微生物细胞大小的测定.ppt

微生物学微生物学实验实验中南民族大学工商学院中南民族大学工商学院环环境与生物工程境与生物工程实验实验教学中心教学中心1.实验实验二二 微生物微生物细细胞大小的胞大小的测测定定 一、一、实验实验目的目的 二、二、实验实验原理原理 三、三、实验实验器材器材 四、四、实验实验方法方法 五、五、实验结实验结果果 六、六、思考思考题题2.一、一、实验实验目的目的了解目了解目镜测镜测微尺和微尺和镜镜台台测测微尺的微尺的构造和使用原理，掌握微生物构造和使用原理，掌握微生物细细胞大小的胞大小的测测定方法。定方法。增增强强微生物微生物细细胞的大小的感性胞的大小的感性认识认识。3.二、实验原理 微生物细胞的大小是微生物重要的形态特征之一，由于菌体小，只能在显微镜下来测量。用于测量微生物细胞大小的工具有 目镜测微尺和镜台测微尺。4.目目镜测镜测微尺是一微尺是一块圆块圆形形玻片，在玻片中央把玻片，在玻片中央把5mm5mm长长度刻成度刻成5050等分，或把等分，或把10 mm10 mm长长度刻成度刻成100100等分。等分。测测量量时时，将其放在接目将其放在接目镜镜中的隔板上中的隔板上(此此处处正好与物正好与物镜镜放大的中放大的中间间像重叠像重叠)来来测测量量经显经显微微镜镜放大后的放大后的细细胞物象。胞物象。目目镜测镜测微尺微尺5.镜镜台台测测微尺微尺 镜镜台台测测微尺是中央部分刻有精确等分微尺是中央部分刻有精确等分线线的的载载玻玻片，一般将片，一般将1mm等分成等分成100格，每格格，每格长长0.01mm（即（即10m）。）。它并不直接它并不直接测细测细胞的大胞的大小，而是用于校正目小，而是用于校正目镜测镜测微尺每格的相微尺每格的相对长对长度。度。6.由于不同目由于不同目镜镜、物、物镜组镜组合的放大倍数合的放大倍数不相同，目不相同，目镜测镜测微尺每格微尺每格实际实际表示的表示的长长度也不一度也不一样样，因此目，因此目镜测镜测微尺微尺测测量微生量微生物大小物大小时须时须先用置于先用置于镜镜台上的台上的镜镜台台测测微微尺校正，求出在一定放大倍数下，目尺校正，求出在一定放大倍数下，目镜镜测测微尺每小格所代表的相微尺每小格所代表的相对长对长度。度。7.v v 由于已知由于已知镜镜台台测测微尺每格微尺每格长长1010m，根据下，根据下列公式即可分列公式即可分别计别计算出在不同放大倍数下目算出在不同放大倍数下目镜测镜测微尺每格所代表的微尺每格所代表的长长度度。镜镜台台测测微尺格数微尺格数1010目目镜测微尺每格微尺每格长度（度（m）=-=-目目镜测镜测微尺格数微尺格数 注：球菌用直径来表示其大小；杆菌注：球菌用直径来表示其大小；杆菌则则用用宽宽和和长长的范的范围围来表示。来表示。8.三、三、实验实验器材器材11材料：酵母斜面菌种。材料：酵母斜面菌种。22器材：器材：显显微微镜镜、目、目镜测镜测微尺、微尺、镜镜台台测测 微尺、盖玻片、微尺、盖玻片、载载玻片、滴管、滴瓶、擦玻片、滴管、滴瓶、擦镜纸镜纸。9.四、四、实验实验方法方法v用镜台测微尺进行校正 取得该显微镜在一定放大倍数的目镜和物镜下,目镜测微尺每小格所代表的相对长度（A）菌体大小的测定微生物细胞相当于目镜测微尺的长度（B）细胞的实际大小（LAB）取下取下镜镜台台测测微尺，将微生物染色微尺，将微生物染色标标本置于本置于载载物台上，然后在油物台上，然后在油镜镜下用目下用目镜测镜测微尺微尺测测量菌体的量菌体的长长和和宽宽。在低倍在低倍镜镜下，看清下，看清镜镜台台测测微尺的微尺的刻度后，刻度后，转动转动目目镜镜，使目，使目镜测镜测微尺与微尺与镜镜台台测测微尺的刻度平行，移微尺的刻度平行，移动动推推动动器，器，使目使目镜测镜测微尺的微尺的0点与点与镜镜台台测测微尺的微尺的某一刻度重合，然后，仔某一刻度重合，然后，仔细寻细寻找两尺找两尺第二个完全重合的刻度。第二个完全重合的刻度。计计算两刻度算两刻度间间目目镜测镜测微尺的格数和微尺的格数和镜镜台台测测微尺的微尺的格数。格数。用同用同样样的方法的方法换换成高倍成高倍镜镜和油和油镜镜进进行校正。行校正。装目镜测微尺10.菌体大小的菌体大小的测测定定(1)(1)将酵母菌斜面制成一定将酵母菌斜面制成一定浓浓度的菌度的菌悬悬液液(2)(2)取一滴酵母菌菌取一滴酵母菌菌悬悬液制成水浸片。液制成水浸片。(3)(3)移去移去镜镜台台测测微尺，微尺，换换上酵母菌水上酵母菌水浸片，先在低倍浸片，先在低倍镜镜下找到目的物，然下找到目的物，然后在高倍后在高倍镜镜下用目下用目镜测镜测微尺来微尺来测测量酵量酵母菌菌体的母菌菌体的长长，宽宽各占几格（不足一各占几格（不足一格的部分估格的部分估计计到小数点后一位数）。到小数点后一位数）。11.1.目镜测微目尺校正结果五、五、实验结实验结果果将实验结果填入下列表格 物物镜镜（mm）目尺格数目尺格数 台尺格数台尺格数 目尺校正目尺校正 4 4 10 10 40 40 100 1002.菌体测定结果微生物名称 目镜测微尺 宽 长 菌体 每格代表的 目镜测微 宽度 目镜测微 长度 大小范围 长度/m 尺格数 /m 尺格数 /m12.注意事项v1.校正目镜测微尺时光线宜弱些，以便找到镜台测微尺的刻度。v2.换高倍镜和油镜时要十分小心，防止压坏镜台测微尺和损坏镜头。v3.测量对象要有代表性，数据及单位换算要准确。13.六、思考六、思考题题v1.如何保证安全准确的校正目镜测微尺？v2.为什么更换不同放大倍数的物镜和目镜时要重新校正测微尺？14.