第2章-细胞工程-第3节-动物细胞工程(导学案)1.doc

完整word)第2章 细胞工程 第3节 动物细胞工程(导学案)1
第3节 动物细胞工程（一)
学习目标
1、简述动物细胞培养的过程、条件及应用（A）；2、简述通过动物体细胞核移植技术克隆动物的过程（A）；3、关注克隆技术的伦理问题（A）。
一、动物细胞工程：
1、技术手段：
① ， ② ，
③ ,④ ， ⑤
2、基础：
二、动物细胞或组织培养：
1、概念：

①材料：取自 ;
②场所： 模拟动物体 ；
③条件：在 、 和 等条件下；
④目的：使动物细胞或组织继续 。
2、动物细胞培养的过程：

取材 → → →传代培养 → →细胞系
原代培养：是指从供体获取组织或细胞后的 培养（10代细胞以内)。适合用于 、 等研究。
传代培养：将 的细胞分离稀释后转入 中继续培养（10代细胞以后的培养）。
细胞株:原代细胞一般传至10代左右细胞生长停滞，大部分细胞衰老死亡,少数细胞存活到40~50代,这种传代细胞为细胞株。
细胞系：细胞株传代至50代后又出现细胞生长停滞状态，只有部分细胞由于遗传物质的改变，使其在培养条件下可以无限制传代，这种传代细胞为细胞系。
思考:传代培养的细胞能一直传代下去吗？细胞株和细胞系的区别？

补充：悬液中分散的细胞很快就贴附在瓶壁上,称为细胞贴壁生长；当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖,这种现象称为细胞的接触抑制.
分析：
①为什么细胞培养前要将组织细胞分散成单个细胞？如何处理?

②植物组织培养过程将组织分散成单个细胞的吗？

③胰蛋白酶的作用是什么呢？由此可说明细胞间的物质是什么成份？

④细胞膜的主要成份是什么?胰蛋白酶能将细胞消化掉吗？

⑤ 既然胰蛋白酶能将细胞消化掉，那将动物组织分散成单个细胞要注意什么问题呢？

⑥ 能够用胃蛋白酶代替胰蛋白酶吗?为什么？

⑦为什么选用动物胚胎或幼龄个体的器官或组织做动物细胞培养材料?
因为这些组织或器官上的细胞生命力 ,分裂能力 .
⑧动物组织或细胞培养的难易程度（填“〈” 或“>” ）:
幼体组织或细胞 老龄组织或细胞
分化程度低的组织或细胞 分化程度高的组织或细胞
肿瘤组织或细胞 正常组织或细胞
⑨动物细胞培养液的成分和性质?
　　（水、无机盐、葡萄糖、氨基酸、维生素和动物血清，属于液体培养基）
培养基类型:
根据营养物质的来源可分为：① 培养基、② 培养基；
根据培养基的物理状态可分为：①固体培养基、②液体培养基、半固态培养基;
根据培养基的用途可分为:①选择培养基、②鉴别培养基。
主要成分： 等。
⑩动物细胞培养能否像植物组织培养那样最终培养成新个体？

3、动物细胞培养的条件：（阅读)
⑴无菌、无毒的环境：①无菌处理;②添加一定量的抗生素,以防培养过程中的污染;③定期更换培养液,以便清除代谢产物，防止细胞代谢产物积累对细胞自身造成伤害。
⑵营养:在合成培养基中通常需加入血清、血浆等一些天然成分。
⑶温度和PH：大多数细胞生存的适宜PH为7.2-7。4，温度一般与动物的体温相近,哺乳动物多以36。5±0。5℃为宜。
⑷气体环境：主要有O2和CO2,O2为代谢所必需，CO2主要作用是维持培养液的PH。通常在培养时采用培养皿或松盖培养瓶，将其置于含95％空气加5％CO2的混合气体的培养箱中进行培养.
4、应用
为① ② ③ 等提供全新的手段.
再如:①大规模的生产重要价值的蛋白质生物制品；②烧伤病人植皮；③培养的动物细胞用于检测有害物质;④培养正常或病变细胞用于科研(如海拉细胞系）。
5、植物组织培养和动物细胞培养的比较
比较项目
植物组织培养
动物细胞培养
原理

培养基
培养基
培养基
培养基特有的成分

培养结果
植株
细胞株、细胞系
应用
快速繁殖、培育无病毒植株等
获得细胞或细胞产物
例1：如图所示是动物细胞培养的基本过程示意图。请据此回答。
(1) 动物细胞培养的原理是 .
（2）容器A中的动物器官或组织首先要进行的处理是剪碎，然后用
酶处理，其目的是 。
（3）培养先在B瓶中进行。瓶中的培养基成分有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素和 等。在此瓶中培养一段时间后,一般传到第10代，有许多细胞衰老死亡，到这时的培养称为 。
(4）为了把B瓶中的细胞分装到C瓶中，用 处理，然后配置成 ，再分装.
(5在C瓶中正常培养了一段时间后，发现大部分细胞衰老死亡。但极少数细胞存活并传代，这种细胞叫做 ，能无限传代的原因是 。
三、细胞核移植与动物体细胞克隆:
1、体细胞克隆：是将供体 的细胞核与受体去核 的细胞质进行 ,借助于 的发育能力，经过培养发育成 进而形成 的技术.其关键是 。
2、细胞核移植：是一种利用 将某种动物细胞的 移入 或 动物的去除细胞核的成熟 内的技术.
3、过程：
思考：克隆个体性状与亲本性状的关系。
4、意义：在克服动物 、创造 等方面有重要意义。
5、应用：
① ;
② ；
③ 等。
例2:世界第一只克隆绵羊“多利"的培养程序如下图所示，请看图回答：
⑴写出图中a、b所指的细胞工程名称：
。
⑵实施细胞工程a时，所需的受体细胞大多采用动物的卵细胞的原因是：
。
⑶“多利"面部的颜色是 ，请根据遗传学原理说明判断依据：
。
⑷继植物组织培养之后，克隆绵羊的培育成功，证明动物细胞的细胞核也具有 。
⑸请举一例,说明克隆绵羊培育成功的实际意义.

巩固练习
1、 动物细胞工程技术的基础是 ( )
A、动物细胞融合　　　 　 B、胚胎移植技术
C、动物组织与细胞培养　　 D、细胞核移植
2、在动物细胞培养中,所培养的动物细胞大都取自 ( )
A、幼龄动物器官　　　B、老龄动物器官　　　C、中年动物器官　　　D、中年动物器官
3、用于动物细胞培养的组织和细胞大都取自胚胎或出生不久的幼龄动物的器官或组织，其主要原因是这样的组织细胞 ( ）　　
A、容易产生各种变异 B、具有更强的全能性
C、取材十分方便 　　 D、分裂增殖的能力强
4、用动物细胞培养技术使细胞传到50代以后仍能传下的传代细胞称为 ( ）
A、原代细胞　　　B、传代细胞　　　C、细胞系　　　　D、细胞株
5、细胞株的特点是 ( )
A、遗传物质没有改变，可以无限传代 B、遗传物质发生改变，不可无限传代
C、遗传物质没有改变，不可无限传代
D、遗传物质发生改变，且有癌变特点，可以无限传代
6、在动物细胞培养过程中遗传物质发生改变的细胞是 （ ）
A、细胞系 B、细胞株 C、原代细胞 D、传代细胞
7、在动物细胞培养过程中，使用胰蛋白酶的目的是 （ ）
A、使动物组织分散为单个细胞 B、去掉细胞壁成为原生质体
C、去掉细胞膜暴露出原生质体便于细胞融合 D、促进蛋白质水解为多肽
8、在动物细胞培养中有关叙述中正确的是 ( )
A、动物细胞培养的目的是获得大量的细胞分泌蛋白
B、动物细胞培养前要用胰蛋白酶使细胞分散
C、细胞遗传物质的改变发生于原代培养过程中
D、培养至50代后能继续传代的传代细胞叫细胞株
9、动物细胞培养与植物细胞培养的重要区别在于 ( ）
A、培养基不同
B、动物细胞培养不需要在无菌条件下进行
C动物细胞能够大量培养而植物细胞不能
D、动物细胞能够大量培养,而植物细胞只能培养成植株
10、下列是动物细胞的工具酶的是 ( ）
A、限制酶 　 B、DNA连接酶 C、胰蛋白酶 D、果胶酶
11、下列有关动物细胞培养的叙述不正确的是 （ )
A、用于培养的细胞大都取自胚胎或幼龄动物的器官或组织
B、将所取的组织先用胰蛋白酶处理使其分散成单个细胞
C、在培养基中要定期用胰蛋白酶使细胞分散从瓶壁上脱离，制成悬浮液
D、动物细胞培养只能传至50代左右，所培养的细胞会衰老死去
12、科学家将雌黑鼠乳腺细胞的细胞核移入白鼠去核的卵细胞内，待发育成早期胚胎后植入褐鼠的子宫，该褐鼠产下的小鼠的体色和性别是 （ )
A、黑、雌 B、褐、雌 C、白、雄 D、黑、雄
13、动物细胞培养常用于生理、病理、药理等方面的研究，如图表示动物细胞培养的部分过程图：
⑴图中A和B处理所用的物质是 .
⑵培养基中除含有葡萄糖、氨基酸、无机盐、维生素等外,还应含有 。
⑶图中分装的过程称为 培养，其过程部分细胞可能会发生 而产生细胞系。
⑷在细胞分裂增值过程中，为了确定DNA合成期的长短，加入3H标记的 （腺嘌呤、鸟嘌呤、胞嘧啶、胸腺嘧啶）最合适。

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