产前诊断ppt课件.ppt

产前前诊断断汇报人：徐佳慧人：徐佳慧主要内容主要内容一一产前前诊断的目的断的目的二二产前前诊断的概念断的概念简介介三三产前前诊断的适用情况断的适用情况四四产前前诊断断的分的分类五五产前前诊断技断技术与方法与方法 六六产前前诊断的断的伦理理问题七七产前前诊断的断的现状状2产前前诊断的目的断的目的出出生生缺缺陷陷临床床上上尚尚缺缺乏乏针对这些些出出生生缺缺陷陷的的有有效效治治疗措措施施 至至少少2 20 0%的的缺缺陷陷儿儿自自然然流流产 2 20 0%出出生生后后很很快快死死亡亡 存存活活下下来来的的人人群群中中2 2%左左右右会会发生生重重要要缺缺陷陷给家家庭庭和和社社会会带来来巨巨大大的的精精神神和和经济压力力,影影响响了了全全民民素素质的的提提高高。遗传因因素素发生生原原因因 环境境因因素素 两两者者共共同同作作用用 遗传咨咨询目目前前可可以以通通过 产前前诊断断 选择性性终止止妊妊娠娠等等方方法法减减少少缺缺陷陷儿儿出出生生率率。3产前前诊断断 产前前诊断断又又称称宫内内诊断断或或出出生生前前诊断断,是是指指在在胎胎儿儿出出生生前前用用各各种种方方法法诊断断胎胎儿儿是是否否患患有有某某种种遗传病病或或先先天天性性疾疾病病的的一一种种手手段段,是是人人类细胞胞遗传学学、分分子子遗传学学、生生物物化化学学和和临床床医医学学实践践紧密密结合合的的一一门学学科科 。4产前前诊断的适用范断的适用范围1 1孕孕妇年年龄大大于于3 35 5岁(或或丈丈夫夫年年龄大大于于3 39 9岁)。这是是因因为卵卵细老老化化，染染色色体体容容易易发生生突突变，产生生胎胎儿儿先先天天性性畸畸形形或或先先天天愚愚型型儿儿的的危危险性性较大大。2 2孕孕妇怀孕孕早早期期或或中中期期血血清清筛查阳阳性性。染染色色体体病病患患儿儿3 3.孕孕妇生生育育过 先先天天畸畸形形的的患患儿儿 智智力力低低下下患患儿儿 代代谢性性疾疾病病患患儿儿5筛查与与诊断断胎儿健康状况的胎儿健康状况的检查分分为 筛查 两两类。诊断断 筛查：是：是针对胎儿是否有胎儿是否有发生某种生某种遗传病病 高高风险进行的；行的；筛查的的方法方法简单,结果果快快速速,成本低廉成本低廉,可分析大批量可分析大批量标本本,但其但其敏感性和特异性均敏感性和特异性均较差差。不能不能作作为对所疑所疑问的疾病作的疾病作最后最后诊断的断的依据依据。筛查的的结果果分分为阳性阳性和和阴性阴性,阳性只能阳性只能说明病人有明病人有可可能能患病患病,而阴性而阴性结果也果也不能不能彻底排除底排除患病患病的可能性。的可能性。6筛查与与诊断断诊断断：诊断性断性检测必必须建立在先症者确建立在先症者确诊基基础上上,是有是有目的性目的性的。的。敏感性和特异性敏感性和特异性较高高,结果准确果准确可靠可靠,但但成本高成本高,时间长。对筛查结果果阳性阳性者者应提供提供诊断性的断性的检查,以达到以达到对所疑所疑问的疾病的疾病进行最行最终诊断的目断的目的。的。产前前诊断中断中应遵从：遵从：筛查在先在先,诊断断在后在后的原的原则。7产前前诊断的适用范断的适用范围4 4有有不不良良生生育育史史(包包括括多多次次流流产史史、死死胎胎史史、死死产史史等等)。这种种情情况况有有可可能能由由夫夫妇一一方方或或双双方方染染色色体体异异常常引引起起，再再次次怀孕孕时仍仍可可出出现畸畸胎胎。5 5.B B超超检查发现异异常常，如如羊羊水水过多多、羊羊水水过少少、胎胎儿儿发育育异异常常或或胎胎儿儿有有可可能能畸畸形形等等。8产前前诊断的适用范断的适用范围6 6.胎胎儿儿怀疑疑有有宫内内感感染染，如如弓弓形形体体、巨巨细胞胞病病毒毒、风疹疹病病毒毒、单纯疱疱疹疹病病毒毒感感染染等等，或或者者孕孕母母怀孕孕早早期期接接触触过可可能能导致致胎胎儿儿先先天天缺缺陷陷的的物物质 (如如药物物、放放射射线等等)。7 7.夫夫妇一一方方或或双双方方是是先先天天遗传病病患患者者，即即有有遗传病病家家族族病病史史。9产前前诊断的主要内容断的主要内容一一.妊娠前妊娠前遗传咨咨询二二.植入前植入前遗传学学诊断断 三三.妊娠期妊娠期产前前诊断断 四四.其他其他妊娠前妊娠前遗传咨咨询 遗传咨咨询是由是由遗传学学专家、家、临床医学床医学专家及家及实验技技术专家家组成的群体成的群体针对各种高危因素各种高危因素,应用用遗传学学和和临床医学床医学的基本原理和技的基本原理和技术对本次妊娠本次妊娠发生出生缺陷的生出生缺陷的风险进行行评估估,根据不同的适根据不同的适应征征进行行产前前诊断断,并并对产前前诊断的断的结果以及可能果以及可能的妊娠的妊娠结局局进行行解解释。孟德孟德尔的分离和自由的分离和自由组合合定律定律,摩摩尔根根连琐、交交换定律定律,遗传病的病的群体群体调查与与临床床遗传学研究学研究是是遗传咨咨询的的理理论基基础。11植入前植入前遗传学学诊断断 植入前植入前遗传学学诊断断(PGD)(PGD)指指胚胎着床前胚胎着床前对其其遗传物物质进行分析行分析,诊断胚胎是否有某些断胚胎是否有某些遗传异常异常,确定确定该胚胎胚胎是否适合移植是否适合移植的的诊断方法。主要是指断方法。主要是指在在显微操作微操作下从下从体外受精体外受精(IVF)(IVF)发育至育至6-86-8个个细胞胞期的胚胎中，活期的胚胎中，活检1-21-2个卵裂球个卵裂球细胞或直接胞或直接获取受取受精前后的极体，通精前后的极体，通过PCRPCR或或FISHFISH，进行快速行快速遗传学学诊断，断，选择正常胚胎植入正常胚胎植入宫内内，从而，从而获得健康胎得健康胎儿。儿。12植植入入前前遗传学学诊断断I IV VF F 过 程程13妊娠期妊娠期产前前诊断断一一.产前前诊断的技断的技术手段目前主要有手段目前主要有：影像学影像学生化生化遗传检测染色体核型分析染色体核型分析基因基因检测等方法等方法14妊娠期妊娠期产前前诊断断二二.产前前诊断取材途径断取材途径：产前前诊断取材方法包括两大断取材方法包括两大类 侵入性侵入性（创伤性）性）非侵入性非侵入性（非（非创伤性）性）创伤性取材方法性取材方法包括：包括：羊膜腔穿刺、羊膜腔穿刺、绒毛活毛活检、脐静脉穿刺、静脉穿刺、胎儿胎儿镜和胚胎活和胚胎活组织检查等等 。其中羊膜腔穿刺和其中羊膜腔穿刺和绒毛取毛取样目前最常用目前最常用 15妊娠期妊娠期产前前诊断断二二.产前前诊断取材途径断取材途径：l 非非创伤性取材方法性取材方法包括包括 植入前植入前诊断、断、孕孕妇外周血分离胎儿外周血分离胎儿细胞、胞、宫颈黏液冲洗、黏液冲洗、孕孕妇血清血清筛查、超声超声诊断断等。等。16羊膜穿刺羊膜穿刺术 主要用于孕主要用于孕中期中期产前前诊断，方法断，方法简便，便，已成已成为当今世界各地当今世界各地最常用最常用且且安全可靠安全可靠的的产前前诊断取材方法，断取材方法，时间以孕以孕16-2016-20周周为宜，此期宜，此期间采集的羊水采集的羊水细胞数量多，胞数量多，体外生体外生长活力活力强，故，故成功率高成功率高，且穿刺，且穿刺对孕孕妇及胎儿及胎儿基本安全基本安全，流，流产及感染少及感染少见。17羊膜穿刺羊膜穿刺术 18绒毛活毛活检 时间为孕孕早期早期的的9-119-11周周，此，此时绒毛毛正正处于生于生长旺盛旺盛时期，易于吸取及分期，易于吸取及分析，因析，因为吸取量很吸取量很小，小，比比较安全安全，流，流产率很低率很低。19 为近年来近年来发展起来的一展起来的一项新技新技术，需要，需要技技术高度高度熟熟练的人的人员在在B B超超直直视下操作，下操作，时间一般一般为孕孕18-2418-24周周。胎儿胎儿脐带血穿刺血穿刺术 20孕孕妇外周血分离胎儿外周血分离胎儿细胞胞 属属非侵入性非侵入性（非（非创伤性）性）产前前诊断技断技术，易于易于被孕被孕妇接受接受。孕。孕妇外周血？外周血？中存在胎儿中存在胎儿细胞胞(滋滋养养细胞、淋巴胞、淋巴细胞、胞、颗粒粒细胞及有核胞及有核红细胞胞)，通，通过分离、富集分离、富集这些些细胞可用于胞可用于产前前诊断，断，时间一一般般为孕孕7-257-25周周，以，以1515周周为最佳，最佳，有核有核红细胞胞是用是用于于产前前诊断的断的最理想最理想的的细胞，但孕胞，但孕妇外周血中胎外周血中胎儿儿细胞的胞的数目极少数目极少，故技，故技术要求很高。要求很高。211.1.胎儿胎儿宫内感染内感染 2.2.染色体病染色体病 3.3.先天畸形先天畸形 4.4.遗传性代性代谢疾病疾病 5.5.单基因疾病基因疾病 6.6.其他其他 产前前诊断断的的疾疾病病分分类22胎儿胎儿宫内感染内感染 微生物感染微生物感染是造成先天畸形胎儿和新生儿是造成先天畸形胎儿和新生儿发病及病及死亡的主要原因死亡的主要原因,可造成先天畸形的主要微生物包可造成先天畸形的主要微生物包括括巨巨细胞病毒胞病毒、弓形体弓形体、单纯疱疹病毒疱疹病毒、风疹病毒疹病毒、梅毒梅毒、乙型肝炎病毒乙型肝炎病毒、艾滋病病毒艾滋病病毒等。等。19711971年年NahmiasNahmias首次提出将弓形虫、首次提出将弓形虫、风疹、巨疹、巨细胞和胞和单纯疱疹病毒疱疹病毒-TORCH的血清学的血清学检查作作为产前前宫内感染内感染实验室室筛查手段手段,广泛用于广泛用于产前前筛查。23TORCH实验 TORCH 实验主要用于血清学分析主要用于血清学分析,包包括括IgM,IgG,IgAIgM,IgG,IgA抗体等的抗体等的检测。由于。由于初初次感染次感染时患者患者对某种病原微生物某种病原微生物产生特异生特异的的IgM IgM 抗体抗体,在在暴露暴露1 1周后周后可可检测到到,检测时间段在段在30 9030 90天内天内。由于。由于IgM IgM 抗体不抗体不能通能通过胎胎盘,那么一旦在胎儿或新生儿血那么一旦在胎儿或新生儿血液中液中检测到到IgM,IgM,则说明胎儿或新生儿已明胎儿或新生儿已被感染被感染,并且开始免疫并且开始免疫应答。答。24TORCH实验 25TORCH实验 26染色体病染色体病 染色体病是由于染色体病是由于染色体异常染色体异常所引致的一大所引致的一大类遗传性疾病性疾病,患者常有智力低下和患者常有智力低下和头面部畸形等表面部畸形等表现。如。如唐氏唐氏综合征合征、1313三体三体综合征合征、1818三体三体综合征合征、TurnerTurner综合征合征等。早期流等。早期流产病例中有病例中有约50%50%是由于染色体异常所引是由于染色体异常所引发。目前主要通。目前主要通过对母血中母血中人人绒毛膜促性腺激素毛膜促性腺激素(HCG)(HCG)、甲胎蛋白甲胎蛋白(AFP)(AFP)、游离雌三醇游离雌三醇(uE3)(uE3)和和妊娠相关血妊娠相关血浆蛋白蛋白A(PAPPA)A(PAPPA)等生化指等生化指标的的检测对胎儿染色体病胎儿染色体病进行行筛查,而其而其诊断断方法仍以方法仍以细胞胞遗传学学的的经典方法典方法-染色体核型分析染色体核型分析为主。通主。通过对胎儿胎儿细胞的核型分析胞的核型分析,可以可以诊断出几乎断出几乎100%100%的数目性染色体异常的数目性染色体异常和大部分明和大部分明显的的结构性染色体异常构性染色体异常。27染色体核型分析染色体核型分析 染色体核型分析是根据染色体的染色体核型分析是根据染色体的长度度、着着丝点位置点位置、臂比臂比、随体的有无随体的有无等特征，并借助染色体等特征，并借助染色体分分带技技术对某一生物的染色体某一生物的染色体进行分析、比行分析、比较、排、排序和序和编号。是号。是细胞胞遗传学研究的基本方法，是研究学研究的基本方法，是研究物种演化分物种演化、分类以及染色体以及染色体结构、形构、形态与功能之与功能之间关系所不可缺少的重要手段。关系所不可缺少的重要手段。经行核型分析后，可行核型分析后，可以以根据染色体根据染色体结构和数目的构和数目的变异异来判断生物的病因来判断生物的病因 。28唐氏唐氏综合症的核型分析合症的核型分析29先天畸形先天畸形 先天畸形是指致先天畸形是指致畸原畸原引起的胎儿出生前或出生引起的胎儿出生前或出生时明明显表表现出的出的组织结构或解剖学异常。据中国出构或解剖学异常。据中国出生缺陷生缺陷检测中心中心统计,我国我国20022002年出生年出生婴儿中先天儿中先天畸形畸形发生率前六位依次生率前六位依次为总唇裂唇裂多指趾多指趾、先天性先天性心心脏病病、神神经管缺陷管缺陷、先天性先天性脑积水水和和肢体短肢体短缩。这些先天畸形儿些先天畸形儿为其自身及其家庭、社会其自身及其家庭、社会带来了极来了极大的精神及大的精神及经济负担担,因此因此,做好做好产前前诊断工作以断工作以便在妊娠早期便在妊娠早期对严重畸形胎儿重畸形胎儿进行行选择性流性流产是有是有必要的。必要的。【方法技方法技术】30先天畸形的先天畸形的检查技技术 超声波超声波检查是是产前前诊断中断中最常用最常用的影像学的影像学检查,其中其中二二维超声超声在大部分胎儿先天畸形的在大部分胎儿先天畸形的产前前诊断中断中发挥了十分重了十分重要的作用要的作用,但但对一些复一些复杂畸形或畸形或细小畸形的小畸形的诊断尚断尚显不足，不足，而而三三维超声超声则利用利用电子子计算机技算机技术将二将二维图像像转变为三三维结构构,能有效提高能有效提高辩识能力能力,能能对胎儿畸形的胎儿畸形的诊断提供更断提供更多信息。多信息。胎儿超声心胎儿超声心动图则是是产前前宫内内诊断胎儿断胎儿心心脏血管血管异常异常不可缺少的无不可缺少的无创影像方法影像方法,随着一系列高分辨率、高随着一系列高分辨率、高帧频彩色多普勒超声心彩色多普勒超声心动图新技新技术的研制及的研制及临床床应用用,可可以在妊娠期尽早以在妊娠期尽早发现和及和及时确确诊胎儿胎儿先天性心先天性心脏病和心律病和心律失常失常。另外另外,多普勒多普勒组织成像技成像技术对诊断胎儿心律失常也断胎儿心律失常也有很好的帮助作用有很好的帮助作用 。磁共振磁共振的的应用用则为超声不能超声不能够单独独诊断或分断或分类困困难的病例提供了很好的的病例提供了很好的辅助手段助手段。31B B超超磁共振磁共振神神经管缺陷（管缺陷（NTDNTD）一种一种严重的畸形重的畸形疾疾病，神病，神经管就是胎儿管就是胎儿的中枢神的中枢神经系系统。胎胎儿神儿神经管畸形主要表管畸形主要表现为无无脑儿儿、脑膨出膨出、脑脊髓膜膨出脊髓膜膨出、隐性性脊柱裂脊柱裂、唇裂唇裂及及腭裂腭裂等。等。33神神经管缺陷（管缺陷（NTDNTD）神神经管缺陷（管缺陷（NTDNTD）在）在产前前诊断中占很大比断中占很大比例例,约l/3 1/2 l/3 1/2 左右。由于胎儿左右。由于胎儿NTD NTD 时母母血清血清AFP(MSAFP)AFP(MSAFP)以及以及羊水中羊水中AFPAFP、乙乙酞胆碱胆碱酯酶(AChE)(AChE)活性增高活性增高,因此可通因此可通过以上以上生化指生化指标的的检测并并结合合B B超超结果将果将99%99%以上的开放性神以上的开放性神经管缺陷管缺陷进行早期行早期诊断断,而与而与染色体畸染色体畸变有关有关的神的神经管畸形管畸形则需要需要作羊水作羊水细胞或胞或绒毛毛细胞的胞的染色体分析染色体分析。34遗传性代性代谢性疾病性疾病 遗传性代性代谢性疾病主要包括性疾病主要包括氨基酸氨基酸代代谢病病、糖脂代糖脂代谢异常疾病异常疾病、溶溶酶体体贮积症症、核酸代核酸代谢异常疾病异常疾病、铜铁代代谢紊紊乱疾病乱疾病等。目前用等。目前用羊水羊水、羊水羊水细胞胞、绒毛毛细胞胞或或血液血液等等进行行蛋白蛋白质、酶和和代代谢产物物的生化的生化检验仍是仍是遗传性代性代谢性疾病性疾病的主要的主要诊断方法。断方法。【举例例】35苯丙苯丙酮尿症尿症(PKU)(PKU)36苯丙苯丙酮尿症尿症(PKU)(PKU)PKU PKU是一种以是一种以智力低下智力低下为特征的特征的先天性氨基酸代先天性氨基酸代谢障碍障碍疾病疾病,属于常属于常染色体染色体隐性性遗传性疾病。性疾病。由于由于缺缺乏苯丙氨酸乏苯丙氨酸羟化化酶(PAH)(PAH)而而不能生成酪氨酸不能生成酪氨酸，大量，大量苯丙氨酸脱氨后生成苯丙氨酸脱氨后生成苯丙苯丙酮酸酸，随尿排出而患病，随尿排出而患病，儿童患者可出儿童患者可出现先天性痴呆。先天性痴呆。用用HPLCHPLC进行血行血苯丙氨苯丙氨酸酸(Phe)(Phe)浓度度的的测定是定是诊断断经典型典型PKUPKU的主要方法。的主要方法。此外此外,由于由于经典型典型PKUPKU是缺乏是缺乏PAHPAH所致所致,因此因此,可以可以用用分子分子遗传学学的方法的方法对PAHPAH基因基因进行行检测从而用于从而用于携携带者者诊断和断和产前前诊断断,如用如用PAHPAH基因探基因探针检测DNA DNA 多多态性以及用性以及用PAH PAH 基因基因单核苷酸多核苷酸多态位点位点进行行连锁分析分析等。等。37单基因疾病基因疾病 单基因病是由某个正常基因基因病是由某个正常基因产生了某种改生了某种改变而而导致基因功能改致基因功能改变或或丧失而失而导致的致的遗传病病,这些改些改变包括包括DNADNA中中一个一个或或多个核苷酸的置多个核苷酸的置换(点突点突变),DNA,DNA中核苷酸的中核苷酸的插入插入或或缺失缺失而而导致致蛋白蛋白质的的移移码和一些三核苷酸和一些三核苷酸重复重复顺序的序的扩展。展。目前主要目前主要应用于用于地中海地中海贫血血、血友病血友病、脆性脆性X X综合征合征等。等。38单基基因因疾疾病病一一.直接直接诊断所采用的技断所采用的技术Southern Southern 印迹技印迹技术多重多重PCRPCR技技术PCR-PCR-限制性片段限制性片段长度多度多态性（性（PCR-RFLPPCR-RFLP）等位基因特异性寡核苷酸（等位基因特异性寡核苷酸（ASOASO）DNADNA芯片技芯片技术（DNA chipDNA chip）单链构象多构象多态性（性（SSCPSSCP）变性梯度凝胶性梯度凝胶电泳（泳（DGGEDGGE）DNADNA序列分析（序列分析（DNA sequencingDNA sequencing）39单基基因因疾疾病病二二.间接接诊断所采用的技断所采用的技术 间接接诊断就是分析断就是分析DNADNA的的遗传标志的多志的多态性。性。（1 1）限制性片段限制性片段长度多度多态性性（RFLPRFLP）第一代第一代DNADNA的的遗传标志，具双等位基因多志，具双等位基因多态性，性，所含信息量有限所含信息量有限 。检测方法：方法：SouthernSouthern印迹技印迹技术、PCR-RFLPPCR-RFLP。40单基基因因疾疾病病二二.间接接诊断所采用的技断所采用的技术（2 2）小小卫星序列星序列 串串联重复可重复可变数目（数目（VNTRVNTR），以），以 6-70bp 6-70bp 为单位，可重复数次至数十次，以串位，可重复数次至数十次，以串联形式排列，形式排列，构成数量可构成数量可变的串的串联重复序列。等位基因常常达重复序列。等位基因常常达1010个以上，信息量比个以上，信息量比 RFLPRFLP大得多大得多 。检测方法：方法：Southern Southern 印迹技印迹技术、PCRPCR技技术 。41SouthernSouthern印迹印迹杂交交 SouthernSouthern印迹印迹杂交交（Southern blotSouthern blot）是）是19751975年由英国人年由英国人southernsouthern创建，是研究建，是研究DNADNA图谱的基本技的基本技术，在在遗传病病诊断、断、DNADNA图谱分析及分析及PCRPCR产物分析物分析等方面有重要价等方面有重要价值。42DNA片段在片段在琼脂脂糖凝胶上糖凝胶上电泳分泳分离离膜上固定膜上固定DNA片段片段在在缓冲液中将冲液中将标记的探的探针加到膜加到膜上上DNA片段从片段从琼脂脂糖凝胶上糖凝胶上转印到印到膜上膜上杂交信号的交信号的检测Southern Southern 印迹印迹产前前诊断的断的伦理理问题（1）不不得得进行行非非医医学学目目的的的的性性别鉴定定；（2）不不建建议对非非致致死死性性,以以及及不不严重重影影响响生生活活质量量和和生生存存能能力力的的畸畸形形终止止妊妊娠娠；（3）要要对患患者者及及其其家家属属告告知知检查手手段段的的局局限限性性；（4）采采取取知知情情同同意意原原则：发现胎胎儿儿异异常常后后,将将继续妊妊娠娠可可能能出出现的的结局局和和概概率率、以以及及进一一步步可可选择的的处理理方方案案,以以书面面形形式式告告知知孕孕妇或或家家属属。孕孕妇或或家家属属自自行行选择处理理方方案案,二二者者有有矛矛盾盾,应由由孕孕妇决决定定,并并签署署知知情情同同意意书。44产前前诊断的断的现状状目目前前产前前诊断断尚尚未未在在我我国国完完全全铺开开,产前前诊断断技技术也也存存在在不不恰恰当当应用用的的问题，而而且且诊断断水水平平还远远不不能能达达到到优生生优育育需需要要,仍仍然然存存在在很很多多需需要要解解决决的的问题,如如缺缺乏乏敏敏感感、特特异异的的早早期期诊断断手手段段,仅凭凭现有有的的1 2项检查往往往往不不能能全全面面反反映映宫内内胎胎儿儿发育育的的真真实情情况况,准准确确率率不不高高,且且分分子子诊断断研研究究落落后后，不不能能满足足临床床的的需需要要;另另外外,目目前前多多数数的的产前前诊断断需需做做侵侵入入性性检查,对孕孕妇和和胎胎儿儿有有一一定定的的创伤和和风险。因因此此,寻找找更更加加合合理理的的无无创的的取取材材方方式式并并将将分分子子生生物物学学、分分子子遗传学学等等方方法法与与目目前前产前前诊断断常常用用的的检测方方法法有有机机结合合以以进一一步步提提高高产前前诊断断的的准准确确率率将将是是今今后后产前前诊断断发展展的的重重要要方方向向。45Thanks For WatchingTheEnd