检查。p，不能排除静脉栓塞性疾病，应结合临床表现和其他检查综，不能排除静脉栓塞性疾病，应结合临床表现和其他检查综合评估血栓性疾病的风险，必要时进行动态观查合评估血栓性疾病的风险，必要时进行动态观查p结合病人群建立结合病人群建立 D-二聚体检测的医学决定水平（反映某一病二聚体检测的医学决定水平（反映某一病种患者罹患血栓的风险程度），如：孕妇、老年人种患者罹患血栓的风险程度），如：孕妇、老年人p动态监测动态监测短期内重复测定短期内重复测定D-D不仅对诊断有益，而且可窥测不仅对诊断有益，而且可窥测病情的演变。病情的演变。D-D-二聚体局限性二聚体局限性局限性局限性:特异性在特异性在50%50%左右左右如果如果D-dimersD-dimers实验结果为阳性实验结果为阳性,其中其中50%50%病例为血栓症病例为血栓症 另外另外50%50%病例为其它临床症状病例为其它临床症状 -炎症炎症,-癌症癌症,-血肿血肿,-术后术后,-出血出血,-怀孕怀孕,-老年人老年人 .各类疾病各类疾病D-DD-D升高的阳性率升高的阳性率D-二聚体局限性二聚体局限性p既往血栓患者的既往血栓患者的D-二聚体水平低于新近发生血栓的患者二聚体水平低于新近发生血栓的患者水平水平p小血栓的小血栓的D-二聚体水平低于大血栓。因此，有一些时间二聚体水平低于大血栓。因此，有一些时间较长的小血栓会出现亚临床表现或阴性的较长的小血栓会出现亚临床表现或阴性的D-D结果结果pD-D对远端血栓的敏感性低，如果患者的临床症状不明显，对远端血栓的敏感性低，如果患者的临床症状不明显，D-D也可能出现假阴性也可能出现假阴性p高滴度的类风湿因子、雌激素治疗、卵巢癌肿瘤标志物高滴度的类风湿因子、雌激素治疗、卵巢癌肿瘤标志物CA125等可引起等可引起D-二聚体水平假性升高二聚体水平假性升高探探 讨讨一、不同试剂检测结果不可比性一、不同试剂检测结果不可比性1.单克隆抗体不同单克隆抗体不同2.报告结果缺乏统一的标准单位（报告结果缺乏统一的标准单位（FEU、DDU）3.参考区间不同参考区间不同4.校准品不同校准品不同二、参考区间与二、参考区间与cutoff值值建议，在报告检测结果时，如果只用于排查建议，在报告检测结果时，如果只用于排查DVT和和PE，只报只报cutoff值，如果用于其他疾病的诊断和监测，就报参值，如果用于其他疾病的诊断和监测，就报参考区间；考区间；2.应对应对“特殊人群特殊人群”重新建立参考区间和重新建立参考区间和cutoff值值资料整理仅供参考,用药方面谨遵医嘱