学习资料NY13802007蔬菜、水果中51种农药多残留的测定气相色谱质谱法ppt课件.ppt

蔬菜水果中GCMS分析确证方法蔬菜、水果中蔬菜、水果中51种种农药多残留的多残留的测定定气相色气相色谱-质谱法法农业部农产品质量监督检验测试中心（北京）1.QuEChERS方法的分析流程2.3.QuEChERS方法在非脂类食品中的应用在非脂类食品的样品处理步骤中，对于含水量较低的样品（80%water conten t10 g-Fruits and vegetables 25-80%water content10 gX gHoney5 g10 gSpices2 g10 g4.3、QuEChERS方法的优缺点优点：点：能在三、四十分能在三、四十分钟内同内同时进行同一行同一试样中中6-12个个样本的萃取提本的萃取提纯，而很，而很少有有害物少有有害物质的浪的浪费。在很多种基在很多种基质中提取出来的中提取出来的农药经过检测在在RSDs5%的情况下均可达的情况下均可达到到90%-110%的回收率。的回收率。缺点：缺点：在有些水果蔬菜基在有些水果蔬菜基质中用此方法并不能中用此方法并不能获得很好的回收率。得很好的回收率。水果蔬菜汁液的水果蔬菜汁液的PH值一般一般为2.5-6.5，因此在使用此方法中易，因此在使用此方法中易发生：生：离子化：碱性离子化：碱性农药在酸性条件下的在酸性条件下的质子化，降低了残留子化，降低了残留农药全部的全部的进入有机相入有机相降解：降解：对碱敏感的碱敏感的农药在高的在高的PH值样本中本中;对酸敏感的酸敏感的农药在低的在低的PH值样本中，均易本中，均易发生此生此现象。象。5.QuEChERS方法的改方法的改进 由于由于QuEChERS方法方法对酸或碱敏感性酸或碱敏感性农药在低或高的在低或高的pH值的母本的母本样品中的回收品中的回收率率较差。因此，人差。因此，人们在在QuEChERS方法的方法的基基础上，上，对其其进行了改行了改进，既在提取，既在提取过程程中中加入适当加入适当浓度的度的缓冲溶液冲溶液，这样增加了增加了对酸碱敏感的酸碱敏感的农药在前在前处理理过程中的程中的稳定定性，提高了性，提高了农药残留残留检测的回收率及准确的回收率及准确度。度。6.CollaborativeStudyinter-laboratoryvalidationofthebufferedQuEChERSmethod13laboratoriesin7countries(Canada,Denmark,Germany,TheNetherlands,Spain,UK,andUSA)21fortified(at10-1,000ng/g)and6incurredpesticidesin3commodities(grape,lettuce,andorange)analysisby(LVI-)GC-MSandLC-MS/MS7.农业行行业标准准NY/T 1380-2007蔬菜、水果中蔬菜、水果中51种种农药多残留的多残留的测定定气相色气相色谱-质谱法法在在重重现USDA USDA QuEchERSQuEchERS方方法法的的基基础上上，结合合中中国国国国情情扩展展农药品品种种（5151种种），提提高高灵灵敏敏度度，开开发适合国情的适合国情的QuEchERSQuEchERS的的GC/MSGC/MS方法。方法。重重点点解解决决农业部部优先先监测的的1313种种有有机机磷磷、有有机机氯农药的的回回收收率率和和确确证灵灵敏敏度度问题，进而而扩展展为5151种种农药，得得到到一一种种简便便、灵灵敏敏、准准确确定定量的量的GC/MSGC/MS确确证方法。方法。8.样品前处理流程图15g 粉碎粉碎 样品品+15ml 0.1%醋酸醋酸/乙乙腈溶液溶液+6.0g 无水硫酸无水硫酸镁+1.5g 醋酸醋酸钠取取2.0ml 上清液至盛有上清液至盛有300mg无水硫酸无水硫酸镁100mg PSA和和100mgC18离心离心试管中管中5000转/分分钟离心离心1.0分分钟剧烈振烈振荡1.0分分钟旋旋涡混合器混合混合器混合1.0分分钟5000转/分分钟离心离心1.0分分钟取取1.0ml 上清液至上清液至进样器小瓶中，用氮吹器小瓶中，用氮吹仪在室温条件下在室温条件下浓缩至小于至小于0.8ml分分别加入加入100ul TPP和和100ul 分析保分析保护剂混混合溶液，用乙睛定容至合溶液，用乙睛定容至1.0ml9.10.11.12.13.GCMS分析分析14.方法实验条件色色谱柱：柱：HP-35MS，30m*0.25mm*0.25um进样口：毛口：毛细管分流管分流/不分流不分流进样口，口，250进样量：量：2ul程序升温：程序升温：95,保留保留1.5分分钟，20/min升温至升温至190,随后随后5.0/min升温至升温至230,最后最后25/min升温至升温至290，保留，保留20.0分分钟离子源温度：离子源温度：230，四极杆温度：，四极杆温度：150检测模式：模式：选择离子模式（共离子模式（共17组）采用保留采用保留时间锁定（恒流模式），以定（恒流模式），以TPP为锁定目定目标化合物，化合物，锁定定时间为18.03分分钟，并且建立了此种条件下的保留，并且建立了此种条件下的保留时间锁定定库。定量方法：定量方法：TPP作作为内内标，内，内标法定量。法定量。样品种品种类：苹果，黄瓜，韭菜；梨，西：苹果，黄瓜，韭菜；梨，西红柿，甘柿，甘蓝；草莓，胡；草莓，胡萝卜，卜，油菜。油菜。15.GCMS方法方法测试农药名称，保留名称，保留时间及及检测离子离子16.51种农药GC-MS总离子流图 17.本本标准方法的技准方法的技术特点：特点：无水硫酸无水硫酸镁代替无水硫酸代替无水硫酸钠和和氯化化钠脱水脱水分散固相萃取代替固相萃取柱分散固相萃取代替固相萃取柱净化化添加分析保添加分析保护剂提高提高检测灵敏度灵敏度18.基质效应指样品中除目标分析物以外的其它成分对目标化合物定量结果的影响。根据基质对检测信号响应值的不同影响，基质效应可分为基质增强效应和减弱效应。增强效应即基质成分的存在减少了色谱系统活性位点与待测物分子作用的机会，使得待测物检测信号增强的现象；减弱效应是指基质成分的存在使仪器检测信号减弱的现象。在气相色谱分析中大多数农药表现出不同程度的基质增强效应，严重影响了分析结果的准确性。国内为了解决基质效应的问题大部分采用基质匹配标样来做为定量标样，但是由于基质种类繁多，配制基质标样的前处理过程复杂，不确定混合基质标样是否能够代表单一的基质标样，且基质标样由于基质的存在使得标样有效的贮存时间很短，为残留分析造成了很大的影响。基质效应的定义19.Discussions20.基质效应的消除与补偿办法 基质匹配标准溶液校准方法：欧盟委员会指令2002/657/EC中指出：在使用的情况下，标准标样必须是制备于尽可能与样品溶液中相同的溶液当中。由于基质效应依赖于所分析的样品基质，那么获得精确结果的最好方式就是对每种样品基质使用其基质匹配标样。目前许多的农药残留检测方法都是使用基质匹配标样来进行校准的，以使标样中的基质环境与样品相同。21.上面这种方法固然有效，但是在检测任务繁重的常规实验室应用起来并不实际，其原因是：由于不同样品之间性质差异很大，在分析检测过程需要考虑各种样品具有不同的基质特性，会产生不同的基质效应；应用时需要选择空白样品材料，然后制备对应于各种样品的基质匹配标样；使得更多的样品基质进入到仪器中，又增加了系统的维护费用；并且这种标样，不易于长期保存，随着时间的增长，基质中的农药会发生降解。为了避免对于每种样品种类都要配制其基质匹配标样，Martmez等对比了4种蔬菜和2种瓜类的基质匹配标准曲线，从中选择黄瓜和分别作为蔬菜和水果的代表基质，来配制基质匹配标准溶液用于其它蔬菜和水果的定量。虽然这种方法较为简便一些，但是不同种类样品间的相对基质效应有时是比较大的。22.多步净化措施：对提取物进行逐步净化可以有效地净化样品,去除杂质的干扰 进样技术和操作条件的优化：标准添加法和内标法 分析保护剂的应用：由于气相色谱分析中基质效应产生的主要原因是进样口、柱头的活性位点与待测物基团的相互作用,所以通过使用合适的试剂以阻止活性位点与待测物之间的相互作用,将会是一种有效的方法。而这种试剂的选择以及其适用性则是关键的因素。23.基质效应24.25.26.27.保护剂D05(20mg/ml)+B06(1.0mg/ml)对峰形和峰面积的影响 A:基质提取+分析保护剂 B:基质提取 C:标样+分析保护剂 D:标样(黄瓜,苹果,韭菜混合基质)ABCDABCDMethamidophos m/z 94Acephate m/z 136Omethoate m/z 156Carbofuran m/z 164Mevinphos m/z 127Fenvalerate m/z 16728.使用分析保护剂这种方法补偿基质效应的优点如下:能改善待测物峰形和强度;操作非常简便,是基质匹配校正方法所不能比拟的;能得到更低的检测限;GC 系统不需要经常维护。缺点是加入的浓度大,全扫描时会掩盖部分农药峰,只能用选择离子扫描检测。29.韭菜(添加水平250ppb)30.Leek MatrixPest Std+ProtectantsLeek+Pest std+Protectants31.方法优越性方法简单易行，且保证回收率和灵敏度。方法使用保护剂山梨醇和乙氧基丙二醇，有效地减弱基质效应，减少纯溶剂标样定量的误差，且能提高甲胺磷，乙酰甲胺磷，氧乐果，乐果，久效磷等农药的灵敏度。Dispersive-SPE技术的应用使得减少了样品的净化步骤，减少了在样品前处理过程中的 损失。方法使用内标法定量，减少了由于仪器响应不同造成的误差。方法使用了保留时间锁定技术，保留时间和质谱图双重定性。保留时间锁定技术使得方法的推广和应用方便，SIM表和定量表建立简单。32.谢谢大家！33.后面内容直接删除就行资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用34.主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！35.致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求36.感感谢您的您的观看和下看和下载The user can demonstrate on a projector or computer,or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field37.后面内容直接删除就行资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用38.主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！39.致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求40.感感谢您的您的观看和下看和下载The user can demonstrate on a projector or computer,or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field41.