40_肟菌酯·咪鲜胺水乳剂高效液相色谱分析_白亮.pdf

农 药AGROCHEMICALS白亮,马超,赵宜君,等.40%肟菌酯 咪鲜胺水乳剂高效液相色谱分析J.农药,2023,62(4):260-262.doi:10.16820/j.nyzz.2023.2034收稿日期：2022-11-16，修返日期：2022-12-01基金项目：国家重点研发计划项目(2016YFD0200507)作者简介：白亮(1994)，男，主要从事农药分析检测工作。E-mail：。通讯作者：徐军(1973)，男，副研究员，主要从事农药制剂研究。E-mail：。陈昶(1971)，男，研究员，主要从事农药应用研究。E-mail：。40%肟菌酯 咪鲜胺水乳剂高效液相色谱分析白 亮1，马 超1，赵宜君1,2，张 喆1，张立群1，徐 军1,2，陈 昶1,2(1.河北中保绿农作物科技有限公司，北京 100193；2.中国农业科学院 植物保护研究所，北京 100193)摘要：目的建立液相色谱法测定40%肟菌酯 咪鲜胺水乳剂的定量分析方法。方法以甲醇-乙腈-水(体积比为31:38:31)为流动相，使用C18色谱柱，流量为0.9 mL/min，柱温为25，选择230 nm波长检测。结果咪鲜胺和肟菌酯的相关系数分别为0.9996和0.9991，相对标准偏差均为0.3%，样品平均回收率分别为100.3%和99.79%。结论此方法快捷简便易操作，准确度和精密度高，线性关系良好。关键词：肟菌酯；咪鲜胺；液相色谱；分析中图分类号：TQ450.7文献标志码：A文章编号：1006-0413(2023)04-0260-03HPLC analysis of prochloraz trifloxystrobin 40%EWBAI Liang1,MA Chao1,ZHAO Yi-jun1,2,ZHANG Zhe1,ZHANG Li-qun1,XU Jun1,2,CHEN Chang1,2(1.Hebei Zhongbao Green Agricultural Crop Technology Co.,Ltd.,Beijing 100193,China;2.Insitute of Plant Protection,Chinese Academy of Agricultural Science,Beijing 100193,China)Abstract:Aims To establish a HPLC method for analyzing prochloraz trifloxystrobin 40%EW.Methods Theanalysis test was performed on a C18column with methanol-acetonitrile-H2O(31:38:31,by vol)as the mobile phase at aflow rate of 0.9 mL/min,and the column temperature was 25 while the wavelength was 230 nm.Results The linearcorrelation coefficients were 0.9996 and 0.9991,both of the relative standard deviations were 0.3%.The averagerecoveries were 100.3%and 99.79%respectively.Conclusions This method is simple,rapid and easy to operate,withhigh accuracy and precision and good linear relationship.Key words:trifloxystrobin;prochloraz;HPLC;analysis肟菌酯(trifloxystrobin)是将Strobilurins作为杀菌剂先导化合物成功开发的一种新品类的含氟杀菌剂1。具有保护、治疗、铲除、高效、渗透、内吸活性、耐雨水冲刷、持效期长等作用特性，对几乎所有真菌纲病害如颖枯病、白粉病、锈病、霜霉病等均有良好活性2-3。咪鲜胺(prochloraz)是一种高效广谱杀菌剂，可以与大多数除草剂、杀虫剂等混用来提高农作物病虫害的防治效果4。咪鲜胺的作用机理是抑制麦角甾醇的生物合成，破坏菌体细胞膜功能，常常用于治疗核腔菌属、喙孢属、尾孢属、核盘菌属、镰孢属以及白粉菌、炭疽菌等引起的病害5-6。对水果蔬菜、大田作物、草皮及观赏植物上得多种病害具有明显的防效，也可以与大多数杀菌剂混用，均有较好的防治效果7-8。目前，咪鲜胺、肟菌酯单剂的检测方法已有报道，但同时检测肟菌酯和咪鲜胺的分析方法尚未见公开报道。试验采用高效液相色谱法同时测定肟菌酯和咪鲜胺，该方法简便快捷、操作简单、适用性强，适用于肟菌酯和咪鲜胺混剂的检测分析。1材料与方法1.1仪器与试剂Waters e2695高效液相色谱仪(紫外检测器)，沃特世科技(上海)有限公司；GLC18色谱柱(5m，4.6mm200mm)，北京海诚中仪科技有限公司；UV-6100紫外可见光分光光度计，上海元析仪器有限公司；AL-104电子天平，梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司；真空抽滤器(内置孔径为0.45 m的水系滤膜)，天津科亿龙试验设备有限公司；肟菌酯标准品(纯度99.0%)、咪鲜胺标准品(纯度98.0%)，沈阳化工研究院有限公司；40%肟菌酯咪鲜胺水乳剂，河北中保绿农作物科技有限公司；甲醇(色谱纯)，默克(德国)股份有限公司；乙腈(色谱纯)，飞世尔科技有限公司；第62卷第4期2023年4月Vol.62,No.4Apr.2023第4期水(新蒸二次蒸馏水)。1.2分析条件流动相：甲醇-乙腈-水(体积比313831)；柱温：25；检验波长：230 nm；流量：0.9 mL/min；进样体积：5 L。1.3溶液制备标品溶液制备：准确称量咪鲜胺标样0.09 g、肟菌酯标样0.03 g(精确至0.0002 g)，用甲醇溶解并定容至100 mL容量瓶中，经0.45 m有机滤膜过滤，备用。样品溶液制备：准确称量0.3 g(精确至0.0002 g)的40%肟菌酯 咪鲜胺水乳剂样品，试样用甲醇溶解并定容至100 mL容量瓶中，经0.45 m有机滤膜过滤，备用。1.4有效成分测定仪器于1.2所述色谱条件下平衡，待基线波动范围小于10-5时，连续注入数针标样溶液，直至相邻2针咪鲜胺(肟菌酯)的响应值相对变化小于1.2%，即平衡完毕，按照标品溶液，试样溶液，试样溶液，标品溶液的顺序检测。1.5计算将测得的2针试样溶液峰面积和2针标品溶液峰面积分别进行平均，按下式计算样品中有效成分肟菌酯和咪鲜胺的质量分数X1。X1(%)=A2m1PA1m2100式中：X1为试样中肟菌酯(或咪鲜胺)的质量分数(%)，A2为试样溶液中咪鲜胺(或肟菌酯)样品峰面积的平均值(mAU)，m1为咪鲜胺(或肟菌酯)标样的质量(g)，P为标样中咪鲜胺(或肟菌酯)的质量分数(%)，A1为标样溶液中咪鲜胺(或肟菌酯)峰面积的平均值(mAU)，m2为称取试样的质量(g)。2结果与讨论2.1检测波长的判定利用紫外-可见光分光光度计对肟菌酯和咪鲜胺标品在190300 nm波长范围内进行扫描，其紫外吸收谱图见图1。在230 nm波长时，肟菌酯和咪鲜胺均有较为理想的吸收，且吸收比例合适，无杂质干扰，因此选择在230 nm作为该方法的检验波长。2.2流动相选择以甲醇、水和乙腈为流动相，调节各相的比例对样品进行检测，当甲醇、乙腈和水的体积比为313831时，有效成分与杂质可以较好的分离，且基线平稳，峰型之间互无干扰，因此试验选定此比例为最适比例(见图2、3)。2.3分析方法的线性关系在上述色谱条件下对咪鲜胺和肟菌酯进行检测，分别以2种物质的峰面积为纵坐标，质量浓度为横坐标，绘制样品标准曲线。根据标准曲线可得：咪鲜胺的线性回归方程为y=915 781x-67 440，相关系数为0.9991；肟菌酯的线性回归方程为y=554 530 x-29 950，相关系数为0.9996。结果表明肟菌酯和咪鲜胺在测试的质量浓度范围内线性关系良好。2.4分析方法的精密度在1.2色谱检测条件下，取40%肟菌酯 咪鲜胺EW样品进行5次独立测试，有效成分相对偏差小于2(1-0.5logC)0.67，其中C为样品中有效成分含量，以小数计9。由检测结果可见：试样中肟菌酯质量分数的相对标准偏差为0.3%(0.9474%)，咪鲜胺质量分数的相对标准偏差为0.3%(0.8023%)，均符合分析要求(n=5)。因此该分析方法的精密度良好(见表1)。2.5分析方法的准确度为了验证该方法的准确度，对产品的回收率进行测图1肟菌酯和咪鲜胺紫外吸收谱图图2标样液相色谱图图3试样液相色谱图有效成分序号质量分数/%平均值/%标准偏差相对标准偏差/%肟菌酯110.0210.000.030.3210.0139.95410.0359.98咪鲜胺129.9829.990.090.3229.95330.02429.97530.01表1分析精密度测定(n=5)白 亮，等：40%肟菌酯 咪鲜胺水乳剂高效液相色谱分析261农 药 AGROCHEMICALS第卷62定并分析。在40%肟菌酯 咪鲜胺EW试样中分别加入已知含量的肟菌酯和咪鲜胺标准品，在上述色谱条件下分析其质量分数，计算回收率。肟菌酯和咪鲜胺的平均回收率分别为99.79%和100.3%，均满足分析方法的要求，该分析方法准确度良好(见表2)。3结论本文建立了能够同时对40%肟菌酯 咪鲜胺水乳剂中的有效成分肟菌酯和咪鲜胺进行检测的高效液相色谱分析方法，并对此方法进行合理的方法验证。结果表明，肟菌酯和咪鲜胺有效成分的分离效果较好，精密度较高，检测方法重现性良好、高效、易操作，因此该方法可用于40%肟菌酯 咪鲜胺水乳剂产品有效成分的定量分析。参考文献：1万宏剑,叶淑芳,谭波.肟菌酯原药高效液相色谱分析J.农药,2011,50(11):820-821.2孙克,吕良忠,司乃国,等.创制杀菌剂烯肟菌酯异构体的鉴定及杀菌活性J.农药,2012,51(3):168-171.3韩冲冲,李飞,李保同.75%肟菌酯戊唑醇水分散粒剂高效液相色谱分析方法J.农药,2018,57(6):419-421.4潘静,刘润峰,高敬雨.25%咪鲜胺 稻瘟酰胺微囊悬浮-悬浮剂高效液相色谱分析J.现代农药,2020,19(2):43-36,44.5陈平,柳训才.咪鲜胺的应用概况及其残留检测研究J.湖北农业科学,2007,46(3):478-480.6徐妍,马超,胡奕俊,等.咪鲜胺生产现状与市场分析J.农药,48(8):552-554.7刘长令.世界农药大全:杀菌剂卷M.北京:化学工业出版社,2006.8孝杰,徐磊.40%吡唑醚菌酯 咪鲜胺水乳剂开发与应用J.河南化工,2020,37(4):20-23.9中华人民共和国农业部.NY/T 28872016.农药产品质量分析方法确认指南S.北京:中国农业出版社,2016.责任编辑：李新有效成分序号加入量/g测定值/g回收率/%平均值/%肟菌酯10.03060.030599.6799.7920.03040.0306100.630.03020.030199.6740.03050.030399.3450.03030.030299.67咪鲜胺10.09050.0908100.3100.320.09020.0904100.230.09030.0905100.240.09020.0907100.550.09040.0906100.2表2分析方法的回收率测定(n=5)参考文献：1周飞,李宏伟,张扬,等.丙硫菌唑在6种病害上的应用研究J.安徽农业科学,2022,50(14):134-138.2张磊,闵红,韩世平,等.丙硫菌唑 戊唑醇防控小麦赤霉病的效果J.中国植保导刊,2022,42(6):66-68.3农业农村部农药检定所.中国农药信息网数据中心登记信息DB/OL.(2022-10-09)2022-11-01.Http:/ 胡雪芳,梁亮,张志民,等.20%寡聚酸碘对水稻白叶枯病的田间防治效果J.湖北农业科学,2015,54(4):872-874.11 刘志航,刘金玲,方城韬,等.42%精异丙甲草胺 异恶唑草酮 莠去津悬乳剂配方筛选及玉米田药效试验J.农药,2022,61(3):172-176.12 崔勇,谢心宏,周惠中,等.40%啶菌恶唑 福美双悬乳剂研究J.农药,2020,59(10):719-721.13 金柱,张军,周媛,等.烷基糖苷柠檬酸单酯盐水溶液表面张力研究J.应用化工,2016,45(9):1614-1618.14 王亚廷,孙绪兵,王凤芝,等.25%丙环唑 多菌灵悬乳剂的研制J.农药,2008,47(1):21-23,33.15 GB/T 17980.222000.农药 田间药效试验准则(一)杀菌剂防治禾谷类白粉病S.责任编辑：李新(上接第 255 页)262