临床标本的细菌学检查.ppt

临床床标本的本的细菌学菌学检查第一第一节 血液及骨髓血液及骨髓标本本1.一一 血液血液标本本n血液血液标本的本的细菌培养是菌培养是诊断菌血症或断菌血症或败血血症的基本方法。症的基本方法。n如从患者血液中如从患者血液中检出出细菌，一般菌，一般应视为病病原菌。原菌。n常常见的病原菌主要有金黄色或表皮葡萄球的病原菌主要有金黄色或表皮葡萄球菌、菌、链球菌（球菌（A、B群、肺炎群、肺炎链球菌等）、球菌等）、肠球菌、球菌、产单核核细胞李斯特菌、胞李斯特菌、脑膜炎奈膜炎奈瑟菌、瑟菌、伤寒及副寒及副伤寒沙寒沙门菌和菌和厌氧菌等。氧菌等。2.（一）（一）标本采集本采集n1.采血采血时间及次数及次数n2.抽血部位及抽血量抽血部位及抽血量(二二)检验方法和操作流程方法和操作流程1.操作操作过程程3.血血液液及及骨骨髓髓标本本细菌菌学学检验方方法法和和操操作作流流程程4.3.报告方式告方式 培养培养7d无菌生无菌生长者者报告告“培养培养7d无菌生无菌生长”。查见细菌菌报告菌名和告菌名和药敏敏结果。果。4.菌血症、菌血症、败血症的血症的诊断断标准准 1）两次培养均出）两次培养均出现同一种同一种细菌（可排除菌（可排除污染）；染）；2）发病星期后血中抗体滴度上升。病星期后血中抗体滴度上升。2.培养瓶中有培养瓶中有细菌生菌生长时的不同表的不同表现。5.第二第二节 脑脊液脊液标本本n脑脊液的脊液的细菌学菌学检查对于于细菌性菌性脑膜炎的膜炎的诊断有断有重要价重要价值。n正常人的正常人的脑脊液是无菌的，脊液是无菌的，检出出细菌提示有菌提示有细菌菌性（急性化性（急性化脓性、性、结核性等）核性等）脑膜炎。膜炎。n常常见的病原菌主要有的病原菌主要有脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、菌、链球菌（球菌（A、B群和肺炎群和肺炎链球菌）、葡萄球菌、球菌）、葡萄球菌、产单核核细胞李斯特菌、胞李斯特菌、结核分枝杆菌等。核分枝杆菌等。6.（一）（一）标本的采集本的采集n脑脊液无脊液无论涂片或培养必涂片或培养必须于于采集后立即送采集后立即送检不宜将其置于不宜将其置于冰箱保存，否冰箱保存，否则影响影响检出率。出率。7.脑脊脊液液标本本细菌菌学学检验方方法法和和操操作作流流程程图8.（二）（二）检验方法和操作流程方法和操作流程n1.涂片涂片检查 (1)一般一般细菌涂片菌涂片检查：例如：革例如：革兰阴性、凹面相阴性、凹面相对的球菌，可能是的球菌，可能是脑膜膜炎奈瑟菌；炎奈瑟菌；链状排列的革状排列的革兰阳性球菌；阳性球菌；长丝状等多形状等多形态性的革性的革兰阴性杆菌，可能是流感嗜血杆菌。阴性杆菌，可能是流感嗜血杆菌。(2)结核分枝杆菌涂片核分枝杆菌涂片检查 (3)新生新生隐球菌涂片球菌涂片检查n2.分离培养分离培养n3.报告方式告方式 培养培养48小小时，仍无菌生，仍无菌生长者者报告告“培培养养2天无天无细菌生菌生长”。查见细菌菌报告告细菌，菌，报告菌名告菌名和和药敏敏结果。果。9.第三第三节 呼吸系呼吸系统标本本n下呼吸道的痰液是无下呼吸道的痰液是无细菌的，而菌的，而经口腔咳出的痰口腔咳出的痰带有多种上呼吸道的正常寄生菌（如草有多种上呼吸道的正常寄生菌（如草绿色色链球球菌）。若从患者痰菌）。若从患者痰标本中本中查见致病菌或条件致病致病菌或条件致病菌，提示有上呼吸道感染。菌，提示有上呼吸道感染。n常常见的病原菌主要有肺炎的病原菌主要有肺炎链球菌、球菌、A群群链球菌、球菌、金黄色葡萄球菌、卡他布金黄色葡萄球菌、卡他布兰汉菌、白喉棒状杆菌、菌、白喉棒状杆菌、结核分枝杆菌、核分枝杆菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肠杆菌和杆菌和军团菌。菌。10.一一 痰痰标本本（一）（一）标本采集本采集n1.痰痰标本的采集本的采集时间n2.标本采集方法本采集方法 (1)自然咳痰法自然咳痰法 (2)气管气管镜下采集法下采集法 (3)气管穿刺法气管穿刺法 (4)结核分枝杆菌核分枝杆菌标本收集法：收集本收集法：收集24H痰液以痰液以提高阳性提高阳性检出率。出率。11.呼呼吸吸系系统标本本细菌菌学学检验方方法法和和操操作作流流程程12.（二）（二）检验方法和操作流程方法和操作流程n1.肉眼肉眼观察察n2.涂片涂片检查 其一依据其一依据100镜下下观察白察白细胞胞和上皮和上皮细胞数目多少来胞数目多少来评定定(如表如表)；其二是初步；其二是初步判定是否有病原存在。判定是否有病原存在。分分级白白细胞（个）胞（个）上皮上皮细胞（个）胞（个）A252525C25痰痰标本本镜下分下分类注：注：A、B两种情况的痰两种情况的痰标本适合做培养，本适合做培养，C不合适，不合适，应重新留重新留标本本13.（1）一般）一般细菌涂片菌涂片（2）结核分枝杆菌涂片核分枝杆菌涂片（3）放）放线菌及菌及诺卡菌涂片卡菌涂片n3.培养培养n（1）培养）培养标本的本的选择：应选择粘液痰作涂片。粘液痰作涂片。（2）痰）痰标本培养前本培养前处理：用无菌理：用无菌盐水将痰洗水将痰洗涤3次，次，加入等量的加入等量的1%胰胰酶溶液（溶液（PH7.6)，37C水浴水浴90min，使痰液均，使痰液均质化后化后备用。用。（3）分离培养）分离培养n4.报告方式告方式 痰痰标本培养本培养48小小时后后仅有草有草绿色色链球菌生球菌生长而无致病菌生而无致病菌生长，报告告“正常菌群正常菌群”。查出的致病菌，出的致病菌，报告菌名和告菌名和药敏敏结果，同果，同时报告告细菌菌的量化指的量化指标。14.分分级划划线区菌落数目区菌落数目第第1区区第第2区区第第3区区少少见（+）101051055表表5-3 痰痰标本在平板上的菌落量化指本在平板上的菌落量化指标15.二二 咽拭咽拭标本本n正常咽正常咽试有多种上呼吸道的正常菌群（如有多种上呼吸道的正常菌群（如草草绿色色链球菌）。若从患者球菌）。若从患者标本中本中查出致出致病菌提示上呼吸道有病菌提示上呼吸道有细菌感染（如急、慢菌感染（如急、慢性扁桃体炎，咽炎，喉炎等）性扁桃体炎，咽炎，喉炎等）n常常见的病原菌主要有金黄色葡萄球菌、表的病原菌主要有金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、化皮葡萄球菌、化脓性性链球菌、微球菌和棒球菌、微球菌和棒状杆菌等）。状杆菌等）。16.n（一）（一）标本采集本采集n（二）（二）检验方法和操作流程方法和操作流程 1.涂片涂片检查（先培养后涂片）（先培养后涂片）2.分离培养分离培养 3.报告方式告方式 同痰同痰标本本检查。17.第四第四节 穿刺液穿刺液标本本n穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关穿刺液包括胸水、腹水、心包液、关节液及鞘膜液及鞘膜液等）。液等）。n正常穿刺液是无菌的，若从患者穿刺液中正常穿刺液是无菌的，若从患者穿刺液中查见致致病菌或条件致病菌提示病菌或条件致病菌提示该部位有部位有细菌感染。菌感染。n胸腔感染的病原菌以胸腔感染的病原菌以结核分枝杆菌多核分枝杆菌多见：腹腔感：腹腔感染的病原菌以染的病原菌以肠道道细菌如大菌如大肠挨希菌、挨希菌、粪肠球菌，球菌，以及以及结核分枝杆菌多核分枝杆菌多见：心包炎和关：心包炎和关节腔液以金腔液以金黄色葡萄球菌、溶血性黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、大球菌、大肠埃希菌和埃希菌和铜绿假假单胞菌多胞菌多见。18.n（一）（一）标本采集本采集n（二）（二）检验方法和操作流程方法和操作流程 1.涂片涂片检查（先接种后涂片）（先接种后涂片）2.分离培养分离培养 （1）普通）普通细菌培养：菌培养：（2）厌氧菌培养氧菌培养 （3）结核菌培养核菌培养 3.报告方式告方式 培养培养48h无无细菌生菌生长，报告告“培培养养2 天无天无细菌生菌生长”。查见细菌，菌，报告菌名和告菌名和药敏敏结果。果。19.穿穿刺刺液液标本本细菌菌学学检验方方法法和和操操作作流流程程20.第五第五节 泌尿、生殖道泌尿、生殖道标本本一一 尿液尿液标本本n中段尿培养加中段尿培养加计数数对于泌尿道感染的于泌尿道感染的诊断有重要断有重要价价值。细菌培养必菌培养必须结合菌落合菌落计数辨数辨别是否是否为病病原菌。原菌。n有致病菌或条件致病菌生有致病菌或条件致病菌生长，菌落，菌落计数数105/ml，提示感染（膀胱炎，提示感染（膀胱炎，肾盂盂肾炎、炎、肾或膀胱或膀胱结核等）。核等）。n常常见病原菌主要有大病原菌主要有大肠埃希菌、葡萄球菌、埃希菌、葡萄球菌、链球球菌、菌、变形杆菌和形杆菌和伤寒沙寒沙门菌等。菌等。21.（一）（一）标本采集本采集 1.中段尿中段尿标本采集法本采集法 （1）女性：）女性：（2）男性）男性（3）儿童、）儿童、婴儿儿（4）两）两侧肾盂尿盂尿（5）膀胱穿刺）膀胱穿刺22.（二）（二）检验方法和操作流程方法和操作流程 1.涂片涂片检查 （1）一般）一般细菌及淋病奈瑟菌菌及淋病奈瑟菌 （2）念珠菌）念珠菌 （3）结核分枝杆菌核分枝杆菌 2.一般一般细菌培养菌培养 如培养如培养2d无无细菌生菌生长，即可弃，即可弃去。去。（1）倾注平板法注平板法 （2）平板接种）平板接种环法法 （3）标准接种准接种环法：若定量接种法：若定量接种环含量含量为.001ml，则整个平板菌落数超整个平板菌落数超过100个，可个，可报告告“菌落菌落数数105/ml”。（4）Uricult 半定量法半定量法23.尿尿液液标本本细菌菌检验方方法法和和操操作作流流程程24.Uricult 操作步操作步骤25.Uricult 菌落比密菌落比密图Uricult 细菌种菌种类标准模式准模式图26.n4.特殊菌落培养特殊菌落培养（1）淋病奈瑟菌培养）淋病奈瑟菌培养（2）厌氧菌培养氧菌培养（3）结核分枝杆菌培养核分枝杆菌培养n5.报告方式告方式 培养培养48h无无细菌生菌生长，报告告“2天无天无细菌生菌生长”。查见细菌，菌，报告菌名告菌名及其菌落及其菌落计数（菌落数数（菌落数/ml）和）和药敏敏结果。果。27.二二 生殖道生殖道标本本n正常的内生殖器是无菌的，而外生殖器正常的内生殖器是无菌的，而外生殖器（包括男性尿道口和女性阴道）有多种（包括男性尿道口和女性阴道）有多种细菌寄生。菌寄生。n查见病原菌提示有病原菌提示有细菌感染。菌感染。n常常见的病原菌主要有葡萄球菌、的病原菌主要有葡萄球菌、肠球菌、球菌、链球菌、淋病奈瑟菌、大球菌、淋病奈瑟菌、大肠埃埃细菌、菌、变形形杆菌等。杆菌等。28.n（一）（一）标本采集本采集 1.女性生殖道女性生殖道标本本 2.男性生殖道男性生殖道标本本 3.梅毒螺旋体梅毒螺旋体标本本29.n（二）（二）检验方法和操作流程方法和操作流程 1.涂片涂片检查 （1）革）革兰染色染色镜检 （2）梅毒螺旋体涂片）梅毒螺旋体涂片检查 2.分离培养分离培养 （1）普通）普通细菌培养菌培养 （2）淋病奈瑟菌培养）淋病奈瑟菌培养 （3）阴道加特）阴道加特纳菌培养菌培养 （4）报告方式：如告方式：如查见淋病奈瑟菌、阴道加特淋病奈瑟菌、阴道加特纳菌等病原菌，菌等病原菌，报告菌名和告菌名和药敏敏结果。果。30.生生殖殖道道标本本细菌菌学学检验方方法法和和操操作作流流程程31.第六第六节 粪便便标本本n正常情况下正常情况下肠道中有多种道中有多种细菌。菌。n引起感染性腹泻的病原微生物有：引起感染性腹泻的病原微生物有：（1）细菌性：菌性：产毒素型腹泻、侵毒素型腹泻、侵袭型腹泻、型腹泻、食物中毒、慢性腹泻。食物中毒、慢性腹泻。（2）真菌性）真菌性 （3）病毒性）病毒性32.粪便便标本本细菌菌学学检验方方法法和和操操作作流流程程33.n（一）（一）标本采集本采集n1.自然排便采集自然排便采集n2.直直肠试子子n（二）（二）检验方法和操作流程方法和操作流程n1.涂片涂片检查 粪便便标本因各种正常菌群含量甚多，本因各种正常菌群含量甚多，仅以染色性和形以染色性和形态无法分无法分辩是否是否为病原菌。因此，病原菌。因此，粪便便标本一般不作涂片本一般不作涂片检查。n2.培养培养n（1）沙）沙门-志志贺菌培养：菌培养：直接划直接划线接种于腔接种于腔选择性培养基；性培养基；用接种用接种针挑挑选SS上不上不发酵乳糖菌酵乳糖菌落，分落，分别接种于三糖接种于三糖铁琼脂（脂（KIA)和尿素和尿素-动力力-靛基靛基质培养基；培养基；生化生化反应，A-F多价“O”血清或因子血清进行鉴定。34.（2）致病性大）致病性大肠埃埃细菌培养菌培养（3）霍乱弧菌培养）霍乱弧菌培养（4）副溶血弧菌培养）副溶血弧菌培养（5）小）小肠结肠炎耶炎耶尔森菌培养森菌培养（6）空）空肠弯曲菌培养弯曲菌培养（7）葡萄球菌培养）葡萄球菌培养（8）艰难梭菌培养梭菌培养（9）真菌培养）真菌培养（10）菌群失）菌群失调的的细菌学菌学检验3.报告方式告方式35.第第7节 脓液及液及创伤感染分泌物感染分泌物标本本n化化脓性感染可由性感染可由单种或多种种或多种细菌引起。菌引起。n常常见病原菌主要有金黄色葡萄球菌、化病原菌主要有金黄色葡萄球菌、化脓性性链球菌、大球菌、大肠埃希菌、埃希菌、铜绿假假单胞菌、胞菌、变形杆菌和形杆菌和结核分枝杆菌、核分枝杆菌、诺卡菌，以及卡菌，以及梭杆菌和梭杆菌和拟杆菌等。杆菌等。36.脓液液和和创面面分分泌泌物物标本本细菌菌学学检查方方法法和和操操作作流流程程37.n（一）（一）标本采集本采集 1.开放性开放性脓肿和和脓性分泌物性分泌物 2.大面大面积烧伤的的创面分泌物面分泌物 3.封封闭性性脓肿n（二）（二）检验方法和操作流程方法和操作流程 1.涂片涂片检查 根据形根据形态和染色特点，可和染色特点，可报告告“查见革革兰性性细菌，形似菌，形似 菌菌”或或报告告“未未查见习菌菌”。2.培养培养 （1）普通菌培养）普通菌培养 （2）厌氧菌培养氧菌培养 （3）嗜血杆菌及奈瑟菌培养）嗜血杆菌及奈瑟菌培养 （4）结核分枝杆菌培养核分枝杆菌培养 （5）真菌培养）真菌培养 3.报告方式告方式 查见致病菌，致病菌，报告菌名和告菌名和药敏敏结果。果。38.后面内容直接删除就行资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用39.主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！40.致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求41.感感谢您的您的观看和下看和下载The user can demonstrate on a projector or computer,or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field42.后面内容直接删除就行资料可以编辑修改使用资料可以编辑修改使用43.主要经营：网络软件设计、图文设计制作、发布广告等公司秉着以优质的服务对待每一位客户，做到让客户满意！44.致力于数据挖掘，合同简历、论文写作、PPT设计、计划书、策划案、学习课件、各类模板等方方面面，打造全网一站式需求45.感感谢您的您的观看和下看和下载The user can demonstrate on a projector or computer,or print the presentation and make it into a film to be used in a wider field46.