DD诊断试剂盒临床试验方案.doc

DD诊断试剂盒
（CNPF法）
临床试验方案

产品名称：（DD）诊断试剂盒
型号规格：R2（乳胶试剂）：1x4mL R1（缓冲液）： 1x15mL
稀释液：1x8ml D-二聚体标准品：1x 1 mL申请注册单位：XXXX生物技术有限公司
申请注册单位联系人：
临床试验单位：XX医院
临床试验类别：已有同品种批准上市产品的临床研究
临床试验负责人：（签字）
统计学负责人：
统计学负责人所在单位：

年 月 日
说　 明

1、 医疗器械产品在临床试验前，必须制定临床试验方案。
2、 临床试验方案由医疗机构和实施者共同设计、制定。实施者与医疗机构签署双方同意的临床试验方案，并签订临床试验合同。
3、 市场上尚未出现的第三类植入体内或借用中医理论制成的医疗器械，临床试验方案应当向医疗器械技术审评机构备案。
4、 医疗机构和实施者应当共同制定每病种的临床试验例数及持续时间，以确保达到试验预期目的。
5、 临床试验类别分临床试用和临床验证。

目录
一、 临床试验的背景
二、 产品的机理、特点与试验范围
三、 产品的适应症或功能
四、 临床试验的项目内容和目的
五、 总体设计（包括成功和失败的可能性分析）
六、 临床评价标准
七、 临床试验持续时间及确定理由
八、 每病种临床试验例数和理由
九、 选择对象范围（包括必要时对照组的选择），选择对象数量及选择理由
十、 副作用的预测及应采取的措施
十一、 临床性能的评价方法和统计处理方法
十二、 受试者知情同意书
十三、 各方承担的职责
十四、 临床试验人员
十五、 伦理委员会意见
十六、 承担临床试验的医疗机构意见
十七、 实施者意见

（DD）诊断试剂盒
临床试验方案

一、临床试验的背景
DD诊断试剂盒为上海XX生物技术有限公司产品，DD诊断试剂盒注册产品标准已经通过复核、具有完善的产品自测报告、目前按新颁发的《体外诊断试剂注册管理办法》需进入临床验证考核。
为了验证其临床适用性，特选择了在国内有一定影响、规模较大、临床样本来源丰富、仪器检测方法先进、操作人员技术熟练的上海市交通大学医学院附属XX医院为临床试验单位。参照国内外相关法规、标准以及国内外同类产品的技术特点，制定了临床试验方案
二、产品的机理、特点与试验范围
1．机理
该试剂盒利用乳胶颗粒作为载体，吸附抗体后遇到待测血浆中相应抗原而发生凝聚，测定胶乳凝聚时的吸光度，根据校准曲线计算D-二聚体的含量。并能达到一定测试准确性和精密度的试剂组合。
2．特点
液体试剂，开瓶直接使用，不需复溶，适用于乳胶免疫比浊测定法测定D-二聚体。
3．试验范围
本产品试验范围：运用在医疗机构临床中进行人血浆中D-二聚体的体外定量分析。
三、产品的适应症或功能
本试剂适用于人血浆中D-二聚体的体外定量分析。
D-二聚体测定是诊断活动性纤溶较好的指标，对血栓形成性疾病如弥漫性血管内凝血（DIC）、深静脉血栓形成、脑血管疾病、肺栓塞、肝脏疾病、外科手术后、急性心梗等疾病均有重要的诊断价值，同时D-二聚体检测还可用于溶栓药物的治疗监测指标。
四、临床试验的项目内容和目的
1．目的
通过对本公司试剂盒的产品性能指标进行测定以及和对照组产品针对同一临床样本的对比试验验证与对照产品是否等效从而验证产品在临床测定中的适用性和有效性。
2．项目内容
在临床采集的样本中，以临床现有的同类试剂盒进行检验。要求选用的样本覆盖范围应包括D-二聚体水平高、中、低三部分，病例数不得少于200例，以便对测定结果进行统计。将样本进行随机编盲。编盲后样本用（DD）诊断试剂盒进行检测，并给出检测结果。解盲后，对各个检测结果相关性进行分析，给出统计学结果。
五、总体设计（包括成功和失败的可能性分析）
1. 标本来源
本试剂盒临床检测样本为经过同类试剂盒进行检验的临床采集血浆样本。
2. 所需耗材和仪器名称
可调微量加液器（ 100-1000μl量程）及相应枪头；
全自动血凝分析仪
3. 实验方案
3.1.1样本要求：空腹静脉采血，109mmol/L枸橼酸钠与全血按照1：9比例混合均匀（1份抗凝剂＋9份全血）。以2500×g离心15分钟，用塑料移液管取出血浆，在4小时内完成试验。样本所含被测物的量应尽可能的分散，应包括被测物含量为正常值与异常值的临床样本。
3.1.2 样本数量：根据《体外诊断试剂临床研究技术指导原则》收集临床血浆样本，由临床单位采用同类试剂盒进行检测，并记录检测结果，检测结果由临床单位保存。要求选用的样本覆盖范围应包括D-二聚体水平高、中、低三部分，病例数不得少于200例，（其中0—1/2正常范围约占比例20%即40例；1/2正常范围—正常范围约占比例60%即120例；正常范围—2倍正常范围约占比例10%即20例；2倍正常范围—线性范围约占比例10%即20例）
3.2 对照产品的要求：选择已批准上市且为目前临床普遍认为质量较好的同方法或原理产品作为对照产品。同时应注明对照产品的生产厂家名称、产品规格型号、注册证号、生产批号、有效期、测试原理。对比试验研究中重复测定结果仍不符的样本，应采用其他方法或原理试剂再次进一步验证试验，以便对临床研究结果进行分析。
3.3 编盲：将临床采集的样本全部随机搁置，由临床试验单位进行样本编号。
3.4 检测前的准备：负责临床试验的检测人员必须熟悉评价方案；熟悉申报产品的检测系统和对照系统中试剂及其检测方法的特点，检测程序和仪器的操作及维护程序；进行预试验。
3.5 室内质控：检测系统和对照系统都应建立适当的质控程序，应保证检测结果的可靠性。
3.6 样本检测：依据DD诊断试剂盒使用说明书，由临床试验单位对编盲后样本进行检测，并给出检测结果。
3.7 由临床试验单位对样本结果进行解盲、比对，对不相符的样本各自进行复测；对复测仍不相符的样品用其它可靠方法加以确认，对结果进行分析评价。
3.8 临床实验单位负责对检测结果进行统计和分析，并提供详实的临床验证报告。
3.9 原始数据：要求保留加样的顺序、校准品的剂量-反应曲线、测定样品的DD含量。并将两种试剂盒所测样品的浓度值按测定顺序对应列表（编号、对照试剂盒测定值、考核试剂盒测定值、病种确认等）。
六、临床评价标准
1． 产品性能
产品性能测定结果应达到下述要求：根据本公司（DD）诊断试剂盒（乳胶免疫比浊法）说明书和仪器操作说明书设定参数。
1.1 准确性
1.1.1 试剂准确性:用已批准上市的D-二聚体质控血浆进行三次平行测量测定，取均值。均值在质控血浆允许偏差范围之内。
1.1.2 校准品准确性:用已批准上市的D-二聚体试剂盒对校准品进行三次平行测量测定，取均值。均值与校准品标定值的不准确度小于10%。
1.2 重复性
1.2.1 试剂批内不精密度:用本公司同一批号的试剂对高、中、低值三个样本分别进行重复测定20次计算变异系数CV，高、中、低值CV不得大于10%（n=20）。变异系数CV计算公式：
CV批内（%）= ×100%
式中：
Xi— 样本中被测物浓度测定值；
X — 测定结果的平均值；
i — 1，2，3，……，n;
n — 重复测定次数。
1.2.2 校准品瓶内不精密度:用本公司配套试剂对本公司一瓶校准品进行重复测定10次，计算变异系数CV，CV不得大于10%（n=10）。变异系数CV计算公式：
CV瓶内（%）= ×100%
1.2.3 试剂批间不精密度:用本公司三批试剂分别对试剂盒中校准品重复进行10次测量，计算其批间变异系数CV，CV不得大于15%。变异系数CV计算公式：
计算按公式（2）
CV批间 （%） = （s批间 / X总 ）×100% ……（1）
其中s批间按公式（3）
s批间2 （%）= s总2 - s批内2 ……（2）
1.2.4 校准品批内不精密度:用本公司配套试剂对本公司同一批中校准品进行重复测定10次，计算变异系数CV，CV不得大于10%（n=10）。变异系数CV计算公式。
CV批内（%）= ×100%
1.3 线性范围:本公司D-二聚体测定试剂盒（自动胶乳增强免疫测定法）的线性范围为50μg/L~5000μg/L，相关系数γ≥0.95。操作方法：将高值临床样本（或校准品）用生理盐水进行倍比稀释，取五个梯度浓度，每个浓度重复测定3次取平均值，计算稀释比例与相应测定浓度均值进行线性回归分析，计算相关系数γ。相关系数γ的计算公式：（通过Excel软件中插入函数CORREL也可求出相关系数）

r=
式中：
—— 测定管溶液的浓度均值；
—— 与测定管溶液浓度相对应的稀释比例；
i —— 1,2，3，……，n；
n —— 测定样本数。
2． 对比试验的统计分析
配对t检验统计分析得出P＞0.05；线性相关分析得出r＞0.95 P＜0.001 。统计出两种产品检测结果没有统计学差异且显著性相关。
七、临床试验持续时间及确定理由
本品最终是在临床上测定样本并给出相关测定结果，从而作为疾病诊断的辅助方法，因此临床验证最关键的是大量的、具有统计学意义的临床样本的测试与对比，测定样本的平均时间比较短，一般10分钟一个。但收集样本3周，实验1周，预计整个实验需要4周。
八、每病种临床试验例数及确定的理由
依据国家对体外诊断试剂临床研究技术指导原则，DD诊断试剂为第二类医疗器械产品，临床研究的总样本数至少为200例。我们确定2家三甲医疗卫生单位。每家样本数为200例，总计400例。
九、选择对象范围（包括必要时对照组的选择选择对象数量及选择理由
临床血浆样本，均为医院同期的门诊及住院病人样本，选择这些样本是因为这些项目就是利用到这些就诊病人的身上，因此很有代表性。D-二聚体的阳性率为____%，D-二聚体含量测定，可将原发纤溶亢进检出率提高至_____%以上
十、副作用的预测及应采取的措施
1．DD试剂盒为体外诊断试剂，不会对受试者产生不良作用。
2．本产品验证的临床样本是人血浆，对试验人员隐含某些病毒感染的可能性，因而本试验应由受过训练的操作人员严格按照说明书的规定来操作。严格执行医学检验的操作规程，可完全避免危险的发生。
十一、临床性能的评价方法和统计处理方法
11.1偏倚估计的数据分析

作图
（1）试验系统每次测定值与相对应的对照系统每次测定值作散布图；
以上以试验系统作Y轴，对照系统作X轴，作散布图。
（2）试验系统与对照系统每次测定值之差与相应对照系统均值作图(中心水平线为零)。
11.2目测线性，计算相关系数
目测线性，非线性段可截去；如线性范围太短，则停止评价。对线性段作相关分析，要求r>0.975，如r<0.975， 应扩大样本量以扩大数据范围。
11.3建立回归方程并分析
计算a值及b值,列出线性回归方程式。
Y=a+bX----------------------------（3）
按下列方程式计算平均偏倚B及试验系统与对照系统测定值差值的标准差SD。
B=Σ(Yi-Xi)/N-----------------------(4)
----------------(5)
(其中B是适当浓度范围内的估计的预期(平均) 偏倚； X为对照系统测定值；Y为试验系统测定值；SD为两系统测定值差值的标准差)
计算医学决定水平(Xc) 处预期偏倚估计值()及其95%区间。
-----------------------(6)
-----------(7)
11.4结果判断与解释:
将医学决定水平预期偏倚的可信区间与允许误差的限值相比较(允许误差推荐为小于或等于1/2CLIA88或者室间质评可接受范围)。预期偏倚可信区间小于规定的允许误差的限值,试验系统可被接受；预期偏倚可信区间大于规定的允许误差的限值, 试验系统不被接受。
11.5 统计学分析
试验系统与对照系统之间结果作配对t检验。如t检验有显著差异，则两者有系统误差，需要进一步分析原因（可能与参考区间有关）必要时需要重新设计临床试验方案。
11.6一致性的数据分析
可按下表进行统计分析试验系统和对照系统的一致性：
表1. 配对计数资料统计表

对照系统
阳性 阴性
合 计
试验 阳性
系统 阴性
a b
c d
a+b
c+d
合 计
a+c b+d
a+b+c+d
对上述基数资料进行Kappa一致性分析，Kappa系数>0.8，为高度一致，认为两系统等效； 0.4 因为此次临床试验使用医院日常工作测定后的剩余样本（为日常在临床试验单位检验室进行D-二聚体含量测定的就医人检测完成后剩余的样本量，并非为临床试验专门采集的样本），所以此次临床试验不涉及个人隐私可不经受试者同意。D-二聚体测定试剂盒（乳胶免疫比浊法）属于体外诊断试剂，在临床试验中不需要与患者直接接触，不向病人提供检测报告，且试验结果只用于对比研究，不作为辅助诊断依据，不会给受试者带来任何风险，因此“知情同意书”这项内容可以省略。

十三、各方承担的责任
实施者职责：
　　（一）依法选择医疗机构；
　　（二）向医疗机构提供《医疗器械临床试验须知》；
　　（三）与医疗机构共同设计、制定医疗器械临床试验方案，签署双方同意的医疗器械 临床试验方案及合同；
　　（四）向医疗机构免费提供受试产品；
　　（五）对医疗器械临床试验人员进行培训；
医疗器械临床试验人员应当具备以下条件：
　　（一）具备承担该项临床试验的专业特长、资格和能力；
（二）熟悉实施者所提供的与临床试验有关的资料与文献。
（三）负责医疗器械临床试验的医疗机构应当确定主持临床试验的专业技术人员作为临床试验负责人。临床试验负责人应当具备主治医师以上的职称。
　负责医疗器械临床试验的医疗机构及临床试验人员职责：
　　（一）应当熟悉实施者提供的有关资料，并熟悉受试产品的使用；
　　（二）与实施者共同设计、制定临床试验方案，双方签署临床试验方案及合同；
　　（三）如实向受试者说明受试产品的详细情况，临床试验实施前，必须给受试者充分的时间考虑是否参加临床试验；
　　（四）如实记录受试产品的副作用及不良事件，并分析原因；发生不良事件及严重副作用的，应当如实、及时分别向受理该医疗器械注册申请的省、自治区、直辖市（食品）药品监督管理部门和国家食品药品监督管理局报告；发生严重副作用，应当在二十四小时内报告；
　　（五）在发生副作用时，临床试验人员应当及时做出临床判断，采取措施，保护受试者利益；必要时，伦理委员会有权立即中止临床试验；
　　（六）临床试验中止的，应当通知受试者、实施者伦理委员会和受理该医疗器械注册申请的省、自治区、直辖市（食品）药品监督管理部门和国家食品药品监督管理局，并说明理由；
　　（七）提出临床试验报告，并对报告的正确性及可靠性负责；
　　（八）对实施者提供的资料负有保密义务。

十四、临床试验人员
临床试验人员
职务
职称
所在科室
签名

检验科

检验科

检验科

十五、伦理委员会意见：

（盖章）年 月 日

十六、承担临床试验的医疗机构意见：

（盖章）年 月 日

十七、实施者意见

（盖章）年 月 日