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真核细胞型微生物PPT.ppt

1、第七章 真核细胞型微生物第一节 真菌(Fungus)概述真核细胞型微生物(具有细胞壁和典型细胞核,细胞结构比较完整,不含叶绿素,无根、茎、叶的分化)广泛存在自然界,少数为单细胞(酵母),多数为多细胞(霉菌和蕈菌)多数对人类有益,仅少数致病,也多为条件致病,称为病原性真菌。比细菌大几倍至几十倍,用普通光学显微镜放大100-500倍就可看清。真菌真菌细菌细菌细胞细胞真核细胞真核细胞原核细胞原核细胞细胞核细胞核有,还有核仁、核膜有,还有核仁、核膜拟拟核核,无无核核仁仁、核膜核膜细胞器细胞器有有只有核糖体只有核糖体细胞壁细胞壁无无肽肽聚聚糖糖,有有葡葡聚聚糖糖和和几丁质几丁质有肽聚糖有肽聚糖对对青青霉

2、霉素素或或头头孢菌素敏感孢菌素敏感不敏感不敏感敏感敏感细胞膜细胞膜含固醇、麦角固醇含固醇、麦角固醇不含固醇不含固醇大大小小,复复杂杂程程度度比比细细菌菌大大几几倍倍至至几几十十倍倍,结构复杂结构复杂小,简单小,简单 真菌不是植物真菌不含叶绿素,以吸收为营养方式,寄生或腐生,无根、茎、叶的分化。具有典型的细胞结构,分单细胞和多细胞具有典型的细胞结构,分单细胞和多细胞具有典型的细胞结构,分单细胞和多细胞具有典型的细胞结构,分单细胞和多细胞两大类。两大类。两大类。两大类。1、单细胞真菌:、单细胞真菌:圆形或卵圆形。圆形或卵圆形。圆形或卵圆形。圆形或卵圆形。酵母型真菌:由母细胞以芽生方式繁殖,酵母型真

3、菌:由母细胞以芽生方式繁殖,酵母型真菌:由母细胞以芽生方式繁殖,酵母型真菌:由母细胞以芽生方式繁殖,如新生隐球菌;如新生隐球菌;如新生隐球菌;如新生隐球菌;类酵母型真菌:芽生方式繁殖,有假菌丝类酵母型真菌:芽生方式繁殖,有假菌丝类酵母型真菌:芽生方式繁殖,有假菌丝类酵母型真菌:芽生方式繁殖,有假菌丝(芽管延长不脱落),如白假丝酵母菌。(芽管延长不脱落),如白假丝酵母菌。(芽管延长不脱落),如白假丝酵母菌。(芽管延长不脱落),如白假丝酵母菌。生物学性状形态与结构单细胞真菌形态新生隐球菌新生隐球菌酵母菌出芽繁殖芽生孢子成熟后脱落成独立个体2、多细胞真菌:菌丝与孢子交织成团-丝状菌(霉菌,mold)

4、。各种丝状菌的菌丝和孢子形态不同,是鉴别真菌的重要标志。多细胞真菌形态sporehyphaPenicillium(1)菌丝)菌丝hypha有隔菌丝有隔菌丝多数致病性真菌多数致病性真菌多数致病性真菌多数致病性真菌无隔菌丝无隔菌丝营养菌丝营养菌丝气中菌丝气中菌丝生殖菌丝生殖菌丝在环境适宜情况下由孢子长出芽管,逐渐延长呈丝在环境适宜情况下由孢子长出芽管,逐渐延长呈丝状,称菌丝,菌丝交织成团称菌丝体。状,称菌丝,菌丝交织成团称菌丝体。菌丝形态多样,故菌丝形态有助于菌种鉴别菌丝形态多样,故菌丝形态有助于菌种鉴别(2 2 2 2)孢子()孢子()孢子()孢子(spore)spore)spore)spore

5、):是真菌的繁殖器官。由生殖菌丝产生而是真菌的繁殖器官。由生殖菌丝产生而是真菌的繁殖器官。由生殖菌丝产生而是真菌的繁殖器官。由生殖菌丝产生而成,一条菌丝可长出多个孢子。在适宜条件下,孢子可发芽伸成,一条菌丝可长出多个孢子。在适宜条件下,孢子可发芽伸成,一条菌丝可长出多个孢子。在适宜条件下,孢子可发芽伸成,一条菌丝可长出多个孢子。在适宜条件下,孢子可发芽伸出芽管形成菌丝。出芽管形成菌丝。出芽管形成菌丝。出芽管形成菌丝。无性孢子:菌丝上的细胞分化而成,并不发生细胞融合。无性孢子:菌丝上的细胞分化而成,并不发生细胞融合。无性孢子:菌丝上的细胞分化而成,并不发生细胞融合。无性孢子:菌丝上的细胞分化而成

6、,并不发生细胞融合。大多数病原性球菌属之。大多数病原性球菌属之。大多数病原性球菌属之。大多数病原性球菌属之。有性孢子:由同一菌体或不同菌体上的二个细胞融合形成。有性孢子:由同一菌体或不同菌体上的二个细胞融合形成。有性孢子:由同一菌体或不同菌体上的二个细胞融合形成。有性孢子:由同一菌体或不同菌体上的二个细胞融合形成。孢子的孢子的形态多样形态多样,可作为鉴别及分类的依据。,可作为鉴别及分类的依据。大分生孢子大分生孢子大小、细胞数和颜色是鉴定的重要依据大小、细胞数和颜色是鉴定的重要依据小分生孢子小分生孢子真菌都能产生,诊断意义不大真菌都能产生,诊断意义不大芽生孢子芽生孢子假菌丝假菌丝厚膜孢子厚膜孢子

7、关节孢子关节孢子分生孢子分生孢子叶状孢子叶状孢子由菌丝内细胞直接形成由菌丝内细胞直接形成由菌丝内细胞直接形成由菌丝内细胞直接形成孢子囊孢子孢子囊孢子由菌丝末端膨大成孢子囊,内含许由菌丝末端膨大成孢子囊,内含许由菌丝末端膨大成孢子囊,内含许由菌丝末端膨大成孢子囊,内含许多孢子,多孢子,多孢子,多孢子,如毛霉,根霉如毛霉,根霉分生孢子由菌丝末端的细胞分裂形成,分生孢子由菌丝末端的细胞分裂形成,分生孢子由菌丝末端的细胞分裂形成,分生孢子由菌丝末端的细胞分裂形成,单个、成簇或链状排列单个、成簇或链状排列单个、成簇或链状排列单个、成簇或链状排列真菌孢子真菌孢子一条菌丝可产生多个孢子一条菌丝可产生多个孢子

8、一条菌丝可产生多个孢子一条菌丝可产生多个孢子抵抗力较强,煮沸时间短抵抗力较强,煮沸时间短抵抗力较强,煮沸时间短抵抗力较强,煮沸时间短不死不死不死不死抵抗力不强,抵抗力不强,抵抗力不强,抵抗力不强,60-7060-7060-7060-70C C C C 短时间即死短时间即死短时间即死短时间即死是一种繁殖方式是一种繁殖方式是一种繁殖方式是一种繁殖方式不是繁殖方式不是繁殖方式不是繁殖方式不是繁殖方式一个细菌只产生一个芽胞一个细菌只产生一个芽胞一个细菌只产生一个芽胞一个细菌只产生一个芽胞1 1、2 2、3 3、细菌芽胞细菌芽胞犬小孢子菌之大分生孢子犬小孢子菌之大分生孢子培养与繁殖n n 特点:营养要求

9、不高特点:营养要求不高特点:营养要求不高特点:营养要求不高 最适最适最适最适PH(4.0-6.0)PH(4.0-6.0)高湿度和氧高湿度和氧高湿度和氧高湿度和氧 最适温度:最适温度:最适温度:最适温度:22-2822-28,深部真菌为,深部真菌为,深部真菌为,深部真菌为3737。n n 培培培培养养养养基基基基:沙沙沙沙保保保保弱弱弱弱(SabouraudSabouraud)培培培培养养养养基基基基,生生生生长长长长缓缓缓缓慢慢慢慢,1-41-41-41-4周周周周才才才才出出出出现典型菌落现典型菌落现典型菌落现典型菌落n n 繁殖方式:繁殖方式:繁殖方式:繁殖方式:单细胞单细胞单细胞单细胞-

10、出芽出芽出芽出芽 多细胞多细胞多细胞多细胞-孢子孢子孢子孢子n n 菌落:菌落:菌落:菌落:单细胞单细胞单细胞单细胞-酵母酵母酵母酵母型菌落、型菌落、型菌落、型菌落、类酵母类酵母类酵母类酵母型菌落(假菌丝),如念珠菌型菌落(假菌丝),如念珠菌型菌落(假菌丝),如念珠菌型菌落(假菌丝),如念珠菌 多细胞多细胞多细胞多细胞-丝状丝状丝状丝状菌落菌落菌落菌落 染色:小培养和乳酚棉蓝染色观察菌丝和孢子的结构和排列染色:小培养和乳酚棉蓝染色观察菌丝和孢子的结构和排列染色:小培养和乳酚棉蓝染色观察菌丝和孢子的结构和排列染色:小培养和乳酚棉蓝染色观察菌丝和孢子的结构和排列 酵母型菌落:酵母型菌落:酵母型菌落

11、:酵母型菌落:单细胞真菌的菌落形式,菌单细胞真菌的菌落形式,菌单细胞真菌的菌落形式,菌单细胞真菌的菌落形式,菌落湿润,柔软而致密,形态与一般菌落落湿润,柔软而致密,形态与一般菌落落湿润,柔软而致密,形态与一般菌落落湿润,柔软而致密,形态与一般菌落相似。如隐球菌。相似。如隐球菌。相似。如隐球菌。相似。如隐球菌。丝状菌落:丝状菌落:丝状菌落:丝状菌落:多细胞真菌的菌落形式,由多细胞真菌的菌落形式,由多细胞真菌的菌落形式,由多细胞真菌的菌落形式,由许多疏松的菌丝体构成,菌落呈棉絮许多疏松的菌丝体构成,菌落呈棉絮许多疏松的菌丝体构成,菌落呈棉絮许多疏松的菌丝体构成,菌落呈棉絮状,绒毛状或粉末状。状,绒

12、毛状或粉末状。状,绒毛状或粉末状。状,绒毛状或粉末状。类酵母型菌落:类酵母型菌落:类酵母型菌落:类酵母型菌落:部分单细胞真菌在出芽部分单细胞真菌在出芽部分单细胞真菌在出芽部分单细胞真菌在出芽繁殖后,芽管延长不与母细胞脱离,繁殖后,芽管延长不与母细胞脱离,繁殖后,芽管延长不与母细胞脱离,繁殖后,芽管延长不与母细胞脱离,形成假菌丝,假菌丝由菌落向下生长,形成假菌丝,假菌丝由菌落向下生长,形成假菌丝,假菌丝由菌落向下生长,形成假菌丝,假菌丝由菌落向下生长,伸入培养基。如假丝酵母菌。伸入培养基。如假丝酵母菌。伸入培养基。如假丝酵母菌。伸入培养基。如假丝酵母菌。酵母型菌落C.albicans菌落(类酵母

13、型)曲霉属青霉菌落抵抗力n n对干燥、日光、紫外线及一般消毒剂抵抗力强对干燥、日光、紫外线及一般消毒剂抵抗力强对干燥、日光、紫外线及一般消毒剂抵抗力强对干燥、日光、紫外线及一般消毒剂抵抗力强n n对热敏感,对热敏感,对热敏感,对热敏感,60601111小时菌丝、小时菌丝、小时菌丝、小时菌丝、孢子均被杀死孢子均被杀死孢子均被杀死孢子均被杀死n n对对对对2%2%石碳酸、石碳酸、石碳酸、石碳酸、0.1%0.1%升汞、升汞、升汞、升汞、2.5%2.5%碘酊或碘酊或碘酊或碘酊或10%10%甲醛甲醛甲醛甲醛敏感敏感敏感敏感n n对常用于抗细菌感染的抗生素不敏感。对常用于抗细菌感染的抗生素不敏感。对常用于

14、抗细菌感染的抗生素不敏感。对常用于抗细菌感染的抗生素不敏感。n n对对对对灰黄霉素、解霉菌素、灰黄霉素、解霉菌素、灰黄霉素、解霉菌素、灰黄霉素、解霉菌素、二性霉素二性霉素二性霉素二性霉素B B、制霉菌素、咪、制霉菌素、咪、制霉菌素、咪、制霉菌素、咪康唑、康唑、康唑、康唑、克霉唑、克霉唑、克霉唑、克霉唑、酮康唑、氟康唑和伊曲康唑敏感酮康唑、氟康唑和伊曲康唑敏感酮康唑、氟康唑和伊曲康唑敏感酮康唑、氟康唑和伊曲康唑敏感真菌的毒力真菌的毒力 n n3737生长生长生长生长n n粘附因子粘附因子粘附因子粘附因子n n酵母相菌丝相转换酵母相菌丝相转换酵母相菌丝相转换酵母相菌丝相转换n n侵袭性酶类如蛋白酶

15、、磷脂酶侵袭性酶类如蛋白酶、磷脂酶侵袭性酶类如蛋白酶、磷脂酶侵袭性酶类如蛋白酶、磷脂酶n n荚膜(隐球菌)荚膜(隐球菌)荚膜(隐球菌)荚膜(隐球菌)致病性和免疫性致病性和免疫性n n致病性感染:致病性感染:浅部真菌感染,如皮肤癣真菌病,这些真菌有嗜角浅部真菌感染,如皮肤癣真菌病,这些真菌有嗜角浅部真菌感染,如皮肤癣真菌病,这些真菌有嗜角浅部真菌感染,如皮肤癣真菌病,这些真菌有嗜角质性,在皮肤局部大量繁殖后,通过机械刺激和代质性,在皮肤局部大量繁殖后,通过机械刺激和代质性,在皮肤局部大量繁殖后,通过机械刺激和代质性,在皮肤局部大量繁殖后,通过机械刺激和代谢产物的作用,引起局部炎症和病变。深部感染

16、真谢产物的作用,引起局部炎症和病变。深部感染真谢产物的作用,引起局部炎症和病变。深部感染真谢产物的作用,引起局部炎症和病变。深部感染真菌遭吞噬细胞吞噬后,不被杀死而能在细胞内繁殖,菌遭吞噬细胞吞噬后,不被杀死而能在细胞内繁殖,菌遭吞噬细胞吞噬后,不被杀死而能在细胞内繁殖,菌遭吞噬细胞吞噬后,不被杀死而能在细胞内繁殖,引起组织慢性肉芽肿性炎症和组织坏死溃疡形成。引起组织慢性肉芽肿性炎症和组织坏死溃疡形成。引起组织慢性肉芽肿性炎症和组织坏死溃疡形成。引起组织慢性肉芽肿性炎症和组织坏死溃疡形成。n n条件致病性感染:条件致病性感染:n n 内源性真菌感染内源性真菌感染内源性真菌感染内源性真菌感染,机

17、体免疫力低下时发生,如白机体免疫力低下时发生,如白机体免疫力低下时发生,如白机体免疫力低下时发生,如白假丝酵母菌、曲霉、毛霉等引起。假丝酵母菌、曲霉、毛霉等引起。假丝酵母菌、曲霉、毛霉等引起。假丝酵母菌、曲霉、毛霉等引起。n n n n超敏反应:超敏反应:敏感患者吸如孢子或菌丝敏感患者吸如孢子或菌丝敏感患者吸如孢子或菌丝敏感患者吸如孢子或菌丝,引起超敏反应引起超敏反应引起超敏反应引起超敏反应 如荨麻疹、哮喘、变应性鼻炎等。如荨麻疹、哮喘、变应性鼻炎等。如荨麻疹、哮喘、变应性鼻炎等。如荨麻疹、哮喘、变应性鼻炎等。真菌性中毒:真菌性中毒:粮食受潮霉变,摄入真菌或其产生的毒素后可粮食受潮霉变,摄入真

18、菌或其产生的毒素后可引起急、慢性中毒称为真菌中毒症(引起急、慢性中毒称为真菌中毒症(mycotoxicosis)。主要有:黄曲霉毒素和镰刀菌毒素主要有:黄曲霉毒素和镰刀菌毒素地区性、季节性、无传染性地区性、季节性、无传染性免疫性 1.天然免疫天然免疫免疫力与机体免疫状态有关免疫力与机体免疫状态有关皮肤粘膜屏障作用(皮脂腺分泌不饱和脂肪酸)皮肤粘膜屏障作用(皮脂腺分泌不饱和脂肪酸)正常菌群的拮抗作用如白色念珠菌正常菌群的拮抗作用如白色念珠菌吞噬细胞的作用:中性粒细胞和巨噬细胞在抗吞噬细胞的作用:中性粒细胞和巨噬细胞在抗真菌感染中起重要作用,真菌的孢子或酵母相的真真菌感染中起重要作用,真菌的孢子或

19、酵母相的真菌易被其吞噬。近年来发现菌易被其吞噬。近年来发现tuftsin(促癣吞噬肽)(促癣吞噬肽)可增强中性粒细胞的吞噬和杀菌作用可增强中性粒细胞的吞噬和杀菌作用免疫性 2.获得性免疫获得性免疫真菌感染的痊愈与细胞免疫有关细胞免疫,真菌感染的痊愈与细胞免疫有关细胞免疫,Th1细胞产生细胞产生IFN-IL-2等激活巨噬细胞,等激活巨噬细胞,Th1细胞还可细胞还可诱发迟发型超敏反应,控制真菌感染的扩散诱发迟发型超敏反应,控制真菌感染的扩散特异性抗体可通过中和作用抑制真菌吸附,通过特异性抗体可通过中和作用抑制真菌吸附,通过调理作用增强吞噬细胞的吞噬,但抗体与补体对调理作用增强吞噬细胞的吞噬,但抗体

20、与补体对真菌的溶菌作用不明显,可能与其胞壁较厚有关真菌的溶菌作用不明显,可能与其胞壁较厚有关微生物学检查法n n标本标本 浅部感染真菌浅部感染真菌浅部感染真菌浅部感染真菌 毛发、皮屑、指甲毛发、皮屑、指甲毛发、皮屑、指甲毛发、皮屑、指甲 深部感染真菌深部感染真菌深部感染真菌深部感染真菌 痰、血液、脑脊液等痰、血液、脑脊液等痰、血液、脑脊液等痰、血液、脑脊液等n n直接镜检直接镜检:浅部标本浅部标本-KOH-KOH处理后镜检,通常不染色处理后镜检,通常不染色 假丝酵母菌假丝酵母菌-革兰染色(芽生孢子、假菌丝)革兰染色(芽生孢子、假菌丝)隐球菌隐球菌-墨汁负染(厚荚膜)墨汁负染(厚荚膜)其他多细胞

21、真菌其他多细胞真菌-特殊染色如乳酚棉兰染色,镜检特殊染色如乳酚棉兰染色,镜检 n n分离培养分离培养 常用于直接镜检不能确定有无及种类,常用沙氏培养基,培养方常用于直接镜检不能确定有无及种类,常用沙氏培养基,培养方常用于直接镜检不能确定有无及种类,常用沙氏培养基,培养方常用于直接镜检不能确定有无及种类,常用沙氏培养基,培养方法常用试管法和小培养。菌落特征是鉴定的重要依据。法常用试管法和小培养。菌落特征是鉴定的重要依据。法常用试管法和小培养。菌落特征是鉴定的重要依据。法常用试管法和小培养。菌落特征是鉴定的重要依据。n n组织病理学检查组织病理学检查n n血清学检查血清学检查 浅部感染真菌不作血清

22、学检查,深部感染真菌可检测其特异性抗浅部感染真菌不作血清学检查,深部感染真菌可检测其特异性抗浅部感染真菌不作血清学检查,深部感染真菌可检测其特异性抗浅部感染真菌不作血清学检查,深部感染真菌可检测其特异性抗原原原原n n皮试皮试 如皮肤癣菌素、孢子丝菌素假丝酵母菌抗原,类似于如皮肤癣菌素、孢子丝菌素假丝酵母菌抗原,类似于如皮肤癣菌素、孢子丝菌素假丝酵母菌抗原,类似于如皮肤癣菌素、孢子丝菌素假丝酵母菌抗原,类似于PPDPPD皮试皮试皮试皮试防治原则n n皮肤癣菌的传播主要靠孢子皮肤癣菌的传播主要靠孢子皮肤癣菌的传播主要靠孢子皮肤癣菌的传播主要靠孢子n n深部感染真菌大多是一些条件致病菌,预防的关键

23、是提深部感染真菌大多是一些条件致病菌,预防的关键是提深部感染真菌大多是一些条件致病菌,预防的关键是提深部感染真菌大多是一些条件致病菌,预防的关键是提高机体抵抗力高机体抵抗力高机体抵抗力高机体抵抗力n n局部感染治疗:外用药有酮康唑、咪康唑和克霉唑局部感染治疗:外用药有酮康唑、咪康唑和克霉唑局部感染治疗:外用药有酮康唑、咪康唑和克霉唑局部感染治疗:外用药有酮康唑、咪康唑和克霉唑n n系统感染治疗:口服有两性霉素系统感染治疗:口服有两性霉素系统感染治疗:口服有两性霉素系统感染治疗:口服有两性霉素B B、伊曲康唑及咪唑类伊曲康唑及咪唑类伊曲康唑及咪唑类伊曲康唑及咪唑类抗真菌药等抗真菌药等抗真菌药等抗

24、真菌药等 第二节第二节 常见的病原性真菌常见的病原性真菌 一、皮肤癣真菌一、皮肤癣真菌 (DermatophytesDermatophytes)n n引起皮肤浅部感染引起皮肤浅部感染n n嗜角质蛋白,侵犯部位:角化的表皮,嗜角质蛋白,侵犯部位:角化的表皮,毛发,指(趾)甲毛发,指(趾)甲n n病理变化:由真菌增殖及代谢产物刺激病理变化:由真菌增殖及代谢产物刺激宿主引起宿主引起一种皮肤癣菌可在不同部位引起病变一种皮肤癣菌可在不同部位引起病变一种皮肤癣菌可在不同部位引起病变一种皮肤癣菌可在不同部位引起病变相同部位的病变也可由不同的皮肤癣菌引起相同部位的病变也可由不同的皮肤癣菌引起相同部位的病变也可

25、由不同的皮肤癣菌引起相同部位的病变也可由不同的皮肤癣菌引起 指(趾)甲指(趾)甲 皮肤皮肤 毛发毛发毛癣菌毛癣菌 +表皮癣菌属表皮癣菌属 +-+-小孢子癣菌属小孢子癣菌属 -+-+脚癣脚癣灰指甲灰指甲临床意义临床意义皮肤癣菌易侵犯人体皮肤、指甲、毛发的皮肤癣菌易侵犯人体皮肤、指甲、毛发的角蛋白组织并生长繁殖致病,是因为其能角蛋白组织并生长繁殖致病,是因为其能产生角质溶解酶。皮肤癣菌是接触传染,产生角质溶解酶。皮肤癣菌是接触传染,只要反复接触患者均有可能被感染。在同只要反复接触患者均有可能被感染。在同一病人有不同的临床表现,如毛癣菌属可一病人有不同的临床表现,如毛癣菌属可引起发癣、体癣、甲癣;而

26、相同部位的病引起发癣、体癣、甲癣;而相同部位的病可由不同皮肤癣菌引起,如甲癣可由不同皮肤癣菌引起,如甲癣(俗称灰指俗称灰指甲甲)可由毛癣菌属和表皮癣菌属引起可由毛癣菌属和表皮癣菌属引起 。微生物检验微生物检验1标标本本采采集集采采集集新新发发生生的的皮皮肤肤损损害害边边缘缘皮皮屑屑;指指甲甲近近尖尖端端下下面面甲甲屑屑;拔拔取取无无光光泽泽病病发发,黄黄癣癣采采集集黄黄癣癣痂痂。将将标标本本盛盛于于清洁纸袋,鳞屑要用黑纸包好。清洁纸袋,鳞屑要用黑纸包好。2直直接接显显微微镜镜检检查查皮皮屑屑标标本本用用10KOH液液制制成成湿湿片片,指指甲甲用用25KOH或或25NaOH含含5甘甘油油处处理理

27、。镜镜检检可可见见透透明明、有有隔隔,常常有有分分支支的的菌菌丝丝及及成成链链的的关关节节孢孢子子,三三个个癣癣菌菌属属难难以以鉴鉴别别。毛毛癣癣菌菌属属感感染染病病发发有有发发外外型型和和发发内内型型孢孢子子,而而小小孢孢子子菌菌属属只只有发外型孢子。有发外型孢子。3分离培养与鉴定分离培养与鉴定皮屑、甲屑和病发标本,先用皮屑、甲屑和病发标本,先用70乙醇或乙醇或在青、链霉素混合液内处理在青、链霉素混合液内处理5min,再用再用生理盐水洗生理盐水洗3次,然后接种沙氏琼脂斜面,次,然后接种沙氏琼脂斜面,25培养,每周观察菌落形态及颜色,直培养,每周观察菌落形态及颜色,直至第四周。挑取菌落镜检菌丝

28、和孢子,也至第四周。挑取菌落镜检菌丝和孢子,也可作棉兰染色后镜检或作小培养后镜检。可作棉兰染色后镜检或作小培养后镜检。必要时作其他鉴定如毛发穿孔试验、脲酶必要时作其他鉴定如毛发穿孔试验、脲酶试验和特殊营养需要试验等来鉴定皮肤癣试验和特殊营养需要试验等来鉴定皮肤癣菌。菌。毛发穿孔试验毛发穿孔试验是将头发发剪成是将头发发剪成lcm长,置于已加入长,置于已加入25ml蒸馏水和蒸馏水和23滴滴10酵母浸膏液的平皿内,酵母浸膏液的平皿内,高压灭菌。将待检皮肤真菌接种于平皿内,高压灭菌。将待检皮肤真菌接种于平皿内,置置25孵育四周,每周检查一次,每次取孵育四周,每周检查一次,每次取数根毛发置载玻片上,经乳

29、酚棉蓝染色后,数根毛发置载玻片上,经乳酚棉蓝染色后,置低倍镜下观察。若毛发有裂口或陷凹者置低倍镜下观察。若毛发有裂口或陷凹者为阳性,否则为阴性。为阳性,否则为阴性。4 4药物敏感试验药物敏感试验皮肤癣菌对灰黄霉素、伊曲康唑等皮肤癣菌对灰黄霉素、伊曲康唑等药物敏感。药物敏感。防治方法:防治方法:预防主要靠注意清洁卫生,避免接触,预防主要靠注意清洁卫生,避免接触,保持鞋袜干燥等;保持鞋袜干燥等;治疗采用抗真菌药,灰黄霉素,制霉菌治疗采用抗真菌药,灰黄霉素,制霉菌素等素等目前尚无有效疫苗预防皮肤癣病目前尚无有效疫苗预防皮肤癣病。二、白色念珠菌二、白色念珠菌是假丝酵母菌属中最常见的病原菌。是假丝酵母菌

30、属中最常见的病原菌。念珠菌病是最常见条件致病性真菌。念珠菌病是最常见条件致病性真菌。n n生物学性状生物学性状生物学性状生物学性状n n1 1、形态与结构:、形态与结构:、形态与结构:、形态与结构:圆形或卵圆形,革兰氏阳性,但染色均;圆形或卵圆形,革兰氏阳性,但染色均;圆形或卵圆形,革兰氏阳性,但染色均;圆形或卵圆形,革兰氏阳性,但染色均;在组织内形成芽生孢子和假菌丝;培养后可形在组织内形成芽生孢子和假菌丝;培养后可形在组织内形成芽生孢子和假菌丝;培养后可形在组织内形成芽生孢子和假菌丝;培养后可形成厚膜孢子。成厚膜孢子。成厚膜孢子。成厚膜孢子。n n2 2、培养特性:、培养特性:、培养特性:、

31、培养特性:在普通琼脂培养基、血平板及沙保弱琼脂在普通琼脂培养基、血平板及沙保弱琼脂在普通琼脂培养基、血平板及沙保弱琼脂在普通琼脂培养基、血平板及沙保弱琼脂培养基上均生长良好;培养基上均生长良好;培养基上均生长良好;培养基上均生长良好;3737培养培养培养培养2323天后可出天后可出天后可出天后可出现典型的类酵母菌落。现典型的类酵母菌落。现典型的类酵母菌落。现典型的类酵母菌落。在玉米粉琼脂培养基上可形成假菌丝,并产在玉米粉琼脂培养基上可形成假菌丝,并产在玉米粉琼脂培养基上可形成假菌丝,并产在玉米粉琼脂培养基上可形成假菌丝,并产生厚膜孢子。生厚膜孢子。生厚膜孢子。生厚膜孢子。致病性致病性皮肤粘膜念

32、珠菌病皮肤粘膜念珠菌病皮肤粘膜念珠菌病皮肤粘膜念珠菌病 :鹅口疮,口角糜烂等鹅口疮,口角糜烂等鹅口疮,口角糜烂等鹅口疮,口角糜烂等 内脏内脏内脏内脏念珠菌病念珠菌病念珠菌病念珠菌病 :念珠菌性肠炎、肺炎及脑膜炎:念珠菌性肠炎、肺炎及脑膜炎:念珠菌性肠炎、肺炎及脑膜炎:念珠菌性肠炎、肺炎及脑膜炎 泌尿生殖道念珠菌病:女性,阴道炎、尿道炎泌尿生殖道念珠菌病:女性,阴道炎、尿道炎泌尿生殖道念珠菌病:女性,阴道炎、尿道炎泌尿生殖道念珠菌病:女性,阴道炎、尿道炎 男性,龟头包皮炎等男性,龟头包皮炎等男性,龟头包皮炎等男性,龟头包皮炎等 微生物学检查:微生物学检查:n n直接镜检n n假菌丝和厚膜孢子可帮

33、助诊断n n1、除去危险因素如潮湿、停止长期应用抗生素等;n n2、鹅口疮及皮肤黏膜念珠菌病治疗可局部涂敷制霉菌素、龙胆紫、酮康唑等;n n3、深部感染可用两性霉素B治疗或与口服氟胞嘧啶合用;n n4、目前尚未建立起有效的预防措施。防治原则防治原则三、新生隐球菌三、新生隐球菌n n在自然界分布广泛;在自然界分布广泛;n n也存在于人体也存在于人体 的体表、口腔和粪便中;的体表、口腔和粪便中;n n大量存在于干燥的鸽粪中大量存在于干燥的鸽粪中生物学性状生物学性状1 1、形态与结构:、形态与结构:、形态与结构:、形态与结构:圆形的酵母样细胞,菌体外周有一层肥厚的荚圆形的酵母样细胞,菌体外周有一层肥

34、厚的荚圆形的酵母样细胞,菌体外周有一层肥厚的荚圆形的酵母样细胞,菌体外周有一层肥厚的荚膜。一般染色法不易着色,故称隐球菌。用墨汁负膜。一般染色法不易着色,故称隐球菌。用墨汁负膜。一般染色法不易着色,故称隐球菌。用墨汁负膜。一般染色法不易着色,故称隐球菌。用墨汁负染色后可见黑色的背景中见到圆形或卵圆形透亮染色后可见黑色的背景中见到圆形或卵圆形透亮染色后可见黑色的背景中见到圆形或卵圆形透亮染色后可见黑色的背景中见到圆形或卵圆形透亮菌体。菌体。菌体。菌体。菌体可见出芽,但不形成假菌丝。菌体可见出芽,但不形成假菌丝。菌体可见出芽,但不形成假菌丝。菌体可见出芽,但不形成假菌丝。2 2、培养特性:、培养特

35、性:、培养特性:、培养特性:在血平板及沙保弱琼脂培养基上在血平板及沙保弱琼脂培养基上在血平板及沙保弱琼脂培养基上在血平板及沙保弱琼脂培养基上25 3725 37培培培培养数天后可出现酵母型菌落;养数天后可出现酵母型菌落;养数天后可出现酵母型菌落;养数天后可出现酵母型菌落;致病性致病性n n外源性感染,肺是主要入侵途径,多数症状不明显,能自愈;有的引起支气管肺炎;严重肺呈暴发性感染,死亡。n n经血行传播至中枢神经及其它组织,引起隐球菌慢性脑膜炎n n一、直接镜检一、直接镜检n n标本作墨汁负染色后检出透亮荚膜和芽标本作墨汁负染色后检出透亮荚膜和芽生孢子。生孢子。n n二、分离培养与鉴定:二、分离培养与鉴定:沙保弱琼脂培养基上沙保弱琼脂培养基上25 37培养数培养数天后可出现酵母型菌落;天后可出现酵母型菌落;37培养检查培养检查尿素酶可鉴定此菌。尿素酶可鉴定此菌。微生物学检查法治疗治疗n n治疗可用二性霉素B、5-氟胞嘧啶、咪康挫等抗真菌药物。四、产毒性真菌四、产毒性真菌n n食物中毒产毒性真菌多数属于曲霉菌属、青霉菌属及镰刀菌属,其中产毒最强的有:n n1.黄曲霉菌n n2.镰刀菌n n3.桔青霉菌

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