一例鸡马立克病的病理学诊断--毕业论文.docx

本科生毕业论文 论文题目: 一例鸡马立克病的病理学诊断 一例鸡马立克病的病理学诊断 摘要：安徽省宿州市某鸡场送检发病鸡6只，本文通过对一例疑似鸡马立克氏病毒感染患病病鸡，采用大体病变观察、病理组织学观察、细菌分离培养、染色镜检以及PCR等方法进行诊断。根据流行病学，剖检病变病鸡胸下皮肤可见肿瘤硬块，剖检可见肝脏、腺胃、肾脏、脾脏、肺上存在肿瘤硬块和结节，似马立克氏病 ，经肝脏细菌分离培养24小时后观察无细菌生长，琼脂扩散试验为阳性；PCR检测发现可以扩增为马立克氏病毒的314bp的片段。关键字：鸡；，马立克氏病毒；诊断；PCR技术Diagnosis of infection of Marek DiseaseGraduate:Sadam Advisor: Wang Xiao-boAbstract: A chicken farm of Suzhou at Anhui province were sent to check six paradigms of invasive chickens，according to Epidemiology dissection lesion they were suspected Marek Disease，then it was not bacterial growth from the liver to be isolated and culured after 24h，agar diffusion reaction were possitive，the expected purpose fragment could be amplified from the extracted Marek viral nucleic acid by the PCR assay developed.The results suggested that the loemiawas caused by the Marek Disease infection.The test is some great significance for exact diagnosis and effectual control the disease.Keyword：Marek Disease；diagnosis；PCR;agar diffussion reaction目录综述篇41. 病原学42. 流行病学43. 发病机理54. 临诊症状51.神经型52.内脏型53.眼型54.皮肤型65. 病理变化66. 诊断67. 防制6论文篇71 材料71.1动物71.2 药品试剂71.3 器材71.4菌株71.5 引物合成72方法82.1 剖检取材82.2 石蜡切片的制作82.3 切片82.4 HE染色82.5 细菌分离培养82.6 细菌染色镜检82.7 PCR 检测93结果93.1 临床症状93.2 剖检病变93.3 病理组织学变化103.4 PCR检测114. 小结与讨论12参考文献13致谢13综述篇马立克氏病（MD）是由马立克氏病毒（MDV）引起的一种接触性传染性肿瘤疾病，以病鸡的外周神经、性腺、虹膜、各种内脏器官、肌肉和皮肤发生单核细胞浸润，形成淋巴肿瘤为特征。该病早在1907年由匈牙利的兽医学专家Marek博士首先发现的，因此得名。1961年在英国科学家Bigges的倡导下，开始使用马立克病这一名称。1967年Churucill首次验证了这个病的病因。该病传染性强，传播速度快，潜伏期较长（1-3个月），急性发病的鸡场淘汰率和死亡率达10-80，是危害养鸡企业的最主要传染病之一，对我国养殖业的发展带来极大的阻碍。1. 病原学马立克氏病病毒属疱疹病毒科疱疹病毒甲亚科的马立克氏病毒属禽疱疹病毒2型。 根据抗原性不同，马立克氏病毒可分为三种血清型，即血清l型、2型和3型。血清1型包括所有致瘤的马立克氏病毒，含强毒及其致弱的变异毒株；而血清2型包括所有不致瘤的马立克氏病毒；血清3型包括所有的火鸡疱疹病毒及其变异毒株本病病原属于疱疹病毒的B亚群(细胞结合毒)，共分三个血清型：血清1型，对鸡致病致瘤，主要毒株有超强毒(Md5等)、强毒(JW、GA、京?1等)；血清2型，对鸡无致病性，主要毒株有SB/1和301B/1等；血清3型，对鸡无致病性，但可使鸡有良好的抵抗力，是一株火鸡疱疹病毒株(HVT-FC126株)。该病毒能在鸡胚绒毛尿囊膜上产生典型的痘斑，卵黄囊接种较好。能在鸡肾细胞、鸡胚成纤维细胞和鸭胚成纤维细胞上生长产生痘斑。完整病毒的抵抗力较强，在粪便和垫料中的病毒，室温下可存活46个月之久。细胞结合毒在4可存活2周，在37存活18小时，在50存活30分钟，60只能存活1分钟。2. 流行病学传染源为病鸡和带毒鸡(感染马立克病的鸡，大部分为终生带毒)，其脱落的羽毛囊上皮、皮屑和鸡舍中的灰尘是主要传染源。此外，病鸡和带毒鸡的分泌物、排泄物也具传染性。 病毒主要经呼吸道传播。本病主要感染鸡，不同品系的鸡均可感染。火鸡、野鸡、鹌鹑、鹧鸪可自然感染，但发病极少。 本病具有高度接触传染性，病毒一旦侵入易感鸡群，其感染率几乎可达100%。本病发生与鸡年龄有关，年龄越轻，易感性越高，因此，1日龄雏鸡最易感。本病多发于58周龄的鸡，发病高峰多在1220周龄之间。我国地方品种鸡较易感。3. 发病机理病毒由呼吸道进入机体，被吞噬细胞带至其他部位，在脾、 法氏囊和胸腺引起溶细胞性感染，36天达高峰。主要靶细胞为B细胞和某些激活的丁 细胞。早期感染的致坏死作用引起急性炎症反应，约在第7天出现暂时性免疫抑制。最后 法氏囊和胸腺萎缩。不同年龄的易感品系和抗病品系对感染同样易感，在早期溶细胞阶段 所有的鸡感染水平相等。但毒株的致病性可影响早期感染的严重程度。4. 临诊症状 潜伏期常为34周，一般在50日龄以后出现症状，70日龄后陆续出现死亡，90日龄以后达到高峰，很少晚至30周龄才出现症状，偶见34周龄的幼龄鸡和60周龄的老龄鸡发病。本病的发病率变化很大，一般肉鸡为2030，个别达60，产蛋鸡为1015，严重达50，死亡率与之相当。根据临床表现分为神经型、内脏型、眼型和皮肤型等四种类型。 1.神经型常侵害周围神经，以坐骨神经和臂神经最易受侵害。当坐骨神经受损时病鸡一侧腿发生不全或完全麻痹，站立不稳，两腿前后伸展，呈“劈叉”姿势，为典型症状。当臂神经受损时，翅膀下垂；支配颈部肌肉的神经受损时病鸡低头或斜颈；迷走神经受损鸡嗉囊麻痹或膨大，食物不能下行。一般病鸡精神尚好，并有食欲，但往往由于饮不到水而脱水，吃不到饲料而衰竭，或被其他鸡只践踏，最后均以死亡而告终，多数情况下病鸡被淘汰。2.内脏型常见于5070日龄的鸡，病鸡精神萎顿，食欲减退，羽毛松乱，鸡冠苍白、皱缩，有的鸡冠呈黑紫色，黄白色或黄绿色下痢，迅速消瘦，胸骨似刀锋，触诊腹部能摸到硬块。病鸡脱水、昏迷，最后死亡。3.眼型在病鸡群中很少见到，一旦出现则病鸡表现瞳孔缩小，严重时仅有针尖大小；虹膜边缘不整齐，呈环状或斑点状，颜色由正常的桔红色变为弥漫性的灰白色，呈“鱼眼状”。轻者表现对光线强度的反应迟钝，重者对光线失去调节能力，最终失明。4.皮肤型较少见，往往在禽类加工厂屠宰鸡只时褪毛后才发现，主要表现为毛囊肿大或皮肤出现结节。 临床上以神经型和内脏型多见，有的鸡群发病以神经型为主，内脏型较少，一般死亡率在5以下，且当鸡群开产前本病流行基本平息。有的鸡群发病以内脏型为主，兼有神经型，危害大损失严重，常造成较高的死亡率。5. 病理变化神经病理变化多见于神经型，以受损害神经(常见于腰荐神经、坐骨神经)的横纹消失，变成灰色或黄色，或增粗、水肿，比正常的大23倍，有时更大，多侵害一侧神经，有时双侧神经均受侵害。内脏型主要表现内脏多种器官出现肿瘤，肿瘤多呈结节性，为圆形或近似圆形，数量不一，大小不等，略突出于脏器表面，灰白色，切面呈脂肪样。常侵害的脏器有肝脏、脾脏、性腺、肾脏、心脏、肺脏、腺胃、肌胃等。有的病例肝脏上不具有结节性肿瘤，但肝脏异常肿大，比正常大56倍，正常肝小叶结构消失，表面呈粗糙或颗粒性外观。性腺肿瘤比较常见，甚至整个卵巢被肿瘤组织代替，呈花菜样肿大，腺胃外观有的变长，有的变圆，胃壁明显增厚或薄厚不均，切开后腺乳头消失，粘膜出血、坏死。一般情况下法氏囊不见肉眼可见变化或见萎缩。6. 诊断6.1 根据典型临床症状和病理变化可做出初步诊断，确诊需进一步做实验室诊断。 6.2 实验室诊断 在国际贸易中，尚无指定诊断方法，替代诊断方法为琼脂免疫扩散试验(AGID)。 病原分离与鉴定：采血分离白细胞，接种敏感细胞，在几天内会出现特征性的蚀斑。放射性沉淀试验(检测感染鸡羽髓)、聚合酶链反应试验。 血清学检查：琼脂扩散试验、直接或间接荧光实验、中和试验、酶联免疫吸附试验。 病料采集：用于分离病毒的材料可以是从抗凝血中分离的白细胞，也可是淋巴瘤细胞或脾细胞悬液。也可采用羽髓作为MDV诊断和分离的材料7. 防制根据本病感染的原因，应将孵化场或孵化室远离鸡舍，定期严格消毒，防止出壳时早期感染。育雏期间的早期感染也是暴发本病的重要原因，育雏室也应远离鸡舍，放人雏鸡前应彻底清扫和消毒。肉鸡群应采取全进全出制，每批鸡出售后空舍710天，进行彻底清洗消毒，然后再饲养下一批鸡。 马立克疫苗在控制本病中起关键作用，应按免疫程序预防接种马立克疫苗，防止疫病发生。 发生本病时，应按中华人民共和国动物防疫法规定，采取严格控制、扑灭措施，防止扩散。病鸡和同群鸡应全部扑杀并无害化处理。污染的场地、鸡舍、用具、粪便等严格消毒。论文篇鸡马立克氏病是动物临床中的常见病，其抗原性及宿主特异性的不同，造成临床动物症状也不大相同，危害性已经引起了人们的重视。本论文中，此例病鸡经过临床观察发现疑似马立克氏病毒感染，最终通过实验室诊断确诊为马立克氏病毒感染。现将诊断情况介绍如下。1 材料1.1动物2013年1月20日于扬州大仪某养猪场采购10只35日龄鸡11.2 药品试剂蛋白酶K、Taq DNA 聚合酶、dNTPs、10 PCR Buffer、氯化镁、DNA Marker( DL2000)购自TaKaRa公司，PCR 产物纯化试剂盒购自Promega 公司；10的中性福尔马林、95%乙醇、无水乙醇、 二甲苯、苏木素、1的盐酸酒精、5的伊红，石蜡、中性树胶、草酸结晶紫、碘液、沙黄染液等由病理教研室提供。1.3 器材PCR 仪（美国 Applied Biosystems 公司）；电泳仪、凝胶成像仪（美国 Gene 公司）；LEICA RM2235 切片机、恒温蜡箱、展片仪、蔡司显微镜。剪刀、镊子、托盘、广口试剂瓶、眼科镊子、刀片、蜡杯、载玻片、盖玻片、毛笔、切片木架、切片盒、标签纸、切片刀、熔蜡箱、展片台、血琼脂平板培养基、麦康凯培养基，酒精灯，铂耳环，无菌操作台、吸水纸。1.4菌株经病鸡病料采集并培养获得1.5 引物合成根据巴氏杆菌Kmt1基因序列设计引物，参考文献10，上游引物（P1）：5，- GGTCT - TAGATGAGCGACAAGG - 3，下游引物（P2）：5，- GCGCTAT - TACTTCCTTCGTTC - 3，。扩增片段大小为457bp，引物由上海生物工程技术公司合成。2方法2.1 剖检取材剖检后取病变明显的心脏、肺脏、肝脏、肾脏、脾脏、淋巴结等组织。立即投入盛有10%中性福尔马林的标本瓶中，贴上标签，注明固定日期，固定48h。2.2 石蜡切片的制作将病料从固定液中取出，水洗12h，置于70%酒精脱水2h，之后顺序放入85%乙醇； 95%乙醇； 100%乙醇中，各24h。将病料从100%乙醇取出后置于二甲苯透明20min。将透明好的组织从二甲苯中取出，放入蜡杯、蜡杯内透蜡，各2h。用温热吸管吸热石蜡注入蜡模，用温热镊子夹取组织块放入蜡中，放平。将蜡模全部浸入冷水中，待石蜡全部凝结变硬即可取出蜡块。把包埋好的蜡块用刀片修切成正方形或长方形。2.3 切片切片厚度5m，取洁净的载玻片涂以甘油蛋白，在涂有甘油蛋白的载玻片上滴两滴蒸馏水，将蜡带切成适当长度的片段，以小镊子夹取蜡带，使浮在玻片的水上。然后把玻片放在展片台上，蜡带受热即自动展开，也可用解剖针轻轻拉开。待蜡片完全展平后，用吸水纸吸去多余水分，蜡片在载玻片上展开后，即取下放在切片框上，置入37温箱内干燥。2.4 HE染色石蜡切片后，放入60烘箱中烘片30min至蜡融为止。然后放入二甲苯12min，取出再放入二甲苯12min，取出，放入95酒精一分钟两次。然后水洗，在进行苏木素染色410min，水洗，用1盐酸酒精分化浸提一次，水洗至蓝化为止，然后用0.5伊红酒精染色12min，水洗，再放入95酒精12min，取出，放入纯酒精12min，取出，放入二甲苯至透明，然后用树胶封片，贴标签，置于光学显微镜下阅读切片、记录结果并拍照。2.5 细菌分离培养取病变明显的新鲜病料，包括心脏、肝脏、肺脏以及有脓肿的肺脏，将剪刀放在酒精灯上燃烧灭菌，然后轻烫病料一周，进行无菌处理，剪下处理后的一部分，保持切面平整，分别均匀涂在血琼脂平板培养基和麦康凯培养基上的相应位置。对于肺脓病料，需要用铂耳环挑取脓汁划线于血琼脂平板培养基上的相应位置上。37的恒温箱中培养过夜观察结果。2.6 细菌染色镜检取洁净载玻片2块，毛面向上，依次从上向下标记心、肝、肺、肺脓，并在载玻片的背面画圆，要求两个圆之间有5mm以上距离。首先用酒精灯将铂耳环烧红灭菌，然后用铂耳环蘸取一滴PBS分别滴在2个载玻片的每个圆中。用铂耳环挑取血琼脂平板上生长的单菌落均匀涂在载玻片的相应圆内。将涂片后的载玻片放在酒精灯火焰上固定。将经酒精灯固定后的涂片用草酸结晶紫初染，染色2min。用清水冲洗初染后的涂片，加碘液覆盖涂面2min，用清水再次冲洗媒染后的涂片，加95%的酒精数滴，并轻轻摇动进行脱色，30s后水洗，滴加沙黄染液数滴，染色2min后用清水再次冲洗，并用吸水纸吸去水分，干燥。 制备好的涂片上滴加两滴美蓝染液，2 min后水洗，用吸水纸吸干，干燥，镜检。 2.7 PCR 检测2.7.1 模板制备将从血琼脂平板肺组织培养的细菌菌落上刮取的细菌放入PCR管中，加入70L超纯水SW，100沸腾10min，然后冰浴5min，放入离心机中12000转离心2min。上清液即为模板。2.7.2 PCR反应体系及扩增PCR反应体系总体积25L，内含10PCR buffer 2.5L， dNTPs 0.5L， Mg2+ 1.5L，上下游引物各0.5L，模板DNA 3L，Taq DNA聚合酶0.5L，补充去离子水至25L。反应条件为：94 4 min、 94 1 min、 59 1 min、 72 30s ，30个循环，72 10 min，4 保存。2.7.3 电泳制胶：使用天平称取0.4g琼脂糖，加入40ml缓冲液。置于微波炉上加热，至琼脂糖颗粒完全融化后，倒入胶板内，加上一滴溴化乙锭，加上梳子，待冷却后，取出梳子。 加样：用加样枪吸取2L溴酚蓝充分混合后，再吸取5L于加到各加样空，然后再加入7L的100bp DNA Ladder Marker，用作指示条带。将凝胶放入电泳槽内，设置电压100V，40 min后置于凝胶成像系统内观察结果并拍照。 3结果3.1 临床症状主要表现为步态不稳、共济失调。特征症状是一肢或多肢麻痹或瘫痪，形成一腿伸向前方一腿伸向后方，翅膀麻痹下垂。颈部麻痹致使头颈歪斜，嗉囊因麻痹而扩大为精神萎靡、食欲不振、拉稀、被毛粗乱、呼吸困难等症状。（见图1）。3.2 剖检病变病鸡胸下皮肤可见肿瘤硬块，剖检可见肝脏、腺胃、肾脏、脾脏、肺上存在肿瘤硬块和结节 图1 图2 图3 图4 3.3 病理组织学变化各内脏器官的组织学变化均以淋巴组织增生和形成肿瘤性病变为主要特征。各脏器的肿瘤病变基本相同，主要表现为淋巴样细胞的弥漫性或局灶性增生与浸润。增生与浸润的肿瘤细胞均由多形态的淋巴样细胞所组成，瘤细胞分裂象多见，受侵害的组织还伴有出血、细胞变性或坏死等变化3.3.1心脏变化心肌内肿瘤组织沿心肌纤维间呈浸润性生长，或在局部形成肿瘤结节，使原有结构遭受不同程度的破坏。残存的心肌纤维着色不匀，纵、横纹紊乱，轻度颗粒变性。毛细血管扩张充血，以心外膜处更为明显。3.3.2肝脏变化肝内肿瘤组织沿窦状隙或小叶间血管周围呈弥漫性、浸润性生长，使肝脏原有结构破坏。肝细胞索呈腺管样弥散于肿瘤组织内，肝细胞发生颗粒变性，并有大量淋巴样细胞浸润（图2-A）。3.3.3脾脏变化脾脏内肿瘤组织生长旺盛，大面积脾组织被肿瘤组织取而代之，形成大片的肿瘤性病灶，使脾脏的原有结构严重破坏。3.3.4肾脏变化肾脏的皮质和髓质内均可发现肿瘤组织生长。肿瘤细胞在肾间质内呈浸润性生长。肿瘤组织生长处间质增宽，肾小管原有结构破坏，残存的肾小管肾上皮发生颗粒变性；并有大量淋巴样细胞浸润（图2-B）H3.4 PCR检测将PCR产物通过琼脂糖凝胶电泳进行分析，结果显示：待检细菌可以扩增为约314bp的目的片段，与对照组马立克氏病毒的电泳结果一致（见图7），即马立克氏病。 注：图1：病料组织MDV PCR扩增结果M. Marker；P. 阳性对照；1-5. 1-5号病鸡肝脏、脾脏由图1可见，阳性对照和1-5号病鸡肝脾样品均扩增出一条明显的约314bp大小的条带，与目的条带大小相符。 4. 小结与讨论本病例中，病鸡的大体病变疑似马立克氏病、胸膜肺炎或副猪嗜血杆菌感染等。根据临床症状、剖检病变、组织学观察以及细菌的分离培养、染色镜检和PCR检测，最终综合诊断为马立克氏病。剖检病理变化与组织学病理变化结果表明，剖检可见内脏器官有灰白色的淋巴细胞性肿瘤。常见于性腺(尤其是卵巢)，其次是肾、脾、心、肝、肺、胰、肠系膜、腺胃、肠道、肌肉等器官组织。本研究中，采用菌落PCR方法进行细菌定性检测。根据徐丽14的研究报道，菌落PCR方法与常规PCR方法相比，具有同样的效果，均能扩增目的片段。常规PCR扩增前需制备、纯化DNF模板，其方法主要有酸酚法、碱酚法、碱性SDS裂解法、CsCl2 -溴化乙锭密度梯度离心法和煮沸裂解法等。它们各有优缺点，有的操作繁琐，难度大；有的则成本较高，同时在反复的操作中DNA量损失也较大，产率较低。而菌落PCR方法最早见于D. Gussow和T. Clackson的文章15。他们提到用无菌牙签挑取单个菌落到TE缓冲液中，煮沸5min，漩涡振荡后短暂离心，用12L裂解液作为DNA模板，省去抽提模板DNA这一步，有效节省大量时间和实验成本。本实验中，采用菌落PCR方法，将样品跳过DNA抽提这一步，而直接以菌体热、冻解后暴露的DNA为模板进行PCR扩增，不仅节约了时间，增加了设备利用率，同时降低了研究成本。针对本例病鸡的病程情况，分析鸡场发生此例幼龄鸡感染马立克氏病毒的原因。忽视常见病毒传染病的免疫接种，可能是此猪场发生本病的原因之一。而若在接种疫苗的情况下依旧发生感染，可能是免疫失败或是病毒产生耐药性，应选择本地区适用的新型抗病毒药物。同时加强饲养管理，注意通风换气和防暑防寒，避免过度拥挤，定期进行动物舍及运动场消毒。坚持全进全出饲养制度。发生本病时，应立即隔离患病猪并严格消毒其污染的场所，在严格隔离的条件下对患病鸡进行治疗。参考文献14 徐丽，蔡俊鹏. 菌落PCR方法的建立及其与常规PCR方法的比较J. 华南 理工大学学报，2004，32（5）：51-55.15 Gussow D，Glackson T. Direct clone characterization from plaquesand colonies by the polymerase chain reaction J. NucleicAcidsRes，1989，17:4 000.致谢 对于本论文的完成，我要衷心感谢我的指导老师王小波老师对我的热心帮助和指导。在我撰写论文的时候王老师帮我进行论文的选题，材料的收集和实验的指导。不厌其烦对我论文的指导修改，最后定稿。王老师专心细致的教诲和无私的帮助使我十分感动，在此表示真诚地感谢和深深的谢意。他对科研工作的严谨态度与敬业作风，以及对待他人耐心、真诚的品质令我受益匪浅，是我学习的典范。同时也感谢在我写论文期间帮助我，给予我建议，协助实验的同学们。感谢所有关心、支持、帮助过我的良师益友。 最后，向在百忙中抽出时间对本文进行评审并提出宝贵意见的各位专家表示衷心地感谢！1. 基于C8051F单片机直流电动机反馈控制系统的设计与研究2. 基于单片机的嵌入式Web服务器的研究 3. 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Pico专用单片机核的可测性设计研究 43. 基于MCS-51单片机的热量计 44. 基于双单片机的智能遥测微型气象站 45. MCS-51单片机构建机器人的实践研究 46. 基于单片机的轮轨力检测 47. 基于单片机的GPS定位仪的研究与实现 48. 基于单片机的电液伺服控制系统 49. 用于单片机系统的MMC卡文件系统研制 50. 基于单片机的时控和计数系统性能优化的研究 51. 基于单片机和CPLD的粗光栅位移测量系统研究 52. 单片机控制的后备式方波UPS 53. 提升高职学生单片机应用能力的探究 54. 基于单片机控制的自动低频减载装置研究 55. 基于单片机控制的水下焊接电源的研究 56. 基于单片机的多通道数据采集系统 57. 基于uPSD3234单片机的氚表面污染测量仪的研制 58. 基于单片机的红外测油仪的研究 59. 96系列单片机仿真器研究与设计 60. 基于单片机的单晶金刚石刀具刃磨设备的数控改造 61. 基于单片机的温度智能控制系统的设计与实现 62. 基于MSP430单片机的电梯门机控制器的研制 63. 基于单片机的气体测漏仪的研究 64. 基于三菱M16C/6N系列单片机的CAN/USB协议转换器 65. 基于单片机和DSP的变压器油色谱在线监测技术研究 66. 基于单片机的膛壁温度报警系统设计 67. 基于AVR单片机的低压无功补偿控制器的设计 68. 基于单片机船舶电力推进电机监测系统 69. 基于单片机网络的振动信号的采集系统 70. 基于单片机的大容量数据存储技术的应用研究 71. 基于单片机的叠图机研究与教学方法实践 72. 基于单片机嵌入式Web服务器技术的研究及实现 73. 基于AT89S52单片机的通用数据采集系统 74. 基于单片机的多道脉冲幅度分析仪研究 75. 机器人旋转电弧传感角焊缝跟踪单片机控制系统 76. 基于单片机的控制系统在PLC虚拟教学实验中的应用研究77. 基于单片机系统的网络通信研究与应用 78. 基于PIC16F877单片机的莫尔斯码自动译码系统设计与研究79. 基于单片机的模糊控制器在工业电阻炉上的应用研究 80. 基于双单片机冲床数控系统的研究与开发 81. 基于Cygnal单片机的C/OS-的研究82. 基于单片机的一体化智能差示扫描量热仪系统研究 83. 基于TCP/IP协议的单片机与Internet互联的研究与实现 84. 变频调速液压电梯单片机控制器的研究 85. 基于单片机-免疫计数器自动换样功能的研究与实现 86. 基于单片机的倒立摆控制系统设计与实现 87. 单片机嵌入式以太网防盗报警系统 88. 基于51单片机的嵌入式Internet系统的设计与实现 89. 单片机监测系统在挤压机上的应用 90. MSP430单片机在智能水表系统上的研究与应用 91. 基于单片机的嵌入式系统中TCP/IP协议栈的实现与应用92. 单片机在高楼恒压供水系统中的应用 93. 基于ATmega16单片机的流量控制器的开发 94. 基于MSP430单片机的远程抄表系统及智能网络水表的设计95. 基于MSP430单片机具有数据存储与回放功能的嵌入式电子血压计的设计 96. 基于单片机的氨分解率检测系统的研究与开发 97. 锅炉的单片机控制系统 98. 基于单片机控制的电磁振动式播种控制系统的设计 99. 基于单片机技术的WDR-01型聚氨酯导热系数测试仪的研制 100. 一种RISC结构8位单片机的设计与实现 101. 基于单片机的公寓用电智能管理系统设计 102. 基于单片机的温度测控系统在温室大棚中的设计与实现103. 基于MSP430单片机的数字化超声电源的研制 104. 基于ADC841单片机的防爆软起动综合控制器的研究105. 基于单片机控制的井下低爆综合保护系统的设计 106. 基于单片机的空调器故障诊断系统的设计研究 107. 单片机实现的寻呼机编码器 108. 单片机实现的鲁棒MRACS及其在液压系统中的应用研究 109. 自适应控制的单片机实现方法及基上隅角瓦斯积聚处理中的应用研究110. 基于单片机的锅炉智能控制器的设计与研究 111. 超精密机床床身隔振的单片机主动控制 112. PIC单片机在空调中的应用 113. 单片机控制力矩加载控制系统的研究 项目论证，项目可行性研究报告，可行性研究报告，项目推广，项目研究报告，项目设计，项目建议书，项目可研报告，本文档支持完整下载，支持任意编辑！选择我们，选择成功！项目论证，项目可行性研究报告，可行性研究报告，项目推广，项目研究报告，项目设计，项目建议书，项目可研报告，本文档支持完整下载，支持任意编辑！选择我们，选择成功！单片机论文，毕业设计，毕业论文，单片机设计，硕士论文，研究生论文，单片机研究论文，单片机设计论文，优秀毕业论文，毕业论文设计，毕业过关论文，毕业设计，毕业设计说明，毕业论文，单片机论文，基于单片机论文，毕业论文终稿，毕业论文初稿，本文档支持完整下载，支持任意编辑！本文档全网独一无二，放心使用，下载这篇文档，定会成功！