桂林医学院-药物分析课件与习题.ppt

第六章第六章芳酸类非甾体抗炎药物芳酸类非甾体抗炎药物的分析的分析桂 林 医 学 院2014.05概概 述述本章讲述芳酸及其酯类，本章讲述芳酸及其酯类，以及芳酸盐等药物以及芳酸盐等药物 共共性性：具具有有苯苯环环，又又有有羧基，另有取代基。羧基，另有取代基。结构性质结构性质鉴别试验（定性）鉴别试验（定性）含量测定（定量）含量测定（定量）结结构构特特点点水杨酸（钠）水杨酸（钠）乙酰水杨酸（阿司匹乙酰水杨酸（阿司匹林）林）对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠贝诺酯贝诺酯一、水杨酸类一、水杨酸类结结构构特特点点苯甲酸（钠）苯甲酸（钠）丙磺舒丙磺舒二、苯甲酸类二、苯甲酸类三、其他芳酸类三、其他芳酸类羧基直接连在苯环上羧基直接连在苯环上,羧基成盐成酯羧基成盐成酯取代基有取代基有-OH，-O-C-R，-NHR等等性性 质质 分分 析析物理性质物理性质大多数为固体，因而有一定的熔点，大多数为固体，因而有一定的熔点，少数为液体（如水杨酸甲酯等）少数为液体（如水杨酸甲酯等）大多数不溶于水，溶于沸水及有机大多数不溶于水，溶于沸水及有机溶剂。盐溶于水，不溶于有机溶剂溶剂。盐溶于水，不溶于有机溶剂 性性 质质 分分 析析化学性质化学性质酸性：酸性：H2CO3,酚类酚类药用芳酸药用芳酸HCl,H2SO4注注意意：在在芳芳酸酸类类药药物物中中，取取代代基基为为卤卤素素、硝硝基基、羟羟基基、羧羧基基时时，酸酸性性强强（吸吸电电子子效效应应）；取取代代基基为为甲甲基基、氨氨基基时时酸酸性性弱弱（斥斥电电子子效效应应）；邻邻位位取取代代的的酸酸性性较较对对位位和和间间位位取取代代的的强强；此此外若能形成分子内氢键，也会使酸性增强。外若能形成分子内氢键，也会使酸性增强。性性 质质 分分 析析化学性质化学性质酸性：酸性：芳酸：中性醇中，碱液中和定量；芳酸：中性醇中，碱液中和定量；芳酸酯：水解，酸液回滴定定量。芳酸酯：水解，酸液回滴定定量。芳酸盐：双相滴定。芳酸盐：双相滴定。鉴鉴 别别 试试 验验FeCl3反应（酚羟基反应）反应（酚羟基反应）缩合反应缩合反应水解反应水解反应重氮化重氮化-偶合反应偶合反应氧化反应氧化反应紫外吸收光谱法与红外吸收光谱法紫外吸收光谱法与红外吸收光谱法 FeCl3反应（酚羟基反应）反应（酚羟基反应）COOCOO6OH+4FeCl3(O)2FeFe+6HCl3+6Cl-紫堇色紫堇色反反应应最最适适PH值值为为46（强强酸酸性性溶溶液液中中配配位位化化合合物物分分解解），反反应应灵灵敏敏，可可检检出出1g的的水水杨杨酸酸，如如取取用用量量大大，产产生生颜颜色色过过深深，可加水稀释后观察。可加水稀释后观察。FeCl3反应（酚羟基反应）反应（酚羟基反应）乙酰水杨酸加热水解后呈乙酰水杨酸加热水解后呈FeCl3反应反应COOHCOOHOCOCH3OH苯甲酸盐（无酚羟基）苯甲酸盐（无酚羟基）赭色碱式苯甲酸铁沉淀赭色碱式苯甲酸铁沉淀 紫堇色紫堇色水解反应水解反应阿司匹林（乙酰水杨酸）阿司匹林（乙酰水杨酸）COOHCOONaOCOCH3OH 放冷放冷 加加稀稀H2SO4COOHOH若若为为乙乙酰酰水水杨杨酸酸片片剂剂，进进行行鉴鉴别别时时，取取片片粉粉加加碳碳酸酸钠钠试试液液，加加热热水水解解后后，应应放放冷冷，过过滤滤除除去去赋赋形形剂剂后后，再再加加H2SO4进行观察。进行观察。NaAc+CO2HAc(臭味臭味)氧化反应氧化反应甲芬那酸甲芬那酸 +重铬酸钾重铬酸钾 深蓝色深蓝色 棕绿色棕绿色 缩合反应缩合反应酮洛芬酮洛芬+二硝基苯肼二硝基苯肼 橙色沉淀橙色沉淀 随即随即其它反应重氮化重氮化-偶合反应偶合反应 COOHCOOH+OHOH+NaNO2+2HClCl-+NaCl+2H2ONH2N2COOH+COOHOHOHCl-+NaOH+NaCl+H2ON2HONN橙红色橙红色 HO 15含含 量量 测测 定定中和法中和法柱分配色谱柱分配色谱-紫外分光光度法紫外分光光度法NaNO2法（重氮化法）法（重氮化法）紫外分光光度法紫外分光光度法高效液相色谱法高效液相色谱法中和法（一）中和法（一）直接滴定法直接滴定法COOHCOONaOCOCH3OCOCH3（溶于中性乙醇）溶于中性乙醇）中性乙醇作用：中性乙醇作用：使供试品易于溶解；使供试品易于溶解；防止酯水解防止酯水解注意：中性指对指示剂呈中性，可消除溶剂的干扰。注意：中性指对指示剂呈中性，可消除溶剂的干扰。本法操作简单，但游离水杨酸不合格时，不宜采用本法本法操作简单，但游离水杨酸不合格时，不宜采用本法中和法（二中和法（二）水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法羟基酯结构在碱性溶液中易于水解。羟基酯结构在碱性溶液中易于水解。COOHCOONaOCOCH3OH2NaOH+H2SO4Na2SO4+H2O（剩余）剩余）+NaAc+H2O中和法（二中和法（二）水解后剩余滴定法水解后剩余滴定法注意：注意：此法为酯的通用测定方法；此法为酯的通用测定方法；适适用用于于羟羟基基酯酯（羧羧基基酯酯难难溶溶于于碱碱性性水溶液，可用水溶液，可用KOH醇溶液回流水解）；醇溶液回流水解）；需需做做空空白白实实验验（碱碱受受热热易易吸吸收收CO2）。）。中和法（二中和法（二）方法（方法（USP）：）：取本品约取本品约1.5g，精密精密称定，加入氢氧化钠滴定液称定，加入氢氧化钠滴定液（0.5mol/L）50.0ml，混合，缓缓煮沸混合，缓缓煮沸10min，放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定放冷，加酚酞指示液，用硫酸滴定液（液（0.25mol/L）滴定剩余的氢氧化钠，并滴定剩余的氢氧化钠，并将滴定结果用空白试验校正。每将滴定结果用空白试验校正。每1ml的氢氧的氢氧化钠滴定液（化钠滴定液（0.5mol/L）相当于相当于45.04mg的的C9H8O4。中和法（二中和法（二）T=（10.5）NaOH1/2乙乙B乙乙=10.51/2180.2=45.04mg/ml注注：代代表表滴滴定定度度，是是指指每每ml规规定定浓浓度度的的标标准准液液相相当当于于待待测测物物的的重重量量，其其经验计算公式为：经验计算公式为：T=MB式式中中，M为为滴滴定定度度的的规规定定摩摩尔尔浓浓度度；b为为被被测测物物在在反反应应方方程程式式中中的的摩摩尔尔数数；a为为滴滴定液在反应方程式中的摩尔数；定液在反应方程式中的摩尔数；B为被测物的分子量。为被测物的分子量。本实验方法中本实验方法中2molNaOH 1molH2SO4 1mol本品本品0.5molNaOH 0.25molH2SO4 0.25mol本品本品1mlNaOH(0.5mol/L)1mlH2SO4(0.25mol/L)本品本品18.02mgASA%=%式中：式中：V0为空白实验消耗硫酸量（为空白实验消耗硫酸量（ml）；）；V为剩余滴定时消耗硫酸量（为剩余滴定时消耗硫酸量（ml）；）；M为硫酸滴定液的浓度；为硫酸滴定液的浓度；W为供试品量。为供试品量。22公式推导：公式推导：ASA%=%=45.04%（）原式原式=45.04%=45.04%23中和法（三）中和法（三）两步滴定法两步滴定法ASA中特殊杂质：水杨酸（中特殊杂质：水杨酸（SA），），HAc；片剂中：加枸橼酸或酒石酸做稳定剂。片剂中：加枸橼酸或酒石酸做稳定剂。方法：（方法：（1）中和：中和：水杨酸水杨酸SA-Na醋醋酸酸NaAc枸橼酸枸橼酸枸橼酸钠枸橼酸钠酒石酸酒石酸酒石酸钠酒石酸钠ASAASA-Na中和法（三）中和法（三）（2）水水解解：加加定定量量过过量量的的氢氢氧氧化化钠钠，加加热热水水解解，剩剩余余碱碱液液用用酸酸滴滴定定，并做空白实验。并做空白实验。COOHCOONaOCOCH3OH。+NaAc+H2O中和法（三）中和法（三）操操作作：精精密密称称取取片片粉粉适适量量（约约相相当当于于ASA0.3g），加加中中性性醇醇20ml，振振摇摇溶溶解解，滴滴加加氢氢氧氧化化钠钠滴滴定定液液（0.1mol/L）至至溶溶液液显显粉粉红红色色（以以酚酚酞酞为为指指示示剂剂），加加入入氢氢氧氧化化钠钠滴滴定定液液（0.1mol/L）40.0ml，水水浴浴上上加加热热10min，放放冷冷，加加酚酚酞酞指指示示液液适适量量，用用硫硫酸酸滴滴定定液液（0.05mol/L）滴滴定定剩剩余余的的氢氢氧氧化化钠钠，并并将将滴滴定定结结果果用用空空白白试试验验校校正正。每每1ml的的氢氢氧氧化化钠钠滴滴定定液液（0.1mol/L）相相当当于于18.02mg的的C9H8O4。此方法中：此方法中：T=0.11180.2=18.02mg/ml26 ASA为标示量百分含量为标示量百分含量=18.02%式中：式中：V0为空白实验消耗硫酸量（为空白实验消耗硫酸量（ml）；）；V为剩余滴定时消耗硫酸量（为剩余滴定时消耗硫酸量（ml）；）；M为硫酸滴定液的浓度（为硫酸滴定液的浓度（mol/L）；）；W为供试品片粉量（为供试品片粉量（g）；）；为平均片重。为平均片重。中和法（四）中和法（四）双相滴定法双相滴定法考虑：碱金属盐具弱碱性，直接滴定有困难；析出的游离酸不溶于水，妨碍终点观察。COONaCOOH+HCl+NaCl（弱碱性）不溶于水水相水相转溶于乙醚 （在分液漏斗中加乙醚）柱分配色谱柱分配色谱-紫外分光光度法紫外分光光度法 ASA胶囊为例胶囊为例CPC的一般方法：的一般方法：组成：组成：担体担体硅藻土硅藻土固定相固定相一定一定PH值的缓冲液或酸性溶液或碱性溶液或其他试剂溶液值的缓冲液或酸性溶液或碱性溶液或其他试剂溶液流动相流动相与水不相混溶的有机溶剂与水不相混溶的有机溶剂操作操作:1)担体下端塞少许玻棉；担体下端塞少许玻棉；2)加担体及固定相；加担体及固定相；3)样品分析，洗脱杂质，保留待测物样品分析，洗脱杂质，保留待测物4)洗脱待测物。洗脱待测物。柱分配色谱柱分配色谱-紫外分光光度法紫外分光光度法 ASA胶囊的测定：胶囊的测定：1)SA限量测定限量测定担担体：体：硅藻土硅藻土固定相：固定相：FeCl3-尿素溶液尿素溶液流动相：流动相：氯仿，冰醋酸氯仿，冰醋酸-乙醚乙醚样品液：样品液：ASA的的CHCl3液液SA待测液及标准液，测吸收度，待测液及标准液，测吸收度，A待待A标标 柱分配色谱柱分配色谱-紫外分光光度法紫外分光光度法 ASA胶囊的测定：胶囊的测定：2)ASA的测定担担体：体：硅藻土硅藻土固定相：固定相：NaHCO3液液流动相：流动相：氯仿，冰醋酸氯仿，冰醋酸-氯仿氯仿样品液：样品液：ASA的的CHCl3液液ASA待待测测液液及及标标准准液液，测测吸吸收收度度，得得ASA的含量的含量 NaNO2法（重氮化法）法（重氮化法）对氨基水杨酸钠对氨基水杨酸钠 永停法或电位法指示终点永停法或电位法指示终点