第十章-弧菌.ppt

第十章第十章 弧菌弧菌弧菌属（弧菌属（VibrioVibrio）一群菌体短小，弯曲成弧形、一群菌体短小，弯曲成弧形、运动活泼的革兰阴性菌运动活泼的革兰阴性菌广泛分布，尤以水中为多广泛分布，尤以水中为多主要致病菌为霍乱弧菌和副溶血性弧菌主要致病菌为霍乱弧菌和副溶血性弧菌弧菌属共有弧菌属共有36个种。其中有个种。其中有12个种与人类感染有关个种与人类感染有关霍乱流行 o1817年首次从东南亚霍乱流行地区开始，随后蔓延到世界其它地区。o1829年1851年，在1832年年蔓延至欧洲、伦敦，同年又蔓延至安大略、加拿大和纽约，在1834年又发展到北美的太平洋海岸。o1852年1860年，主要影响了俄罗斯，造成了超过百万人的死亡。并且造成柴可夫斯基和他母亲的死亡。o1863年1875年 传播到了大部分欧洲及非洲区域。o1866年在北美爆发。o1892年，霍乱污染德国汉堡自来水，以致8606人死亡。o第七次爆发被称作El Tor，发生于 1961年发生在印尼，1963年传染到孟加拉，1964年传染到印度，并于1966年传播到苏联。o香港曾经在七十年代爆发霍乱。o1994年卢旺达危机后，霍乱暴发在一个月内至少在刚果戈马的难民营造成48 000病例和23 800人死亡 o津巴布韦于2008年8月份起爆发霍乱，并在全国蔓延。据估计，疫情可能最快要到2009年3月雨季过后才会受到控制。19051905年在埃及西奈半岛的年在埃及西奈半岛的ElTor ElTor 检疫站首次分离到检疫站首次分离到溶血性霍乱弧菌，命名为：溶血性霍乱弧菌，命名为：ElTor ElTor 生物型生物型(溶血溶血)O-1O-1群群 古典生物型古典生物型 霍乱弧菌（霍乱弧菌（1817196118171961）前六次大流行的流行菌株前六次大流行的流行菌株O-1O-1群群 ElTorElTor生物型霍乱弧菌生物型霍乱弧菌(1961)(1961)第七次大流行的流行菌株第七次大流行的流行菌株非非O-1O-1群群 引起散发的胃肠炎引起散发的胃肠炎O139 O139 19921992年年9 9月月1919日印度南部城市马德拉斯，日印度南部城市马德拉斯，1212月孟月孟加拉国出现流行影响全印度，继而扩散到泰国、中国加拉国出现流行影响全印度，继而扩散到泰国、中国（19931993年）等亚洲国家年）等亚洲国家（一）（一）霍乱弧菌（霍乱弧菌（V.choleraeV.cholerae）o形态与染色形态与染色弧形逗点革兰阴弧形逗点革兰阴弧形逗点革兰阴弧形逗点革兰阴单根鞭毛助运动单根鞭毛助运动单根鞭毛助运动单根鞭毛助运动（鱼群样穿梭）（鱼群样穿梭）（鱼群样穿梭）（鱼群样穿梭）没有芽胞有菌毛没有芽胞有菌毛没有芽胞有菌毛没有芽胞有菌毛多数没有荚膜裹多数没有荚膜裹多数没有荚膜裹多数没有荚膜裹（O139O139除外）除外）除外）除外）培养与生化培养与生化兼性厌氧要求低兼性厌氧要求低兼性厌氧要求低兼性厌氧要求低嗜碱厌酸助分离嗜碱厌酸助分离嗜碱厌酸助分离嗜碱厌酸助分离（pH8.8pH8.89.09.0碱碱碱碱性蛋白胨水）性蛋白胨水）性蛋白胨水）性蛋白胨水）多种糖类都爱吃多种糖类都爱吃多种糖类都爱吃多种糖类都爱吃生化反应很活跃生化反应很活跃生化反应很活跃生化反应很活跃（硝酸盐、吲哚（硝酸盐、吲哚（硝酸盐、吲哚（硝酸盐、吲哚、过氧化氢酶、氧化酶）、过氧化氢酶、氧化酶）、过氧化氢酶、氧化酶）、过氧化氢酶、氧化酶）V.choleraeV.cholerae在在pH8.89.0pH8.89.0碱性蛋白胨水培碱性蛋白胨水培养基中生长。液体呈均匀混浊，有菌膜养基中生长。液体呈均匀混浊，有菌膜（6 68h8h），左侧为阴性对照。），左侧为阴性对照。氧化酶试验阳性氧化酶试验阳性(深紫色深紫色)小川型小川型古典生物型古典生物型El TorEl Tor生物型生物型稻叶型稻叶型古典生物型古典生物型El TorEl Tor生物型生物型彦岛型彦岛型古典生物型古典生物型El TorEl Tor生物型生物型O1O1群群O O抗原和抗原和H H抗原抗原根据根据O O抗原分抗原分为为155155个血清群，其中个血清群，其中O1O1群和群和O139O139群引起霍乱。群引起霍乱。O1O1群分型：群分型：抗原构造与分型抗原构造与分型抵抗力抵抗力耐碱不耐酸：耐碱不耐酸：在正常胃酸中仅能存活在正常胃酸中仅能存活4分钟分钟对外环境抵抗力：对外环境抵抗力：对外环境抵抗力：对外环境抵抗力：古典型生物型古典型生物型 El Tor型和其它型和其它 1份漂白粉和份漂白粉和4份水比例处理患者排泄物或呕吐物份水比例处理患者排泄物或呕吐物1小时，可杀死小时，可杀死霍乱弧菌。水加霍乱弧菌。水加0.5ppm氯氯,15分钟能杀死霍乱弧菌分钟能杀死霍乱弧菌水中存活长：水中存活长：1-31-3周，夏季可大量繁殖周，夏季可大量繁殖耐冷不耐热：耐冷不耐热：1001-21001-2分钟死亡分钟死亡致病性与免疫性致病性与免疫性o致病物致病物质质n霍乱霍乱肠肠毒素毒素choleratoxincholeratoxinn致泻毒性最致泻毒性最强强毒素，由溶源性毒素，由溶源性转换转换而来而来A A亚单亚单位位ctxActxA毒素活性成分，腺苷酸毒素活性成分，腺苷酸环环化化酶酶活性增高，活性增高，使使细细胞内胞内cAMPcAMP水平升高，主水平升高，主动动分泌分泌NaNa+、K K+、HCOHCO3 3-和和水，水，导导致致严严重的腹泻与呕吐。重的腹泻与呕吐。B B亚单亚单位位ctxBctxB与小与小肠肠粘膜上皮粘膜上皮细细胞胞GM1GM1神神经节经节苷脂受苷脂受体体结结合，介合，介导导A A亚单亚单位位进进入入细细胞。胞。致病机制致病机制霍乱肠毒素：前噬菌体编码霍乱肠毒素：前噬菌体编码主动分泌主动分泌Na+、K+、HCO3和水，和水，导致严重的腹泻与呕吐导致严重的腹泻与呕吐腺苷二磷酸核糖腺苷二磷酸核糖 +G+GGsGsA(A1+A2)+B 霍乱肠毒素霍乱肠毒素A1(腺苷二磷酸核糖转移酶腺苷二磷酸核糖转移酶)使细胞内使细胞内cAMP水平升高水平升高鞭毛：鞭毛：鞭毛：鞭毛：菌毛：菌毛：菌毛：菌毛：acf(acf(accessoryaccessory colonization factor)colonization factor)编码粘附素编码粘附素编码粘附素编码粘附素 致病物质致病物质紧密连接毒素紧密连接毒素紧密连接毒素紧密连接毒素（zonula occludenszonula occludens toxin）:zot:zot:zot:zot编码编码编码编码剧烈腹泻和呕吐（米泔水样腹泻物），大量水分和电剧烈腹泻和呕吐（米泔水样腹泻物），大量水分和电解质丧失解质丧失，低容量性休克，心、肾衰竭（死亡率高达，低容量性休克，心、肾衰竭（死亡率高达60%）发病季节在夏秋季，发病季节在夏秋季，7-9月为发病高峰月为发病高峰传播途径传播途径主要通过污染的水源或食物经口摄入主要通过污染的水源或食物经口摄入所致疾病所致疾病传染源传染源临床表现临床表现霍霍 乱乱病人、无症状感染者病人、无症状感染者上吐下泻上吐下泻O139比比O1严重严重人类是惟一易感者，甲类传染病人类是惟一易感者，甲类传染病感染剂量：感染剂量：10 （胃酸低时，（胃酸低时，10 10 ）835霍乱病人霍霍 乱乱 患患 者者免免 疫疫 性性感染霍乱弧菌后，机体可获得牢固免疫力感染霍乱弧菌后，机体可获得牢固免疫力SIgA起主要作用起主要作用 保护性抗体：抗肠毒素保护性抗体：抗肠毒素保护性抗体：抗肠毒素保护性抗体：抗肠毒素BB亚基抗体（亚基抗体（亚基抗体（亚基抗体（IgGIgG型）型）型）型）抗抗抗抗OO抗原抗体抗原抗体抗原抗体抗原抗体 （IgMIgM型）型）型）型）O1群的免疫对群的免疫对O139无保护作用无保护作用带菌者少见带菌者少见微生物学检查法微生物学检查法标本：标本：米泔水样粪便、肛拭或呕吐物米泔水样粪便、肛拭或呕吐物镜检：镜检：悬滴法检查有无悬滴法检查有无“鱼群鱼群”样穿梭运动的弧菌样穿梭运动的弧菌 革兰染色观察细菌形态革兰染色观察细菌形态培养：培养：标本接种于碱性蛋白胨水增菌标本接种于碱性蛋白胨水增菌 选择培养基选择培养基TCBSTCBS霍乱是烈性传染病，霍乱是烈性传染病，对首例病人的病原学对首例病人的病原学诊断应快速、准确，诊断应快速、准确，并及时作出疫情报告并及时作出疫情报告 选择培养基选择培养基TCBSTCBS（硫代硫酸盐（硫代硫酸盐-枸枸橼酸盐橼酸盐-胆盐胆盐-蔗糖蔗糖琼脂平板）：琼脂平板）：霍乱弧菌形成较大霍乱弧菌形成较大菌落，发酵蔗糖产菌落，发酵蔗糖产酸使菌落呈黄色酸使菌落呈黄色选择培养选择培养霍乱弧菌检验程序霍乱弧菌检验程序标本标本 增菌培养增菌培养碱性蛋白胨水碱性蛋白胨水 分离培养（分离培养（TCBS、碱性平板）、碱性平板）生化鉴定分型生化鉴定分型血清学鉴定血清学鉴定确诊报告确诊报告初步报告初步报告快速诊断快速诊断直接涂片直接涂片 动力、制动动力、制动试验试验防治原则防治原则改善社区环境，加强水源管理，改善社区环境，加强水源管理，疫苗预防接种疫苗预防接种及时补充液体和电解质及时补充液体和电解质预防大量失水导致的低血容量性休克和酸中毒预防大量失水导致的低血容量性休克和酸中毒治疗霍乱的关键治疗霍乱的关键控制传染源控制传染源切断传播途径切断传播途径提高易感者免疫力提高易感者免疫力隔离病人，治疗无症状携带者隔离病人，治疗无症状携带者o接接种种疫疫苗苗：霍霍乱乱弧弧菌菌死死菌菌苗苗、类类毒毒素素、新新疫疫苗苗（减减毒毒重重组组活活疫疫苗苗、菌菌苗苗加加类类毒毒素素混混合合苗苗、霍乱霍乱-伤寒杂交菌苗等）伤寒杂交菌苗等）o及时和适当的补充液体和电解质及时和适当的补充液体和电解质o应应用用抗抗菌菌药药物物（四四环环素素、氯氯霉霉素素、多多西西环环素素、磺胺类药物等）磺胺类药物等）(注意耐药性)深圳口岸检出副溶血性弧菌感染性腹泻病例深圳口岸检出副溶血性弧菌感染性腹泻病例o6 6月月9 9日日22:4522:45分，由泰国曼谷飞往深圳的分，由泰国曼谷飞往深圳的FD3622FD3622次航班旅客到次航班旅客到达，一位年轻的女性旅客面色发青，痛苦地蹲在地上，现场询达，一位年轻的女性旅客面色发青，痛苦地蹲在地上，现场询问，此位旅客腹绞痛、头晕、呕吐，并曾在机上出现两次腹泻问，此位旅客腹绞痛、头晕、呕吐，并曾在机上出现两次腹泻的情况的情况o流行病学调查，该名女性旅客流行病学调查，该名女性旅客2323岁、广西人，于两年前去泰国岁、广西人，于两年前去泰国曼谷进行学习交流，今次回国前夕曾曼谷进行学习交流，今次回国前夕曾2 2次食用自助餐内的虾类海次食用自助餐内的虾类海产品，并于登机前一个小时发生腹泻现象产品，并于登机前一个小时发生腹泻现象o立即留取该旅客大便样本进行检查。霍乱弧菌胶体金筛检结果立即留取该旅客大便样本进行检查。霍乱弧菌胶体金筛检结果阴性、血常规检查结果白细胞和中性粒细胞比率升高，镜检发阴性、血常规检查结果白细胞和中性粒细胞比率升高，镜检发现样本内有大量的运动非常活跃的弧菌现样本内有大量的运动非常活跃的弧菌o工作人员遂将样品接种于到碱性蛋白胨水中进行增菌，样品送工作人员遂将样品接种于到碱性蛋白胨水中进行增菌，样品送深圳国际旅行卫生保健中心医学媒介生物实验室进一步检验。深圳国际旅行卫生保健中心医学媒介生物实验室进一步检验。6 6月月1010日，深圳国际旅行卫生保健中心医学媒介生物实验室结果日，深圳国际旅行卫生保健中心医学媒介生物实验室结果反馈，该旅客大便样本中检出副溶血性弧菌核酸阳性。反馈，该旅客大便样本中检出副溶血性弧菌核酸阳性。(二）副溶血性弧菌副溶血性弧菌（V.parahaemolyticusV.parahaemolyticus）1 1、革兰阴性杆菌，或微弯，单端鞭毛，、革兰阴性杆菌，或微弯，单端鞭毛，无芽胞，无荚膜无芽胞，无荚膜2 2、嗜盐：、嗜盐：3.5%NaCl3.5%NaCl最适最适3 3、不耐热，不耐酸、不耐热，不耐酸3 3、存在于近海的海水、海底沉积物和鱼、存在于近海的海水、海底沉积物和鱼类、贝类等海产品中类、贝类等海产品中致病性与免疫性致病性与免疫性致病物质致病物质所致疾病所致疾病所致疾病所致疾病：食物中毒、创伤感染、败血症：食物中毒、创伤感染、败血症：食物中毒、创伤感染、败血症：食物中毒、创伤感染、败血症传染源：海产品或盐腌渍品传染源：海产品或盐腌渍品传染源：海产品或盐腌渍品传染源：海产品或盐腌渍品传播途径：经口传播途径：经口传播途径：经口传播途径：经口临床症状：腹痛、腹泻、呕吐与发热、水样便临床症状：腹痛、腹泻、呕吐与发热、水样便临床症状：腹痛、腹泻、呕吐与发热、水样便临床症状：腹痛、腹泻、呕吐与发热、水样便耐热性溶血毒素：与动物红细胞膜表面的神经节耐热性溶血毒素：与动物红细胞膜表面的神经节耐热性溶血毒素：与动物红细胞膜表面的神经节耐热性溶血毒素：与动物红细胞膜表面的神经节 脂受体结合而致溶血。脂受体结合而致溶血。脂受体结合而致溶血。脂受体结合而致溶血。不耐热溶血毒素不耐热溶血毒素不耐热溶血毒素不耐热溶血毒素微生物学检查方法与防治微生物学检查方法与防治o诊诊断断n标标本本:粪粪便、肛拭、剩余食物便、肛拭、剩余食物n分离培养分离培养:SS:SS平板或嗜平板或嗜盐盐菌菌选择选择平板平板n嗜嗜盐盐性性试验试验或生化反或生化反应应:神奈川神奈川现现象（象（溶血）溶血）n血清学血清学鉴鉴定：玻片凝集定：玻片凝集o防治防治n食品卫生管理食品卫生管理；抗生素：；抗生素：庆庆大霉素，大霉素，SMZ-TMPSMZ-TMP思考题:o请介绍霍乱肠毒素的组成、致病过程、致病机制。请介绍霍乱肠毒素的组成、致病过程、致病机制。o哪些霍乱弧菌可以引起霍乱？霍乱是如何哪些霍乱弧菌可以引起霍乱？霍乱是如何传传播的？播的？其其临临床表床表现现、预预后如何？后如何？o副溶血性弧菌可以引起何种疾病？如何副溶血性弧菌可以引起何种疾病？如何预预防？防？课外阅读资料目录课外阅读资料目录1FarmerP.,etal.MeetingcholeraschallengetoHaitiandtheworld:ajointstatementoncholerapreventionandcare.PLoSNeglTropDis.2011;5(5):e1145.2HarrisJB.,etal.Cholera.Lancet.2012Jun30;379(9835):2466-76.3ShimohataT,TakahashiA.Diarrheainducedbyinfectionofvibrioparehaemolyticus.JMedInvest.2010Aug;57(3-4):179-82.4.MooreS，ThomsonN,MutrejaA,PiarrouxR.WidespreadepidemiccholeraduetoarestrictedsubsetofVibriocholeraeclones.ClinMicrobiolInfect.2014Feb27.doi:10.1111/1469-0691.12610.