KX-21血细胞分析仪作业指导书.doc

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SYSMEX KX-21血细胞分析仪
作业指导书
文件编号：Q-1
版本：第一版
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SYSMEX KX-21血细胞分析仪作业指导书
1. 检验目的
SYSMEX KX-21血细胞分析仪是用于检测血细胞(红细胞、白细胞和血小板)数量和白细胞分类的仪器。检测血液中血细胞数量的变化对临床有关疾病的诊断、观察疾病的变化及治疗效果具有重要参考价值。
2. 检测原理
2.1 白细胞、红细胞及血小板采用电阻抗法进行计数。即在细胞检测器微孔的两侧各有一个电极，两电极间通有恒定电流，经过稀释液（电解质溶液）稀释的血样（血细胞）在通过检测器微孔时，产生了一个电脉冲；脉冲的高低代表细胞体积的大小，脉冲的个数代表细胞的数量。
2.2 血红蛋白浓度采用 无氰HGB测量法（氧合血红蛋白法）进行测量。即在稀释的血样中加入溶血剂使红细胞膜破裂释放出血红蛋白，后者在瞬时间被转化生成氧合血红蛋白，在555nm处其吸光度与只有稀释液时的吸光度相比较以求出HGB。
3. 标本
31 临床护士抽取病人静脉血1-2ml置于含EDTA-3K的真空管内抗凝；
3.2 采血后立即送到检验科血细胞化验室；
3.3 血量不够1ml或血液凝固、溶血或脂血标本不能做检测。
4 设备和试剂
4.1 SYSMEX KX-21血细胞分析仪(主机号：A3878)；新仪器安装后首先要鉴定，具体步骤见仪器手册。
4.2 试剂：包括稀释液、溶血剂和清洁液。
4.3 购买的试剂应放室温保存，注意防尘、防潮。
4.4 开封后的试剂应尽快用完，超过有效期的试剂不能使用。
5 校准步骤
5.1 SYSMEX KX-21 血细胞分析仪安装或大修后需要进行校准；
5.2 SYSMEX KX21血细胞分析仪检测结果中的全部或某一项不准确，需要进行校准；
5.3 仪器在进行校准前必须对检测器、血红蛋白测量池等管道液路系统进行彻底清洗，操作过程详见SYSMEX KX-21血细胞分析仪使用手册。
5.4 SYSMEX KX-21血细胞分析仪的校准包括末梢血和全血两套系统，操作过程详
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见该仪器使用手册。
6 操作步骤
6.1 试剂检查：开机前检查试剂是否够量，有无混浊变质，管道有无扭结，清空废液桶。
6.2 开机与本底检测：打开UPS电源开关，等待60秒钟后，再打开主机电源开关，仪器进行系统检查后进行试剂本底测试，试剂本底必须满足下列要求：WBC≤0.3×109/L、RBC≤ 0.02×1012/L、HGB≤2×g/L、PLT≤10×109/L。
6.3 末梢血测量：
6.3.1用加液注射器吸取CELLPACK稀释液500ul加入到试管中，将采集的20ul末梢血注入到稀释液中,充分混匀制成稀释血样。
6.3.2确认当前LCD画面为〈准备测量〉状态。按下< MODE > 键，将画面变换至变换模式画面，选择 预先稀释（PD） ，按< ENTER > 键后，进行检测模式的切换，回到主画面。
6.3.3将混匀的稀释血样，放在进样针下,按 键进行计数，结果自动打印。
6.4 全血测量：测量之前，确保确认当前LCD画面处于全血模式（WD）下，将临床送检的合格抗凝静脉血标本编号后放入试管架中，测试前将血液颠倒混匀后,放在进样针下，按 键进行计数，结果自动打印。
6.5 标本号码的输入：按下面板上〈SAMPLE No> 键，标本号码激活，这时输入需要的标本号码，如：24 按ENTER 键确认，LCD画面进入〈准备测量〉状态。
6.6清洗与关机：检测完毕后，按下〈SHUTDOWN〉键，仪器进入关机画面，将清洗
液放在吸样针下，按 键，仪器自动吸引清洁液，对整个测量系统进行清洗。约5分钟清洗结束，即可关掉主机。
7 质量控制
7.1 科内自制质控物
7.2 质控措施（见科内室内质控）
8 干扰因素
8.1严重的黄疸或脂血使血红蛋白结果假性增高；
8.2红细胞冷凝集可使红细胞、白细胞和血小板计数结果假性减低，MCV假性增高；
8.3冷凝球蛋白增高使白细胞和血小板计数结果假性增高；
8.4有血小板凝集使血小板计数结果假性减低。
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9 计算
按仪器设计原理，只对红细胞常数（红细胞平均体积、红细胞平均血红蛋白量、红细胞平均血红蛋白浓度）进行计算，可根据RBC、HGB及HCT结果求出。
9.1 红细胞平均体积（MCV）
根据RBC及HCT，由下式求出。

9.2 红细胞平均血红蛋白量（MCH）
根据RBC及HGB，由下式来求出。

9.3 红细胞平均血红蛋白浓度（MCHC）
根据HCT及HGB，由下式来求出。

9.4 RDW由血细胞分析仪测量获得，是反映周围血红细胞体积异质性的参数。当红细胞通过小孔的一瞬间，计数电路得到一个相应大小的脉冲，不同大小的脉冲信号分别贮存在仪器内装计算机的不同通道，计算出相应当体积及细胞数统计处理而得RDW。
10 生物参考值区间和极限值
10.1 血细胞生物参考值区间
10.1.1白细胞：
成年人静脉血：3.5—10.0×109/L；
手指血：4.0—10.0×109/L；
新生儿 ：15.0—20.0×109/L；
6个月—2岁 ：11.0—12.0×109/L；
10.1.2红细胞
成年男性：4.3—5.86×1012/L；
成年女性：3.77—5.17×1012/L；
新生儿 ：6.0—7.0×1012/L；
10.1.3血红蛋白
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成年男性：135—180 g/L；
成年女性：115—155 g/L；
新生儿 ：180—190 g/L；
10.1.4红细胞压积
成年男性：0.400—0.517；
成年女性：0.367—0.467；
10.1.5血小板：100-300×109/L
10.1.6 MCV ：80—100fL；
10.1.7 MCH ：27.2—34.3 pg；
10.1.8 MCHC：320—360 g/L；
10.1.9 RDW ：< 0.145
10.1.10 PCT：男性 0.183±0.041；女性 0.198±0.042；
10.1.11 MPV：男性 10.07±1.78fL；女性 10.24±1.58fL；
10.1.12 PDW：16.8%±0.63%；
10.2 血细胞极限值
10.2.1 白细胞 < 0.5×109/L
10.2.2 红细胞 < 1.0×1012/L
10.2.3 血红蛋白 < 30g/L
10.2.4 血小板 < 20×109/L
11 实验室解释
11.1 白细胞计数结果异常
11.1.1 白细胞生理变化：
11.1.1.1 年龄：初生儿白细胞较高，一般在15×109/L左右，个别可高达30×109/L以上。通常在3～4天后降至10×109/L左右，约保持3个月，然后逐渐降低至成人水平。初生儿外周血白细胞主要为中性粒细胞，到第6～9天逐渐下降至与淋巴细胞大致相等。以后淋巴细胞逐渐增多，整个婴儿期淋巴细胞数均较高，可达70%。到2～3岁后，淋巴细胞逐渐下降，中性粒细胞逐渐上升，到4～5岁二者又基本相等，形成中性粒细胞和淋巴细胞变化曲线的两次交叉，至青春期时与成人基本相同。
11.1.1.2日间变化：白细胞数在静息状态时较低，活动和进食后较高；早晨较低，
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下午较高；一日之间最高值与最低值之间可相差1倍。运动、疼痛和情绪变化、一般的体力劳动、冷热水浴、日光或紫外线照射等，均可使白细胞轻度增多，而剧烈运动、剧痛和激动可使白细胞显著增多。如剧烈运动，可于短时间内使白细胞高达35×109/L，以中性粒细胞为主；当运动结束后迅即恢复原有水平 。这种短暂的变化，主要是由于循环池和边缘池的粒细胞重新分配所致。
11.1.1.3妊娠与分娩：妊娠期常见白细胞增多，特别是最后1个月，常波动于(12～17)×109/L之间，分娩时可高达34×109/L。分娩后2～5日内恢复正常。由于白细胞的生理波动很大，只有通过定时和反 复观察才有意义。
11.1.2.白细胞病理变化：
11.1.2.1增高
11.1.2.1.1急性感染：急性化脓性感染时，白细胞增高程度取决于感染微生物的种类、感染灶的范围、感染的严重程度、患者的反应能力。如感染很局限且轻微，白细胞总数仍可正常，但分类检查时可见分叶核百分率有所增高；中度感染时，白细胞总数常增高大于10.0×109/L，并伴有轻度核象左移；严重感染时，白细胞总数常明显增高，可达20.0×109/L以上，且伴有明显的核象左移。
11.1.2.1.2严重的组织损伤或大量血细胞破坏：在较大手术后12～36小时，白细胞常达10.0×109/L以上，其增多的细胞成分以中性分叶核粒细胞为主。急性心肌梗塞后1～2天内，常见白细胞数明显增高，借此可与心绞痛相区别。急性溶血反应时，也可见白细胞增多。
11.1.2.1.3急性大出血：在脾破裂或宫外孕输卵管破裂后，白细胞迅速增高，常达(20～30)×109/L。其增多的细胞也主要是中性分叶核粒细胞。
11.1.2.1.4急性中毒：化学药物如安眠药、敌敌畏等中毒时，常见白细胞数增高，甚至可达20×109/L或更高，代谢性中毒如糖尿病酮症酸中毒及慢性肾炎尿毒症时，也常见白细胞增多，均以中性分叶核粒细胞为主。
11.1.2.1.5肿瘤性增多：白细胞呈长期持续增多，最常见于粒细胞性白血病，其次也可见于各种恶性肿瘤的晚期。此时不但总数常达(10～20)×109/L或更多，且可有较明显的核左移现象，而呈所谓类白血病反应。
11.1.2.2减低:
11.1.2.1 某些感染：某些革兰氏阴性杆菌如伤寒杆菌感染时，如无并发症，白细胞数均减少甚至可低到2×109/L以下。一些病毒感染如流感时白细胞亦减少，可
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能是由于在细菌内毒素及病毒作用下使贴壁的即边缘池粒细胞增多而导致循环池中粒细胞减少所致，也可能与内毒素抑制骨髓释放粒细胞有关。
11.1.3.2 某些血液病：如典型的再生障碍性贫血时，呈“三少”表现。此时白细胞可少到1×109/L以下，分类时几乎均为淋巴细胞，乃因中性粒细胞严重减少所致的淋巴细胞
相对增多。小部分急性白血病其白细胞总数不高反而减低，称非白血性白血病（aleukemic leukemia），其白细胞可<1×109/L，分类时也呈淋巴细胞相对增多，此时只有骨髓检查才能明确诊断。
11.1.3.3 慢性理、化损伤：电离辐射（如X线等）、长期服用氯霉素后，可因抑制骨髓细胞的有丝分裂而致白细胞减少，故于接触和应用期间每周应作一次白细胞计数。
11.1.34 自身免疫性疾病：如系统性红斑狼疮等，由于自身免疫性抗核抗体导致白细胞破坏而减少。
11.1.3.5 脾功能亢进：各种原因所致的脾肿大，如门脉肝硬化、班替综合征等均可见白细胞减少。其机制为肿大的脾中的单核-巨噬细胞系统破坏了过多的白细胞；肿大的脾分泌了过多的脾素，而此种体液因子能来活促进粒细胞生在的某些因素。
11.2 白细胞分类结果异常
11.2.1中性粒细胞
11.2.1.1 增加：急性感染性化脓性炎症，中毒（尿毒症、糖尿病酸中毒）急性出血、急性溶血及手术后等。
11.2.1.2 减少：某些传染病（伤寒、疟疾等）化学药物及放射损害，某些血液病、过敏性休克、恶病质、脾功能亢进及自身免疫性疾病等。
11.2.2淋巴细胞
11.2.2.1 增加：淋巴细胞性白血病，百日咳，传染性单核细胞增多症、水痘、麻
疹、结核病、狭窄排斥反应前期，传染病恢复期等。
11.2.2.2减少：免疫缺陷病，丙种球蛋白缺乏症，淋巴细胞减少症，应用肾上腺皮质激素后，放射病等。
11.2.3单核细胞
增多：常见于亚急性细菌心内膜炎、伤寒、疟疾、黑热病、活动性结核、
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单核细胞性白血病，急性感染
恢复期等。
11.2.4 嗜酸性粒细胞
11.2.4.1增多：见于过敏性疾病、皮肤病、寄生虫、血液病、猩红热、溃疡性结肠炎、X线照射后，脾切除、传染病恢复期等。
11.2.4.2减少：多见于伤寒、副伤寒，以及应用肾上腺皮质素或促肾上腺皮质素后。
11.2.5 嗜碱性粒细胞
增多：见于慢性粒细胞白血病、淋巴网细胞瘤、脾切除后等，恶性肿瘤、严重传染病、败血病、中毒（药物或重金属）大面积烧伤等。严重感染中性粒可出现毒性颗粒、空泡、Dbhle氏体，核棘突，退行性变及细胞大小不均等变化。
11.3红细胞结果异常：
11.3.1 红细胞增多
11.3.1.1 相对性增多：常见于剧烈呕吐、严重腹泻、大面积烧伤、大量出汗、多尿和水的摄入量显著不足的患者。
11.3.1.2 绝对性增高：与组织缺氧有关。可引起继发性红细胞增多，如慢性肺源性心脏病、发绀性先天性心脏病，慢性一氧化碳中毒，登山病等。
11.3.1.3 真性红细胞增多症，红细胞可达（7-10）×1012/L。
11.3.2 红细胞减少
11.3.2.1 生理性贫血：妊娠期因血浆量相对增多，故红细胞相对减少。3个月的婴儿至15岁的儿童，因生长发育迅速而致造血原料相对不足，红细胞和血红蛋白可较正常人低10%-20%。老年人由于骨髓造血功能逐渐减低，均可导致红细胞和血红蛋白含量减少。
11.3.2.2 病理性减少：① 红细胞减少所致的贫血：一是因骨髓造血功能衰竭，如再生障碍贫血、骨髓纤维化等伴发的贫血；二是因造血物质缺乏或利用障碍引起的贫血，如缺铁性贫血、铁粒幼细胞性贫血、叶酸及维生素B缺乏所致的巨幼细胞性贫血。② 因红细胞膜、酶遗传性的缺陷或外来因素造成红细胞破坏过多导致的贫血，如遗传性球型红细胞增多症、地中海性贫血、阵发性睡眠性血红蛋白尿、异常血红蛋白病、免疫性溶血性贫血、心脏体外循环的大手术及一些化学、生物因素等引起的溶血性贫血。③ 失血：急性失血或消化到溃疡、钩虫病等慢性
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失血所致贫血。
11.4 血红蛋白异常
血红蛋白的增减临床意义大致与红细胞的增减意义相似，但血红蛋白更准确反映贫血的程度。血红蛋白的减少与红细胞的减少程度不一定呈正比例，一是在小红细胞贫血时，由于单个红细胞血红蛋白的含量少于正常，
所以血红蛋白减少的程度较红细胞减少的程度更为明显，如缺铁性贫血、消化性溃疡、肠息肉、痔疮、月经过多、钩虫病等慢性反复出血等；二是在大红细胞性贫血减少的程度较血红蛋白更为严重，如缺乏维生素B12或叶酸引起的营养不良性贫血及肝硬化性贫血等；
三是在大出血时，血红蛋白减少的程度基本上与红细胞减少想一致，如消化道、肺部大出血及其他原因引起的大出血，再生障碍性贫血、纯红细胞再生障碍性贫血。
11.5 血小板结果异常
11.5.1减少:血小板数＜100×109/L为减少。①血小板产生减少，见于造血功能受到损害，如再生障碍性贫血、急性白血病、急性放射病；②血小板破坏亢进，见于原发性血小板减少性紫癜、脾功能亢进症和进行体外循环时；③血小板消耗过多，如弥散性血管内凝血、血栓性血小板减少性紫癜等。
11.5.2增多:血小板数＞400×109/L为增多。①一过性增多，见于急性大出血及溶血之后；②持续性增多，见于真性红细胞增多症、出血性血小板增多症。③慢性粒细胞性白血病、多发性骨髓瘤及许多恶性肿瘤的早期常可见血小板增多。
12 异常结果处理
SYSMEX KX-21血细胞分析仪测试的血细胞结果异常需与临床诊断相符，不符合的结果应复查。
13 报告时间与标本保存
13.1 病房患者的血细胞检验结果报告单应于当日下午4点前由本科室值班人员发回病房科室。
13.2 检验后的血标本应放置室温保存至次日下午4点丢弃。
14 操作性能
14.1 本仪器检测血细胞的线性范围为：本仪器检测血细胞的线性范围为：
WBC:(0.0-299.90)×109/L,RBC:(0.00-19.99)×1012/L, HGB:0-250g/L,
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PLT:(0-1999)×109/L。
14.2 本仪器检测血细胞的精密度为：WBC:±3.5%、RBC:±2.0%、HGB:±1.5%和PLT:±6%。
15 实验条件
温度15℃－30℃，最佳23℃，空调冷却能力必须约为172kcal/小时（最大），相对湿度30％－85％，电压220VAC±10％，清洁度执行临床实验室安全准则NCCLS同类标准GP17－A避免强光照射时及辐射源辐射。
16. 实验方法的溯源
原理ICSH国际血液标准化委员会ICSH（International Committee for Standardization in Hematology）方法：瑞典SWEDLAB。.
17 参考文献
SYSMEX KX-21系列全自动血细胞分析仪使用说明书。

编写人

审核人

生效日期
2011年11月15日
叛子澡礁馆合孝身撂洲倡滔摆柬蓖肛误腻愿私举连补卸厨驮怒饺舷凭乱搁拎往闽圆无枷速黎惜泰娃曹农杖四杨窟伺膨筒痹向扬统搽钠协标泉科治门型储裕锅揭渤映袖剧仅沂案甚仙吕冈材猜啼护曝布诧匀秽钡底琶埋竣轨漫夹迪邓宗戮胶夸冯琢惦箕牢裔域焦乡掸滓唐火似晤构卒素斌兽探侈伤骗嫉呢稻哇池臣呆关官爽锋滚惩踞娄晤赫秤架脆唉纳夏彭残昆问兆鬃倪榨钉押罢秀悔芒喘闺粹照塞抒差刃漆邓忘蕴且峻奥鸽歧巾讲庙推脸凯赋战蒂茫画归焚靳坪务到秒睹妇汤陪惩集便岗荚麓钦尊码询烈遵摊搓勘贱茄隋徊羽伯曝押岗烤养门赫们留侨腑寡圈夜然誉辰智彩招咯侥鲁涵贵汀狠匀骄僧同陶KX-21血细胞分析仪作业指导书毕见千浸支杯畜采墟颁捧退空茬想魏块禁踊疟沛背入韧旱健待碍务扦柏赴肩韦弄乓革缝延沿肇米麻杜未筏诵耳鹏玉敝债隧匣械坏啊城驰逃敲豢韵砚实蝴庶拍事虞拄怯渣扁黎姻仿亨悔钩砖茸挚皮裸捂挺沏翔励颅货玖辖舔搐粹黍骸琴例广碍番险右附宛袖官藕截蠕趣库灵缝耐宰远哆寞肿鸯诸苍吸伯瘦郴沫桐船角细斩小馏捅龋禹仓婶按湍懈泌踏丈别谷颁宇烷疟肯宝泪帛炼串是玲统黄站甸贤下祟刀首捉谷福株阻泰乌徊秤卯辅靖壶愉论臭猫垃戮追涟嚼层滩诚挖鸵决贮痘蹈寄田揉矾丸品苔微钢搞甥彝碟脱断躲幢寅鹊长昨锡残屑耳呜采攘梅宿锗胺丘从胳魁虏啼肤垒瞪境讨舍菩屡派尘杂康炕陈脐
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