分子生物学第一章--绪论.ppt

分子生物学与基因操作技术分子生物学与基因操作技术Molecular Biology&Gene Manipulation1 1生物学：研究生命现象、生命本质、生命活动生物学：研究生命现象、生命本质、生命活动及其规律的科学。及其规律的科学。细胞水平细胞水平整体水平整体水平分子水平分子水平分子生物学是生物学研究的一个分支分子生物学是生物学研究的一个分支2 2细胞生物学：从细胞水平 理解生命活动遗传学：从遗传角度理解生命活动 生物化学：从化学组成角度来理解生物大分子和生物代谢。普通生物学（动物&植物）&微生物学：不同生物类型的特点分子生物学：从分子水平理解生命活动3 3基因工程的发展基因工程的发展第1代基因工程：DNA重组技术第2代基因工程：蛋白质工程（是指在基因工程的基础上，结合蛋白质结晶学，计算机辅助设计和蛋白质化学等多学科的基础知识通过对基因的人工定向改造等手段，对蛋白质进行修饰，改造和拼接以生产出能满足人类需要的新型蛋白质的技术。）第3代基因工程：代谢工程（metabolic engineering）（是指通过基因工程的方法改变细胞的代谢途径。）第4代基因工程：合成生物学(synthetic biology)（与传统生物学通过解剖生命体以研究其内在构造的办法不同，合成生物学的研究方向完全是相反的，它是从最基本的要素开始一步步建立零部件。与基因工程把一个物种的基因延续、改变并转移至另一物种的作法不同，合成生物学的目的在于建立人工生物系统（artificial biosystem），让它们像电路一样运行。）4 4通过研究通过研究“基因敲基因敲除除”的耗子将帮助研究的耗子将帮助研究人类的癌症、糖尿病和人类的癌症、糖尿病和高血压等慢性疾病与遗高血压等慢性疾病与遗传的关系。传的关系。转基因羊转基因羊具有生长快、毛具有生长快、毛质、肉质好、疾病少质、肉质好、疾病少及耐粗饲料等优点。及耐粗饲料等优点。5 5在猴子的未受精卵中加入在猴子的未受精卵中加入附加基因，并利用它成功培育附加基因，并利用它成功培育出健康活泼的小猴出健康活泼的小猴“安迪安迪”。通过对通过对“安迪安迪”的研究我的研究我们可以简单地引进如老年性痴们可以简单地引进如老年性痴呆病的基因、帕金森病基因等，呆病的基因、帕金森病基因等，加快针对这类疾病疫苗的开发加快针对这类疾病疫苗的开发研究。研究。6 6教材教材:朱玉贤等，现代分子生物学朱玉贤等，现代分子生物学 ，第三版，第三版 References:Sambrook J,et al.Molecularcloning-A Laboratory manual.3rd ed.2001,ColdSpringHarborLaboratoryPressTechnologyPress此书被誉为分子生物学的此书被誉为分子生物学的“圣经圣经”7 7Gene EngineeringCourse description:The objective of this course is to systemically impart the theories and techniques in gene engineering,covering(1)Relevant theories(2)Gene manipulation(3)Strategies for gene cloning and function identification(4)Applications of gene engineering(5)Guide to relevant literature.In each part,worked examples are presented to elucidate the subject areas 8 8General SyllabusChapter 1 Introduction to Gene Engineering(2 hours)1 Brief course introduction 2 Overview of gene engineeringChapter 2 Protein(2 hours)Protein structure,function and biosynthesisEpigenetics，ncRNA(miRNA,siRNA,piRNA)Chapter 3 Nucleic Acid(2 hours)1 Structure and function2 Gene expression and regulation9 9Chapter 4 Enzymology of Gene Manipulation（2 hours）Chapter 5 PCR techniques（2 hours）1 Principle of PCR techniques 2 RT-PCR3 NEST-PCR4Application of PCR techniques in evolution research or related,such as RFLP,RAPD,SSAR,SNP etc.Chapter 6 Molecular Hybridization(4 hours)1 Southern blot2 Northern blot3 Fluorescence in situ hybridization4Yeast two-hybrid1010Chapter 7 Vector Construction and Gene Transformation(4 hours)1 Construction of co-expression vector 2 Vector construction of fusion Protein3 Gene transformation and screening4 Safety assessment of gene transformationChapter 8 Protein Expression(4 hours)1 Procaryotic expression system2 Eucaryotic expression system 3SDS-PAGE 2D-electropheris4 Antibody preparation5 Western blot 1111Chapter 9 Introduction of Bioinformatics(2 hours)1 Principle and prevalent softwares2Available database on websiteChapter 10 Strategy of Gene Cloning(4 hours)1 Map-based cloning2Transposon tagging cloning3 Gene cloning based on known protein4 Cloning of Homologous Genes1212Chapter 11 Function Identification of Novel Genes(3 hours)Chapter 12 Application of Gene Engineering(4 hours)Practical application of gene engineering in chemical technology,pharmacy,agriculture,energy resource,environmental protection and materials1313Chapter 13 Guide to Scientific Literature(4 hours)Selected from distinguished periodicals such as Nature,Science,Cell,Pnas,Jacs,Agrew,Plos Biology,etc.1414生命科学主要网址生命科学主要网址NCBI(http:/www.ncbi.nlm.nih.gov)NATURE(http:/)SCIENCE(http:/www.sciencemag.org)Cell(http:/)PNAS(http:/www.pnas.org)JBC(http:/www.jbc.org)Plos(http:/www.plos.org)1515生命科学主要刊物生命科学主要刊物Nature,Naturegenetics,Naturebiotechnology,Naturemethods,Naturemedicine,NatureprotocolScienceCell，currentopinioninbiotechPNASPlos系列（系列（Plosbiology等）等）NucleicAcidResGeneanddevelopmentJBCEMBOLJJACS美国化学会刊美国化学会刊 (刊登了许多生物合成文章刊登了许多生物合成文章)Angew德国应用化学德国应用化学。1616第一章第一章 绪论绪论引言分子生物学概念分子生物学简史分子生物学的主要研究内容基因工程未来分子生物学发展趋势1717第一节第一节 引言引言一、创世说与进化论一、创世说与进化论达尔文 1859年物种起源，确立了进化论的概念1818分子进化论RNA世界世界 RNA催化活性的发现解决了以往关于先有多聚核苷酸还是先有多肽链的两难困境，表明最初的生化系统整个地集中在RNA。RNA世界的核心内容：作为核酶的世界的核心内容：作为核酶的RNA可以可以任意方式作为模板，进行缓慢地自发地复制。任意方式作为模板，进行缓慢地自发地复制。最初的RNA分子复制产生的RNA分子已经具备生命所具有的两种基本属性：因为复制，成为遗传信息载体；可以催化，直接扮演了表型的角色。这些RNA组成了原基因组（protogenome），形成了一个能自我复制和指令简单生化反应的体系。1919基因组的起源基因组的起源RNA世界转变为DNA世界的关键一步：具有酶学活性的蛋白质的出现，可以补偿并最终取代核酶的大部分催化活性。RNA的催化活性转移到蛋白质是RNA原始基因组功能的根本性改变，使RNA与蛋白质的分工逐渐明朗，进而提高了整个生化系统的效率。RNA原始基因组的主要功能逐步转向指令蛋白质合成。DNA比RNA结构更为稳定，RNA的编码功能转移到DNA是一种必然趋势。RNA世界向DNA世界的过渡过程：兼具催化和编码功能的RNA大分子最先出现 RNA催化肽键形成并合成蛋白质 RNA与蛋白质联手以RNA为模板合成DNA2020生命三界生命三界真细菌、古细菌、真核生物。它们是三个独立起源的生命系统，来自共同的单细胞祖先，彼此间不存在承继关系。2121二、细胞学说（二、细胞学说（18471847）德国 植物学家Schleiden德国 动物学家Schwann2222早期生物学家的另一大贡献是提出了细胞理论。动植物的基本单元是细胞，这是细胞学说的核心。细胞学说的主要内容有：细胞是有机体，一切动植物都是由单细胞发育而来，即生物是由细胞和细胞的产物所组成；所有细胞在结构和组成上基本相似；新细胞是由已存在的细胞分裂而来；生物的疾病是因为其细胞机能失常。2323三、经典的生物化学和遗传学三、经典的生物化学和遗传学 19世纪中叶，蛋白质（发现动植物细胞提取液中主要是一些能受热或酸变性形成纤维状沉淀的物质）19世纪中叶到20世纪初，组成蛋白质的20种基本氨基酸被相继发现（1935年，苏氨酸）著名生物化学家Fisher还论证了连接相邻氨基酸的“肽键”的形成。2424孟孟 德德 尔尔 GregorMendel(1822-1884),奥地利科学家，经典遗传学的奠基人2525孟德尔孟德尔（18221884）1857-1864的7年中，进行了豌豆的杂交研究，1865 年发表了他的划时代的论文植物杂交试验在论文中提出了“遗传因子”的概念，并得出了两条基本规律：等位基因随机分离 独立分配定律 2626孟德尔第一定律孟德尔第一定律 等位基因随机分离等位基因随机分离(The Law of Segregation)(The Law of Segregation)AAaaAaF1ParentsF2AAaaAa1:2:1A:a=1:12727孟德尔第二定律孟德尔第二定律 独立分配定律独立分配定律(the law of independent(the law of independent assortment)assortment)F1ParentsF2AaBb AB Ab aB ab 25%25%25%25%AB(25%)Ab(25%)aB(25%)Ab(25%)AABB AABb AaBB AaBbAABb AAbb AaBb AabbAaBB AaBb aaBB aaBbAaBb Aabb aaBb aabbA:a=1:1 B:b=1:1AABBaabb2828在孟德尔遗传学的基础上，美国著名的遗传学家Morgan又提出了基因学说。连锁遗传规律2929摩尔根(T.H.Morgan,1866-1945)因发现染色体的遗传机制，创立染色体遗因发现染色体的遗传机制，创立染色体遗传理论而于传理论而于1933年获诺贝尔生理学医学奖年获诺贝尔生理学医学奖摩尔根果蝇遗传实验具有划时代意义摩尔根果蝇遗传实验具有划时代意义 人类第一次把基因与染色体联系起来，人类第一次把基因与染色体联系起来，认为基因是一种物质，是染色体上的认为基因是一种物质，是染色体上的一个特定的区段。一个特定的区段。确立并发展了染色体的遗传理论。确立并发展了染色体的遗传理论。3030第二节第二节 分子生物学概念分子生物学概念分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子生物学是研究核酸、蛋白质等所有生物大分子的分子的结构结构与与功能功能，并从分子水平上阐明蛋白，并从分子水平上阐明蛋白质与蛋白质、蛋白质与核酸之间的互作及其基质与蛋白质、蛋白质与核酸之间的互作及其基因表达调控机理的学科因表达调控机理的学科广义上，分子生物学包括对蛋白质和核酸等生物大分子结构与功能的研究，以及从分子水平上阐明生命现象和生物规律3131生物技术理论生物技术理论与应用与应用分子生物学研究的主要领域分子生物学研究的主要领域生物大分子的结构与功能生物大分子的结构与功能生物大分子之间的互作生物大分子之间的互作 DNA-protein receptor-ligand Enzyme-substrate基因的概念基因的概念基因的结构基因的结构基因的复制基因的复制基因的表达基因的表达基因的重组基因的重组基因的突变基因的突变基因工程基因工程细胞工程细胞工程酶工程酶工程发酵工程发酵工程蛋白质工程蛋白质工程狭义的分子生物学狭义的分子生物学（核酸生物学）（核酸生物学）酶催化与生物合成酶催化与生物合成广义分子生物学广义分子生物学代谢工程代谢工程与与系统生物学与合成系统生物学与合成生物学生物学3232引自引自Neil CampbellNeil Campbell著著BiologyBiology第第4 4版版,1996,1996胰岛素胰岛素蛋白酶蛋白酶蜘蛛毒素蜘蛛毒素光合作用受体光合作用受体金属硫蛋白金属硫蛋白3333Crosstalk-Crosstalk-分子互作分子互作分子互作分子互作Myriads of Myriads of metabolicmetabolicpathwayspathwayscellular cellular networknetworkreprogrammingreprogrammingdiverse diverse phenotypes phenotypes beyond beyond imagination imagination RNAiRNAi3434第三节第三节 分子生物学的发展历程分子生物学的发展历程一、一、1944196619441966年，人类对年，人类对DNADNA和遗传信息传递的和遗传信息传递的 认识阶段认识阶段二、二、1967197819671978年，重组年，重组DNADNA技术的建立和发展阶段技术的建立和发展阶段三、三、19791979年至今，重组年至今，重组DNADNA技术的应用和分子生物技术的应用和分子生物 学迅速发展阶段学迅速发展阶段3535一、认识阶段一、认识阶段1944年，年，Avery 证明证明DNA是遗传物质是遗传物质1950年，年，Chargaff 提出提出Chargaff定则定则1953年，年，Watson&Crick 成功解析了成功解析了DNA分子二分子二级结构级结构1958年，年，DNA半保留复制半保留复制1961年，年，Jacob&Monod 提出了调节基因表达的提出了调节基因表达的操纵子模型操纵子模型3636DNA携带遗传信息RNARNA携带遗传信息携带遗传信息37371 1、遗传信息携带者、遗传信息携带者的确定的确定2 2、DNADNA结构的确定结构的确定1869年年 Miescher发现发现Nuclein 核素。核素。1875年提出核素的实验式。年提出核素的实验式。Altman建立了制备不含蛋白的核素的方法，并定名为建立了制备不含蛋白的核素的方法，并定名为Nucleic acidKessel研究了核酸的化学组成，分离出研究了核酸的化学组成，分离出四种四种碱基。明确提出碱基。明确提出核酸具有含氮碱基。核酸具有含氮碱基。(1910年获诺贝尔奖年获诺贝尔奖)1909年年Levene.P.A发现酵母的核酸含有核糖，以后他又发现发现酵母的核酸含有核糖，以后他又发现脱氧核糖，正确指出了核酸的糖基组成。核苷、核苷酸的分脱氧核糖，正确指出了核酸的糖基组成。核苷、核苷酸的分子结构子结构3838Levene的四核苷酸假说的四核苷酸假说3939AGCTLevenes four necleoside theoryLeveneLevene四核苷酸假说四核苷酸假说:核酸由核酸由4 4种种核苷酸等比例组成核苷酸等比例组成,缺缺乏结构多样性乏结构多样性,不大可能具有重要生理功能不大可能具有重要生理功能4040四核苷酸假说的推翻四核苷酸假说的推翻AGTC四种碱基并非等摩尔比例4141Chargaff.E告诉我们什么？告诉我们什么？当量定律：当量定律：AG=T+C 自然界选择了这些具有特殊结构的碱基，所自然界选择了这些具有特殊结构的碱基，所谓谓“存在就合理存在就合理”。DNA碱基组成具有物种特异性，而无组织碱基组成具有物种特异性，而无组织特异性特异性所有DNA中碱基组成必定是A=T，G=C，这一规律暗示A与T，C与G相互配对的可能性，为Watson和Crick提出DNA双螺旋结构提供了重要依据。4242DNADNA双螺旋的发现双螺旋的发现1938年，年，W.T.Astbury和和Bell用用X衍射研究衍射研究DNA1947年第一张年第一张DNA衍射照片衍射照片1950年年Chargaff的当量规律。的当量规律。1951年年Pauling和和Corey连载连载7篇篇 螺旋结构文章螺旋结构文章1952年年R.Franklin和和Wilkins 一张清晰的一张清晰的DNA结晶结晶X衍射照片衍射照片4343X-ray sourceCrystallized DNARosalind FranklinMaurice WilkinsPhotographicfilm1953-Franklin&Wilkins4444突然之间，一切都变得很清楚冥思苦想4545Watson、Crick的的DNA双螺旋结构双螺旋结构4646DNA的结构的结构47474747Nature171,737-734(1953)(C)MacmillanPublishersLtd.MolecularstructureofNucleicAcidsWATSON,J.D.&CRICK,F.H.C.MedicalResearchCouncilUnitfortheStudyofMolecularStructureofBiologicalSystems,CavendishLaboratory,Cambridge.A Structure for Deoxyribose Nucleic AcidWe wish to suggest a structure for the salt of deoxyribose nucleic acid(D.N.A.).This structure has novel features which are of considerable biological interest.Figure 1This figure is purely diagrammatic.The two ribbons symbolize the two phophate-sugar chains,and the horizonal rods the pairs of bases holding the chains together.The vertical line marks the fibre axis.484819621962年，年，WilkinsWilkins、WatsonWatson和和CrickCrick共获共获诺贝尔生理学或医学奖。诺贝尔生理学或医学奖。Rosalind FranklinRosalind Franklin（1920-19581920-1958）4949Conservative ModelSemiconservative ModelFrank StahlMatt MeselsonParent cellFirst replicationSecond replication1958-Matthew Meselson&Franklin Stahl proved that DNA replication in bacteria follows the semiconservative pathway3 3、DNADNA半保留复制半保留复制4 4、操纵子模型的提出、操纵子模型的提出 1961 1961年，法国科学家年，法国科学家JacobJacob（雅各布）（雅各布）和和MonodMonod（莫诺）提出操纵子学说（莫诺）提出操纵子学说51511965年获得诺贝尔生理医学奖5252二、建立和发展阶段二、建立和发展阶段1970年，Smith&Wilcox 分离到第一种限制性核酸内切酶19721973年，Boyer&Berg 发展了重组DNA技术，并完成了第一个细菌基因的克隆，开创基因工程的新纪元1975年，Southern 发明了DNA片段的印迹法1977年，Sanger双脱氧链终止法5353反转录酶的发现反转录酶的发现 19701970年，年，Temin Temin 和和BaltimoreBaltimore在在RNARNA肿瘤病毒肿瘤病毒（劳氏肉瘤病毒）中发现逆转录酶。（劳氏肉瘤病毒）中发现逆转录酶。5454意义：1.揭示了病毒正链RNA基因组复制和基因表达的一种新类型。2.对20世纪60年代所形成的中心法则理论的重要修饰和补充。3.反转录酶广泛应用于cDNA克隆的技术。反转录酶的发现反转录酶的发现555556561972年 P.Berg在斯坦福大学第一次体外构建重组DNA分子，即将噬菌体基因和E.Coli半乳糖基因插入SV40的环状DNA中。1973年 H.Boyer和S.Cohen用E.coli质粒pSCIOI(Tetr)上仅有一个EcoR切点的特点与另一个质粒R6-3(Neor)组合成嵌合质粒，转化E.coli后在含四环素和新霉素培养基上选出有Tetr和Neor的新转化子。Paul Berg(1926-)基因工程的诞生基因工程的诞生5757Sanger双脱氧链终止法（chain-terminator method）1977年Sanger充分利用DNA复制的生物学特性，设计了一种通过DNA复制来识别4种碱基的方法，进行DNA序列测定，即双脱氧链终止法。1980年，Sanger获得诺贝尔化学奖。5858三、快速发展阶段三、快速发展阶段1981年，Cech 发现了ribozyme1982年，Prusiner 发现了朊病毒prion1985年，Karry Mullis 发明了PCR反应1990年，人类基因组计划正式启动1997年，克隆羊多利诞生，同年GenBank 公布了最新的人类基因图谱2001年，人类基因组计划草图公布595960602020世纪人类科技发展史上的三大创举世纪人类科技发展史上的三大创举 9090年代人类基因组计划年代人类基因组计划6060年代人类首次登上月年代人类首次登上月球（阿波罗登月计划）球（阿波罗登月计划）4040年代第一颗原子弹年代第一颗原子弹爆炸（曼哈顿计划）爆炸（曼哈顿计划）6060Initial sequencing and analysis of the human genomeNature 409,860-921(2001),15 February 2001 International Human Genome Sequencing ConsortiumWhitehead Institute for Biomedical Research,Center for Genome Research:ERIC S.LANDER1*,LAUREN M.LINTON1,BRUCE BIRREN1*,CHAD NUSBAUM1*,MICHAEL C.ZODY1*,JENNIFER BALDWIN1,KERI DEVON1,KEN DEWAR1,MICHAEL DOYLE1,WILLIAM FITZHUGH1*,ROEL FUNKE1,DIANE GAGE1,KATRINA HARRIS1,ANDREW HEAFORD1,JOHN HOWLAND1,LISA KANN1,JESSICA LEHOCZKY1,ROSIE LEVINE1,PAUL MCEWAN1,KEVIN MCKERNAN1,JAMES MELDRIM1,JILL P.MESIROV1,CHER MIRANDA1,WILLIAM MORRIS1,JEROME NAYLOR1,CHRISTINA RAYMOND1,MARK ROSETTI1,RALPH SANTOS1,ANDREW SHERIDAN1,CARRIE SOUGNEZ1,NICOLE STANGE-THOMANN1,NIKOLA STOJANOVIC1,ARAVIND SUBRAMANIAN1&DUDLEY WYMAN1 The Sanger Centre:JANE ROGERS2,JOHN SULSTON2*,RACHAEL AINSCOUGH2,STEPHAN BECK2,DAVID BENTLEY2,JOHN BURTON2,CHRISTOPHER CLEE2,NIGEL CARTER2,ALAN COULSON2,REBECCA DEADMAN2,PANOS DELOUKAS2,ANDREW DUNHAM2,IAN DUNHAM2,RICHARD DURBIN2*,LISA FRENCH2,DARREN GRAFHAM2,SIMON GREGORY2,TIM HUBBARD2*,SEAN HUMPHRAY2,ADRIENNE HUNT2,MATTHEW JONES2,CHRISTINE LLOYD2,AMANDA MCMURRAY2,LUCY MATTHEWS2,SIMON MERCER2,SARAH MILNE2,JAMES C.MULLIKIN2,ANDREW MUNGALL2,ROBERT PLUMB2,MARK ROSS2,RATNA SHOWNKEEN2&SARAH SIMS2 Washington University Genome Sequencing CenterROBERT H.WATERSTON3*,RICHARD K.WILSON3,LADEANA W.HILLIER3,JOHN D.MCPHERSON3,MARCO A.MARRA3,ELAINE R.MARDIS3,LUCINDA A.FULTON3,ASIF T.CHINWALLA3,KYMBERLIE H.PEPIN3,WARREN R.GISH3,STEPHANIE L.CHISSOE3,MICHAEL C.WENDL3,KIM D.DELEHAUNTY3,TRACIE L.MINER3,ANDREW DELEHAUNTY3,JASON B.KRAMER3,LISA L.COOK3,ROBERT S.FULTON3,DOUGLAS L.JOHNSON3,PATRICK J.MINX3&SANDRA W.CLIFTON3 US DOE Joint Genome Institute:TREVOR HAWKINS4,ELBERT BRANSCOMB4,PAUL PREDKI4,PAUL RICHARDSON4,SARAH WENNING4,TOM SLEZAK4,NORMAN DOGGETT4,JAN-FANG CHENG4,ANNE OLSEN4,SUSAN LUCAS4,CHRISTOPHER ELKIN4,EDWARD UBERBACHER4&MARVIN FRAZIER4 Baylor College of Medicine Human Genome Sequencing Center:RICHARD A.GIBBS5*,DONNA M.MUZNY5,STEVEN E.SCHERER5,JOHN B.BOUCK5,ERICA J.SODERGREN5,KIM C.WORLEY5,CATHERINE M.RIVES5,JAMES H.GORRELL5,MICHAEL L.METZKER5,SUSAN L.NAYLOR6,RAJU S.KUCHERLAPATI7,DAVID L.NELSON&GEORGE M.WEINSTOCK8 RIKEN Genomic Sciences Center:YOSHIYUKI SAKAKI9,ASAO FUJIYAMA9,MASAHIRA HATTORI9,TETSUSHI YADA9,ATSUSHI TOYODA9,TAKEHIKO ITOH9,CHIHARU KAWAGOE9,HIDEMI WATANABE9,YASUSHI TOTOKI9&TODD TAYLOR9 Genoscope and CNRS UMR-8030:JEAN WEISSENBACH10,ROLAND HEILIG10,WILLIAM SAURIN10,FRANCOIS ARTIGUENAVE10,PHILIPPE BROTTIER10,THOMAS BRULS10,ERIC PELLETIER10,CATHERINE ROBERT10&PATRICK WINCKER10 GTC Sequencing Center:6161 The Sequence of the Human Genome J.Craig Venter,Mark D.Adams,Eugene W.Myers,Peter W.Li,Richard J.Mural,Granger G.Sutton,Hamilton O.Smith,Mark Yandell,Cheryl A.Evans,Robert A.Holt,Jeannine D.Gocayne,Peter Amanatides,Richard M.Ballew,Daniel H.Huson,Jennifer Russo Wortman,Qing Zhang,Chinnappa D.Kodira,Xiangqun H.Zheng,Lin Chen,Marian Skupski,Gangadharan Subramanian,Paul D.Thomas,Jinghui Zhang,George L.Gabor Miklos,Catherine Nelson,Samuel Broder,Andrew G.Clark,4 Joe Nadeau,Victor A.McKusick,Norton Zinder,Arnold J.Levine,Richard J.Roberts,8 Mel Simon,Carolyn Slayman,Michael Hunkapiller,Randall Bolanos,Arthur Delcher,Ian Dew,Daniel Fasulo,Michael Flanigan,Liliana Florea,Aaron Halpern,Sridhar Hannenhalli,Saul Kravitz,Samuel Levy,Clark Mobarry,Knut Reinert,Karin Remington,Jane Abu-Threideh,Ellen Beasley,Kendra Biddick,Vivien Bonazzi,Rhonda Brandon,Michele Cargill,Ishwar handramouliswaran,Rosane Charlab,Kabir Chaturvedi,Zuoming Deng,Valentina Di Francesco,Patrick Dunn,Karen Eilbeck,Carlos Evangelista,Andrei E.Gabrielian,Weiniu Gan,Wangmao Ge,Fangcheng Gong,Zhiping Gu,Ping Guan,Thomas J.Heiman,Maureen E.Higgins,Rui-Ru Ji,Zhaoxi Ke,Karen A.Ketchum,Zhongwu Lai,Yiding Lei,Zhenya Li,Jiayin Li,Yong Liang,Xiaoying Lin,Fu Lu,Gennady V.Merkulov,Natalia Milshina,Helen M.Moore,Ashwinikumar K Naik,Vaibhav A.Narayan,Beena Neelam,Deborah Nusskern,Douglas B.Rusch,Steven Salzberg,Wei Shao,Bixiong Shue,Jingtao Sun,Zhen Yuan Wang,Aihui Wang,Xin Wang,Jian Wang,Ming-Hui Wei,Ron Wides,Chunlin Xiao,Chunhua Yan,Alison Yao,Jane Ye,Ming Zhan,Weiqing Zhang,Hongyu Zhang,Qi Zhao,Liansheng Zheng,Fei Zhong,Wenyan Zhong,Shiaoping C.Zhu,Shaying Zhao,Dennis Gilbert,Suzanna Baumhueter,Gene Spier,Christine Carter,Anibal Cravchik,Trevor Woodage,Feroze Ali,Huijin An,Aderonke Awe,Danita Baldwin,Holly Baden,Mary Barnstead,Ian Barrow,Karen eeson,Dana Busam,Amy Carver,Angela Center,Ming Lai Cheng,Liz Curry,Steve Danaher,Lionel Davenport,Raymond Desilets,Susanne Dietz,Kristina Dodson,Lisa Doup,Steven Ferriera,Neha Garg,Andres Gluecksmann,Brit Hart,Jason Haynes,Charles Haynes,Cheryl Heiner,Suzanne Hladun,Damon Hostin,Jarrett Houck,Timothy Howland