1、 ICS 65.020.01 CCS B16 15 内蒙古自治区地方标准 DB15/T 25602022 油菜抗菌核病室内鉴定技术规程 Technical code of practice on indoor identification of canola against sclerotinia sclerotiorum 2022-05-25 发布 2022-06-25 实施 内蒙古自治区市场监督管理局 发 布 DB15/T 25602022 I 前言 本文件按照GB/T 1.12020标准化工作导则 第1部分：标准化文件的结构和起草规则的规定起草。 本文件由内蒙古自治区农牧厅提出。 本文件
2、由内蒙古自治区农业标准化技术委员会（SAM/TC 20）归口。 本文件起草单位：内蒙古自治区农牧业科学院、特泥河农牧场有限公司。 本文件主要起草人：宋培玲、李子钦、燕孟娇、皇甫海燕、杨永青、贾晓清、皇甫九茹、郭晨、史志丹、赵丽丽。 DB15/T 25602022 1 油菜抗菌核病室内鉴定技术规程 1 范围 本文件适用于内蒙古春油菜生产品种、新育成品种、区域试验品种、亲本及育种中间材料的菌核病抗性鉴定和抗性评价。 本文件适用于内蒙古春油菜品种、品系室内抗菌核病鉴定。 2 规范性引用文件 本文件没有规范性引用文件。 3 术语和定义 下列术语和定义适用于本文件。 油菜菌核病 Sclerotinia
3、stem rot of oilseed rape 核盘菌(S. sclerotiorum )侵染引起的油菜病害，危害油菜的茎、叶、花、角果、种子。油菜各发育阶段均可感病，以开花结果期发病最重。 叶片病斑呈灰褐色或黄褐色，有同心轮纹、外缘具黄色晕圈，干燥时病斑破裂穿孔；皮层纵裂，维管束外露如麻，茎髓部被蚀空，茎内形成黑色鼠粪状菌核；花瓣感染，形成水渍状斑，易腐烂脱落；角果产生不规则白色病斑，内、外部均可形成菌核；种子多成瘪粒，少数种子表面长有菌丝。 4 接种菌株 从内蒙古春油菜主栽区发病植株上分离纯化并鉴定的核盘菌菌株（S. sclerotiorum），中等致病力。 5 培养基的配制 PDA培养
4、基：马铃薯200 g、葡萄糖20 g、琼脂粉15 g20 g，蒸馏水定容至1000 mL。 6 病原菌的培养 将低温保存的核盘菌菌丝体接种在PDA平板上， 22 恒温培养箱中活化培养。 待菌落长到培养皿直径的3/4 时，用直径为4 mm的打孔器在菌落边缘打取菌饼，接于新的PDA平板中央，22 恒温培养箱中培养。待菌落长到培养皿直径的3/4 时，用相同方法的打取菌饼用于接种。 DB15/T 25602022 2 7 鉴定品种幼苗培养 将供试材料及对照品种（中油821）的种子播种在装有无菌土的营养钵（13 cm13 cm）中，每个品种播种3钵，每钵播10粒，置于25 、16 h/8 h（光照/黑暗
5、）条件下，待幼苗生长到34片真叶时，用于接种。 8 抗性鉴定 取油菜第3片或第4片真叶，用水冲洗干净，滤纸吸干多余水分。将叶片正面朝上均匀的放在铺有滤纸的不锈钢盘内，每个叶片接种2个菌饼，对称的放置在中脉的两侧，有菌丝的一面紧贴叶面，每个品种接种10个叶片。用保鲜膜封住不锈钢盘，于22 光照培养箱中观察病斑的生长情况。 9 病情调查及抗性水平划分 接种5 d后，十字交叉逐叶测量病斑直径，以中油821为对照，参照孙晓敏的方法计算供试材料抗病指数。抗病指数计算公式如下。 (I) = ( YCK Y) / YCK。（1） 式中： I抗病指数； YCK对照品种病斑长度； Y 参试材料病斑长度。 根据抗病指数划分油菜对菌核病的抗性水平，其划分标准见表1。 表1 油菜菌核病抗性水平划分标准 抗性类型 抗病 感病 高抗 HR 中抗 MR 低抗 LR 低感 LS 中感 MS 高感 HS 抗病指数 RI RI0.6 0.3RI0.6 0.0RI0.3 -0.3RI0.0 -0.6RI-0.3 RI-0.6 DB15/T 25602022 3 参考文献 1 孙晓敏,张晓娟,李英等.陕西汉中地区抗菌核病油菜材料检测 J 江苏农业科学， 2016，44(7) : 180182
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