喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析.pptx

喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析喹啉与青蒿素类抗疟药物的分析疟疾得流行范围疟疾得流行范围:世界范围内世界范围内,呈现临床症状得病例每年就在呈现临床症状得病例每年就在3亿到亿到5亿之亿之间间,每年因患疟疾死亡得人数在一到三百万之间每年因患疟疾死亡得人数在一到三百万之间,其中大部其中大部分为儿童。疟疾主要得流行地区就是非洲中部、南亚、东分为儿童。疟疾主要得流行地区就是非洲中部、南亚、东南亚及南美北部得热带地区南亚及南美北部得热带地区,这其中又以非洲得疫情最甚。这其中又以非洲得疫情最甚。就中国而言就中国而言,疟疾主要得流行地带为华中华南得丛林多山疟疾主要得流行地带为华中华南得丛林多山地区地区,但疫情远较非洲为轻。但疫情远较非洲为轻。疟原虫得生命周期疟原虫得生命周期:1)雌按蚊叮咬人时雌按蚊叮咬人时,唾液中得疟原虫得长梭形得子孢子进入人体内唾液中得疟原虫得长梭形得子孢子进入人体内,随血液运随血液运移到肝脏移到肝脏,侵入肝细胞。子孢子在肝细胞内部吸收营养侵入肝细胞。子孢子在肝细胞内部吸收营养,长大成熟后分裂生殖长大成熟后分裂生殖形成很多小得裂殖子。裂殖子成熟后形成很多小得裂殖子。裂殖子成熟后,破坏肝细胞进入体液、血液中破坏肝细胞进入体液、血液中,一部分一部分再侵入肝细胞重复上述循环再侵入肝细胞重复上述循环,一部分侵入红细胞。一部分侵入红细胞。2)在红细胞内在红细胞内,裂殖子逐渐吸收血红蛋白作为营养长大裂殖子逐渐吸收血红蛋白作为营养长大,成为像个戒指得环状成为像个戒指得环状体。环状体进一步长大体。环状体进一步长大,向四周伸出伪足向四周伸出伪足,称为阿米巴样体或大滋养体。大滋称为阿米巴样体或大滋养体。大滋养体进一步发育形成裂殖体养体进一步发育形成裂殖体,裂殖体成熟后放出很多裂殖子裂殖体成熟后放出很多裂殖子,破坏红细胞后进破坏红细胞后进入血液入血液,继续感染其她红细胞。由于人体内得疟原虫得裂殖子同时破坏大量继续感染其她红细胞。由于人体内得疟原虫得裂殖子同时破坏大量红细胞进入血液红细胞进入血液,人体会产生疟疾得典型症状人体会产生疟疾得典型症状,如发冷发热。如果宿主环境不如发冷发热。如果宿主环境不利利,一些裂殖子进入红细胞后可形成大、小配子母细胞。这些配子母细胞在一些裂殖子进入红细胞后可形成大、小配子母细胞。这些配子母细胞在人体中不再进一步发育人体中不再进一步发育,如果不能被蚊子吸血时吸走如果不能被蚊子吸血时吸走,配子母细胞在人体内可配子母细胞在人体内可存活存活60天。天。3)当蚊子吸取受感染人体得血液后当蚊子吸取受感染人体得血液后,雄雄,雌配子母细胞进入蚊子胃内雌配子母细胞进入蚊子胃内,发育成配发育成配子并进行有性繁殖。合子穿透蚊子得胃壁子并进行有性繁殖。合子穿透蚊子得胃壁,在胃壁下形成卵囊在胃壁下形成卵囊(oocyte)。卵囊。卵囊中疟原虫进行无性繁殖中疟原虫进行无性繁殖,最终形成子孢子最终形成子孢子(sporozoite)。成熟后。成熟后,卵囊破裂卵囊破裂,子孢子孢子进入蚊子体腔子进入蚊子体腔,穿透各种组织穿透各种组织,进入蚊子唾液腺。蚊子唾液腺中得子孢子可进入蚊子唾液腺。蚊子唾液腺中得子孢子可达达20万。子孢子在蚊子体内存活万。子孢子在蚊子体内存活70天。准备感染新得脊椎动物宿主。天。准备感染新得脊椎动物宿主。疟原虫得生命周期疟原虫得生命周期:疟原虫得生活周期及抗疟药得作用特点疟原虫得生活周期及抗疟药得作用特点:常见抗疟药按结构可分为四类常见抗疟药按结构可分为四类:喹啉类、萘啶类、青蒿素及其衍生物、嘧啶及双喹啉类、萘啶类、青蒿素及其衍生物、嘧啶及双胍类胍类,本书仅介绍前三类。本书仅介绍前三类。第一节:喹啉类药物结构特征大家有疑问的，可以询问和交流大家有疑问的，可以询问和交流可以互相讨论下，但要小声点可以互相讨论下，但要小声点可以互相讨论下，但要小声点可以互相讨论下，但要小声点1、碱性 奎宁、奎尼丁奎宁、奎尼丁:二元酸硫酸二元酸硫酸(喹核碱含脂环氮喹核碱含脂环氮,碱性强碱性强)磷酸氯喹和磷酸伯胺喹啉为三元生物碱磷酸氯喹和磷酸伯胺喹啉为三元生物碱 磷酸咯萘啶为五元生物碱磷酸咯萘啶为五元生物碱 磷酸哌喹为六元生物碱磷酸哌喹为六元生物碱喹啉环上得喹啉环上得N N原子具有碱性原子具有碱性,与强酸成盐与强酸成盐2、旋光性硫酸奎宁硫酸奎宁 (左旋体左旋体)硫酸奎尼丁硫酸奎尼丁(右旋体右旋体)3、荧光特性硫酸奎宁和硫酸奎宁丁在稀硫酸中显蓝色荧光硫酸奎宁和硫酸奎宁丁在稀硫酸中显蓝色荧光二、鉴别反应二、鉴别反应Identification一、绿奎宁反应一、绿奎宁反应(Thalleioquin)二醌基亚胺得胺盐u 取其水溶液加溴试液取其水溶液加溴试液2 23 3滴滴和氨试液和氨试液1ml1ml,即显翠绿色即显翠绿色;u 加酸至中性显蓝色加酸至中性显蓝色;u 酸性则呈紫红色酸性则呈紫红色;u 翠绿色可转溶于醇、氯仿中翠绿色可转溶于醇、氯仿中不溶于醚。不溶于醚。二、二、Identification二、光谱特征二、光谱特征 UVChP磷酸氯喹:取本品,加0、01mol/L盐酸溶液制成每1ml中约含10ug得溶液,照UV测定,在222nm,257nm,329nm与343nm得波长有最大吸收。FLDChP硫酸奎宁:取本品约20mg,加水20ml溶解后,分取溶液10ml,加稀硫酸使成酸性,即显蓝色荧光。IR(红外光谱):硫酸奎宁、二盐酸奎宁、磷酸氯喹、磷酸哌喹、磷酸咯萘喹、磷酸伯氨喹在ChP中均采用IR进行鉴别。二、二、Identification二、二、Identification二、二、Identification三、三、Detection of specific impurities一、硫酸奎宁一、硫酸奎宁1、酸度酸性杂质 取本品取本品0 0、2g2g,加水加水20ml20ml溶解后溶解后,测定测定pHpH值应为值应为5 5、7 76 6、6 6。2、氯仿乙醇不溶物 取本品取本品2g2g,加氯仿无水乙醇加氯仿无水乙醇 (2:1)(2:1)得混合液得混合液15ml15ml,在在5050加加热热10min10min后后,用称定重量得垂熔坩埚滤过用称定重量得垂熔坩埚滤过,滤渣用上述混合液分滤渣用上述混合液分5 5 次洗涤次洗涤,每次每次10ml 10ml,在在105 105 干燥至恒重干燥至恒重,遗留残渣不得过遗留残渣不得过2mg2mg。3、其她金鸡纳碱(TLC、HPLC)三、三、Detection of specific impurities1、酸度 取本品取本品1 1、0g,0g,加水加水25ml25ml溶解溶解,测定测定pHpH值应大于值应大于2 2、4 4。2、水中不溶物 取本品加水溶解后取本品加水溶解后,稍放置即有黄色不溶物产生稍放置即有黄色不溶物产生,影响品质、影响品质、3、氯化物 系生产工艺带入、检查时为了避免溶液颜色干扰碱使咯萘系生产工艺带入、检查时为了避免溶液颜色干扰碱使咯萘啶沉淀析出啶沉淀析出,过滤后进行检查、过滤后进行检查、4、甲醛:合成过程中引入合成过程中引入5、四氢吡啶:合成过程中引入合成过程中引入 磷酸咯萘啶得纯度检查四四 含量测定含量测定一、硫酸喹啉含量测定硫酸喹啉含量测定当当HAHA酸性较强时酸性较强时,反应不能定量完成反应不能定量完成,必须除去或降低必须除去或降低HAHA得酸得酸性性,使反应顺利地完成。使反应顺利地完成。BH+A-+HClO4BH+ClO4+HA游离碱类盐游离碱类盐被置换出得弱酸被置换出得弱酸A A、非水溶液滴定法、非水溶液滴定法B、硫酸奎宁测定3H+H+二、磷酸氯喹制剂含量测定磷酸氯喹制剂含量测定磷酸氯喹用磷酸氯喹用非水溶液滴定法测定含量非水溶液滴定法测定含量,但制剂中由于含但制剂中由于含有辅料有辅料,所采用得含量测定方法不同。所采用得含量测定方法不同。示例示例12-10:12-10:ChP中磷酸氯喹片含量得紫外可见分光光度测定法:取本品10片,精密称定,研细,精密称取适量约相当于磷酸氯喹0、13g),置200ml量瓶中,加0、lmol/L 盐酸溶液适量,充分振摇使磷酸氯喹溶解并稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液2ml,置100ml量瓶中,用0、lmol/L 盐酸溶液稀释至刻度,摇匀,照紫外-可见分光光度法(附 录IVA),在343nm得波长处测定吸光度;另取磷酸氯喹对照 品适量,精密称定,加O、lmol/L盐酸溶液溶解并定量稀释制 成每lml中约含13pg得溶液,同法测定,计算,即得。第二节:青蒿素类药物得分析n青蒿素又名黄蒿素青蒿素又名黄蒿素,就是我国从菊花科植物黄花蒿中提取分就是我国从菊花科植物黄花蒿中提取分离得到得一个含过氧基团得新型倍半萜内酯离得到得一个含过氧基团得新型倍半萜内酯研究历史:资料来源于baidu 中国抗疟新药得研究源于1967年成立得五二三项目,其全称为中国疟疾研究协作项目,成立于1967年得5月23日,因绝密军事项目,遂设代号523。研究历史:资料来源于baidu 历经380多次鼠疟筛选,1971年10月取得中药青蒿素筛选得成功。1972年从中药青蒿中分离得到抗疟有效单体,命名为青蒿素,对鼠疟、猴疟得原虫抑制率达到100%。1973年经临床研究取得与实验室一致得结果、抗疟新药青蒿素由此诞生。研究历史:资料来源于baidu 1981年年10月在北京召开得由世月在北京召开得由世界卫生组织主办得界卫生组织主办得“青蒿素青蒿素国国际会议上际会议上,中国中国青蒿素得化学青蒿素得化学研究研究得发言得发言,引起与会代表极引起与会代表极大得兴趣大得兴趣,并认为并认为“这一新得发这一新得发现更重要得意义就是在于将为进现更重要得意义就是在于将为进一步设计合成新药指出方向一步设计合成新药指出方向”。研究历史:资料来源于baidu 2011年9月,中国女药学家屠呦呦因创制新型抗疟药青蒿素和双氢青蒿素得贡献,获得被誉为诺贝尔奖“风向标”得拉斯克奖。这就是中国生物医学界迄今为止获得得世界级最高级大奖。1990年,为控制疟疾对青蒿素得耐药性,世界卫生组织建议在治疗中必须将青蒿素同别得抗疟药联合使用。2007年5月,在瑞士日内瓦举行得第60届世界卫生大会上,世界卫生组织声明,单方青蒿素为引发耐药性,建议在全球范围内推广使用复方青蒿素。青蒿素在国际上得评价(以维基百科为例):Treatment:Treatment:Unplicated malaria may be treated with oral medicationsUnplicated malaria may be treated with oral medications、The most effective treatment for PThe most effective treatment for P、falciparum(falciparum(恶性疟恶性疟疾疾)infection is the use of artemisinins in bination with)infection is the use of artemisinins in bination with other antimalarials(known as artemisinin-bination other antimalarials(known as artemisinin-bination therapy,or ACT),which decreases resistance to any single therapy,or ACT),which decreases resistance to any single drug ponent(drug ponent(组分组分)、72 72 青蒿素在国际上得评价(以维基百科为例):nThese additional antimalarials include:amodiaquine,These additional antimalarials include:amodiaquine,lumefantrine,mefloquine or lumefantrine,mefloquine or sulfadoxine/pyrimethaminesulfadoxine/pyrimethamine、7373(苯芴醇苯芴醇,甲氟喹或阿甲氟喹或阿莫地喹莫地喹,磺胺磺胺/乙胺嘧啶乙胺嘧啶)Another remended bination)Another remended bination is dihydroartemisinin and piperaquineis dihydroartemisinin and piperaquine、7475 7475 ACT is ACT is about 90%effective when used to treat unplicated about 90%effective when used to treat unplicated malariamalaria、51 51 青蒿素在国际上得评价(以维基百科为例):nTo treat malaria during pregnancy,the WHO remends the use of quinine plus clindamycin(奎宁克拉霉素片)early in the pregnancy(1st trimester),and ACT in later stages(2nd and 3rd trimesters)、76 In the 2000s(decade),malaria with partial resistance to artemisins emerged in Southeast Asia、7778小节:n青蒿素抗疟作用有迅速、高效、安全、低毒且与大多数抗青蒿素抗疟作用有迅速、高效、安全、低毒且与大多数抗疟药无交叉抗性疟药无交叉抗性n就是一类全新结构得抗疟药就是一类全新结构得抗疟药,为抗疟药得研发提供了新得为抗疟药得研发提供了新得先导化合物先导化合物n易产生耐药性易产生耐药性,推荐使用复方青蒿素推荐使用复方青蒿素n合成难度较大合成难度较大,药物得生产仍依赖于天然药材得提取药物得生产仍依赖于天然药材得提取青蒿素类药物结构与性质脂溶性脂溶性青蒿素类药物结构与性质水溶性水溶性青蒿素类药物结构与性质青蒿素经过硼氢化钠还原而来青蒿素经过硼氢化钠还原而来青蒿素类药物结构与性质青蒿素类药物化学性质青蒿素类药物得鉴别试验青蒿素类药物得鉴别试验青蒿素类药物得鉴别试验青蒿素类药物得鉴别试验青蒿素类药物得鉴别试验青蒿素类药物得鉴别试验青蒿素类药物得含量测定【含量测定】【含量测定】照高效液相色谱法(附录V D)测定。色谱条件与系统适用性试验色谱条件与系统适用性试验:用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂;以乙腈-水(60:4 0)为流动相;检测波长为 2 1 0 n m。取本品和双氢青蒿素对照品适量,加甲醇溶解并稀释制成每l ml中各约含lmg得混合溶液,量取注入液相色谱仪,双氢青蒿素呈现两个色谱峰,青蒿素峰与相邻双氢青蒿素峰得分离度应大于2、0;理论板按青蒿素峰计算不低于3 0 0 0。测定法测定法:取本品约25 mg,精密称定,置25ml量瓶中,加甲醇溶解并稀释至刻度,摇匀,精密量取20L,注入液相色谱仪,记录色谱图;另取青蒿素对照品,同法测定。按外标法以峰面积计算,即得。青蒿素类药物得体内药物分析