2018中药显微鉴别.ppt

1中药显微鉴别应用简介23洋葱表皮细胞结构图洋葱表皮细胞结构图4洋葱表皮细胞结构洋葱表皮细胞结构5主要内容主要内容u一、显微鉴别的概述一、显微鉴别的概述u二、常用中药材的显微鉴别特征二、常用中药材的显微鉴别特征u三、显微镜的结构与使用简介三、显微镜的结构与使用简介u四、中药显微制片操作四、中药显微制片操作u五、中药材及中成药显微鉴别实例五、中药材及中成药显微鉴别实例6显微鉴别概述显微鉴别概述显微鉴别显微鉴别利用显微镜观察药材的组织构造、细胞形状及其后利用显微镜观察药材的组织构造、细胞形状及其后 含物的特征，用以鉴定药材真伪含物的特征，用以鉴定药材真伪的一种方法。的一种方法。特点特点 经济、简便，快速、直观，取样量少，专属性强经济、简便，快速、直观，取样量少，专属性强历史历史 上世纪上世纪5050年代，中国科学院院士、中国生药学研究的创始人徐国钧先年代，中国科学院院士、中国生药学研究的创始人徐国钧先生开始开展中药材及中成药显微鉴别研究，先后完成石斛夜光丸、六味生开始开展中药材及中成药显微鉴别研究，先后完成石斛夜光丸、六味地黄丸等地黄丸等100100多种中成药的显微鉴别，打破了多种中成药的显微鉴别，打破了“丸散膏丹，神仙难辨丸散膏丹，神仙难辨”传传统认识，为后人留下了宝贵的显微鉴别经验和资料。统认识，为后人留下了宝贵的显微鉴别经验和资料。应用应用 中国药典中国药典从从19771977年版一部开始，在中药材和中药成方制剂年版一部开始，在中药材和中药成方制剂 鉴别鉴别 项下收录了显微鉴别内容，此后历版项下收录了显微鉴别内容，此后历版药典药典不断充实并予以完善。不断充实并予以完善。7891011显微鉴别概述显微鉴别概述u定义：定义：u特点：特点：经济、简便，快速、直观，取样量少，专属性强经济、简便，快速、直观，取样量少，专属性强12常用中药材的显微鉴别特征常用中药材的显微鉴别特征u植物细胞植物细胞 u细胞后含物细胞后含物13（一）植物细胞（一）植物细胞u细胞：细胞：是构成植物体形态结构和生命活动的基本单位。是构成植物体形态结构和生命活动的基本单位。u特点：特点：形状多样：形状多样：随植物种类及在植物体内存在随植物种类及在植物体内存在 部位和行使机能不同而异。部位和行使机能不同而异。大小悬殊：大小悬殊：一般细胞直径在一般细胞直径在10m10m 100m100m 之间，小的直径只有之间，小的直径只有0.1m0.1m，长的，长的 如苘麻的纤维细胞可长达如苘麻的纤维细胞可长达200mm200mm。14常见植物细胞类型常见植物细胞类型u薄壁细胞：薄壁细胞：组成植物体的基本组织，为组成植物体的基本组织，为活细胞活细胞，含多种内含物。显微镜下细胞壁薄。含多种内含物。显微镜下细胞壁薄。15常见植物细胞类型常见植物细胞类型u木栓细胞：木栓细胞：存在于木本植物的树皮或根皮，细胞壁内渗入存在于木本植物的树皮或根皮，细胞壁内渗入了脂肪性的木栓质，隔绝外界的水和空气，排了脂肪性的木栓质，隔绝外界的水和空气，排列紧密，对植物内部组织起保护作用，为列紧密，对植物内部组织起保护作用，为死细死细胞。胞。16 香加皮草酸钙方晶石细胞长方形或类多角形木栓细胞棕黄色，多角形。乳管含无色油滴状颗粒淀粉粒甚多，单粒类圆形或长圆形17常见植物细胞类型常见植物细胞类型u石细胞石细胞 为细胞壁强烈木质化的为细胞壁强烈木质化的厚壁细胞厚壁细胞，在植物体内存，在植物体内存在广泛，分布：根、茎、叶、果实、种子。果皮、种在广泛，分布：根、茎、叶、果实、种子。果皮、种皮中较多，形成坚硬的保护组织。如椰子、核桃坚硬皮中较多，形成坚硬的保护组织。如椰子、核桃坚硬的内果皮。特点：单个散生或群生；形状多样；壁极的内果皮。特点：单个散生或群生；形状多样；壁极厚，木化、栓化、角化细胞腔小；形成分枝纹孔道。厚，木化、栓化、角化细胞腔小；形成分枝纹孔道。18石细胞石细胞19枸杞子：枸杞子：种皮石细胞淡黄色，壁厚，波状弯曲。种皮石细胞淡黄色，壁厚，波状弯曲。20黄芩石细胞：黄芩石细胞：类圆形、类方形或长方形，壁较厚或甚厚类圆形、类方形或长方形，壁较厚或甚厚21鸡血藤石细胞：鸡血藤石细胞：成群，有的含有红棕色物质或成群，有的含有红棕色物质或方晶方晶22鸡血藤石细胞：鸡血藤石细胞：成群，有的含有红棕色物质或成群，有的含有红棕色物质或方晶方晶23常见植物细胞类型常见植物细胞类型u花粉粒花粉粒 细胞功能细胞功能 为植物为植物生殖细胞生殖细胞，存在于，存在于 花类药材的雄蕊上。花类药材的雄蕊上。形态特征形态特征 外壁多具雕纹和萌发孔，是花外壁多具雕纹和萌发孔，是花 类药材的主要鉴别特征。类药材的主要鉴别特征。24不同植物的花粉粒不同植物的花粉粒25常见植物细胞类型常见植物细胞类型u纤维：纤维：多存在于植物的木质部和韧皮部，起支撑作多存在于植物的木质部和韧皮部，起支撑作用。显微镜下为两端尖斜的长形细胞，具有全面增厚用。显微镜下为两端尖斜的长形细胞，具有全面增厚的次生壁，壁上有少数纹孔。的次生壁，壁上有少数纹孔。u有的纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。有的纤维束周围薄壁细胞含草酸钙方晶，形成晶纤维。如鸡血藤、黄柏如鸡血藤、黄柏26鸡血藤鸡血藤晶纤维晶纤维27黄柏黄柏晶纤维晶纤维28黄芩黄芩韧皮纤维韧皮纤维u微黄色u梭形u孔沟明显u两头尖或斜尖29常见植物细胞类型常见植物细胞类型u导管：导管：主要存在于植物的木质部中，起输送水主要存在于植物的木质部中，起输送水分和无机盐的作用，镜下呈长管状或筒状，细分和无机盐的作用，镜下呈长管状或筒状，细胞壁不全面不均匀增厚，根据增厚情况，分为胞壁不全面不均匀增厚，根据增厚情况，分为环纹、螺纹、梯纹、网纹及孔纹导管。环纹、螺纹、梯纹、网纹及孔纹导管。30环纹环纹网纹网纹梯纹梯纹螺纹螺纹孔纹孔纹31甘草甘草具缘纹孔导管具缘纹孔导管32（二）细胞后含物（二）细胞后含物u后含物的概念：后含物的概念：细胞在代谢过程中产生的营养细胞在代谢过程中产生的营养物质、废物和储藏物质统称为细胞后含物。物质、废物和储藏物质统称为细胞后含物。u贮藏的营养物质主要为淀粉、蛋白质、脂肪油，贮藏的营养物质主要为淀粉、蛋白质、脂肪油，另有多糖团块及菊糖等。另有多糖团块及菊糖等。u代谢废物主要为晶体，有草酸钙结晶和碳酸钙代谢废物主要为晶体，有草酸钙结晶和碳酸钙结晶以及砂晶。结晶以及砂晶。331 1）淀粉粒淀粉粒u淀粉粒淀粉粒：葡萄糖分子聚合而成的长链葡萄糖分子聚合而成的长链碳水碳水化合物，在化合物，在细胞中以颗粒状态存在，称为淀粉粒细胞中以颗粒状态存在，称为淀粉粒。所有的薄壁细所有的薄壁细胞中胞中几乎几乎都有淀粉粒的存在，都有淀粉粒的存在，尤以根、根茎及种子中尤以根、根茎及种子中为多。多数淀粉粒表面都有层纹和脐点，不同植物淀为多。多数淀粉粒表面都有层纹和脐点，不同植物淀粉粒大小、层纹、脐点各有特征，可以作为药材的鉴粉粒大小、层纹、脐点各有特征，可以作为药材的鉴定依据之一。定依据之一。u单粒单粒：只有一个脐点和围绕脐点的许多轮纹。只有一个脐点和围绕脐点的许多轮纹。如山药、川贝母等。单粒淀粉多见如山药、川贝母等。单粒淀粉多见u复粒复粒：由若干分粒组成，有两个以上的脐点，每由若干分粒组成，有两个以上的脐点，每 个脐点各有轮纹围绕。个脐点各有轮纹围绕。34山药山药的淀粉粒单粒扁卵形、三角状卵形、类圆形或的淀粉粒单粒扁卵形、三角状卵形、类圆形或矩圆形，脐点点状、人字状等，可见层纹矩圆形，脐点点状、人字状等，可见层纹35马铃薯马铃薯淀粉粒淀粉粒 浙贝母浙贝母淀粉粒淀粉粒362)2)结晶结晶晶体是植物细胞的代谢废物，常见的有两种类型：草晶体是植物细胞的代谢废物，常见的有两种类型：草酸钙结晶和碳酸钙结晶（桑叶）。酸钙结晶和碳酸钙结晶（桑叶）。草酸钙结晶：为无色半透明或稍呈暗灰色的晶体草酸钙结晶：为无色半透明或稍呈暗灰色的晶体，一，一般一种植物只能见到一种形状，少数有两种或多种般一种植物只能见到一种形状，少数有两种或多种（如曼陀罗叶），在同一植物中晶体的分布以及形（如曼陀罗叶），在同一植物中晶体的分布以及形态特征较稳定，是植物显微鉴别的主要特征之一态特征较稳定，是植物显微鉴别的主要特征之一37草酸钙结晶的类型草酸钙结晶的类型 簇晶：簇晶：由许多八面体、三棱形单晶体聚集而成，由许多八面体、三棱形单晶体聚集而成，如：大黄、人参、白芍等。如：大黄、人参、白芍等。单晶单晶 通常呈正方形、长方形、斜方形等，包括方通常呈正方形、长方形、斜方形等，包括方 晶、砂晶、棱晶等。例如：葛根、甘草等。晶、砂晶、棱晶等。例如：葛根、甘草等。针晶针晶 晶体呈两端尖锐的针状，在细胞中多成束存晶体呈两端尖锐的针状，在细胞中多成束存 在，称针晶束，一般存在于单子叶植物的粘在，称针晶束，一般存在于单子叶植物的粘 液细胞中，在双子叶植物中较少见。液细胞中，在双子叶植物中较少见。如：半夏、山药、巴戟天、茜草等。如：半夏、山药、巴戟天、茜草等。38簇晶簇晶大黄簇晶39方晶方晶 香加皮的方晶香加皮的方晶 甘草的方晶甘草的方晶40针晶针晶 半夏的针晶束半夏的针晶束 白及的针晶束白及的针晶束41钩藤的砂晶钩藤的砂晶 淫羊藿的柱晶淫羊藿的柱晶423 3）脂肪和脂肪油）脂肪和脂肪油是是由由脂脂肪肪酸酸和和甘甘油油结结合合而而成成的的脂脂。常常温温下下呈呈固固体体或或半半固固体体的的称称为为脂脂，如如柯柯柯柯豆豆脂脂；呈呈液液体体的的称称为为油油，如如芝芝麻麻油油、大大豆豆油油。脂脂肪肪油油常常呈呈小小滴滴状状分分散散于于细细胞胞质质中。中。检验：检验：遇苏丹遇苏丹试液显橘红试液显橘红色或红色。色或红色。花生子叶细胞花生子叶细胞43 黑芝麻黑芝麻油滴油滴 鲜橘皮鲜橘皮中的油滴中的油滴444 4）菊糖）菊糖u菊糖是由果糖分子聚合而成的，主要存在于菊科、菊糖是由果糖分子聚合而成的，主要存在于菊科、桔梗科等部分植物根的薄壁细胞中（如木香、白桔梗科等部分植物根的薄壁细胞中（如木香、白术、桔梗、党参）术、桔梗、党参）u菊糖能溶于水，在细胞中呈溶解状态存在，不溶菊糖能溶于水，在细胞中呈溶解状态存在，不溶于乙醇，乙醇处理后，可成球形、半球形或扇状于乙醇，乙醇处理后，可成球形、半球形或扇状结晶析出，久置不溶化。结晶析出，久置不溶化。u水合氯醛装片（不加热），可见呈扇形或不规则水合氯醛装片（不加热），可见呈扇形或不规则的菊糖团块，表面现放射状线纹，久置渐溶化。的菊糖团块，表面现放射状线纹，久置渐溶化。45菊糖菊糖桔梗-木香46菊糖菊糖茅苍术茅苍术475 5）黏液）黏液 黏液为杂多糖，是植物正常的生理产物，黏液为杂多糖，是植物正常的生理产物，多存在于种子、果实、根及根茎等的黏液多存在于种子、果实、根及根茎等的黏液细胞中（如白及、山药）。细胞中（如白及、山药）。48山药山药的粘液细胞的粘液细胞 白及白及的粘液细胞的粘液细胞 （内含草酸钙针晶束）（内含草酸钙针晶束）49菌类药材显微特征菌类药材显微特征 大多以子实体或菌核的形式入药，无淀粉大多以子实体或菌核的形式入药，无淀粉粒和高等植物的显微特征。观察时应注意粒和高等植物的显微特征。观察时应注意菌丝的形状、有无分枝、颜色、孢子的形菌丝的形状、有无分枝、颜色、孢子的形态；结晶的有无及形态。态；结晶的有无及形态。50 茯苓茯苓水合氯醛装片水合氯醛装片 未加热透化未加热透化 加热透化加热透化51 冬虫夏草菌的菌丝冬虫夏草菌的菌丝52三、显微镜使用简介三、显微镜使用简介 显微镜主要是由机械部分与光学部分组成，显微镜主要是由机械部分与光学部分组成，虽然新型显微镜不断面市，但其原理及各虽然新型显微镜不断面市，但其原理及各部分的构造均大同小异。部分的构造均大同小异。机械部分机械部分 光学部分光学部分53显微镜的构造显微镜的构造54显微镜使用注意事项显微镜使用注意事项u制片时盖玻片上不得有试液残留，避免污染物镜制片时盖玻片上不得有试液残留，避免污染物镜 及载物台，损伤镜头。及载物台，损伤镜头。u变换物镜时，切记先低倍、后高倍，先粗调、后变换物镜时，切记先低倍、后高倍，先粗调、后 微调。由低到高逐级变换。微调。由低到高逐级变换。u使用高倍物镜时，只能用细螺旋调节焦距，禁止使用高倍物镜时，只能用细螺旋调节焦距，禁止 用粗螺旋调节；也不得装卸载玻片。用粗螺旋调节；也不得装卸载玻片。u使用完毕，应将最小物镜与通光孔相对，关闭光使用完毕，应将最小物镜与通光孔相对，关闭光 源，罩好，收置起来。源，罩好，收置起来。u显微镜的光学部分，只能用特殊的擦镜头纸擦拭显微镜的光学部分，只能用特殊的擦镜头纸擦拭55偏光的应用偏光的应用显微鉴别中，常利用某些物质具有双折射性的特点，显微鉴别中，常利用某些物质具有双折射性的特点，采用偏光检测。采用偏光检测。淀粉粒在偏光显微镜下呈现黑十字现象；草酸钙结淀粉粒在偏光显微镜下呈现黑十字现象；草酸钙结晶类型多样，在偏光显微镜下呈不同的多彩颜色；晶类型多样，在偏光显微镜下呈不同的多彩颜色；矿物类多具有偏光特性。其他如石细胞、纤维、矿物类多具有偏光特性。其他如石细胞、纤维、导管等也呈现出不同的偏光特性。可作为药材鉴导管等也呈现出不同的偏光特性。可作为药材鉴别的补充。别的补充。56偏光显微镜下淀粉粒形态偏光显微镜下淀粉粒形态山药淀粉粒山药淀粉粒浙贝母淀粉粒浙贝母淀粉粒马铃薯淀粉粒马铃薯淀粉粒57偏光显微镜下各种结晶形态偏光显微镜下各种结晶形态58四、中药显微制片四、中药显微制片u1 1、药材粉末制片、药材粉末制片 主要用于粉末状药材及含药材粉末的成方制剂的主要用于粉末状药材及含药材粉末的成方制剂的观察。观察。u药材粉末制备药材粉末制备 取干燥药材，研磨或锉成细粉取干燥药材，研磨或锉成细粉（通常应过（通常应过8080目以上药筛）。目以上药筛）。u制备粉末时需注意取样的代表性。例如：根类药制备粉末时需注意取样的代表性。例如：根类药材要切取根头、根中段及根尾等部位，并全部磨材要切取根头、根中段及根尾等部位，并全部磨粉，过筛，混匀，不得丢弃渣头。粉，过筛，混匀，不得丢弃渣头。u需观察淀粉粒时，一般干燥温度不能超过需观察淀粉粒时，一般干燥温度不能超过6060，避免淀粉粒糊化，有碍观察。避免淀粉粒糊化，有碍观察。59制片注意事项制片注意事项1 1）透化时加热温度不能过高，以防水合氯醛试）透化时加热温度不能过高，以防水合氯醛试液沸腾太过，使组织内带入气泡；加热时应将液沸腾太过，使组织内带入气泡；加热时应将载玻片不断移动，以免受热不匀而炸裂。载玻片不断移动，以免受热不匀而炸裂。2 2）如需观察菊糖等多糖物质，加水合氯醛试液）如需观察菊糖等多糖物质，加水合氯醛试液不要加热。不要加热。602.2.药材切面制片药材切面制片-徒手切片徒手切片 是日常检验中最为常用、简便的切片方法。是日常检验中最为常用、简便的切片方法。切片前的药材预处理：切片前的药材预处理：1 1、质地软硬适中的样品可直接进行切片。、质地软硬适中的样品可直接进行切片。2 2、质地坚硬的药材，需先软化后再切片，最方便、质地坚硬的药材，需先软化后再切片，最方便 常用的方法为水浸泡。常用的方法为水浸泡。3 3、过于柔软的样品，可将其浸入、过于柔软的样品，可将其浸入70%70%95%95%乙醇乙醇 中，约中，约2020分钟后可变硬些，再切片；或用硬物分钟后可变硬些，再切片；或用硬物 包裹后切片。包裹后切片。61五、中药材及成药五、中药材及成药显微鉴别显微鉴别实例实例 1.1.橘红丸中苦杏仁和紫菀的鉴别橘红丸中苦杏仁和紫菀的鉴别 苦杏仁石细胞特征苦杏仁石细胞特征 橙黄色橙黄色贝壳形贝壳形壁较厚壁较厚较宽一边纹孔明显较宽一边纹孔明显621.1.橘红丸中苦杏仁和紫菀的鉴别橘红丸中苦杏仁和紫菀的鉴别 苦杏仁苦杏仁 检验过程中个别厂家样品显检验过程中个别厂家样品显微镜下找不到苦杏仁石细胞，怀疑微镜下找不到苦杏仁石细胞，怀疑未投料，采用未投料，采用HPLCHPLC法进行验证，未法进行验证，未检测到苦杏仁苷，证明确实未投料。检测到苦杏仁苷，证明确实未投料。还有厂家的样品也找不到苦杏仁还有厂家的样品也找不到苦杏仁的石细胞，沟通时厂家坚称确实投的石细胞，沟通时厂家坚称确实投料了，经料了，经HPLCHPLC法验证，能够检出苦法验证，能够检出苦杏仁苷后经了解，厂方使用的是沸杏仁苷后经了解，厂方使用的是沸水燀后脱皮苦杏仁。水燀后脱皮苦杏仁。63 紫菀紫菀 下皮细胞长方形，垂周壁波状弯曲，下皮细胞长方形，垂周壁波状弯曲，有的含紫色色素。有的含紫色色素。641.1.橘红丸中苦杏仁和紫菀的鉴别橘红丸中苦杏仁和紫菀的鉴别紫菀：紫菀：检验时有个厂家样品中找不到紫菀的显微检验时有个厂家样品中找不到紫菀的显微 特征，采用特征，采用TLCTLC法验证也没有紫菀的特征斑法验证也没有紫菀的特征斑 点，之后让厂方提供了投料药材，经鉴定点，之后让厂方提供了投料药材，经鉴定 其投料药材不是紫菀正品。其投料药材不是紫菀正品。652 2 一批造假西红花的鉴别一批造假西红花的鉴别 西红花西红花掺伪西红花掺伪西红花66体视显微镜下体视显微镜下西红花西红花造假西红花造假西红花67 水浸泡后水浸泡后西红花西红花造假西红花造假西红花68 西红花正品显微特征西红花正品显微特征表皮细胞表皮细胞环纹及螺纹导管环纹及螺纹导管69 造假西红花显微镜下结构造假西红花显微镜下结构无定型物无定型物植物纤维植物纤维普通卷纸显微特征普通卷纸显微特征70 3 3 海金沙海金沙合格品合格品不合格品不合格品71 海金沙海金沙孢子孢子孢子为四面体孢子为四面体三角状圆锥形三角状圆锥形孢子外壁有孢子外壁有颗粒状雕纹颗粒状雕纹72 海金沙海金沙孢子孢子合格品镜检特征合格品镜检特征不合格品镜检特征不合格品镜检特征 总灰分高达总灰分高达55%55%73 4.4.麦冬与山麦冬的鉴别麦冬与山麦冬的鉴别74 麦冬与山麦冬维管束比较麦冬与山麦冬维管束比较韧皮部束韧皮部束16162222个个麦冬横切面放大麦冬横切面放大4040倍倍韧皮部束韧皮部束7 71515个个山麦冬放大山麦冬放大100100倍倍75