霉菌毒素的控制及解决办法.ppt

控制控制饲料原料中霉菌毒素的料原料中霉菌毒素的办法法农作物的耕种作物的耕种:种植种植对霉菌有抵抗力的品种霉菌有抵抗力的品种使用有效的昆虫控制方法使用有效的昆虫控制方法维持好的灌持好的灌溉系系统实行良好的耕作行良好的耕作,农作物作物轮换,杂草控制草控制收割收割时:适当的收割适当的收割时间迅速降低水份迅速降低水份除去多余的雑除去多余的雑质1.收收获后及后及储藏藏:保保护储藏的原料藏的原料/产品不被水份品不被水份,昆虫昆虫,及其它及其它环境因素的侵害境因素的侵害保存原料保存原料/产品在干燥干品在干燥干净的表面的表面测试所有要使用的原料的霉菌毒素所有要使用的原料的霉菌毒素贮存桶及管路的定期清理存桶及管路的定期清理先先进先出先出收收获后后,加工加工,制造制造:测试所有要使用的原料及成品的霉菌毒素所有要使用的原料及成品的霉菌毒素监控加工控加工过程以程以维持高品持高品质的的产品品贮存桶及加工存桶及加工设备的定期清理的定期清理依照依照GMPGMP程序程序控制饲料原料中霉菌毒素的办法2.饲喂喂动物物:保存保存产品在干燥干品在干燥干净的表面的表面先先进先出先出贮存桶及存桶及饲喂系喂系统的定期清理的定期清理水槽的定期清理水槽的定期清理垫料料控制饲料原料中霉菌毒素的办法3.4.5.6.7.如何解决霉菌毒素的危害？如何解决霉菌毒素的危害？8.霉菌毒素的霉菌毒素的预防防1 1控制控制饲料原料的料原料的质量。关量。关键在于在于严格控制格控制原料的含水量，一般要求玉米、高粱、稻原料的含水量，一般要求玉米、高粱、稻谷等的含水量谷等的含水量应不超不超过14%14%；大豆及其；大豆及其饼粕、粕、麦麦类、糠麸、糠麸类、甘薯干、木薯干等的含水、甘薯干、木薯干等的含水量量应不超不超过13%13%；棉籽；棉籽饼粕、菜籽粕、菜籽饼粕、向粕、向日葵日葵饼粕、粕、亚麻仁麻仁饼粕、花生仁粕、花生仁饼粕、粕、鱼粉、骨粉及肉骨粉等的含水量粉、骨粉及肉骨粉等的含水量应不超不超过12%12%。9.霉菌毒素的霉菌毒素的预防防2 2预防：防：使用使用优质防霉防霉剂，预防原料或成品防原料或成品饲料霉料霉变。饲料防霉料防霉剂种种类很多，目前使很多，目前使用最广泛的是丙酸及其用最广泛的是丙酸及其盐类（包括丙酸（包括丙酸钠、丙酸丙酸钙、丙酸、丙酸铵和二丙酸和二丙酸铵）、山梨醇及）、山梨醇及其其盐类、双乙酸、双乙酸钠等是常用的防霉等是常用的防霉剂。饲料一旦料一旦污染染应使用有效的霉菌毒素吸附使用有效的霉菌毒素吸附剂。10.霉菌毒素的控制霉菌毒素的控制1)物理、化学物理、化学处理法理法2）生物）生物转化法化法3）吸附法（霉菌毒素吸附）吸附法（霉菌毒素吸附剂）11.霉菌毒素的脱毒霉菌毒素的脱毒物理化学方法？物理化学方法？方便性如何？方便性如何？适口性如何？适口性如何？12.吸附吸附剂法法 为了减少损失，很多学者采用一些物质作为霉菌毒素的吸附剂来处理霉变饲料，即在饲料中添加可以吸附霉菌毒素物质，使毒素在经过动物肠道时不被动物所吸收，直接排出体外。例如：甘露低聚糖，水合铝硅酸盐类，膨润土，蒙脱石等。13.市市场上霉菌毒素吸附上霉菌毒素吸附剂产品主要品主要类型型黏土黏土类吸附吸附剂；酵母酵母细胞壁提取物；胞壁提取物；酶解毒解毒剂；微生物解毒微生物解毒剂；中草中草药制制剂；14.粘土粘土类吸附吸附剂Silicon tetrahedron:SiOSilicon tetrahedron:SiO4 44-4-Aluminum octahedron:AlOAluminum octahedron:AlO6 69-9-硅及铝 地球上最丰富的矿物质 不同的硅及铝组合造成不同的粘土类粘土类吸附剂是自然矿产 粘土类吸附剂都带负极 15.硅硅铝酸酸盐Aluminosilicates高岭土高岭土(1:1):水合硅水合硅铝酸酸盐Al2(Si2O5)(OH)8延展性差延展性差,带负极极沸石粉沸石粉:水合硅水合硅铝酸酸盐Na2Al2Si3O10.2H2O火山灰火山灰,可能可能污染染许多多矿物物质及重金属及重金属结构像蜂构像蜂窝-分子分子筛,可吸引大小适当可吸引大小适当带负极的极的分子分子最常用在最常用在滤水器的水器的滤芯芯膨膨润土土(2:1):Montmorillonites,Sodium and calcium bentonites(Na,Ca)X(Al,Mg)2Si4O10(OH)2.nH2O火山灰火山灰类的天然的天然矿产水合水合钙钠硅硅铝酸酸盐延展性比延展性比较好好,吸水后膨吸水后膨胀增加增加饲料流料流动性性16.膨膨润土如何吸附黄曲霉菌毒素土如何吸附黄曲霉菌毒素+-H2O:高极性螃蟹眼状的螃蟹眼状的结结构构黄曲霉菌毒素黄曲霉菌毒素:唯一唯一带带有极性的有极性的霉菌毒素霉菌毒素17.膨膨润土如何吸附黄曲霉菌毒素土如何吸附黄曲霉菌毒素Divalent InterlayercationsCa+Na+orOOOOOOCH318.粘土粘土类吸附吸附剂的局限性的局限性添加添加剂量高量高(1-3%)吸附力取决于分子大小及吸附力取决于分子大小及带正价的分子正价的分子只能吸附只能吸附带极性的黄曲霉毒素极性的黄曲霉毒素但是也吸附但是也吸附矿物物质,例如例如锰,锌,镁(Chestnut et al.1992),铜及及钠(Kramer 1993),尤其是使用量尤其是使用量 0.5%对吸附呕吐毒素吸附呕吐毒素,T-2毒素毒素,玉米赤霉玉米赤霉烯酮(Orr et al.1988;Kubena et al.1998),赭曲霉毒素赭曲霉毒素A(Huff et al.1992),蛇形菌毒素蛇形菌毒素(Kubena et al.1993),高羊茅毒素高羊茅毒素(Chestnut et al.1992)无效无效可能有二可能有二恶英英(dioxins)及重金属的及重金属的污染染对环保有保有负面的影响面的影响19.吸附吸附剂法的缺陷法的缺陷20.酶法分解霉菌毒素法分解霉菌毒素21.OOOOOOCH3OOOOOOCH3OHOOOOOOCH3OOOOOOCH3OHOO黄曲霉毒素 B1黄曲霉毒素 B2黄曲霉毒素 G1黄曲霉毒素 G2黄曲霉毒素的黄曲霉毒素的结结构非常相似构非常相似,一种一种酶酶就可以分解所有的黄曲霉毒素就可以分解所有的黄曲霉毒素使用酶分解黄曲霉毒素22.一种酶可能可以分解所有的单端孢霉烯类毒素单端孢霉烯类毒素(Trichothecenes)23.需要同时含有多种的酶但是但是还有其他的有其他的霉菌毒素霉菌毒素黄曲霉毒素萎蔫酸Penicillic AcidAlternariolFusariocinPenitremCitreoviridinFusarinsPhomopsin桔霉素IslanditoxinRoridins环匹克尼酸LuteoskyrinRubratoxin呕吐毒素串珠镰刀菌毒素Slaframine蛇形菌毒素MonoacetoxyscirpenolDicoumarolNeosolaniolSlaframineStachbotryotoxinsErgotamine赭曲霉毒素SterigmatocystinErgo ToxinsOosporeinT-2毒素FumitremorgenPaspalitremsTremorgens烟曲霉毒素Patulin玉米赤霉烯酮 还有其他300多种,可能还有数千种未知的霉菌毒素.25.酶分解霉菌毒素的局限性分解霉菌毒素的局限性酶也是蛋白也是蛋白质,活力可受活力可受pH,pH,温度温度,及受及受质(霉菌毒素霉菌毒素)的影响的影响酶对受受质的的选择非常非常专一性一性,而且而且专一性的程度非常高一性的程度非常高,有有时是是绝对性的性的是否适合是否适合该种种酶的作用条件，的作用条件，酶解后解后的次的次级产物是否能保物是否能保证没有毒性。没有毒性。26.酵母酵母细胞壁提取物胞壁提取物有效成份:改性的葡聚糖利用酵母细胞壁内的葡萄糖甘露聚糖的化学结构与同样属于有机类的霉菌毒素的亲和性，吸附霉菌毒素。类似于肥皂去油的原理，为表面亲和吸附。27.改性的葡聚糖的三改性的葡聚糖的三维螺旋螺旋结构构28.改性甘露聚糖改性甘露聚糖-黄曲霉毒素黄曲霉毒素黄曲霉毒素甘露聚糖29.其他毒素与它的吸附方式其他毒素与它的吸附方式T2T2呕吐毒素赭曲霉毒素烟曲霉毒素30.乳酸菌乳酸菌对于霉菌毒素的作用于霉菌毒素的作用乳酸菌对于霉菌毒素的去除的作用是目前在食品和人类营养方面一个崭新的课题。目前主要集中在黄曲霉毒素AFb1上。已经有大量研究证实了一些乳酸菌能够很好去除黄曲霉毒素，可能还有其他毒素（参见随附的参考文献）。31.霉菌毒素霉菌毒素检测方法方法n饲料中霉菌及霉菌毒素的检测方法主要有目测法、薄层色谱法(T LC)、高效液相色谱法(HP LC)、酶联免疫法(E LISA)、放射免疫法(KIA)及气相色谱法等。n快速试纸检测法33.薄薄层层析法析法(TLC)nT LC法是我国法是我国测定食品及定食品及饲料中霉菌毒素的国家料中霉菌毒素的国家标准方法准方法之一之一,其原理是其原理是针对不同的不同的样品品,用适宜的提取溶用适宜的提取溶剂将霉将霉菌毒素从菌毒素从样品中提取出来品中提取出来,经柱柱层析析净化化,再在薄再在薄层板上板上层析展开、析展开、分离分离,利用霉菌毒素的利用霉菌毒素的荧光性光性,根据根据荧光斑点光斑点的的强弱与弱与标准比准比较测定其最低含量。定其最低含量。nT LC法由于法由于设备简单易于普及易于普及,所以国内外仍在使用所以国内外仍在使用,但但该法法样品前品前处理繁理繁琐,且提取和且提取和净化效果不化效果不够理想理想,提提取液中取液中杂质较多多,在展开在展开时影响斑点的影响斑点的荧光光强度度,而双向而双向展开展开虽避免了避免了杂质干干扰，但增加了操作步，但增加了操作步骤和和时间(叶雪叶雪珠珠,2003)。34.液相色液相色谱法法(HPLC)HPLC法是近几年法是近几年发展起来的展起来的检测霉霉菌毒素的方法，主要是用菌毒素的方法，主要是用荧光光检测器器检测。在适宜的流。在适宜的流动相条件下，采用相条件下，采用反相反相C18柱柱，使霉菌毒素同，使霉菌毒素同时分离。分离。用用 HPLC 法法检测，最低，最低检出量出量0.08 ng，回收率，回收率为 92.87%。该法快速法快速而准确而准确,但需要昂但需要昂贵的的仪器器设备。35.酶联免疫法免疫法(ELISA)nELISA 法是法是1971年提出的。基本原理是在合适的年提出的。基本原理是在合适的载体上体上,酶标记抗体或抗原与相抗体或抗原与相应的抗原或抗体形的抗原或抗体形成成酶标记的抗原抗体复合物的抗原抗体复合物,在在酶底物参与下底物参与下,复复合物上的合物上的酶催化底物使其水解催化底物使其水解,氧化或氧化或还原成原成为另另一种一种带色物色物质。可用分光光度。可用分光光度计进行行测定定,从而可从而可计算出参与反算出参与反应的抗原和抗体的含量的抗原和抗体的含量(杨利国利国,1998)。该免疫学方法更免疫学方法更实际,其灵敏度与其灵敏度与 TLC 或或 HPLC 法相当或更高法相当或更高,因而具有更广因而具有更广阔的的应用用前景。前景。n该法由于快速、法由于快速、灵敏、灵敏、准确、准确、可定量、可定量、操作操作简便、便、无需无需贵重重仪器器设备 ,且且对样品品纯度要求不高度要求不高等特性等特性 ,特特别适用于大批量适用于大批量样品的品的检测。36.金金标快速快速试纸条条检测原理原理l试剂含有被事先固定于膜上含有被事先固定于膜上测试区（区（T）的）的AFB1-BSA偶偶联物和被胶体金物和被胶体金标记的抗的抗AFB1特异性抗体。特异性抗体。l测试时，样品滴入品滴入试剂盒孔内，如盒孔内，如AFB1在在样品中品中浓度度低于低于5ng/ml时，胶体金抗体不能与，胶体金抗体不能与AFB1全部全部结合。合。这样，胶体金抗体在，胶体金抗体在层析析过程中会被固定在膜上的程中会被固定在膜上的AFB1-BSA偶偶联物物结合，在合，在测试区（区（T）内会出）内会出现一条一条紫紫红色色条条带。如果。如果AFB1在在样品中品中浓度高于度高于5ng/ml时，胶体金，胶体金抗体与抗体与AFB1全部全部结合，从而在合，从而在测试区（区（T）内因）内因为竞争反争反应不会与不会与AFB1-BSA偶偶联物物结合而不出合而不出现紫紫红色条色条带。37.