菊花的组织培养导学案分析.doc

完整word)菊花的组织培养导学案分析
课题1 菊花的组织培养
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【教学目标】 1、熟悉植物组织培养的基本过程
2、理解细胞分化的概念及离体植物细胞的脱分化和再分化
一、基础知识 (一）植物组织培养的基本过程
1.细胞分化 （1）概念：在个体发育中，相同细胞的后代在______、______、____________上发生稳定性差异的过程。
（2)过程：如：受精卵增殖→生长→分化形成组织、器官、系统。
（3）特点：①持久性：是一种持久性的变化,它发生在生物体的整个生命过程中,在______期达到最大限度。②稳定性:细胞分化是稳定的,一般是____________的。
③全能性：已分化的细胞，仍具有发育成完整个体的潜能.
（4）结果：形成不同的细胞和组织。
（5）原因：______________________________________________________的结果。
2.细胞全能性
（1）定义：生物体的细胞具有使后代细胞形成完整个体的潜能的特性.
（2）原理：生物体的每一个细胞都包含有该物种所特有的全套遗传物质，都有发育成为完整个体所必需的全部基因.
（3）实例：已分化的植物细胞，仍具有全能性.高度特化的动物细胞，从整个细胞来说，全能性受到限制。但它的细胞核仍然保持着全能性,这是因为__________________。
(4）全能性的比较： 受精卵>胚胎干细胞〉生殖细胞(卵细胞)>体细胞。
3.植物组织培养
（1)必要条件：①细胞离体；②一定的营养物质、激素和其他外界条件。
（2）原理:细胞的全能性
(3）相关概念：①外植体：_________________________________________。
②脱分化：由高度分化的植物组织或细胞____________的过程，称为植物细胞的脱分化，或者叫做去分化。
③再分化：脱分化产生的愈伤组织继续进行培养，又可以重新分化成根或芽等器官，这个过程叫做再分化。
④愈伤组织: __________________，是高度液泡化的、成无定形状态的薄壁细胞。
（二)影响组织培养的因素 1。外植体的选取
不同植物的组织培养难度不同；同一种植物的不同组织培养难度不同。
菊花的组织培养一般选择__________________________________________。
2。培养基的配制(MS培养基）

3。不同植物激素浓度，使用顺序和使用量大量元素：N、P、K、Ca、Mg、S;
微量元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co
有机物：甘氨酸、烟酸、肌醇、维生素、蔗糖等。
植物激素:生长素、细胞分裂素、赤霉素等。

使用顺序
实验结果
先生长素，后细胞分裂素

先细胞分裂素,后生长素

同时使用

生长素细胞分裂素比值
结果
比值高时

比值低时

比值适中

4.消毒：在培养的整个过程中,都需要是一个______环境。
5.pH、温度、光照 菊花: pH=_____;温度控制在____℃；每日用日光灯照射____h。
二、实验操作 (一）MS固体培养基制备 1．配置各种母液
①无机物中大量元素浓缩______倍，微量元素浓缩______倍,常温保存。
②激素类、维生素类以及用量较小的有机物一般可按1mg/ml的质量浓度单独配制成母液。
③用母液配制培养基时,需要根据各种母液的浓缩倍数，计算用量。
2．配制培养基
① 配制培养液;② 调PH；③培养基的分装。
分装到锥形瓶中，每瓶分装50ml或100ml.由于菊花的茎段的组织培养比较容易，因此不必添加植物激素.
3．灭菌
分装好的培养基连同其他器械一起进行 灭菌.
（二）外植体消毒
1．选材：菊花茎段,取生长旺盛的嫩枝.
2．消毒
①流水冲洗：菊花茎段用流水冲洗后可少许 ，用软刷轻轻刷洗,刷洗后在流水下冲洗20min左右。
② 酒精处理：用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分,放入体积分数为70%的酒精中摇动______次,持续______s,立即将外植体取出,在无菌水中清洗。
③消毒液处理：取出后用无菌吸水纸吸干外植体表面的水分，放入质量分数为0.1%的氯化汞溶液中1－2min,取出后在无菌水中至少清洗______次，漂净消毒液。

课题1 菊花的组织培养的第二课时
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（三)接种
1．接种室消毒
污染的主要来源是空气中的细菌和孢子，接种室消毒是至关重要的。用70％的酒精喷雾使空气消毒, 酒精擦拭工作台并用紫外线照射20分钟。

2．无菌操作要求
操作要在____________完成，每次使用器械后，都需要__________________，接种后立即____________.
3．材料的切取和接种
4．接种注意事项
①每接种一块外植体前，镊子需放入体积分数为75％的酒精溶液中消毒一次，然后在酒精灯火焰上烧一遍，冷却后再接种。
②外植体在培养基中要分布均匀，放置外植体数量根据锥形瓶的大小确定，一般胡萝卜____________块，菊的茎或叶____________块,也不要太少，以充分利用培养基中的营养成分和光照条件.
③插入时应注意______,不要______。茎段、茎尖基部插入培养基利于_____
（四）培养
1．愈伤组织的培养
3．试管苗的培养
当愈伤组织长到一定大小后，可以更换培养基，进行试管苗的见光培养。
（五）移栽
1．打开封口膜
移栽生根的菊花试管苗之前，应先打开培养瓶的封口膜，让试管苗在培养间生长几日。
2．清洗转移
用流水清洗根部的培养基，将幼苗移植到消过毒的蛭石或珍珠岩等环境下生活一段时间.
3．移栽:幼苗长壮后，移栽到土壤中。
（六）栽培
幼苗移栽后,每天观察并记录幼苗的生长情况，适时浇水、施肥,直至开花.
［达标测试]
1．以下不能说明细胞全能性的实验是 （ ）
A．胡萝卜韧皮部细胞培育出植株 B．紫色糯性玉米种子培育出植株
C．转入抗虫基因的棉花细胞培育出植株 D．番茄与马铃薯体细胞杂交培育出植株
2．植物细胞表现出全能性的条件是 （ )
A．给予适宜的营养和外界条件 B．将成熟筛管的细胞核移植到去核卵细胞中
C．导入其他植物细胞的基因 D．脱离母体后，给予适宜的营养和外界条件
3．下列细胞工程技术培育新品种,操作过程中不能形成愈伤组织的是（ ）
A．植物组织培养 B．植物体细胞杂交
C．动物细胞培养 D．转基因植物的培育
4．愈伤组织分化过程，培养基中细胞分裂素/生长素的比值较低时诱导分化的是( )
A．根 B．芽 C．叶 D．胚性细胞团
5．下列植物组织培养的目的中不正确的是 （ ）
A．生产人工种子 B．生产新品种 C．生产杀虫剂 D．生产抗体
6。关于愈伤组织形成过程的正确叙述是 (  )
A。愈伤组织形成是离体的植物细胞分化的结果
B。愈伤组织形成是离体的植物细胞脱分化和分裂的结果
C。愈伤组织形成是离体的动物细胞分化的结果
D.愈伤组织形成是离体的动物细胞脱分化和分裂的结果
7. 把胡萝卜的单个韧皮部的细胞放入配制的培养基上培养，获得了许多完整的
植株,这种繁殖方式和细胞工程技术分别属于 (  ）
A.孢子生殖和细胞杂交技术  B.无性生殖和植物组织培养
C。配子生殖和细胞拆合技术  D。卵式生殖和细胞培养
8．（10分)请回答下列有关植物组织培养的几个问题：
(1）离体植物组织和细胞培养常用的一种培养基是 ，培养中常用的两种植物激素是 和 。
（2)植物组织培养的一般实验操作步骤包括 、外植体消毒、______、 培养、移栽、栽培.
（3）图示植物组织培养的部分过程：
离体的器官、
组织或细胞
①
A
②
植物体

①过程是 ,②过程是 ,A是
(4）组织培养过程中还需要维持一定的外界条件，一是要有适宜的 ____ ____ ,二是________ ____ __环境。

【基础知识】答案
一、基础知识
（一）植物组织培养的基本过程
1。细胞分化
（1）形态、结构、生理功能。
（3）特点:①胚胎。②不可逆转。
（5)原因：基因在特定的时间和空间条件下的选择性表达.
2。细胞全能性
（3）实例：细胞核内含有该物种遗传性所需要的遗传物质。
3.植物组织培养
（3）相关概念:
①外植体：从活植物体上切下进行培养的那部分细胞、组织或器官.
②脱分化：产生愈伤组织。
④愈伤组织:细胞排列疏松而无规则。
（二）影响组织培养的因素
1。外植体的选取：未开花植株的茎上部新萌生的侧枝.
3.不同植物激素浓度，使用顺序和使用量
先细胞分裂素，后生长素，细胞既分裂也
分化比值低时，促芽分化，抑根形成
4。消毒：无菌。
5.pH、温度、光照：pH=5.8；温度18-22℃；照射12。
二、实验操作
（一)MS固体培养基制备
1．配置各种母液：①10倍，微量元素浓缩100倍,常温保存。
（二)外植体消毒
2．消毒：② 酒精处理： 2－3次， 6－7s.③消毒液处理: 3次。
（三）接种
2．无菌操作要求：酒精灯火焰旁；用火焰灼烧灭菌；盖好瓶盖。
4．接种注意事项
②胡萝卜3－4块，菊的茎或叶6－8块。
③方向，不要倒插；吸收水分和养分。
思考:应该做几组重复、设置几组对照实验?
答：每种材料或配方至少要做一组以上的重复。设置对照实验可以取用一个经过灭菌的装有培养基的锥形瓶，与接种操作后的锥形瓶一同培养,用以说明培养基制作合格，没有被杂菌污染.
（四）培养
1．愈伤组织的培养：继代培养。

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