啤酒中甲醛含量的检测.ppt

化学与生物工程学院 应用化学0901班 王荣芝 200967090112气相色谱气相色谱-质谱质谱-选择离子检测选择离子检测(GC-MS-SIM)测定测定啤酒啤酒中的甲醛含量中的甲醛含量目录目录n n引言n n啤酒中甲醛的来源n n目前对啤酒中甲醛的检测方法n n用GC-MS-SIM联用检测啤酒中的甲醛n n甲醛对人体的危害引言引言n n危害：甲醛已被确定为可疑致癌物，明令啤酒行业禁止使用。n n原因：一些不法商人为缩减产品成本，在啤酒中添加甲醛。n n现状：目前国产啤酒中95%的都加入了甲醛作稳定剂，去除多酚，避免絮状沉淀。啤酒中甲醛的来源啤酒中甲醛的来源n n来源于原料来源于原料(主要是麦芽主要是麦芽)及所使用的水及所使用的水 。n n来源于啤酒生产过程中麦汁的制备时添加甲醛的残留来源于啤酒生产过程中麦汁的制备时添加甲醛的残留 n n来源于啤酒发酵过程中酵母的代谢产物来源于啤酒发酵过程中酵母的代谢产物 n n来源于啤酒发酵过程中污染微生物的代谢产物来源于啤酒发酵过程中污染微生物的代谢产物 n n来源于罐体、管道杀菌中使用的甲醛来源于罐体、管道杀菌中使用的甲醛 Logo目前目前对啤啤酒中甲酒中甲醛的的检测方法方法分光光度法分光光度法荧光分析法荧光分析法气气谱法法其优点是设备简单、其优点是设备简单、快速方便，缺点是快速方便，缺点是 易受干扰，造成假易受干扰，造成假 阳性结果，准确阳性结果，准确 度较差。度较差。优点；操作点；操作简单、快速、快速、灵灵敏度高、准确度高，敏度高、准确度高，且且检出最低下出最低下线达达 0.005mg/L。缺点：此方法缺点：此方法尚尚 不不够成熟，有待成熟，有待进 一方面的一方面的研研究。究。气谱法包括气谱法包括GC和和HPLC.其优点是样品其优点是样品经色谱柱分离后能与经色谱柱分离后能与共存物分开，定性、定共存物分开，定性、定量较准确，可以作为判量较准确，可以作为判 定依据。定依据。GC法：由于法：由于甲醛分子质量太小，直甲醛分子质量太小，直接进接进GC分析时出峰太快。分析时出峰太快。且在且在FID中检测器无响中检测器无响应。应。HPLC也因甲醛极也因甲醛极性太大与溶剂峰同时性太大与溶剂峰同时流出在紫外无吸收而流出在紫外无吸收而无法检测。无法检测。Logo仪器器与与试剂 用用GC-MS-SIM联用用检测啤啤酒中的酒中的甲甲醛1 测试条条件件2啤啤酒的酒的预处理及理及检测 3标准曲准曲线的的绘制制 4测量量条条件件对实验的影的影响响5一、仪器与试剂一、仪器与试剂n n仪器：气相色谱气相色谱-质谱联用仪；超声波发生器质谱联用仪；超声波发生器。n n试剂：甲醛标准溶液：取含量为甲醛标准溶液：取含量为36%38%36%38%的甲醛，用水的甲醛，用水配制成配制成1g/L 1g/L 标准储备液，置于冰箱内可保存标准储备液，置于冰箱内可保存3 3个月，使用个月，使用时再逐级稀释成所需浓度。衍生试剂：称取时再逐级稀释成所需浓度。衍生试剂：称取2.0g,2-42.0g,2-4二硝基二硝基苯肼苯肼(DNPH(DNPH），加），加2mol/L Hcl2mol/L Hcl溶解定容至溶解定容至1L1L，配制成，配制成2g/L 2g/L 的衍生试剂，置于棕色瓶中，此溶液可保存的衍生试剂，置于棕色瓶中，此溶液可保存3 3 个月；石油个月；石油醚、盐酸等，分析纯；二蒸馏水醚、盐酸等，分析纯；二蒸馏水.Logo二、二、测试条条件件n n气相色谱条件：色谱柱：色谱柱：SE-30(15m0.2mm0.33um0SE-30(15m0.2mm0.33um0弹性石英毛细管柱，；弹性石英毛细管柱，160160240240（1010/min),/min),保持保持5min5min。载气：高纯载气：高纯HeHe。柱前压。柱前压40KPa40KPa，分流比，分流比10:110:1，溶剂延迟，溶剂延迟2min2min，进样，进样1uL1uL。n n质谱条件：EIEI离子源，电子能量离子源，电子能量70eV70eV，四极杆温度，四极杆温度150150,离子源温度离子源温度离子源温度离子源温度230230,电子倍增器电压电子倍增器电压电子倍增器电压电子倍增器电压2300V2300V，GM-MSGM-MS接口温度接口温度接口温度接口温度280280，选择离子检测，选择离子检测，选择离子检测，选择离子检测（SIMSIM）m/z79m/z79、210210。甲醛标样衍生物的气相。甲醛标样衍生物的气相。甲醛标样衍生物的气相。甲醛标样衍生物的气相色谱色谱色谱色谱-质谱总离子流图见图质谱总离子流图见图质谱总离子流图见图质谱总离子流图见图1 1。三、啤酒的预处理三、啤酒的预处理三、啤酒的预处理三、啤酒的预处理n n取新鲜啤酒样，超声去除泡沫，滤纸快速过滤后，再通过取新鲜啤酒样，超声去除泡沫，滤纸快速过滤后，再通过有机膜过滤，所得酒样进行下一步衍生处理。有机膜过滤，所得酒样进行下一步衍生处理。n n衍生化处理：取衍生化处理：取20mL 20mL 液体样品或固体样品提取液，加液体样品或固体样品提取液，加2mL DNPH2mL DNPH衍生试剂，混合均匀，避光衍生衍生试剂，混合均匀，避光衍生6h6h。标准溶液。标准溶液与样品同时进行衍生。衍生产物与样品同时进行衍生。衍生产物2.4-2.4-二硝基苯腙用石油醚二硝基苯腙用石油醚萃取萃取3 3次，每次次，每次10mL10mL，合并萃取液于，合并萃取液于6060水浴浓缩后，移水浴浓缩后，移入入5mL 5mL 容量瓶，定容至刻度容量瓶，定容至刻度。GCMSGCMSMSMS迸样分析检迸样分析检测测。四、标准曲线的绘制四、标准曲线的绘制n n准确移取适量甲醛、用乙醇稀释，分别配成准确移取适量甲醛、用乙醇稀释，分别配成0.050.05、0.10.1、0.20.2、0.30.3、0.5 mg0.5 mgL(L(甲醛甲醛)的系列标准溶液，进行的系列标准溶液，进行GC-MC-SIMGC-MC-SIM分析分析.。以峰面。以峰面积（积（A A）和浓度（）和浓度（c c）作定量工作曲线，线性方程为）作定量工作曲线，线性方程为A=-A=-848.6+114800c,848.6+114800c,相关系数为相关系数为0.985.0.985.在在0.050.20.050.2浓度范围内线性关系良浓度范围内线性关系良好，最低检测浓度为好，最低检测浓度为0.01mg/L.0.01mg/L.国家规定啤酒中甲醛的含量不得超过国家规定啤酒中甲醛的含量不得超过2mg/L,2mg/L,故此本方法检出限完全满足食品分析的要求。故此本方法检出限完全满足食品分析的要求。五、测定条件对实验的影响五、测定条件对实验的影响n n超声波提取对实验的影响超声波提取对实验的影响n n衍生剂（衍生剂（DNPH)DNPH)条件的优化。条件的优化。DNPHDNPH用量过大会吸附于色谱柱上，用量过大会吸附于色谱柱上，对色谱柱造成损伤，但用量过小将导致甲醛衍生不完全。本实验选对色谱柱造成损伤，但用量过小将导致甲醛衍生不完全。本实验选择择2mL2mL为佳。甲醛衍生物的峰面积随着衍生时间的增加而增大，为佳。甲醛衍生物的峰面积随着衍生时间的增加而增大，6h6h后趋于稳定，实验选择衍生时间为后趋于稳定，实验选择衍生时间为6h.6h.n n检测离子的选择。依据选择离子的原则，应尽量选择质荷比在高端检测离子的选择。依据选择离子的原则，应尽量选择质荷比在高端的离子，以减少干扰；同时应选择丰度较大的离子，以提高灵敏度。的离子，以减少干扰；同时应选择丰度较大的离子，以提高灵敏度。本实验选择本实验选择2,4-2,4-二硝基苯腙的碎片离子丰度最大的峰为二硝基苯腙的碎片离子丰度最大的峰为m/z79m/z79，分子，分子离子离子m/z210.m/z210.提取时间提取时间（min)10 20 30 40 50 60峰面积峰面积（A)9241086 1197132012131240甲醛对人体的危害甲醛对人体的危害n n甲醛具有强烈的致癌和促癌作用。甲醛对人体健康的影响主要表现在嗅觉异常、刺激、过敏、肺功能异常、肝功能异常和免疫功能异常等方面。n n长期接触低剂量甲醛可引起慢性呼吸道疾病，引起鼻咽癌、结肠癌、脑瘤、月经紊乱、细胞核的基因突变，DNA单链内交连和DNA与蛋白质交连及抑制DNA损伤的修复、妊娠综合症、引起新生儿染色体异常、白血病，引起青少年记忆力和智力下降。n n希望大家能能理性对待室内空气和食品质量安全，关注自己和家人的健康，使家远离甲醛，远离疾病。Thank you