水律蛇病原菌的药敏实验.doc

海 南 大 学本 科 生 毕 业 论 文（设计）题 目：水律蛇病原菌的药敏实验 学 号： 20090109310033 姓 名： 年 级： 2009级 学 院： 农学院 系 别： 动物科学系 专 业： 动物医学 指导教师： 完成日期： 2013 年 4 月 1 日 水律蛇病原菌的药敏实验 摘 要 水律蛇（Mouse snake）也叫滑鼠蛇，是一种无毒且经济、药用价值都很高的蛇种，养殖水律蛇的效益很高，所以越来越多的人选择饲养水律蛇与研究水律蛇，本实验以能及时控制与治疗水律蛇间一种高度传染的细菌性急病、减少该疾病引起的危害为目的，研究该疾病，对引起该疾病的致病菌做一组药物敏感试验，以便准确、针对性地用药，从而能及时控制与治疗该疾病，减少损失，本实验从病蛇体内抽取心脏血获取致病菌，通过分离及纯化得到三种致病菌（鲁氏耶而森氏菌的两种不同形态菌；木糖氧化产碱杆菌），实验通过K-B纸片法用多种抗菌药物分别对这三种致病菌进行药物敏感实验（drug sensitive test）与最小抑菌浓度（minimal inhibitory concentration）测试，实验结果表明这三种致病菌皆对氟啶酸、丙环派酸、丁胺卡那霉素、氟苯尼考等药为极敏，对乙酰螺旋霉素为高敏，对痢特灵、利福平、先锋VI耐药。木糖氧化产碱杆菌对氟苯尼的最低抑菌浓度（MIC）为8 IU/ML，对卡那霉素的最低抑菌浓度（MIC）为37 IU/ML，对庆大霉素的最低抑菌浓度（MIC）为2 IU/ML，鲁氏耶而森氏菌形态A菌对氟苯尼考的最低抑菌浓度（MIC）为4IU/ML，对卡那霉素的最低抑菌浓度（MIC）为4 IU/ML，对庆大霉素的最低抑菌浓度（MIC）为1 IU/ML，鲁氏耶而森氏菌形态B菌对氟苯尼考的最低抑菌浓度（MIC）为4 IU/ML，对卡那霉素的最低抑菌浓度（MIC）为2 IU/ML，对庆大霉素的最低抑菌浓度（MIC）为0.5 IU/ML。关键词：水律蛇；致病菌；药敏实验；最小抑菌浓度 Abstract Mouse snake, is a non-toxic and economic, are high medicinal value snake species, breeding mouse snake-effective, so more and more people choose to farming mouse snake and research mouse snake, the purpose of the experiments is timely control and treatment of the bacterial disease that highly contagious from mouse snake, and to reduce the harm caused by the disease, so we study of the disease, and do one set of susceptibility testing for the cause of the disease, in order to accurately targeted drugs, timely control and treatment of the disease, reduce losses, for this experiments，we get the bacteria from the blood to the heart of the snake, by separation and purification ，we get three bacteria (Yersinia ruckeri tow Different forms; xylose oxidation Alcaligenes), experiment with a variety of antimicrobial agents by KB method these three pathogens drug sensitivity test with minimum inhibitory concentration tested and the results show that these three pathogens are of enoxacin, propiconazole send acid, amikacin, florfenicol test drugs for a very sensitive, high sensitivity of the Acetylspiramycin furazolidone, rifampicin, Pioneer VI resistance. Xylose oxidation Alcaligenes the Florfenicol minimum inhibitory concentration (MIC) of 8 IU / ml of kanamycin minimum inhibitory concentration (MIC) of 37 IU / ml gentamicin minimum inhibitory concentration (MIC) of 2 IU / ml, Lus Jesus and Sen bacteria form A bacteria the minimum inhibitory concentration (MIC) of florfenicol 4IU/ML minimum inhibitory concentration of kanamycin (MIC) of 4 IU / ml gentamicin minimum inhibitory concentration (MIC) of 1 IU / ml, Roots yeah and Sen bacteria form B bacteria florfenicol minimum inhibitory concentration (MIC ) 4 IU / ml kanamycin minimum inhibitory concentration (MIC) of 2 IU / ml gentamicin minimum inhibitory concentration (MIC) of 0.5 IU / ml.Keywords: Mouse snake; Pathogens; Susceptibility testing; Minimum inhibitory concentration (MIC)目 录摘要.1Abstract .2目录.3前言.51 实验材料与实验方法.51.1实验材料.51.1.1病料获取.51.1.2培养基.51.1.3实验药品及试剂准备.61.1.4实验主要仪器.61.2实验设计与方法.61.2.1病菌的分离及纯化.61.2.2药敏实验.61.2.2.1实验准备.61.2.2.2试验步骤 .61.2.3最小抑菌浓度试验.61.2.3.1实验准备. .61.2.3.2试验步骤.72. 结果与分析.82.1药敏试验结果与分析.82.2最小抑菌浓度试验结果与分析.103. 讨论.123.1兽医临床中的用药现状. 123.2药敏试验的意义.12 3.3水律蛇养殖的注意事项. .133.4 本实验所研究疾病的治疗建议. 134. 结论.13致谢.15参考文献.16附件.17前 言 水律蛇是一种非常常见的无毒蛇，是蛇酒的首选代表蛇之一，其肉具有祛风除湿、舒筋活络的药用功效，养殖水律蛇会带来很高的经济效益，所以养殖水律蛇的养殖户也越来越多，特别是广西广东福建一带，水律蛇不仅用于药用，也是广西广东福建一带主要的食用蛇之一。但是，很多的疾病也会严重影响着水律蛇的存活率，给养殖户带来很大的损失，其中，有一种在水律蛇之间高度传染的疾病，该病传播速度快，发病急，可致使水律蛇心、肝、肺等重要器官发生严重的炎性反应，应急情况下给蛇用常用的抗生素治疗没有效果，很多养殖户此时会选择大量使用抗生素，一种抗生素不行就换另外一种，此方法不但导致抗生素大量滥用，还延误疫情的控制及治疗，加剧经济损失，要想及时控制疾病减少损失就必须要针对性的准确用药，抗生素是最常见也是最有效的抗菌药物，为了防止无目的滥用抗生素，我们对引起此病的致病菌用K-B纸片法做药物敏感试验从而确定用药方案，针对性的治疗疾病达到控制疫情的作用，同时，再针对敏感药物做一组最小抑菌浓度（MIC）试验，确定致病菌的最小抑菌浓度，可为用药方案提供参考值。药敏试验目的在于检出细菌的耐药性，确定细菌的耐药药物与敏感药物，根据细菌的敏感药物有针对性地选择治疗药物，测出最小抑菌浓度便于给临床用药做指导。1试验材料与方法1.1试验材料1.1.1病料的获取 解剖患病的水律蛇，用注射器刺进心包之内，从其心脏抽取一点心血液分离培养所得的分离纯化后的菌落，注意解剖的手术用具包括试验台都必须要进行消毒灭菌1。1.1.2培养基 普通肉汤培养基 普通琼脂培养基 MH肉汤培养基 MH琼脂平板培养基21.1.3实验药品及药液准备头孢唑啉钠、氟苯尼考、卡那霉素、庆大霉素、生理盐水、无菌水、0.5麦氏比浊管、药敏纸片。1.1.4实验主要仪器 接种针、接种环、酒精灯、涂布棒、巴氏滴管、1ml注射器、5ml注射器、37恒温箱、高压蒸汽灭菌锅、超净工作台、分析天平等。1.2实验设计与方法1.2.1病菌的分离及纯化 从病蛇体内抽取心血划线于普通琼脂平板培养基上，37培养24小时，观察菌落，然后挑取平板上的纯培养菌落，再进行划线分离，直到染色镜检确定已无污染后，再将这些纯化的细菌做系列1进行保种及做下一步实验3。本步骤纯化获得三种不同的细菌（鲁氏耶而森氏菌的两种不同形态菌；木糖氧化产碱杆菌）。1.2.2药敏实验（K-B纸片法）(1)实验准备 用接种环沾取一点纯化后的系列1细菌，接种于MH肉汤培养液中，37培养1216个小时，再用生理盐水将菌液调制为0.5麦氏（相当于1.5亿个细菌/ml）备用。(2)试验步骤 用无菌巴氏滴管吸取一管备用菌液滴3至4滴到MH琼脂平板培养基上，弃掉剩余菌液，取灭菌过的涂布棒，经酒精灯灭菌，在MH琼脂平板上均匀涂布，待35min室温干燥后，将相应的抗生素纸片平贴于涂布好的培养基上，37培养24小时4，观察结果，注意一个平板贴4至5个纸片，且纸片之间要保持一定的距离，不能太过靠近，以免影响结果的记录。1.2.3最小抑菌浓度（MIC）试验(1)实验准备 本实验有三种细菌，分别测试这三种细菌的最低抑菌浓度，先将这三种细菌接种到MH肉汤培养基中37培养24小时，再分别将三种细菌用生理盐水或肉汤稀释成0.5麦氏浊度备用，相当于1.5亿/ml的细菌量，实验用药有卡那霉素64IU/ML、卡那霉素256IU/ML、氟苯尼考64IU/ML、庆大霉素64IU/ML和头孢唑啉钠64IU/ML四种药物，卡那霉素、氟苯尼考、庆大霉素都是根据前一步实验KB纸片法的结果选择的相应的敏感药物，此三样药物都是市面上容易买到的药物，头孢唑啉钠的选择是为了验证上一步实验KB纸片法中头孢纸片抑菌圈为0是否合理，若两实验结果相符则可以排除头孢药敏纸片药效失效的可能。药物配制好后用高压蒸汽灭菌锅灭菌，再低温保存备用。本实验每种细菌做四种药，共有12组，每组9根试管，试管规格12*75，实验共用试管108根。(2)试验步骤 本实验全部过程都在超净工作台操作，本实验的三种细菌分成A菌组(鲁氏耶而森氏菌A菌)B菌组(鲁氏耶而森氏菌B菌)，C菌组(木糖氧化产碱杆菌)三大组实验，每大组四种药物分别记为Q药F药K药T药。A组实验；将36支试管排成4行，每行各标上Q、F、K、T记号，每行9支试管，标上序号1至9号，在每一管中加入MH肉汤1ml，塞上胶塞，在Q行1号管中加入1ml 64IU/ml的庆大霉素，混匀后吸取1ml到Q行2号管，混匀再吸1ml到Q行3号管，依次类推至Q行8号管，从Q行8号管吸1ml弃掉，Q行9号管不加药对照。再在Q行1至9号管中分别加入0.1ml 0.5麦氏浊度的A菌菌液，塞上胶塞，做好标记。F行、K行、T行依照Q行的方法相应加的64IU/ml的氟苯尼考、64IU/ml的卡那霉素、64IU/ml的头孢唑啉钠进行试验操作，加好后做好标记。B组与C组实验跟A组实验做法一样，B组用B菌试验，C组用C菌试验，其他步骤都同A组一样。全部加好后做好标记，37培养1620小时观察结果，如果结果试管变浑浊则说明长菌，该试管药物不能达到最低抑菌浓度，无法抑制细菌生长，如果试管依然清亮，则说明不长菌，该试管药物达到了最低抑菌浓度抑制了细菌的生长5。 表1 MIC术式表管号药物浓度iu/ml 1 32 2 16 3 8 4 4 5 2 6 1 7 0.5 8 0.25 9 0肉汤ml庆大霉素ml木糖氧化产碱杆菌菌液110.1110.1110.1110.1110.1110.1110.111 弃0.1 10.1肉汤ml氟苯尼考ml木糖氧化产碱杆菌菌液110.1110.1110.1110.1110.1110.1110.111 弃0.1 10.1肉汤ml卡那霉素ml木糖氧化产碱杆菌菌液110.1110.1110.1110.1110.1110.1110.111 弃0.1 10.1肉汤ml头孢唑啉ml木糖氧化产碱杆菌菌液110.1110.1110.1110.1110.1110.1110.111 弃0.1 10.1肉汤ml庆大霉素ml鲁氏A菌菌液110.1110.1110.1110.1110.1110.1110.111 弃0.1 10.1肉汤ml氟苯尼考ml鲁氏A菌菌液110.1110.1110.1110.1110.1110.1110.111 弃0.1 10.1肉汤ml卡那霉素ml鲁氏A菌菌液110.1110.1110.1110.1110.1110.1110.111 弃0.1 10.1肉汤ml头孢唑啉ml鲁氏A菌菌液110.1110.1110.1110.1110.1110.1110.111 弃0.1 10.1肉汤ml庆大霉素ml鲁氏B菌菌液110.1110.1110.1110.1110.1110.1110.111 弃0.1 10.1肉汤ml氟苯尼考ml鲁氏B菌菌液110.1110.1110.1110.1110.1110.1110.111 弃0.1 10.1肉汤ml卡那霉素ml鲁氏B菌菌液110.1110.1110.1110.1110.1110.1110.111 弃0.1 10.1肉汤ml头孢唑啉ml鲁氏B菌菌液110.1110.1110.1110.1110.1110.1110.111 弃0.1 10.12结果与分析2.1药敏试验结果与分析 根据中华人民共和国卫生行业标准纸片抗菌药物敏感试验标准WS/T 125-1999的规定标准，测药敏试验抑菌圈直径，所得实验数据如下： 表2-1 WS/T 125-1999 肠杆菌科药敏试验判定标准 抗菌药物及 纸片 抑菌环直径 相应的MIC 所测细菌名称 含量（ug） （最接近的完整mm数） （临界点，ug/ml） 耐药R 中介I 敏感S 耐药R 敏感S 氨基糖苷类 丁胺卡那 30 17 32 10 500 500 测其他细菌 10 15 8 4 卡那霉素 30 18 25 10 测其他细菌 10 15 表2-2药敏试验判断结果6 mm青霉素敏感标准其他抗菌药物敏感标准抑菌环直径敏感性抑菌环直径敏感性10耐药10耐药1020中度敏感1115中度敏感20高度敏感1520高度敏感20极敏表3三种细菌对10种抗菌药物敏感性的抑菌环直径及敏感性 mm药菌木糖氧化产碱杆菌鲁氏耶而森氏菌形态A菌鲁氏耶而森氏菌形态B菌抑菌圈直径敏感性抑菌圈直径敏感性抑菌圈直径敏感性卡那霉素13中敏25极敏22极敏氟啶酸27极敏25极敏26极敏痢特灵9耐药13中10耐药丙环派酸30极敏33极敏37极敏乙酰螺旋霉素18高敏23极敏26极敏利福平0耐药10耐药9耐药先锋VI15中敏0耐药0耐药丁胺卡那霉素30极敏22极敏24极敏氟苯尼考24极敏26极敏31极敏结果分析： 根据中华人民共和国卫生行业标准纸片抗菌药物敏感试验标准WS/T 125-1999的规定标准，分析结果如下：木糖氧化产碱杆菌对氟啶酸、环丙派酸、丁胺卡那霉素、氟苯尼考等抗药性为极敏，其中对丙环派酸、丁胺卡那霉素最敏，对乙酰螺旋霉素、氟啶酸为高度敏感，对先锋VI、卡那霉素为中度敏感，对痢特灵、利福平为耐药，对利福平耐药最强。鲁氏耶而森氏菌形态A菌对卡那霉素、氟啶酸、丙环派酸、乙酰螺旋霉素、丁胺卡那霉素、氟苯尼考为极敏，其中对丙环派酸最为敏感，对痢特灵为中敏，对利福平、先锋VI为耐药，对先锋VI耐药最强。鲁氏耶而森氏菌形态B菌对卡那霉素、氟啶酸、丙环派酸、乙酰螺旋霉素、丁胺卡那霉素、氟苯尼考为极敏，其中对丙环派酸最为敏感，对痢特灵、利福平、先锋VI为耐药，其中对先锋VI耐药性最强。2.2最小抑菌浓度（MIC）试验结果与分析 表4-1氟苯尼考药物结果菌管号123456789木糖氧化产碱杆菌清亮清亮清亮浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊鲁氏耶而森氏菌形态A菌清亮清亮清亮清亮浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊鲁氏耶而森氏菌形态B菌清亮清亮清亮清亮浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊药物浓度32IU/ML16IU/ML8IU/ML4IU/ML2IU/ML1IU/ML0.5IU/ML0.25IU/ML0IU/ML 表4-2卡那霉素药物结果1菌管号123456789木糖氧化产碱杆菌浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊鲁氏耶而森氏菌形态A菌清亮清亮清亮清亮浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊鲁氏耶而森氏菌形态B菌清亮清亮清亮清亮清亮浑浊浑浊浑浊浑浊药物浓度32IU/ML16IU/ML8IU/ML4IU/ML2IU/ML1IU/ML0.5IU/ML0.25IU/ML0IU/ML 表4-3卡那霉素药物结果2菌管号123456789木糖氧化产碱杆菌清亮清亮清亮清亮清亮清亮清亮清亮浑浊药物浓度128IU/ML64IU/ML61IU/ML57IU/ML51IU/ML47IU/ML43IU/ML37IU/ML0IU/ML 表4-4庆大霉素药物结果菌管号123456789木糖氧化产碱杆菌清亮清亮清亮清亮清亮浑浊浑浊浑浊浑浊鲁氏耶而森氏菌形态A菌清亮清亮清亮清亮清亮清亮浑浊浑浊浑浊鲁氏耶而森氏菌形态B菌清亮清亮清亮清亮清亮清亮清亮浑浊浑浊药物浓度32IU/ML16IU/ML8IU/ML4IU/ML2IU/ML1IU/ML0.5IU/ML0.25IU/ML0IU/ML 表4-5头孢唑啉钠药物结果菌管号123456789木糖氧化产碱杆菌浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊鲁氏耶而森氏菌形态A菌浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊鲁氏耶而森氏菌形态B菌浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊浑浊药物浓度32IU/ML16IU/ML8IU/ML4IU/ML2IU/ML1IU/ML0.5IU/ML0.25IU/ML0IU/ML 结果分析：在木糖氧化产碱杆菌试验中，氟苯尼考3号管清亮4号管浑浊可知木糖氧化产碱杆菌对氟苯尼考的最低抑菌浓度为3号管的8 IU/ML，同理对卡那霉素的最低抑菌浓度为6号管的37 IU/ML，对庆大霉素的最低抑菌浓度为5号管的2 IU/ML，鲁氏耶而森氏菌形态A菌实验中，4号管澄清5号管浑浊可知鲁氏耶而森氏菌形态A菌对氟苯尼考的最低抑菌浓度为4号管的4IU/ML，同理对卡那霉素的最低抑菌浓度为4号管的4 IU/ML，对庆大霉素的最低抑菌浓度为6号管的1 IU/ML，鲁氏耶而森氏菌形态B菌实验中，4号管澄清5号管浑浊可知鲁氏耶而森氏菌形态B菌对氟苯尼考的最低抑菌浓度为4号管的4IU/ML，同理对卡那霉素的最低抑菌浓度为5号管的2 IU/ML，对庆大霉素的最低抑菌浓度为7号管的0.5 IU/ML。3. 讨论3.1兽医临床中的用药现状目前由各种细菌所引起的疾病给畜禽养殖业带来严重经济损失，阻碍了养殖业的快速发展，所以使用抗菌药预防和治疗细菌性疾病成了畜禽养殖过程中的一项重要工作。但由于养殖过程中不科学的、盲目的滥用抗菌药，细菌的耐药性问题正变得越来越突出，不少耐药菌株可耐受多种抗生素7。由此而造成的危害十分严重，它不仅使抗菌药的疗效降低，疗程延长，死亡率升高和治疗费用增加。这不仅给养殖业带来巨大的经济损失，而且耐药菌株可能会将耐药性基因由动物转移给人类，对人类健康也造成潜在威胁。3.2药敏试验的意义 可以相对快速有效地检测病原菌对各种抗菌药的敏感性，指导临床合理用药 。因为实验是在体外对已经分离的细菌进行药敏，不需要生物载体，不需要实验动物，操作相对简单，成本相对降低。是一种既经济又有效的方法。 可以对流行病学调查进行监控，控制和预防耐药菌株的流行8。因为随着新型致病菌的不断出现，各种致病菌对不同的抗菌药的敏感性不同，同一细菌的不同菌株对不同抗菌药的敏感性也有差异，进行有效的药敏试验可以及时掌握各种新型菌种和菌株的耐药性，对流行病学调查建立监控，同时采取相应的措施也就可以控制和预防耐药菌株的流行。为临床用药提供参考依据，因为一个正确的药敏试验结果，可作为临床兽医和畜禽养殖者选用有效抗菌药的参考。长期以来，由于各种致病菌耐药性的产生使各种常用抗菌药药效下降或消失。不能很好的掌握药物对细菌的敏感程度，不但造成药物浪费，而且还延误病情，给养殖户造成了很大的经济损失。近十几年，在养殖生产中，为了控制大肠杆菌及某些细菌感染，一些抗菌药物的盲目使用，导致耐药菌株越来越多。根据已进行的大量药敏试验结果，大肠杆菌、沙门氏菌对曾经敏感的氨基糖苷类、氟喹诺酮类等，均产生了不同程度的耐药性，经常发现对十几种常用抗菌药都不敏感的菌株9 ，这是一个非常危险的信号。所以在临床疾病防治工作中，要取得较好的治疗效果，应扩大常规抗菌药种类进行药敏试验，根据药敏试验结果，选择敏感药物，且应注意交替用药，按疗程投药，这样才能收到较好的治疗效果。3.3水律蛇养殖的注意事项 水律蛇养殖过程中，主要以疾病的预防为主，平时注意蛇舍的卫生与清洁，定时消毒与清理水律蛇排泄物10，发现有传染病发生时，要及时隔离病蛇，进行隔离治疗，水律蛇患病时一般会不进食，所以用药很不方便，很多的养殖员会直接采取口灌的方式进行用药，这种用药方式虽然有效但是花费的人力物力较多，相对来说不是最经济最合适的方法，对于蛇类的用药，除了口灌以外还可以采用药物浸泡的方法进行用药，此方法不需要花费很多的人力物力，而且效果也很好，浸泡的药物通过蛇的皮肤渗入体内从而达到治疗效果11。3.4 本实验所研究疾病的治疗建议 因为感染水律蛇引起水律蛇不食，腐皮，死亡且是混合感染的鲁氏耶而森氏菌两种形态菌和木糖氧化产碱杆菌都对氟啶酸、丙环派酸、丁胺卡那霉素、氟苯尼考等药为极敏，对乙酰螺旋霉素为高敏，对痢特灵、利福平、先锋VI耐药，所以建议在该疾病的治疗中，可以优先考虑用氟啶酸、丙环派酸、丁胺卡那霉素、氟苯尼考等这些抗生素进行治疗，用极敏药物治疗见效快，效果好，同时还可以避免过多的使用抗生素或是滥用抗生素，导致筛选出超级耐药细菌，不仅缩短了治疗的时间、及时控制疾病传染，还节省了很多的成本与人力物力。4.结论 木糖氧化产碱杆菌对氟啶酸、环丙派酸、丁胺卡那霉素、氟苯尼考等抗药性为极敏，其中对丙环派酸、丁胺卡那霉素最敏，对乙酰螺旋霉素、氟啶酸为高度敏感，对先锋VI、卡那霉素为中度敏感，对痢特灵、利福平为耐药，对利福平耐药最强。其中对氟苯尼的最低抑菌浓度（MIC）为8 IU/ML，对卡那霉素的最低抑菌浓度（MIC）为37 IU/ML，对庆大霉素的最低抑菌浓度（MIC）为2 IU/ML。鲁氏耶而森氏菌形态A菌对卡那霉素、氟啶酸、丙环派酸、乙酰螺旋霉素、丁胺卡那霉素、氟苯尼考为极敏，其中对丙环派酸最为敏感，对痢特灵为中敏，对利福平、先锋VI为耐药，对先锋VI耐药最强。其中对氟苯尼考的最低抑菌浓度（MIC）为4IU/ML，对卡那霉素的最低抑菌浓度（MIC）为4 IU/ML，对庆大霉素的最低抑菌浓度（MIC）为1 IU/ML。鲁氏耶而森氏菌形态B菌对卡那霉素、氟啶酸、丙环派酸、乙酰螺旋霉素、丁胺卡那霉素、氟苯尼考为极敏，其中对丙环派酸最为敏感，对痢特灵、利福平、先锋VI为耐药，其中对先锋VI耐药性最强。其中对氟苯尼考的最低抑菌浓度（MIC）为4 IU/ML，对卡那霉素的最低抑菌浓度（MIC）为2 IU/ML，对庆大霉素的最低抑菌浓度（MIC）为0.5 IU/ML。致谢本论文是在 老师的悉心指导下完成的，老师治学严谨，对科研一丝不苟，这种敬业的精神潜移默化的影响并且激励着我，在老师的细心指导下，我学到了很多光靠书本是学不会的知识与技能，让我懂得学以致用，借此机会我向曾老师表示衷心的感谢！同时，也感谢在完成实验的过程中给我很多帮助的马能凤、陈跃午、唐惠鹏同学和试验室的其他老师、师兄师姐。 参考文献