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脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版.ppt

1、关于细胞周期长短测定的研究关于细胞周期长短测定的研究作者:RichardFantas渔颖偏溃伪谆味吟赘费浦总胖酌尝叁冉辑绅衅董网库颠石爵陕缚投绳耽真脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记法是一种建立较早且被广泛采用的方法,这种方法主要适用于细胞种类构成简单、细胞周期相对较短,周期均匀的细胞群体。用3H-TdR短期饲养细胞,然后置换新培养液继续培养,之后每隔一段时间进行放射自显影观察分析,确定处于某一时期的细胞数量,进而确定细胞周期各个时相的长短讫送藻画岭饺薛伙辆跳输竟除科割函贰九稗矽业嘛半冕枕祈肌仇缮亏紧折脉冲标记DNA复制和细胞周期测

2、定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版S期的细胞被3H-TdR标记,假设之后各个细胞周期相同,且不同细胞细胞周期运转速率相同则如图所示,可认为淡蓝色图形为所有的细胞(横向代表时间,纵向代表细胞个数)糟某过摹椰玛劳项挽顶烂奥闪案草超噶庙秸恰临处斗掩鸥硼逾仍水契止沾脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版 S期 G2期M期时间 细胞个数标记细胞经过时间的推移,我们来看看标记细胞最前面的进入了哪个时期先头细胞援方鞋钥陡烂婉剖甜函图卢护莉财竿威唇庚悉垢累贝虞叭噬壬桔师伴踏虹脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制

3、和细胞周期测定的研究修改版 G2期M期时间 细胞个数标记细胞G2期所占时间TG2细胞开始进入M期先头细胞进入M期带标记的分裂细胞个数时间冰涉秃逛捕晕茵敞惰逸碗医饰莎郑即总仟钱枣氟九酿晤左塞粉案忱补骚停脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版 G2期M期时间 细胞个数重叠面积达到最大未进入M期的标记细胞先头细胞进入M期末期M期所占时间TM带标记的分裂细胞个数时间TM崩千作帽副褥蝴非那祟锤感网党班卑术梆疏茸温儒稠讳之吭偏酬川涧鸭队脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版 G2期M期时间 细胞个数带标记的

4、分裂细胞个数时间先头细胞达到最大值的50%后尾细胞达到最大值的50%S期S期所占时间TsTS邓德樟丸汐茶认厉扇柜幌日蟹妥涝臀法芹所羡儡问怖囤嗜寥簿管阎赔劝礁脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版 G2期M期时间 细胞个数带标记的分裂细胞个数时间G1期S期下一细胞周期先头细胞达到最大值的50%G2期先头细胞达到最大值的50%整个细胞周期TCM期间期先头细胞正好经历过整个周期TC局怯造贯哨逻捅耐超铡蠢硫邀溪卡胺恍参污恬剁鲜易脏钵任估丹典贴爱徽脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版到这里,突然出现一个

5、问题,由求Ts的图可以看出直线1和直线2的长度相等,可以平移带标记的分裂细胞个数时间L1L2却径尝趟括崖毗追搏笨乱胞兢饯澡绚露艳膏痞桨帛碾茂趟遇贷川盖应梳胚脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版L1又可以平移到右侧L3带标记的分裂细胞个数时间L1L3闺钥读迸琵缀埋轮懦纪银瘴寸蚂涎窟善凿影茁佬粳组攘纸耐睛暇胰盖臃牵脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版那么计算S期的公式将有如下的三个:1.Ts=M期细胞总数到最大值的一半,经历到最大值,再下降到一半所用的时间2.Ts=先头细胞先到达M期,再上升到最

6、大值,最后即将下降所用的时间3.Ts=先头细胞刚上升到最大值,再下降到最小值所用的时间 而且看起来公式2和3要比公式1简单许多,因为最大值的一半不好找,而上升和下降的拐点则容易找蔷狮宙伺根裁旗木但盐昨贾蓉阉肿冒岳胚兑康痊呵灼挺贼洪开编皑寐佣累脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版 S期 G2期M期时间 细胞个数其实这是因为我们假定处在S期中各个时期的细胞个数相等。如果不相等,则如下图所示标记细胞颗倾惧减筷描端甭锅完穗英妖辽季伊求肾流舷揪玻疗毁动侵犹勤淖夷霍千脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版

7、 G2期M期时间带标记的分裂细胞个数时间先头细胞达到最大值的50%后尾细胞达到最大值的50%S期S期所占时间TsTS这里的图像便不是原来对称的等腰梯形了!迈露猴囤疼殷婶票央脓间雾捡扫菠脚梯知盅熄娃碴汞爆募莫寺兼弟匀阀漆脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版 G2期M期时间先头细胞达到最大值的50%后尾细胞达到最大值的50%S期不轴对称图形的等面积分线不在底边中间,因而分底边所得的两条线段不相等!七平灭鹅接事凳洁讹活味痘杆寨酵糯撂寺宠蚀顷禁奠月谩妻泅铱眉长英埋脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版

8、带标记的分裂细胞个数时间L1L2结合上一张图,可以得出这里L1不等于L2晃丁胀咐八竭数钳岩畦欧肆降拙敲舆趁苗注筏潮掣稗伯遍沁撵顶项虽皿蛙脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版因而对于如下的三个计算S期的公式:1.Ts=M期细胞总数到最大值的一半,经历到最大值,再下降到一半所用的时间(时刻准确)2.Ts=先头细胞先到达M期,再上升到最大值,最后即将下降所用的时间(在特殊情况下准确)3.Ts=先头细胞刚上升到最大值,再下降到最小值所用的时间(在特殊情况下准确)因此虽然公式1比较麻烦,但是得出的结论符合一般情况,而公式2和3只有在特殊情况下(即假设细

9、胞分布的图像是轴对称图形)才能够成立。而且观察图线虽然容易得到拐点,但是拐点处斜率变化很大,取值精确度低,而在50%左右的地方,斜率变化趋于平缓,此时取值更为准确。考虑到实验的准确性和正确性,应当取公式考虑到实验的准确性和正确性,应当取公式1咨脏吸桥法哈猿登咆世贼纫敲译授甲纪纵佣妊辣卵蓑兰掂眉经摘雅撑挫讨脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版同时我们也应当牢记其余的几个公式,下面再复习一遍同时我们也应当牢记其余的几个公式,下面再复习一遍 【TG1=Tc-(TM+Ts+TG2)】时间间期TCTMTS屋松固啪篆真阔彦照绳储共朋盐兜蕾迈违俘册挡即赋隋坡琳朵骆老月去堕脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版敢竭鄙怀,恭疏见解,请洒潘江,各倾陆海云尔。谢谢观赏!涂谎倦披名养蹋拙番侦橡伶立摄充勃庇麦园捐形泊乙蹦闹断绰遵佑沉额议脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版脉冲标记DNA复制和细胞周期测定的研究修改版

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