1、金黄色葡萄球菌v食工1:黄婉玲、陈倩文、陈诗妍、何渝、柯畅v食工3:林俊虹、黄桂愉、李明芬、黄海波、罗锐波Staphyloccocus aureus Rosenbach 分类地位生物学特性功能/危害作用机理最新研究进展金黄色葡萄球菌微生物原核微生物真核微生物非细胞微生物细菌放线菌光合性细菌立克次氏体、支原体、衣原体古菌(蓝细菌、光合细菌)(链霉菌、卡诺氏菌)(酵母菌、丝状真菌即霉菌)(病毒)(个体形态)球菌杆菌螺旋菌金黄色葡萄球菌生物学特性形态与染色 培养特性 生化特性 生物学特性v形态与染色 典型的金黄色葡萄球菌为球型,直径0.8m左右,显微镜下排列成葡萄串状。其细胞壁含有3种主要成分:核糖
2、醇磷壁酸、肽聚糖和A蛋白(SPA)。A蛋白已广泛应用于细菌、病毒等病原诊断及分析等方面。金黄色葡萄球菌A蛋白 显微镜下的金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌无芽孢、鞭毛,大多数无荚膜。革兰氏染色阳性。培养特性v 金黄色葡萄球菌营养要求不高,在普通培养基上生长良好,需氧或兼性厌氧,最适生长温度37C,最适生长pH 7.4。v平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起,直径1-2mm。血平板菌落周围形成透明的溶血环。v金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性,可在10-15%NaCl肉汤中生长。生化特性v可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖,产酸不产气。甲基红反应阳性,VP反应弱阳性。v许多菌株可分解精氨酸,水解尿素,还原硝酸盐,液
3、化明胶。v金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力,对磺胺类药物敏感性低,但对青霉素、红霉素等高度敏感。功能/危害 金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)是引起医院感染和细菌性食物中毒的一种主要病原菌。该菌可分泌20 多种毒性蛋白质:这些毒性物质是引起人类疾病的主要致病因子。其分泌的葡萄球菌肠毒素葡萄球菌肠毒素(Staphylococcal Staphylococcal enterotoxinenterotoxin SE)SE);可引起人类胃肠炎性的细菌性食物中毒;有些菌株可产生引起烫伤样皮肤综合症的表皮剥表皮剥脱毒素脱毒素A A和和B(B(exfoliativeexfoliati
4、ve toxins A toxins A和和B B);有些菌株可产生引起人类中毒性休克综合症的中毒性休克综合症毒素中毒性休克综合症毒素(toxic shock(toxic shock syndrome syndrome toxtox in TSST-1)in TSST-1)。关于金黄色葡萄球菌各种致病因子的特性详见表112毒素种类毒素种类 发现年发现年代代 分子量分子量(dada)主要成分主要成分等电点等电点基因编码部基因编码部位位引起的疾病引起的疾病肠毒素 A19602780006.8染色体 食物中毒 肠毒素B 1959283668.6染色体 食物中毒 肠毒素C1 1967341008.6染
5、色体 食物中毒 肠毒素C2 1967340007.0染色体 食物中毒 肠毒素 C31965269008.15染色体 食物中毒 肠毒素 D1967285007.4质粒 食物中毒 肠毒素 E1971296007.0 噬菌体 食物中毒 表皮剥落脱毒素A 1971240007.0染色体 烫伤样皮肤综合症 表皮剥落脱毒素B 1971330007.0质粒剥落性皮炎 中毒性休克综合症毒素(TSST-1)1981240007.0转座子 毒性休克综合症 表1 金黄色葡萄球菌各种致病因子的特性小儿金黄色葡萄球菌肺炎 严重时可诱发纵隔积气纵隔积气金黄色葡萄球菌金黄色葡萄球菌 金黄色葡萄球菌肺炎(staph yloc
6、occus aureus pneumonia)是由金黄色葡萄球菌(一般为凝固酶阳性)所致的肺炎。由于滥用抗生素的结果,抗药性金黄色葡萄球菌的菌株明显增加,金黄色葡萄球菌感染也见增多。本病大多并发于葡萄球菌败血症,多见于幼婴及新生儿,年长儿也可发生。增强体质,提高自身的免疫力,是预防肺炎的有效途径。同时必须重视幼托机构居室的卫生清洁,并应及时检查工作人员是否带菌,带菌者及时适当处理。MRSA是已经对甲氧苯青霉素具有抗药性的金黄色葡萄球菌,已成为困扰全球医院的恶菌之一。原因是感染MRSA后,现时仅存一种抗生素万古霉素(Vancomycin)可以治疗患者,但副作用严重,病人常出现肾功能受损,而近年全
7、球包括香港,均发现这种恶菌连万古霉素也出现抗药性,令治疗成为一大难题。虽然近两年发现一种新药Linezolid亦可治疗MRSA,但使用超过两周,会出现血小板减少的严重副作用,病人可能流血不止。超级细菌超级细菌耐甲氧西林金黄色耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(葡萄球菌(MRSAMRSA)研究进展v目前对于金黄色葡萄球菌的研究进展主要还是在医疗方面和检测方面。v茶多酚对金黄色葡萄球菌的抑制作用v蜂胶有助于对抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌v蝓天克喘胶囊对金黄色葡萄球菌的抗菌作用 v蓼科植物抗金黄色葡萄球菌的研究现状简述 v荧光定量PCR快速检测金黄色葡萄球菌茶多酚对金黄色葡萄球菌的抑制作用 茶多酚作为一种广谱、
8、强效、低毒的抗药,对金黄色葡萄球菌和普通变形杆菌尤其是对肠道致病菌具有不同的抑制和杀伤作用。茶多酚抗菌的主要机制是能特异性地凝固细菌蛋白、破坏细菌细胞膜结构,与细菌遗传物质DNA结合,从而改变细菌生理、抑制细菌生长。【3】茶多酚对金黄色葡萄球菌最低抑制浓度为62.5mg/ml。蜂胶有助于对抗耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 根据英国斯特拉斯克莱德大学完成的一项研究结果,蜂蜜在对抗致命的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(MRSA)治疗中可能发挥关键作用。研究人员发现,来自太平洋地区蜂巢中的蜂胶,对引起致命感染、特别是住院患者感染的MRSA有活性。蝓天克喘胶囊对金黄色葡萄球菌的抗菌作用v蝓天克喘胶囊为治疗慢性阻塞
9、性肺病的中药 2类新药,主要成份为腹足类腹足纲肺螺亚纲柄眼目蛞蝓科足襞蛞蝓全虫的冷冻干燥粉。v功能主治:平喘止咳,固肺祛邪,主要用于慢性阻塞性肺病、慢性支气管炎、支气管哮喘等疾患的治疗。【4】结论:蝓天克喘胶囊能改善金黄色葡萄球菌感染小鼠的摄食、饮水及或存活天数,减轻细菌感染所致的囊肿及结节形成。说明蝓天喘胶囊对金黄色葡萄球菌有一定抗菌作用。蓼科植物抗金黄色葡萄球菌的研究现状简述v具有抗金黄色葡萄球菌的蓼科植物有蓼属植物何首乌、虎杖、杠板归、拳参、抱茎花蓼和太白蓼等;还有药用大黄、掌叶大黄、R.nervosus和R.abyssinicus等大黄属的植物及酸模属植物。v蓼科植物大多具有清热解毒、
10、散结消肿等功效,这与蓼科植物具有抗菌杀毒作用息息相关,蓼科植物具有抗金黄色葡萄球菌的主要化学成分为蒽醌衍生物和二苯乙烯苷类及挥发油成分。【5】荧光定量PCR快速检测金黄色葡萄球菌v金黄色葡萄球菌(Staphy loco ccus aureus,简称SAU)广泛分布于自然界,可产生肠毒素,误食被其污染的饮用水、牛奶及奶制品等可引起急性胃肠炎,导致以呕吐为主要症状的食物中毒,至今已有多起牛奶及奶制品污染SAU 的事件被报道。v为检测食品中的SAU,国内外常用的微生物定量方法有平板计数法、细菌磷酸酶活性定量法、MPN-PCR 法等,这些方法耗时费力、特异性不强、需要PCR后处理。v另一种定量方法是荧
11、光定量PCR,该方法能够定量测定DNA的含量,因此也具有对微生物进行计数的能力。但许多食品基质、培养基等都可能对PCR 有抑制作用,导致假阴性结果,这是荧光定量PCR全面引入常规食品分析的一大障碍。【6】v荧光定量PCR 技术是目前最准确、重现性最好的核酸分子定量定性检测方法,已经广泛应用于基因表达、转基因、病原体检测等诸多领域。v本研究中,我们选取SAU nuc基因为靶基因设计合成引物和探针。所建立的nuc-IAC荧光定量PCR实验引入了内质控IAC,IAC是一段非靶核酸的DNA片段,加入到反应体系中,能利用靶核酸的引物与靶核酸同时进行扩增。v本实验的IAC由单核细胞增生李斯特菌特异hly基
12、因片段两侧连接上nuc特异片段构成。通过利用另一个标记不同荧光基团(JOE)的TaqMan 探针来检测IAC信号,使体系能同时检测IAC与nuc扩增。由此,IAC能够非常方便的监控PCR抑制、实验中的操作错误等,防止假阴性发生,从而防止因PCR失败而导致的靶基因的低估,有助于解释用PCR技术分析食品污染所得到的结果,如果目的序列的扩增结果是阴性,而IAC信号也缺失,表明这个PCR反应失败。1向阳.2002.食品中金黄色葡萄球菌及其肠毒素的检测方法J.中国食品学报2雷祚荣.金黄色葡萄球菌肠毒素分子遗传学研究进展J.国外医学(微生物学分册)参 考 文 献3王恩智,缪汉强,周新辉,等 2010.茶多酚对金黄色葡萄球菌的抑制作用.中国药师.13(5):740-7414谭湘萍,罗其富,严鹏科,等 2010.蝓天克喘胶囊对金黄色葡萄球菌的抗菌作用研究.今日药学.20(10):47-495江正祥,2010.蓼科植物抗金黄色葡萄球菌的研究现状.科技资讯.30:241-243 6苏裕心,高 姗,康 琳,等.2010.荧光定量PCR快速检测金黄色葡萄球菌方法的建立.军事医学科学院院刊.34(1):25-29
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