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人类疾病模型与模式化实验动物饲料浅谈20152015年年6 6月月2828日日成都达硕成都达硕2024/5/21 周二1模式化实验动物饲料是确保实验动物疾病造模模式化实验动物饲料是确保实验动物疾病造模成功的关键因素之一。成功的关键因素之一。实验动物实验动物标准化的实验动物饲料是维持该标准化的实验动物饲料是维持该“试剂试剂”标准标准化的重要基础。化的重要基础。实验动物被誉为活试剂，是一切疾病模型、毒实验动物被誉为活试剂，是一切疾病模型、毒理研究的载体。理研究的载体。2024/5/21 周二2缺缺V VD3D3饲饲料料缺赖氨缺赖氨酸饲料酸饲料缺钙缺钙 饲料饲料高钙高钙 饲料饲料高铁高铁 饲料饲料高蛋白高蛋白质饲料质饲料缺铬缺铬 饲料饲料模式化实验动物饲料模式化实验动物饲料食源性肥胖模型饲料食源性肥胖模型饲料胰岛素抵抗胰岛素抵抗/糖尿病模型饲料糖尿病模型饲料非酒精性脂肪肝非酒精性脂肪肝(NAFLD)模型饲料模型饲料 动脉粥样硬化模型饲料动脉粥样硬化模型饲料高血压模型饲料高血压模型饲料2024/5/21 周二3肥胖肥胖食源性肥胖症食源性肥胖症高脂饲料诱导的食源性肥胖症（高脂饲料诱导的食源性肥胖症（DIO）遗传与环境因素是肥胖的主因，遗传与环境因素是肥胖的主因，饮食因饮食因素素是诱发肥胖的是诱发肥胖的主要环境因素主要环境因素。啮齿类动物。啮齿类动物在高脂诱导下很容易长胖，是非常有效的食在高脂诱导下很容易长胖，是非常有效的食源性肥胖症（源性肥胖症（Diet-Induced Obesity,DIO）的）的研究工具研究工具1,2。2024/5/21 周二4肥胖肥胖食源性肥胖症（食源性肥胖症（DIO）高脂饲料诱导的高脂饲料诱导的DIODIO诱导饲料诱导饲料:3045kcal%脂肪脂肪（粗脂肪（粗脂肪1318%，粗蛋白，粗蛋白1820%）高脂日粮高脂日粮 DIO对照饲料对照饲料:1011kcal%脂肪脂肪（粗脂肪（粗脂肪45%，粗蛋白，粗蛋白1820%）低脂日粮低脂日粮 饲喂该高脂料饲喂该高脂料68周能引起大鼠、小鼠营养性肥胖，周能引起大鼠、小鼠营养性肥胖，且大鼠伴随高血脂和高血糖，小鼠伴随高胆固醇和高且大鼠伴随高血脂和高血糖，小鼠伴随高胆固醇和高血糖，为人类营养性肥胖伴发高脂血症、高胆固醇血血糖，为人类营养性肥胖伴发高脂血症、高胆固醇血症和高血糖提供了研究方便症和高血糖提供了研究方便【3-4】。2024/5/21 周二5食源性肥胖造模常用饲料配方食源性肥胖造模常用饲料配方配配 方方成成 分分17酪蛋白酪蛋白200g，玉米淀粉，玉米淀粉72.8g，麦芽糊精，麦芽糊精100g，蔗糖，蔗糖172.8g，纤维素，纤维素50g，大豆油，大豆油25g，猪油，猪油177.5g，l-胱氨酸胱氨酸3g，矿物质预混料，矿物质预混料45g，复合维生，复合维生素素10g，酒石酸胆碱，酒石酸胆碱2g27酪蛋白酪蛋白200g，麦芽糊精，麦芽糊精125g，蔗糖，蔗糖68.8g，纤维素，纤维素50g，大豆油，大豆油25g，猪，猪油油245g，l-胱氨酸胱氨酸3g，矿物质预混料，矿物质预混料45g，复合维生素，复合维生素10g，酒石酸胆碱，酒石酸胆碱2g38酪蛋白酪蛋白35.5%，蔗糖，蔗糖20%，猪油，猪油40%，无机盐混合物，无机盐混合物3.5%，维生素混合，维生素混合物物1%48基础料基础料65%，奶粉，奶粉15%，花生油，花生油10%，猪油，猪油10%59基础料基础料70%，奶粉，奶粉10%，蛋黄粉，蛋黄粉10%，猪油，猪油10%，鱼肝油，鱼肝油10滴滴610基础料基础料75.3%，蛋黄粉，蛋黄粉12%，奶油，奶油12%，胆固醇，胆固醇0.5%，胆盐，胆盐0.2%711基础料基础料79%，蛋黄粉，蛋黄粉10%，猪油，猪油10%，胆固醇，胆固醇1%812基础料基础料82.8%，蛋黄粉，蛋黄粉5%，猪油，猪油10%，胆固醇，胆固醇2%，甲基硫氧嘧啶，甲基硫氧嘧啶0.2%2024/5/21 周二6动物模型动物模型 虽然大多数啮齿类动物在摄食高脂饲料后都会发胖，虽然大多数啮齿类动物在摄食高脂饲料后都会发胖，但是在体重增加、葡萄糖耐受水平、胰岛素抗性、甘油但是在体重增加、葡萄糖耐受水平、胰岛素抗性、甘油三酯水平及其他生理指标上存在三酯水平及其他生理指标上存在品系差异性品系差异性。小鼠小鼠高脂饲料近交高脂饲料近交易感易感品系小鼠：品系小鼠：C57BL/6、AKR。用用58Kcal%脂肪的高脂饲料饲喂这两种小鼠，体重增加相同，但脂肪的高脂饲料饲喂这两种小鼠，体重增加相同，但C57BL/6比比AKR对葡萄糖更加耐受对葡萄糖更加耐受13 。表现单一肥胖抵抗的小鼠品系：表现单一肥胖抵抗的小鼠品系：SWR/J、A/J14,15。封闭群的封闭群的SD大鼠与大鼠与Wistar大鼠是常用大鼠是常用DIO品系，特别是品系，特别是SD大鼠。大鼠。SD大鼠对大鼠对32或或45Kcal%脂肪的高脂饲料存在个体差异性，可用于肥胖脂肪的高脂饲料存在个体差异性，可用于肥胖（DIO）与肥胖抵抗）与肥胖抵抗（DR）的研究）的研究16,17。大鼠大鼠2024/5/21 周二718 如图所示，如图所示，随着周龄的增随着周龄的增加，加，DIO组组与与DR组组的大鼠体重的大鼠体重差异增大差异增大 18。研究发现，高脂或高脂高糖饲料造模结果只研究发现，高脂或高脂高糖饲料造模结果只有部分可诱导成肥胖，约有一半的动物存在食物有部分可诱导成肥胖，约有一半的动物存在食物抵抗，不能诱导成营养性肥胖抵抗，不能诱导成营养性肥胖1919。2024/5/21 周二8 幼年幼年动物对动物对高脂高脂食物更敏感，而年龄为食物更敏感，而年龄为70d 75d后后的动物对的动物对高糖高糖食物所诱导的动物体重增加敏感食物所诱导的动物体重增加敏感19 19。高脂食物所诱导的肥胖还存在高脂食物所诱导的肥胖还存在性别差异性别差异，这种差异主，这种差异主要表现为脂肪分布部位的不同。雌性动物在腹内及生殖要表现为脂肪分布部位的不同。雌性动物在腹内及生殖器官周围的脂肪垫所占比例大于雄性，而在前肢的比例器官周围的脂肪垫所占比例大于雄性，而在前肢的比例较雄性小较雄性小19 19。2024/5/21 周二9小结小结食源性肥胖造模以有很多成功的经验，对肥胖模食源性肥胖造模以有很多成功的经验，对肥胖模型饲料的研究至今已有约型饲料的研究至今已有约20年历史，形成了较为年历史，形成了较为成熟的方法。成熟的方法。肥胖症研究的混杂因素很多，除了模型饲料的脂肥胖症研究的混杂因素很多，除了模型饲料的脂肪水平外，还包括实验动物品种、品系、性别、肪水平外，还包括实验动物品种、品系、性别、年龄等，而且约有年龄等，而且约有50%的动物存在食物抵抗。所的动物存在食物抵抗。所以要得到足够数量的模型动物，实验动物样本的以要得到足够数量的模型动物，实验动物样本的数量需数量需放大至少放大至少1倍。倍。2024/5/21 周二10糖尿病糖尿病胰岛素抵抗胰岛素抵抗/糖尿病糖尿病高果糖高果糖/蔗糖饲料对啮齿类动物血脂水平与胰岛素抵抗的影响蔗糖饲料对啮齿类动物血脂水平与胰岛素抵抗的影响 胰岛素抵抗（胰岛素抵抗（IR）是指胰岛素靶组织对内源性）是指胰岛素靶组织对内源性或外源性胰岛素的敏感性与反应性降低。或外源性胰岛素的敏感性与反应性降低。IR不仅是不仅是2型糖尿病的发病基础，并且也与肥胖、高血压和型糖尿病的发病基础，并且也与肥胖、高血压和心血管疾病等密切相关。心血管疾病等密切相关。目前目前IR模型以鼠类模型为主，按照建立方法的模型以鼠类模型为主，按照建立方法的不同可以分为不同可以分为遗传性模型、遗传性模型、基因改造模型、基因改造模型、诱发模诱发模型，型，其中其中诱发模型诱发模型由于复制成功率高、稳定、复制由于复制成功率高、稳定、复制方法简单、价格低、周期短，在国内得到了广泛应方法简单、价格低、周期短，在国内得到了广泛应用用20。2024/5/21 周二11IR常用造模动物及模型饲料常用造模动物及模型饲料序号序号动物动物饲饲 料料造成造成IR动物模型动物模型 所需时间所需时间121Wistar大鼠68%高蔗糖饲料2周222仓鼠60%高果糖饲料2周323Wistar大鼠，雌性脂肪40.08Kcal%，碳水化合物43.27Kcal%，蛋白质16.65Kcal%8周424Wistar大鼠，雄性脂肪59Kcal%，碳水化合物20%，蛋白质21Kcal%6周525SD大鼠，雌雄各半脂肪60.65Kcal%，碳水化合物25%，蛋白质14.35Kcal%6周2024/5/21 周二12*注：SD大鼠，分别用对照料和不同加工方式高脂料饲喂6周后测定。Nor对照组、H1高脂料1所用原料混匀，100oC烘烤2h；H2高脂料2白糖+鸡蛋混匀，100oC水蒸2h，再与其余原料混匀，继续100oC水蒸水蒸2h；H3高脂料3白糖+鸡蛋混匀，100oC水蒸2h，再与其余原料混匀，100oC烘烤烘烤2h；3组高脂料配方相同25。糖与蛋白充分混匀并加热的高热量饲料更易于诱发糖与蛋白充分混匀并加热的高热量饲料更易于诱发IR美拉德反应美拉德反应(Maillard reaction):是是还原糖的羰基还原糖的羰基与与氨基酸的氨基酸的氨基氨基之间在加热时发生的非酶催化的褐变反应。该反应是之间在加热时发生的非酶催化的褐变反应。该反应是法国化学家法国化学家Louis-Camille Maillard于于1912年在将甘氨酸与年在将甘氨酸与葡萄糖混合加热时发现的，葡萄糖混合加热时发现的，也称为羰氨反应。该反应生也称为羰氨反应。该反应生成一系列的的糖化产物（成一系列的的糖化产物（AGEs）。）。人类及动物实验研究均表明食入人类及动物实验研究均表明食入AGEs的量影响血的量影响血AGEs水水平，而高平，而高AGEs血症可以影响机体对胰岛素的敏感性，导血症可以影响机体对胰岛素的敏感性，导致致IR，促进糖尿病及其并发症的发生、发展，促进糖尿病及其并发症的发生、发展25。2024/5/21 周二13非胰岛素依赖型糖尿病非胰岛素依赖型糖尿病(NIDDM)。特点是人体自身。特点是人体自身能够产生胰岛素，但细胞无法对其作出反应，使胰能够产生胰岛素，但细胞无法对其作出反应，使胰岛素的效果大打折扣。岛素的效果大打折扣。型糖尿病型糖尿病2024/5/21 周二14二型糖尿病造模动物及模型饲料二型糖尿病造模动物及模型饲料刘亚平刘亚平81等等2008年通过对年通过对Wistar大鼠的研究发现：大鼠的研究发现：通过给大鼠饲喂高脂高糖饲料通过给大鼠饲喂高脂高糖饲料（基础料（基础料60%+猪油猪油10%+蛋黄粉蛋黄粉10%+蔗糖蔗糖20%）8周，再结合小剂量周，再结合小剂量注射链脲佐菌素（注射链脲佐菌素（STZ，30mg/kg），可成功建立），可成功建立雄性大鼠雄性大鼠2型糖尿病模型，而同等剂量，雌性模型型糖尿病模型，而同等剂量，雌性模型需两次注射需两次注射STZ。雄、雌性糖尿病大鼠模型都具有。雄、雌性糖尿病大鼠模型都具有高血糖、脂质代谢紊乱和胰岛素抵抗的特点高血糖、脂质代谢紊乱和胰岛素抵抗的特点造模成功率及稳定性与性别有关，雄性大鼠较雌性造模成功率及稳定性与性别有关，雄性大鼠较雌性大鼠成模率高，稳定性好，且耗时更短。大鼠成模率高，稳定性好，且耗时更短。2024/5/21 周二15汤球（汤球（2011）82在雄性在雄性SD大鼠中研究发现：大鼠中研究发现：给雄性给雄性SD大鼠饲喂高脂高糖饲料大鼠饲喂高脂高糖饲料4周，第一次周，第一次腹腔注射腹腔注射STZ30mg/kg，再过，再过4周后第二次注射周后第二次注射STZ40mg/kg，能够成功制备，能够成功制备T2DM大鼠模型，造大鼠模型，造模成功率为模成功率为81.9%，死亡率为，死亡率为18.1%。2024/5/21 周二16小结小结食物诱发的食物诱发的胰岛素抵抗胰岛素抵抗模型复制成功率高、模型复制成功率高、稳定、可靠，同时复制方法简单、价格低稳定、可靠，同时复制方法简单、价格低廉、周期短，在国内得到了广泛应用。廉、周期短，在国内得到了广泛应用。目前主要的目前主要的胰岛素抵抗胰岛素抵抗模型饲料有：高脂模型饲料有：高脂饲料、高糖饲料、高脂高糖饲料。饲料、高糖饲料、高脂高糖饲料。二型糖尿病二型糖尿病造模的主要方法是：用高脂高造模的主要方法是：用高脂高糖饲料糖饲料+小剂量的小剂量的STZ注射。注射。2024/5/21 周二17脂肪肝脂肪肝脂肪肝脂肪肝非酒精性脂肪肝（非酒精性脂肪肝（NAFLD）non-alcoholic fatty liver diaease NASH与人类肥胖症、胰岛素抵抗、血脂异常及II型糖尿病的发病密切相关27。大部分肥胖症患者都伴有肝脏脂肪变性28,29。2024/5/21 周二18非酒精性脂肪肝模型动物非酒精性脂肪肝模型动物 NAFLDNAFLD动物模型采用的实验动物主要有大鼠动物模型采用的实验动物主要有大鼠、小鼠、沙鼠、家兔、小型猪等，但主要以、小鼠、沙鼠、家兔、小型猪等，但主要以大大鼠鼠造模最为常见造模最为常见8080。2024/5/21 周二19非酒精性脂肪肝模型饲料非酒精性脂肪肝模型饲料 啮齿类动物的脂肪肝可以用饲料进行诱导。主啮齿类动物的脂肪肝可以用饲料进行诱导。主要有要有3种饲料：种饲料：MCD饲料（蛋氨酸饲料（蛋氨酸-胆碱缺乏饲料）、胆碱缺乏饲料）、CD饲料（胆碱缺乏饲料）和饲料（胆碱缺乏饲料）和HFD饲料（高脂饲料）。饲料（高脂饲料）。2024/5/21 周二20 给给SDSD大鼠饲喂大鼠饲喂MCDMCD饲料饲料2-2-4周可诱导严重非酒精性周可诱导严重非酒精性脂肪肝表型（肝脏脂肪变性、肝炎和肝纤维化）脂肪肝表型（肝脏脂肪变性、肝炎和肝纤维化）30,31；体重减少，不会引起胰岛素抵抗；体重减少，不会引起胰岛素抵抗 32,33。MCD饲料（蛋氨酸胆碱缺乏饲料）：MCD饲料诱导的肝脏脂肪变性的机制：饲料诱导的肝脏脂肪变性的机制：蛋氨酸、胆碱缺乏蛋氨酸、胆碱缺乏 磷脂酸胆碱合成减少磷脂酸胆碱合成减少 VLDL分泌受阻分泌受阻 甘油三酯出肝受阻甘油三酯出肝受阻 脂肪浸润肝细胞（脂肪变性）脂肪浸润肝细胞（脂肪变性）34MCDMCD饲料成分的改变：饲料成分的改变：果糖果糖比比葡萄糖葡萄糖更有效诱导小鼠的肝细胞损伤更有效诱导小鼠的肝细胞损伤35。饱和脂肪饱和脂肪比比非饱和脂肪非饱和脂肪能加速肝脏脂肪氧化并诱导促炎基因能加速肝脏脂肪氧化并诱导促炎基因表达表达35。相对于相对于奶油奶油，橄榄油橄榄油诱导肝脏甘油三酯堆积，诱导肝脏甘油三酯堆积，鱼油鱼油降低肝脏降低肝脏胆固醇水平胆固醇水平36。2024/5/21 周二2122给大鼠饲喂给大鼠饲喂CD饲料饲料7周后，血脂水平升周后，血脂水平升高并诱发胰岛素抵抗高并诱发胰岛素抵抗37。饲喂饲喂10周后，诱导肝脏脂肪变性、肝炎周后，诱导肝脏脂肪变性、肝炎及肝损伤及肝损伤,且且体重下降体重下降37。CD饲料（胆碱缺乏饲料）：饲料（胆碱缺乏饲料）：2024/5/21 周二22HFD饲料（高脂饲料）：诱导诱导SDSD大鼠体重增加，体内脂肪堆积及胰岛素抵抗大鼠体重增加，体内脂肪堆积及胰岛素抵抗38。不能诱导肝纤维化，只能诱导轻度的肝脏脂肪变性不能诱导肝纤维化，只能诱导轻度的肝脏脂肪变性27。添加胆固醇的添加胆固醇的HFD饲料，能诱导饲料，能诱导LDLR（-/-）小鼠肝脏）小鼠肝脏脂肪水平升高并产生大小泡型脂肪变性脂肪水平升高并产生大小泡型脂肪变性39。VD缺乏的缺乏的HFD饲料能使饲料能使SD大鼠大鼠NAFLD恶化恶化40。在在35kcal%脂肪的脂肪的HFD饲料中用饲料中用中链中链甘油三酯替代甘油三酯替代长链长链甘油三酯，可以阻止大鼠的肝脂肪变性甘油三酯，可以阻止大鼠的肝脂肪变性41。加果糖加果糖/蔗糖水的蔗糖水的HFD饲料能诱导小鼠的肝纤维化饲料能诱导小鼠的肝纤维化42。母体在妊娠期与哺乳期就进行母体在妊娠期与哺乳期就进行HFD饲喂的小鼠后代比那饲喂的小鼠后代比那些离乳后才进行些离乳后才进行HFD饲喂的小鼠对饲喂的小鼠对NASH的发病更加易感的发病更加易感43。中链脂肪酸（中链脂肪酸（MCFAs）比长链脂肪酸（）比长链脂肪酸（LCFAs）水解能力强）水解能力强6倍，倍，且且MCFAs水解对胆盐和胰酶的依赖性较低，水解对胆盐和胰酶的依赖性较低，MCFAs的吸收不经的吸收不经过淋巴系统而直接入血由肝门静脉入肝，可以不依赖肉碱载体而过淋巴系统而直接入血由肝门静脉入肝，可以不依赖肉碱载体而直接进入线粒体氧化供能。直接进入线粒体氧化供能。MCFAs几乎不参与脂肪酸的从头合成，几乎不参与脂肪酸的从头合成，在体内很少沉积在体内很少沉积91。2024/5/21 周二23 王倩等王倩等2007年用改良的高脂饲料年用改良的高脂饲料（猪油（猪油10%+蔗糖蔗糖5%+胆固醇胆固醇2%+胆酸钠胆酸钠0.5%+丙硫丙硫氧嘧啶氧嘧啶0.2%+基础饲料基础饲料82.3%）饲喂饲喂SD大鼠大鼠5周能成功地构建非酒精性脂肪肝大鼠模型，主周能成功地构建非酒精性脂肪肝大鼠模型，主要表现为大鼠体重与对照组无显著差异，光镜要表现为大鼠体重与对照组无显著差异，光镜下可见肝细胞内弥漫大量的脂肪空泡，电镜证下可见肝细胞内弥漫大量的脂肪空泡，电镜证实肝细胞内有大量脂滴实肝细胞内有大量脂滴92。2024/5/21 周二24 刘贺荣等刘贺荣等2010用高脂饲料用高脂饲料（猪油（猪油10%+胆固醇胆固醇1.5%+猪胆盐猪胆盐0.5%+基础料基础料88%）饲饲喂昆明小鼠喂昆明小鼠6周，成功建立非酒精性脂肪肝周，成功建立非酒精性脂肪肝模型。具体表现为小鼠肝细胞明显肿胀，模型。具体表现为小鼠肝细胞明显肿胀，肝组织内可见弥漫分布的大脂滴和微脂滴肝组织内可见弥漫分布的大脂滴和微脂滴并散布全肝并散布全肝93。2024/5/21 周二25小结小结啮齿类动物中的大鼠、小鼠是啮齿类动物中的大鼠、小鼠是NAFLD很好很好的动物模型，也是目前研究中常用的动物的动物模型，也是目前研究中常用的动物模型。模型。诱导诱导NAFLD模型的饲料主要有高脂饲料、模型的饲料主要有高脂饲料、胆碱缺乏饲料、胆碱胆碱缺乏饲料、胆碱-蛋氨酸缺乏饲料三蛋氨酸缺乏饲料三种。种。2024/5/21 周二2024/5/21 周二26动脉粥动脉粥样硬化样硬化动脉粥样硬化动脉粥样硬化饲料诱导的啮齿类动物动脉粥样硬化饲料诱导的啮齿类动物动脉粥样硬化/高胆固醇血症高胆固醇血症 动脉粥样硬化（动脉粥样硬化（AtherosclerosisAtherosclerosis，ASAS）是一种复杂）是一种复杂的慢性病，是指动脉内膜下有脂质沉积，并伴有纤维基的慢性病，是指动脉内膜下有脂质沉积，并伴有纤维基质成分和平滑肌的细胞增殖，逐步发展形成动脉硬化性质成分和平滑肌的细胞增殖，逐步发展形成动脉硬化性斑块，斑块部位的动脉壁增厚、变硬，斑块内部的斑块，斑块部位的动脉壁增厚、变硬，斑块内部的坏死坏死组织组织与与沉积的脂质沉积的脂质结合，形成粥样物质的过程结合，形成粥样物质的过程44。2024/5/21 周二27模型饲料模型饲料饲料诱导的啮齿类动物动脉粥样硬化饲料诱导的啮齿类动物动脉粥样硬化/高胆固醇血症高胆固醇血症 动脉粥样硬化的诱发因素之一是高胆固醇血症（动脉粥样硬化的诱发因素之一是高胆固醇血症（TC和和LDL-C水平升高）。富含水平升高）。富含饱和脂肪（饱和脂肪（SFSF）与与胆固醇胆固醇的食物，如的食物，如Western-type diets，能引起血液循环系统中，能引起血液循环系统中的胆固醇（尤其的胆固醇（尤其LDL-C）水平升高）水平升高44。模型饲料：模型饲料：西方饮食模型饲料西方饮食模型饲料。高脂高脂 高胆固醇高胆固醇2024/5/21 周二28动物模型动物模型 小鼠：小鼠：诱导动脉粥样硬化模型常用转基因小鼠：诱导动脉粥样硬化模型常用转基因小鼠：LDLR基因缺基因缺陷小鼠与陷小鼠与apoE基因缺陷小鼠。基因缺陷小鼠。含胆固醇（含胆固醇（0.15%-1.25%重量比）不含胆酸的重量比）不含胆酸的Western-type diets能在能在12周后诱导周后诱导LDLR基因缺陷小鼠明显的动脉粥基因缺陷小鼠明显的动脉粥样硬化病变样硬化病变52。Western-type diets诱导诱导apoE基因缺陷小鼠出现动脉粥样基因缺陷小鼠出现动脉粥样硬化早期病变只需硬化早期病变只需6 周周53。原理：这些小鼠体内的突变体基因阻止了原理：这些小鼠体内的突变体基因阻止了肝脏对血液循环系统中胆固醇的清除作用。肝脏对血液循环系统中胆固醇的清除作用。2024/5/21 周二29动物模型动物模型 大鼠：大鼠：Western-type diets(45kcal%脂肪，氢化椰子油、胆固醇脂肪，氢化椰子油、胆固醇1%，重量比、胆酸重量比、胆酸0.25%，重量比，重量比)饲料都能诱导大鼠饲料都能诱导大鼠TC及及LDL-C水水平的升高平的升高47-49，若要诱导动脉粥样硬化还需添加，若要诱导动脉粥样硬化还需添加0.5%的的甲状腺激甲状腺激素抑制剂素抑制剂(2-硫脲嘧啶硫脲嘧啶)50。SDSD大鼠造模开始时一次性腹腔注射大鼠造模开始时一次性腹腔注射V VD3D3 60 60万万IU.kgIU.kg-1-1，并饲喂高，并饲喂高脂饲料（脂饲料（10%10%猪油猪油+5%+5%白糖白糖+3%+3%胆固醇胆固醇+0.5%+0.5%胆酸盐胆酸盐+0.2%+0.2%丙基硫氧嘧丙基硫氧嘧啶啶+81.3%+81.3%基础饲料）基础饲料）8 8周，可建立动脉粥样硬化模型。但该方法造周，可建立动脉粥样硬化模型。但该方法造模时大鼠的体重减轻模时大鼠的体重减轻,且死亡率达且死亡率达53%53%（周永刚等，（周永刚等，20112011）。）。SDSD大鼠饲喂高脂模型饲料（大鼠饲喂高脂模型饲料（1%1%胆固醇胆固醇+0.5%+0.5%胆酸钠胆酸钠+0.1%+0.1%甲巯甲巯咪唑咪唑+5%+5%猪油猪油+93.4%+93.4%基础料）基础料）2 2个月可建立动脉粥样硬化模型个月可建立动脉粥样硬化模型84。VD3 升高血浆钙升高血浆钙 破坏动脉内皮破坏动脉内皮 加速血管壁脂沉积加速血管壁脂沉积2024/5/21 周二30动物模型动物模型 基因突变大鼠：基因突变大鼠：自发性基因突变大鼠（如自发性基因突变大鼠（如JCR，LA-Corpulent）对食物中胆）对食物中胆固醇敏感，能在没有胆酸或甲状腺激素抑制剂的参与下诱发高胆固醇敏感，能在没有胆酸或甲状腺激素抑制剂的参与下诱发高胆固醇血症固醇血症51。2024/5/21 周二31动物模型动物模型 仓鼠：仓鼠：（含有（含有胆固醇酯转移蛋白胆固醇酯转移蛋白CETPCETP，而大鼠、小鼠没有），而大鼠、小鼠没有）CETP能将HDL微粒内的胆固醇转移至血浆LDL微粒中。富含胆固醇（富含胆固醇（0.5%，重量比）与饱和脂肪（，重量比）与饱和脂肪（15-20%奶油脂奶油脂肪，重量比）的肪，重量比）的西方饮食模型饲料（西方饮食模型饲料（Western-type diets）能能在没有胆酸的参与下在在没有胆酸的参与下在6周内诱导仓鼠血浆周内诱导仓鼠血浆TC和和LDL-C水平水平的升高及明显的动脉粥样硬化病变的升高及明显的动脉粥样硬化病变55。2024/5/21 周二32动物模型动物模型 豚鼠：豚鼠：豚鼠体内含有豚鼠体内含有胆固醇酯转移蛋白胆固醇酯转移蛋白CETP 57，西方饮食模型，西方饮食模型饲料能在没有胆酸的参与下诱导豚鼠的胆固醇水平升高和饲料能在没有胆酸的参与下诱导豚鼠的胆固醇水平升高和动脉粥样硬化动脉粥样硬化58。豚鼠对膳食脂肪酸成分变化高度敏感，富含豚鼠对膳食脂肪酸成分变化高度敏感，富含饱和脂肪酸饱和脂肪酸SF（棕榈仁油）的高脂料中，添加（棕榈仁油）的高脂料中，添加0.3%胆固醇胆固醇（重量比重量比）可诱导豚鼠可诱导豚鼠TC和和LDL-C水平升高，在水平升高，在12周后诱发动脉粥样周后诱发动脉粥样硬化硬化59-61。高糖（高糖（42Kcal%）适度高脂（）适度高脂（35Kcal%脂肪）高胆固醇脂肪）高胆固醇（0.25%重量比）的饲料容易诱导豚鼠的动脉粥样硬化重量比）的饲料容易诱导豚鼠的动脉粥样硬化62。2024/5/21 周二33小结小结西方饮食模型饲料诱导啮齿类动物动脉粥西方饮食模型饲料诱导啮齿类动物动脉粥样硬化（样硬化（AS）是目前广泛应用的模式化饲）是目前广泛应用的模式化饲料。料。不同啮齿动物（如大鼠、小鼠、仓鼠、豚不同啮齿动物（如大鼠、小鼠、仓鼠、豚鼠、基因敲除鼠）其造模特点不同，因此鼠、基因敲除鼠）其造模特点不同，因此应根据研究目的进行选择并配套相应的模应根据研究目的进行选择并配套相应的模式化饲料。式化饲料。2024/5/21 周二2024/5/21 周二34高血压高血压高血压高血压饲料诱导的啮齿类动物高血压表型饲料诱导的啮齿类动物高血压表型 人类高血压的发病机制与遗传、环境等多种因素相关。高血压研究首选的动物模型是大鼠，包括选择性培育的纯合品系高血压大鼠（自发性高血压大鼠SHR、盐敏感性高血压大鼠Dahl SS）与封闭群大鼠（SD大鼠）。2024/5/21 周二35高血压高血压高钠饲料高钠饲料是常用的高血压诱导饲料。是常用的高血压诱导饲料。Lewis Dahl等根据等根据SD大鼠对大鼠对8%NaCl饲料的不同响应，从选饲料的不同响应，从选择性近亲交配的择性近亲交配的SD大鼠中培育出了大鼠中培育出了Dahl盐敏感性（盐敏感性（Dahl SS，2-6周）周）与与Dahl盐抵抗性（盐抵抗性（Dahl SR）大鼠模型大鼠模型63。动物年龄在高血压的钠诱导中也起重要作用。动物年龄在高血压的钠诱导中也起重要作用。SHR大鼠在大鼠在5-6周龄就会自发性地血压升高周龄就会自发性地血压升高64。在饲料中添加在饲料中添加7%NaCl或或1%生理盐水能增加生理盐水能增加SHR大鼠的血管大鼠的血管阻力，从而加剧阻力，从而加剧SHR大鼠的血压升高大鼠的血压升高65,66。随着血液循环系统中钠水平的升高，细胞内的水分会在渗透压的随着血液循环系统中钠水平的升高，细胞内的水分会在渗透压的作用下释放至血液循环系统，从而引起血管壁受压升高作用下释放至血液循环系统，从而引起血管壁受压升高2024/5/21 周二36 摄食摄食4%NaCl纯化饲料的纯化饲料的Dahl SS大鼠后代无论离大鼠后代无论离乳后是否继续摄食高盐饲料，其血压都是偏高的。这预乳后是否继续摄食高盐饲料，其血压都是偏高的。这预示母体在妊娠内过度摄食高盐饲料可能会导致其后代患示母体在妊娠内过度摄食高盐饲料可能会导致其后代患高血压高血压68。NaCl含量正常含量正常,富含果糖或蔗糖富含果糖或蔗糖(60Kcal%)的饲料能的饲料能诱发高血压动物模型诱发高血压动物模型(Dahl SS大鼠、大鼠、SHR大鼠大鼠)的血压的血压升高升高70-74。影响高血压表型的其他膳食因素影响高血压表型的其他膳食因素 2024/5/21 周二37粗饲料中的大豆（粗饲料常见蛋白质来源）与纯化饲料中的酪蛋粗饲料中的大豆（粗饲料常见蛋白质来源）与纯化饲料中的酪蛋白（纯化饲料主要的蛋白质来源）相比，大豆能抑制白（纯化饲料主要的蛋白质来源）相比，大豆能抑制SHR大鼠的大鼠的高血压发病高血压发病69。减缓高血压发病的饲料诱导方法：在饲料中补充额外的钾盐减缓高血压发病的饲料诱导方法：在饲料中补充额外的钾盐成分，可阻止由成分，可阻止由8%NaCl饲料诱发的高血压的发生饲料诱发的高血压的发生76,77。在饲料中添加抗氧化剂（维生素在饲料中添加抗氧化剂（维生素E、C），可使高血压模型大鼠），可使高血压模型大鼠的血压降低的血压降低78-80。影响高血压表型的其他膳食因素影响高血压表型的其他膳食因素 大豆蛋白含有植物雌激素和染料木黄酮，这些成分已被证实大豆蛋白含有植物雌激素和染料木黄酮，这些成分已被证实能降低由能降低由NaCl诱发的血压升高诱发的血压升高75。酪蛋白不含植物雌激素。酪蛋白不含植物雌激素。2024/5/21 周二38小结小结 对于饮食引发的高血压动物模型，一些膳食因对于饮食引发的高血压动物模型，一些膳食因素只能诱导一种表型（钠诱导的高血压），而另一素只能诱导一种表型（钠诱导的高血压），而另一些膳食因素却能诱导多种表型（高果糖诱导的高血些膳食因素却能诱导多种表型（高果糖诱导的高血压、胰岛素抵抗与高甘油三脂血症）。因此压、胰岛素抵抗与高甘油三脂血症）。因此,需结合需结合研究目的选择合适的模型动物与模型饲料。研究目的选择合适的模型动物与模型饲料。2024/5/21 周二39成都达硕实验动物有限公司成都达硕实验动物有限公司2024/5/21 周二40 成都达硕实验动物有限公司成都达硕实验动物有限公司是一是一家从事实验动物、动物实验、实验动物饲料、家从事实验动物、动物实验、实验动物饲料、模型饲料及相关一体化配套服务的专业化公模型饲料及相关一体化配套服务的专业化公司。司。公司近十年以来，充分发挥后发优势，公司近十年以来，充分发挥后发优势，在吸收国内外研究成果的基础上，深入研究在吸收国内外研究成果的基础上，深入研究特定饲料成分对动物造模的影响。在特定饲料成分对动物造模的影响。在做好做好标标准化实验动物饲料准化实验动物饲料的基础上开发的基础上开发了多种了多种模式模式化动物饲料化动物饲料，包括诱导动物，包括诱导动物肥胖肥胖模型、模型、糖尿糖尿病病模型、模型、非酒精性脂肪肝非酒精性脂肪肝模型、模型、动脉硬化动脉硬化模模型、型、高血压高血压模型、模型、代谢综合症代谢综合症模型、模型、癌症癌症模模型、型、骨质疏松骨质疏松模型、模型、毒理学毒理学模型等各个研究模型等各个研究方向的特定饲料。方向的特定饲料。2024/5/21 周二41实验动物实验动物大鼠大鼠小鼠小鼠豚鼠豚鼠仓鼠仓鼠兔子兔子小型猪小型猪非人非人 灵长类灵长类达硕的实验动物饲料实验动物饲料有多种形态：粉末粉末状、颗粒颗粒状及液态液态形式喂养对象有：大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、兔喂养对象有：大鼠、小鼠、豚鼠、仓鼠、兔子、小型猪及非人灵长类动物。与此同时，子、小型猪及非人灵长类动物。与此同时，本公司还研究开发出各种本公司还研究开发出各种“大鼠、小鼠疾大鼠、小鼠疾病诱导饲养系统病诱导饲养系统”为医学科学研究提供更为医学科学研究提供更专业的服务。专业的服务。2024/5/21 周二42TEXT 01TEXT 02TEXT 03TEXT 04TEXT 05TEXT 06TEXT 07 目前，我公司除共享目前，我公司除共享OpenSource已公开的上万种饲已公开的上万种饲料原始配方以外，还可以根据研究者的意向，调整其任料原始配方以外，还可以根据研究者的意向，调整其任何一种营养成分，以达到实验的需求，并保持其与对照何一种营养成分，以达到实验的需求，并保持其与对照饲料的一致性。饲料的一致性。种类种类研究范围研究范围大鼠大鼠肥胖、糖尿病、高血压、脂肪肝、癌症、骨质疏松症肥胖、糖尿病、高血压、脂肪肝、癌症、骨质疏松症小鼠小鼠肥胖、糖尿病、高血压、脂肪肝、脂代谢、癌症、动脉粥样肥胖、糖尿病、高血压、脂肪肝、脂代谢、癌症、动脉粥样硬化、骨质疏松硬化、骨质疏松仓鼠仓鼠肥胖、糖尿病、动脉粥样硬化、癌症肥胖、糖尿病、动脉粥样硬化、癌症豚鼠豚鼠脂质代谢、动脉粥样硬化脂质代谢、动脉粥样硬化兔兔高血压、动脉粥样硬化高血压、动脉粥样硬化小型猪小型猪肥胖、糖尿病、高血压、动脉粥样硬化肥胖、糖尿病、高血压、动脉粥样硬化犬犬肥胖、糖尿病、高血压肥胖、糖尿病、高血压非人灵长类动物非人灵长类动物肥胖、糖尿病、高血压、脂肪肝、动脉粥样硬化、血脂代谢肥胖、糖尿病、高血压、脂肪肝、动脉粥样硬化、血脂代谢2024/5/21 周二43超越梦想，一起飞！hank youT2024/5/21 周二44