微生物学检验呼吸道病毒及检验.ppt

微生物学检验呼吸道病毒及检验流行性感冒病毒流行性感冒病毒属正粘病毒科属正粘病毒科是引起流行性感冒的病原体是引起流行性感冒的病原体分甲、乙、丙三型分甲、乙、丙三型甲型流感病毒常引起流感的大流行甲型流感病毒常引起流感的大流行生物学特性生物学特性形态结构：球形；属形态结构：球形；属RNA病毒；有包膜病毒；有包膜结构结构核心核心：RNA（分阶段）、核蛋白、（分阶段）、核蛋白、RNA聚合酶聚合酶基质蛋白基质蛋白（M蛋白）：具有型的特异性蛋白）：具有型的特异性包膜包膜血凝素（血凝素（HA）神经氨酸酶神经氨酸酶(NA)血凝素与神经氨酸酶血凝素与神经氨酸酶是流感病毒的表面抗原是流感病毒的表面抗原是流感病毒分亚型的依据是流感病毒分亚型的依据抗原性极不稳定，常发生变异抗原性极不稳定，常发生变异流感病毒分型与变异流感病毒分型与变异分型分型 根据核蛋白和根据核蛋白和M 蛋白抗原的不同，流感蛋白抗原的不同，流感病毒分病毒分甲、乙、丙三型甲、乙、丙三型。根据根据HA、NA抗原不同分若干抗原不同分若干亚型亚型变异：甲型流感病毒的变异：甲型流感病毒的HANA极易变异极易变异 抗原性漂移抗原性漂移：变异幅度小，常造成流感中：变异幅度小，常造成流感中小流行小流行 抗原性转变抗原性转变：变异幅度大，常引起流感大：变异幅度大，常引起流感大流行流行 甲型流感病毒亚型类别、流行年代甲型流感病毒亚型类别、流行年代流行年代流行年代亚型类别亚型类别1947H1N1（亚甲型）（亚甲型）1957H2N2（亚洲甲型）（亚洲甲型）1968H3N2（香港甲型）（香港甲型）1977H1NI、H3N2培养特性培养特性 鸡胚培养：不引起鸡胚出现病变，取羊鸡胚培养：不引起鸡胚出现病变，取羊水或尿囊液做血凝试验水或尿囊液做血凝试验 细胞培养：红细胞吸附试验细胞培养：红细胞吸附试验抵抗力：较弱，不耐热，对干燥、乙醚、抵抗力：较弱，不耐热，对干燥、乙醚、甲醛和乳酸等敏感。甲醛和乳酸等敏感。致病性致病性传染源：病人传染源：病人传播途径：呼吸道传播途径：呼吸道致病机制致病机制流感病毒流感病毒呼吸道呼吸道毒性物质进入血流毒性物质进入血流呼吸道炎症呼吸道炎症全身中毒症状全身中毒症状免疫性免疫性病后对同型流感病毒产生免疫力病后对同型流感病毒产生免疫力抗抗HA、抗、抗NA抗体为中和抗体抗体为中和抗体微生物学检查微生物学检查病毒分离：病毒分离：标本：取患者咽漱液或鼻咽拭标本：取患者咽漱液或鼻咽拭分离方法：分离方法：鸡胚接种：鸡胚接种：尿囊腔接种收获尿囊液血凝试验血凝抑制试验尿囊腔接种收获尿囊液血凝试验血凝抑制试验细胞培养细胞培养微生物学检查微生物学检查血清学诊断血清学诊断 血凝抑制试验、中和试验、补体结合试血凝抑制试验、中和试验、补体结合试验、酶免疫测定验、酶免疫测定抗原检测抗原检测 直接从病人呼吸道分泌物、脱落细胞中直接从病人呼吸道分泌物、脱落细胞中检测抗原检测抗原分型鉴定分型鉴定 核酸杂交、核酸杂交、PCR、序列分析、序列分析防治原则防治原则q一般性预防：空气消毒一般性预防：空气消毒q特异性预防特异性预防:接种疫苗接种疫苗 灭活三价疫苗灭活三价疫苗 亚单位疫苗亚单位疫苗 减毒活疫苗减毒活疫苗禽流感病毒禽流感病毒禽流感病毒是流感病毒属的一个成员禽流感病毒是流感病毒属的一个成员 禽流感病毒具有禽流感病毒具有A型抗原型抗原,属于属于A型流感型流感毒毒,列为禽流感病毒类。列为禽流感病毒类。本病毒颗粒呈球形、杆状或长丝状本病毒颗粒呈球形、杆状或长丝状,为多为多形性。其直径为形性。其直径为80一一120nm。具有血凝素（具有血凝素（HA）和神经氨酸（）和神经氨酸（NA）历史上高致病性的禽流感都是由历史上高致病性的禽流感都是由H5和和H7引起的引起的 世世界界卫卫生生组组织织认认为为，当当发发生生下下列列三三种种假假设设之之一一时时，禽禽流流感感病病毒毒就就有有可可能能发发生生难难以以预预见见的的变变异异，转转变变成成新新病病毒毒。禽流感病毒致病性禽流感病毒致病性禽流感在家禽中以鸡和火鸡及某些野禽禽流感在家禽中以鸡和火鸡及某些野禽的易感性最高的易感性最高 一般认为带毒的候鸟使禽流感病毒成世一般认为带毒的候鸟使禽流感病毒成世界性传播界性传播人可通过与病禽接触而感染人可通过与病禽接触而感染 q禽流感病毒正禽流感病毒正在攻击健康人在攻击健康人细胞细胞麻疹病毒麻疹病毒属副粘病毒科属副粘病毒科球形病毒，单股球形病毒，单股RNA，有包膜，有包膜只有一个血清型只有一个血清型在细胞中形成嗜酸性包涵体在细胞中形成嗜酸性包涵体经呼吸道传播，引起麻疹经呼吸道传播，引起麻疹严重的并发症肺炎、亚急性硬化性全脑炎严重的并发症肺炎、亚急性硬化性全脑炎病后免疫力牢固病后免疫力牢固接种麻疹疫苗进行特异性预防（接种麻疹疫苗进行特异性预防（8个月、个月、7岁）岁）丙种球蛋白可进行紧急预防丙种球蛋白可进行紧急预防 麻疹临床表现麻疹临床表现发热发热畏光、流泪畏光、流泪口腔粘膜出现口腔粘膜出现柯氏斑柯氏斑皮肤出现皮肤出现红色斑丘疹红色斑丘疹冠状病毒冠状病毒属冠状病毒科属冠状病毒科包括人冠状病毒、禽传染性支气管炎病包括人冠状病毒、禽传染性支气管炎病毒、鼠肝炎病毒毒、鼠肝炎病毒严重急性呼吸衰竭综合症（严重急性呼吸衰竭综合症（SARS）是）是新冠状病毒引起的急性呼吸道传染病新冠状病毒引起的急性呼吸道传染病生物学特性生物学特性形态结构：多形性，单股正链形态结构：多形性，单股正链RNA,有包有包膜，病毒外形呈日冕状膜，病毒外形呈日冕状抵抗力抵抗力：较弱，对湿热、脂溶剂、消毒：较弱，对湿热、脂溶剂、消毒剂敏感剂敏感SARS病毒致病性病毒致病性腮腺炎病毒腮腺炎病毒属副粘病毒科属副粘病毒科球形，有包膜，单股正链球形，有包膜，单股正链RNA只有一个血清型只有一个血清型经呼吸道飞沫传播，引起经呼吸道飞沫传播，引起腮腺炎腮腺炎可引起睾丸炎、卵巢炎、脑膜炎等并发可引起睾丸炎、卵巢炎、脑膜炎等并发症症病后免疫力牢固病后免疫力牢固接种腮腺炎减毒活疫苗进行特异性预防接种腮腺炎减毒活疫苗进行特异性预防风疹病毒风疹病毒属披膜病毒科属披膜病毒科球形，单股正链球形，单股正链RNA，有包膜，有包膜只有一个血清型只有一个血清型经呼吸道传播，引起风疹经呼吸道传播，引起风疹成人：出疹、关节疼痛等成人：出疹、关节疼痛等儿童：发热、出疹、耳后淋巴结肿大儿童：发热、出疹、耳后淋巴结肿大经胎盘传播，引起经胎盘传播，引起先天性风疹综合症先天性风疹综合症接种风疹减毒活疫苗进行特异性预防接种风疹减毒活疫苗进行特异性预防腮腺炎腮腺炎冠状病毒冠状病毒NAHA包膜包膜M2M1基质蛋白基质蛋白41 2 35 6 7 8核心核心RNA核蛋白核蛋白 RNA聚合酶聚合酶流感病毒结构流感病毒结构血凝素血凝素神经氨酸酶神经氨酸酶流感病毒电镜图流感病毒电镜图肠道病毒肠道病毒属小核糖核酸病毒科属小核糖核酸病毒科有有72型型人类肠道病毒：人类肠道病毒：脊髓灰质炎病毒脊髓灰质炎病毒柯萨奇病毒柯萨奇病毒埃可病毒埃可病毒新型肠道病毒（甲型肝炎病毒为新型肠道病毒（甲型肝炎病毒为72型）型）肠道病毒共同特征肠道病毒共同特征球形，球形，20面体立体对称，无不包膜面体立体对称，无不包膜单股正链单股正链RNA细胞中增殖，引起细胞病变细胞中增殖，引起细胞病变对脂溶剂敏感，耐酸对脂溶剂敏感，耐酸经粪口途径传播经粪口途径传播临床表现多样化临床表现多样化小核糖核酸病毒电镜图小核糖核酸病毒电镜图肠道病毒微生物学检验肠道病毒微生物学检验标本采集标本采集:粪便、肛拭、咽拭、粪便、肛拭、咽拭、脑脊液脑脊液检验程序：检验程序：病毒鉴定：病毒鉴定：中和试验中和试验 分子生物学方法：检测细胞培养物中病分子生物学方法：检测细胞培养物中病毒基因组毒基因组血清学试验：取双份血清进行中和试验血清学试验：取双份血清进行中和试验检测抗体检测抗体脊髓灰质炎病毒脊髓灰质炎病毒是引起脊髓灰质炎（小儿麻痹症）的病是引起脊髓灰质炎（小儿麻痹症）的病原体原体生物学形状生物学形状形态结构：球形，无包膜，单股正链形态结构：球形，无包膜，单股正链RNA，有四种核衣壳蛋白，有四种核衣壳蛋白培养特性：采用细胞培养，引起典型的培养特性：采用细胞培养，引起典型的细胞病变细胞病变分型：采用中和试验将分型：采用中和试验将Polio病毒分为病毒分为、型，各型间无交叉反应型，各型间无交叉反应抵抗力：在外界环境中抵抗力较强，在抵抗力：在外界环境中抵抗力较强，在酸性环境中较稳定，对湿热、紫外线较酸性环境中较稳定，对湿热、紫外线较敏感敏感致病性与免疫性致病性与免疫性传染源传染源：病人、带毒者：病人、带毒者传染途径：粪口途径传染途径：粪口途径致病机制：致病机制：临床特征临床特征 90的感染为隐性感染的感染为隐性感染 12为非麻痹性脊髓灰质炎或无菌性脑膜炎为非麻痹性脊髓灰质炎或无菌性脑膜炎 仅约仅约0.1%出现永久性弛缓性肢体麻痹出现永久性弛缓性肢体麻痹 极少数发展为延髓麻痹极少数发展为延髓麻痹病后对同型病后对同型Polio.v有牢固免疫力有牢固免疫力微生物学检查微生物学检查粪便标本粪便标本细胞培养细胞培养中和试验中和试验血清标本血清标本中和试验中和试验病毒培养病毒培养血清学诊断血清学诊断基因检测基因检测核酸杂交技术核酸杂交技术聚合酶联反应（聚合酶联反应（PCR）防治原则防治原则接种疫苗接种疫苗 小儿麻痹糖丸（口服）小儿麻痹糖丸（口服）灭活疫苗（注射）灭活疫苗（注射柯萨奇病毒和埃可病毒柯萨奇病毒和埃可病毒柯萨奇病毒分柯萨奇病毒分A、B 两组，共两组，共29个血清型个血清型埃可病毒有埃可病毒有31个血清型个血清型消化道感染，很少引起肠道症状消化道感染，很少引起肠道症状临床表现多样临床表现多样血清学检查核核酸检测有助于病原学诊断血清学检查核核酸检测有助于病原学诊断尚无疫苗进行预防尚无疫苗进行预防柯萨奇病毒与埃可病毒所致疾病柯萨奇病毒与埃可病毒所致疾病疾病疾病柯萨奇病毒柯萨奇病毒埃可病毒埃可病毒无菌性脑膜炎无菌性脑膜炎麻痹疾病麻痹疾病疱疹性咽峡炎疱疹性咽峡炎普通感冒普通感冒流行性肌痛流行性肌痛手足口病手足口病报道不一报道不一心包炎心包炎新生儿心肌炎新生儿心肌炎不明原因发热不明原因发热皮疹皮疹婴幼儿腹泻婴幼儿腹泻轮状病毒轮状病毒属轮状病毒科属轮状病毒科球形；双股球形；双股RNA；双层衣壳，有放射；双层衣壳，有放射状突起，呈轮状状突起，呈轮状经粪口途径传播，引起腹泻经粪口途径传播，引起腹泻以粪便为标本，查粪便中的病毒颗粒或以粪便为标本，查粪便中的病毒颗粒或病毒抗原病毒抗原疫苗尚在研制中疫苗尚在研制中轮状病毒轮状病毒分组分组及其及其致病性致病性A组组 引起婴幼儿腹泻引起婴幼儿腹泻B组组 感染人感染人-成人成人C组组 感染猪，偶尔也感染人感染猪，偶尔也感染人 D组组 感染鸟类感染鸟类 E组组 感染猪感染猪轮状病毒电镜图轮状病毒电镜图减毒活疫苗与灭活疫苗的比较减毒活疫苗与灭活疫苗的比较项目项目活疫苗活疫苗死疫苗死疫苗接种方法接种方法 口服糖丸口服糖丸肌肉注射肌肉注射抗体产生抗体产生 血清抗体、分泌型抗体血清抗体、分泌型抗体血清抗体血清抗体细胞免疫细胞免疫 有有无无间接免疫间接免疫 通过接种者粪便排毒通过接种者粪便排毒无无稳定性稳定性差，不易保存差，不易保存易保存易保存副作用副作用极少数引起疫苗相关脊灰极少数引起疫苗相关脊灰无无免疫效果免疫效果 更好更好好好致病机制致病机制Polio病毒粪口途径粪口途径小肠粘膜、淋巴结入血入血 第一次第一次病毒血症病毒血症 单核吞噬细胞 第二次第二次病毒血症病毒血症 脊髓前角运动神经原小儿麻痹症小儿麻痹症脊髓灰质炎病毒形态结构脊髓灰质炎病毒形态结构