大学课件病毒感染的检查方法与防治原则ppt课件.ppt

第24章病毒感染的检查方法与防治原则1.v1）掌握）掌握标本的采集与送本的采集与送检原原则、病毒感染的、病毒感染的快速快速诊断；断；v2）熟悉病毒感染的免疫）熟悉病毒感染的免疫预防、抗病毒治防、抗病毒治疗；v3）了解病毒的分离培养。）了解病毒的分离培养。2.第一第一节 病毒感染的病毒感染的检查方法方法病毒学病毒学实验室室诊断有三个方面：断有三个方面：u直接直接检测和分离和分离鉴定；定；u检测病毒核酸和抗原成分；病毒核酸和抗原成分；u检测特异性抗体。特异性抗体。3.第一第一节 病毒感染的病毒感染的检查方法方法一、一、标本采集与送本采集与送检：1、采集的、采集的标本：通常采集血液、鼻咽分本：通常采集血液、鼻咽分泌液、咯痰、泌液、咯痰、粪便、便、脑脊液、疱疹内容脊液、疱疹内容物、活物、活检组织或尸或尸检组织等。等。（一）供病毒分离培养、（一）供病毒分离培养、检测核酸和抗原核酸和抗原4.2、采集原、采集原则v（1）时间:在在发病初期（急性期）采取，病初期（急性期）采取，较易易检出出病毒，越病毒，越迟阳性率越低。阳性率越低。v（2）类型型:在感染部位采取。如呼吸道感染采取鼻在感染部位采取。如呼吸道感染采取鼻咽洗漱液或咯痰；咽洗漱液或咯痰；v（3）运）运输:冷藏速送。病毒离活体后在室温下很易冷藏速送。病毒离活体后在室温下很易死亡，故采得死亡，故采得检材材应尽快送尽快送检。远距离运送，距离运送，应将将检材放入装有冰材放入装有冰块或干冰的空器内送或干冰的空器内送检。病。病变组织则应保存于保存于50%的甘油的甘油缓冲冲盐水中。水中。v（4）处理：无菌操作；理：无菌操作；污染染检材，加双抗生素或材，加双抗生素或氯仿仿处理。如鼻咽分泌液、理。如鼻咽分泌液、粪便等便等应加入青霉素、加入青霉素、链霉素等，以免霉素等，以免杂菌菌污染染细胞或胞或鸡胚，而影响病毒胚，而影响病毒分离。分离。5.（二）供血清学（二）供血清学检查的的标本的采集原本的采集原则1、检测特异性抗体需要采取急性期与恢复特异性抗体需要采取急性期与恢复期双份血清，第一份尽可能在期双份血清，第一份尽可能在发病后立即病后立即采取，第二份在采取，第二份在发病后病后23周采取。周采取。2、血清、血清标本放本放4-20保存，保存，试验前血前血清清标本以本以5630分分钟处理去除非特异性物理去除非特异性物质及及补体。体。3、无菌性、无菌性脑炎患者也可取炎患者也可取脑脊液脊液检测特异特异性性lgM。6.二、形二、形态学学检查v电子子显微微镜（EM）:能能观察病毒察病毒颗粒的形粒的形态和大小。和大小。v光学光学显微微镜:能能观察病毒感染察病毒感染细胞内的病理胞内的病理变化，如包涵体或多核巨化，如包涵体或多核巨细胞等。胞等。例如，狂犬病病毒感染后可在例如，狂犬病病毒感染后可在脑神神经细胞胞浆中中检出嗜酸性包涵体，称出嗜酸性包涵体，称为内基小体，可内基小体，可辅助助诊断狂断狂犬病。犬病。7.三、病毒的分离培养三、病毒的分离培养（一）病毒分离的一般程序是（一）病毒分离的一般程序是鉴定病毒种型定病毒种型(血清学方法血清学方法)检验标本本杀灭杂菌菌(青、青、链霉素霉素)接种接种易感的易感的动物物出出现病状病状 鸡胚胚病病变或死亡或死亡细胞培养胞培养细胞病胞病变8.9.（二）分离病毒的（二）分离病毒的鉴定定1病毒在病毒在细胞内增殖的指征胞内增殖的指征（1）细胞致病作用胞致病作用(Cytopathogenic effect,CPE):病病毒在毒在细胞内增殖引起胞内增殖引起细胞退形性胞退形性变，表，表现为细胞胞皱缩、变圆、出、出现空泡、死亡和脱落。某些病毒空泡、死亡和脱落。某些病毒产生特征性生特征性CPE，普通光学倒置，普通光学倒置显微微镜下可下可观察上述察上述细胞病胞病变，结合合临床表床表现可做出可做出预测性性诊断。断。（2）红细胞吸附胞吸附现象象（3）干）干扰现象象（概念、作用机理、意（概念、作用机理、意义）2病毒感染性的定量病毒感染性的定量测定定：10.病毒在病毒在细胞内增殖的指胞内增殖的指标正常正常细胞胞病病变细胞胞11.干干扰现象象概念：两种不同病毒或同种异型病毒、感染同一概念：两种不同病毒或同种异型病毒、感染同一概念：两种不同病毒或同种异型病毒、感染同一概念：两种不同病毒或同种异型病毒、感染同一细细胞胞胞胞时时，一种病毒抑制另一病毒增殖的，一种病毒抑制另一病毒增殖的，一种病毒抑制另一病毒增殖的，一种病毒抑制另一病毒增殖的现现象。象。象。象。u病毒病毒诱导宿主宿主细胞胞产生干生干扰素素:抑制被干抑制被干扰病毒的病毒的生物合成。生物合成。u竞争干争干扰：一种病毒破坏宿主：一种病毒破坏宿主细胞的表面受体，因胞的表面受体，因而阻断另一病毒吸附。而阻断另一病毒吸附。u改改变宿主宿主细胞的代胞的代谢途途经：从而阻止第二种病毒的：从而阻止第二种病毒的mRNA的合成或其他生物合成的合成或其他生物合成过程。程。u产生缺陷病毒生缺陷病毒:其基因不能正常复制，但能干其基因不能正常复制，但能干扰感感染性病毒体的复制，染性病毒体的复制，这种缺陷病毒称种缺陷病毒称为缺陷干缺陷干扰颗粒。粒。12.四、病毒成分（核酸及抗原）的直接四、病毒成分（核酸及抗原）的直接检出出 vv（一）直接（一）直接检出病毒核酸出病毒核酸 1 1核酸核酸核酸核酸杂杂交交交交 2 2多聚多聚多聚多聚酶链酶链反反反反应应 3.3.基因芯片技基因芯片技基因芯片技基因芯片技术术vv（二）直接（二）直接检测病毒抗原病毒抗原 1 1免疫免疫免疫免疫荧荧光（光（光（光（IFIF）技）技）技）技术术 2 2酶联酶联免疫吸附免疫吸附免疫吸附免疫吸附试验试验（ELISAELISA）13.ELISAMicroplate ELISA for HIV antibody:coloured wells indicate reactivity14.五、特异性抗体的五、特异性抗体的检测v病毒感染后通常病毒感染后通常诱发针对病毒一种或多种抗病毒一种或多种抗原免疫原免疫应答，特异性抗体效价升高或答，特异性抗体效价升高或lgM抗抗体出体出现有有辅助助临床床诊断的价断的价值。（一）（一）补体体结合合试验（CF）（二）中和（二）中和试验（NT）（三）血凝抑制（三）血凝抑制试验（HIA）15.光光镜-包涵体包涵体电镜免疫免疫荧光光ELISA分子生物学技分子生物学技术杂交PCR六、六、病毒感染的快速病毒感染的快速诊断断16.第二第二节 病毒感染的免疫病毒感染的免疫预防防17.一、人工主一、人工主动免疫免疫v人工主人工主动免疫制免疫制剂病毒疫苗：病毒疫苗：（一）减毒活疫苗（一）减毒活疫苗是由从自然界或人工突是由从自然界或人工突变培育培育筛选出的致病性减弱出的致病性减弱或或丧失的病毒突失的病毒突变株制株制备而成的疫苗，如脊髓灰而成的疫苗，如脊髓灰质炎炎活疫苗。活疫苗。（二）（二）灭活疫苗活疫苗是利用某些理化因素是利用某些理化因素处理活病毒，使其失去感染性后制理活病毒，使其失去感染性后制备而成。如乙型而成。如乙型脑炎炎灭活疫苗。活疫苗。（三）（三）亚单位疫苗位疫苗是将病毒中有效的免疫原成分提取制是将病毒中有效的免疫原成分提取制备而成。而成。（四）基因工程疫苗（四）基因工程疫苗利用基因工程技利用基因工程技术制制备的病毒疫苗主要有：的病毒疫苗主要有：基因工程基因工程亚单位疫苗；位疫苗；基因工程基因工程载体疫苗；体疫苗；核酸疫苗。核酸疫苗。18.19.二、人工被二、人工被动免疫免疫v常用制常用制剂有：有：v抗病毒免疫血清抗病毒免疫血清:现有抗麻疹、有抗麻疹、抗狂犬病、抗乙型抗狂犬病、抗乙型脑炎免疫血清等，炎免疫血清等，这些些免疫血清具有免疫血清具有显著的著的预防作用；防作用；人免疫球蛋白制人免疫球蛋白制剂:包括人血清丙种球蛋包括人血清丙种球蛋白、胎白、胎盘球蛋白球蛋白 v特异性免疫球蛋白：从某种病毒感染者特异性免疫球蛋白：从某种病毒感染者的血清中提取、的血清中提取、纯化后制化后制备的免疫球蛋白，的免疫球蛋白，可可紧急急预防相防相应的病毒感染，如乙型肝炎的病毒感染，如乙型肝炎免疫球蛋白（免疫球蛋白（HBIg）。）。20.v1抗病毒的化学制抗病毒的化学制剂：目前抗病毒化学：目前抗病毒化学药物主要物主要有核苷有核苷类药物。物。（1）核苷）核苷类药物：通物：通过阻抑子代病毒基因的合成与阻抑子代病毒基因的合成与表达，抑制病毒复制表达，抑制病毒复制.常用常用药物有物有:用于用于DNA病毒感染病毒感染:阿糖腺苷、碘尿苷、无阿糖腺苷、碘尿苷、无环鸟苷苷（阿昔洛（阿昔洛韦）、丙氧）、丙氧鸟苷；苷；用于用于HIV感染感染:叠氮脱氧胸苷（叠氮脱氧胸苷（AZT）广广谱抗病毒抗病毒:3-氮氮唑核苷，核苷，对多种多种RNA或或DNA病毒病毒有抑制作用。有抑制作用。第三第三节 病毒感染的治病毒感染的治疗21.v（2）病毒蛋白）病毒蛋白酶抑制抑制剂：通：通过抑制病毒抑制病毒蛋白蛋白酶的活性，阻止病毒的复制的活性，阻止病毒的复制.常用常用药物有印地那物有印地那韦、利多那、利多那韦等，等，对HIV有一定抑制作用。有一定抑制作用。v（3）其它抗病毒）其它抗病毒药物：金物：金刚烷胺或甲基胺或甲基金金刚烷胺用于甲型流感的治胺用于甲型流感的治疗，甲酸磷，甲酸磷霉素用于疱疹病毒感染的治霉素用于疱疹病毒感染的治疗。22.v2干干扰素及干素及干扰素素诱生生剂:干干扰素具有广素具有广谱抗病毒作用，主要用抗病毒作用，主要用IFN-，副作用小，副作用小，对某些病毒性疾病的防治有某些病毒性疾病的防治有较好的效果好的效果。v3中草中草药:黄芪、大青叶、板黄芪、大青叶、板兰根、根、贯众。众。v4其他其他:单克隆抗体、治克隆抗体、治疗性疫苗、性疫苗、细胞因胞因子等免疫制子等免疫制剂。23.后面内容直接删除就行资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用资料仅供参考，实际情况实际分析24.感感谢您的您的观看和下看和下载The user can demonstrate on a projector or computer,or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field25.