TRACEDSQⅡ气相色谱质谱联用仪作业指导说明书.doc

本细则依据《有机质谱分析方法通则》（JY∕T 003－1996）和美国THERMO Fisher企业TRACE DSQ Ⅱ气相色谱质谱仪操作说明书制订。

1．适用范围
本方法适适用于易挥发、热稳定液体、固体样品（溶于溶剂）分离及定性定量分析，样品气化温度为常压下300℃以下（气化时不分解），分子量范围：1～1050Da；，高分子材料定性分析（采取裂解器进样）。

2．引用标准
《有机质谱分析方法通则》（JY∕T 003－1996）

3．术语、符号、代号
详见《有机质谱分析方法通则》（JY∕T 003－1996）

4．方法、原理
详见《有机质谱分析方法通则》（JY∕T 003－1996）

5．常见试剂和材料
试剂：分析纯乙醇、正己烷、丙酮、乙醚、甲醇。

6．检测、分析步骤
6. 1检测仪器
仪 器 名称：TRACE DSQ Ⅱ气相色谱质谱联用仪
分子量范围：1～ 1050Da
质量稳定性：0.1amu/12hr
灵敏度：EI 全扫描 1pg八氟萘 S/N 100:1
附件： Pyrojector II 裂解器、固体直接进样杆
6. 2仪器环境要求
室内温度：18℃～25℃
相对湿度：30％～60％
电源电压：200V ± 10V，频率50Hz
6. 3 试样制备方法
6. 3. 1 固体样品和高沸点液体
用合适溶剂将样品溶解，浓度为0.01～1mg/ml，用微量注射器取0.2～1ml，进样。
6. 3. 3 直接进样杆进样
取适量样品于取样量杯中，按仪器设定条件进行分析。
6. 3.4 裂解器进样
取适量样品于进样器中按仪器设定条件进行分析。
6. 4 操作过程
6.4.1准备和开机
6.4.1.1依次开启氦气(0.4~0.5MPa)、计算机电源、GC电源、MS电源。
6.4.1.2开启计算机桌面Tune程序；PC会和MSD自动联机，开始抽真空。
6.4.2调谐
6.4.2.1开机后仪器稳定2小时以上，选择适宜调谐条件，并观察参考气质谱峰情况。
6.4.2.2选择Tune程序中Instrument/Diagnostics/AutoTune命令进行自动调谐。
6.4.3GC/MS联用时样品测试
6.4.3.1点击 图标，Xcalibur工作站，设定气相色谱条件：选定色谱柱，进样口温度，柱箱温度，传输线温度，载气流量、压力，进样量，分流比等；质谱条件：电离方法和条件、离子源温度、数据采集模式(全扫描和选择离子监测)和范围，保留编辑方法。
6.4.3.2用样品洗注射器5 ～ 10次，每次0.2～1 ml。在电脑上调用上述编辑好方法，待色谱及质谱均为“Waiting for Contact Closure”时，从气相色谱进样口进样。按“Start键，电脑自动采集数据；
6.4.4固体直接进样杆样品测试
6.4.4.1安装固体直接进样离子源，并选择Tune程序中固体直接进样杆控制部分。
6.4.4.2打开循环冷却用氮气、固体直接进样杆控制器。
6.4.4.3将少许样品(肉眼可见)放入固体直接进样杆小试管中；固体直接进样杆插入固体直接进样离子源进样孔，打开球阀；在Tune程序中Insert/Remove Probe窗口中观察真空度；当真空度显示小于50 mTorr将固体直接进样杆推到底，按“Start”键，电脑自动采集数据。
6.4.4.4样品测试结束后，仪器自动降温；待固体直接进样杆控制器温度显示小于100℃时；拉出固体直接进样杆，关闭球阀。
6.4.5裂解进样器样品测试
用进样器取10mg样品插入裂解器进样口，在裂解器上设置好裂解炉炉温及载气压力。在电脑上调用上述编辑好方法，待裂解温度达成设定温度、色谱及质谱均为“Waiting for Contact Closure”时，能够进样。按“Start”键，电脑自动采集数据。
6. 4. 6 关机：
（1）先把离子源温度设定到100℃，让其先冷却。在Tune/instrument点击shutdown，等候Ion source温度降到目标值；生物论坛,生物秀论坛,中国生物
（2）等候GC上传输线（off）、柱温箱（50℃）、进样口温度（off）全部降下来；（3）关闭Tune窗口，关闭MS总电源；
(4)关闭GC总电源，最终关闭氦气钢瓶。
6. 5 测试结果分析
6. 5. 1 定性分析
调出谱图，依据需要分别打开离子色谱图窗口和质谱图窗口。选择要分析离子色谱峰，将其放大，扣本底后取其质谱图。依据质谱仪得到关键碎片离子、关键特征离子、分子离子进行可能结构推测，结合谱库（NIST或WILEY等）中标准图谱搜寻对应信息以提供化合物可能结构。
6. 5. 2 定量分析
用质谱法进行定量测定时，要准备标准样品（各待测成份纯物质或检测用混合物）和待测定样品，在一定条件下测定其色谱和质谱；依据需要分别打开离子色谱图窗口和质谱图窗口。依据色谱图中保留时间和质谱数据确定分析物质，选择要定量总离子流色谱、选择离子色谱进行峰面积积分，并结合标准溶液浓度进行定量。
定量测定精密度以数次色谱测定值相对标准偏差RSD%表示。同一样品平行测定不少于3次，取置信度95%，进行数据处理，计算平均值，标准偏差SD和相对标准偏差RSD%。
6. 6 检测结果汇报
6. 6.1 根据测定方法要求计算结果，定量分析应标出分析反复性误差。
6.6.2 测定数据及计算结果必需经过校核。
6.6.3 原始统计，测定数据及计算结果统计必需整齐清洁，符合规范，和检测汇报及存档件一起，由校核人员校核，送交中心业务办公室，最终由中心授权签字人审核签发

7．注意事项
7.1仪器参数设定时要注意不超出色谱柱最高使用温度。
7.2使用溶剂含有易燃性和毒性，仪器室里要保持通风或安装通风设施，不然，易引发中毒或火灾。
7.3在GC后面柱温箱排气口周围，请勿放置易燃品，以免引发火灾。
7.4进样分析进样针要垂直、快速插入进样口，进样动作要快、准。进样量通常少于两微升，使用微量进样针注射，浓度太低应浓缩。
7.5仪器每次使用应检验运行是否正常，发觉问题要认真统计。
7. 6若出现异常现象，应停止采集，检测软件运行情况。假如不能处理，作好故障现象统计；报有机室责任人，找维修人员进行检验。
7. 7在运行过程中若忽然断电，应立即关闭仪器上全部开关，等供电恢复后再重新开机。在高温下烘烤色谱柱最少1小时，再检验是否有残留化合物留在柱中，若有，则再升温烘烤直至洁净为止。

8．仪器维护
8.1出现载气泄漏时，按使用说明书来检漏。
8.2离子源要不定时清洗。清洗、更换质谱部分零件需戴手套，全部工具需洁净。
8.3溶剂切割时间通常在3分钟左右，以免烧断灯丝。
8.4真空泵专用油6个月更换一次，最多十二个月更换一次； 油泵在潮湿地域计算所频率要增加。仪器开机时，要检验泵运转声音是否正常，油泵排气含水量是否过大。泵油是否够，排气是否通畅，泵是否漏油等。1-2 周开泵放气阀至1 号位，放气10-15min，以放走小分子；放气后需把开关阀门调到0 号位。
8.5进样垫：①在注入次数约100次时，或保留时间、面积重现性变差检测出现鬼峰时，需要进行进样垫检修和维护和更换；②在进行高灵敏度分析时，需要进行硅橡胶进样垫调整，去除进样垫杂质。调整方法：将进样垫浸于己烷中，放置10～15h，然后将进样垫取出放置到洁净容器内，在洁净大气中自然干燥，然后在130～150℃柱温箱中热烘2h。
8.6玻璃衬管：在一系列分析前，或保留时间、面积重现性变差检测出现鬼峰时，需要对玻璃衬管进行清洗维护。清洗方法：将石英棉用细棒捅出，然后用蘸丙酮等溶剂纱布擦洗内壁，再把玻璃衬管放置于装有丙酮小试管内，超声1h，凉干，在5%DMCS/n-正己烷溶液中浸泡一夜，取出立即用甲醇清洗2-3次，然后再在甲醇中浸1h左右，从甲醇中取出，凉干，置于干燥器中保留。
8.7色谱柱：①色谱柱取下临时不用时，两端要密封以防污染；②柱老化：使用新色谱或旧色谱柱长时间末用、基线不稳定，出现鬼峰时，需要进行色谱柱老化。老化方法：从室温开始，以10℃每分钟程序升温到柱最高使用温度-20℃，保持数小时。在新柱老化时，最好不用连接检测器(把检测器接口堵住)。老化前，需要设定检测器温度比柱温高20℃左右；③能够不开启真空泵，如气相色谱一样老化柱，老化时间4-6h，MS柱2-3h；④因难于挥发成份碳化，用老化方法不能除去柱内残留难于挥发成份时，在注入口侧切掉30～50cm色谱柱。
8.8微量注射器：使用前后全部需要用丙酮等溶剂洗净20次，以免沾污样品或样品中高沸点物质沾污注射器。
8.9仪器出现较大波动或故障要汇报技术责任人，然后进行处理。

9．期间检验
为了确保仪器随时处于良好状态，在两次仪器检定之间最少对仪器进行一次期间检验。期间检验关键参数包含：
(1)分辨力，(2)质量范围，(3)信噪比，(4)测量反复性，(5)质量正确性。