人源性生物制品.ppt

v二、人源性生物制品的种类1.血液制品血液制品2.尿液制品尿液制品3.胎胎盘制品制品4.人体液人体液细胞中的活性物胞中的活性物质v血液制品的定血液制品的定义：由：由健康人血健康人血浆或或特异免疫人血特异免疫人血浆分离、提分离、提纯或由或由重重组DNADNA技技术制成的血制成的血浆蛋白蛋白组份或血份或血细胞胞组份制品，份制品，如人血白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血因子、如人血白蛋白、人免疫球蛋白、人凝血因子、红细胞胞浓缩物物等，用于等，用于诊断、治断、治疗或被或被动免疫免疫预防防。v原料原料：血：血浆v现有种有种类：人血白蛋白，人胎：人血白蛋白，人胎盘血白蛋白，静脉注血白蛋白，静脉注射用的免疫球蛋白等十几种制品。射用的免疫球蛋白等十几种制品。第二节 血液制品P102,NP123血液的组成血液的组成水水HCO3-、Cl-、HPO42 等等Na+、K+、Ca2+、Mg2+等等电解质电解质溶质溶质小分子物质小分子物质血浆血浆血浆蛋白血浆蛋白血细胞血细胞红细胞红细胞白细胞白细胞血小板血小板气体：气体：O2 和和 CO2血血液液白蛋白白蛋白球蛋白球蛋白纤维蛋白原纤维蛋白原营养物质营养物质代谢产物代谢产物激素激素50%60%40%50%91%92%8%9%白细胞白细胞数量：数量：(4-10)x10(4-10)x109 9个个/L/L粒细胞粒细胞淋巴细胞淋巴细胞单核单核-巨噬细胞巨噬细胞一、血液制品的种一、血液制品的种类1.全血全血2.血液成分制品：血液成分制品：红细胞制胞制剂，白，白细胞制胞制剂，血小板制，血小板制剂，血血浆制制剂3.血血浆蛋白制品蛋白制品v国际上大规模生产和推广应用的血液制品主要有三类：国际上大规模生产和推广应用的血液制品主要有三类：1)1)白蛋白白蛋白2)2)各种免疫球蛋白（包括肌注、静注和各种特异性免各种免疫球蛋白（包括肌注、静注和各种特异性免疫球蛋白）疫球蛋白）3)3)凝血因子制剂（主要为凝血因子制剂（主要为FF和和FF浓制剂）。浓制剂）。v就我国目前的血液制品而言，还是以血浆中提纯的就我国目前的血液制品而言，还是以血浆中提纯的血浆蛋白制剂血浆蛋白制剂为主。为主。v血浆蛋白制品获得途径血浆蛋白制品获得途径1)从健康人血浆或从特异免疫人血浆从健康人血浆或从特异免疫人血浆分离、提纯分离、提纯2)用用重组重组DNA技术技术制备重组血浆蛋白制剂。制备重组血浆蛋白制剂。广广广广义义的血液成份制品指由全血分离制的血液成份制品指由全血分离制的血液成份制品指由全血分离制的血液成份制品指由全血分离制备备而成的各种血液而成的各种血液而成的各种血液而成的各种血液成分制品和血液衍生物制品。成分制品和血液衍生物制品。成分制品和血液衍生物制品。成分制品和血液衍生物制品。现现在血液成分制品主要是在血液成分制品主要是在血液成分制品主要是在血液成分制品主要是指以一指以一指以一指以一单单位全血位全血位全血位全血为为原料，用原料，用原料，用原料，用简单简单的物理方法，分离制的物理方法，分离制的物理方法，分离制的物理方法，分离制备备而成的制品，可直接用于而成的制品，可直接用于而成的制品，可直接用于而成的制品，可直接用于临临床床床床输输注而不需要作注而不需要作注而不需要作注而不需要作进进一步一步一步一步处处理。属于理。属于理。属于理。属于“单单供者制品供者制品供者制品供者制品”这类这类制品主要有：制品主要有：制品主要有：制品主要有：红细红细胞、血小胞、血小胞、血小胞、血小板、血板、血板、血板、血浆浆和冷沉淀等。和冷沉淀等。和冷沉淀等。和冷沉淀等。血液成份制品血液成份制品血液衍生物血液衍生物主要指血主要指血主要指血主要指血浆浆蛋白的衍生物。用复蛋白的衍生物。用复蛋白的衍生物。用复蛋白的衍生物。用复杂杂的物理和化学的物理和化学的物理和化学的物理和化学方法将由方法将由方法将由方法将由许许多献血多献血多献血多献血员员采集的混合血采集的混合血采集的混合血采集的混合血浆浆分离制分离制分离制分离制备备而而而而成的血成的血成的血成的血浆浆蛋白制品。主要有：白蛋白、免疫球蛋蛋白制品。主要有：白蛋白、免疫球蛋蛋白制品。主要有：白蛋白、免疫球蛋蛋白制品。主要有：白蛋白、免疫球蛋白和凝血因子制品等。白和凝血因子制品等。白和凝血因子制品等。白和凝血因子制品等。l悬浮红细胞悬浮红细胞(packed RBC)l洗涤红细胞洗涤红细胞(washed RBC)l去甘油冷冻红细胞去甘油冷冻红细胞(Frozen Deglyceride RBC)l新鲜冰冻血浆新鲜冰冻血浆(Fresh Frozen Plasmce FFP)l冰冻血浆冰冻血浆(Frozen Plasmce FP)l去病毒血浆去病毒血浆l冷沉淀冷沉淀(cryoprecipitate)l单采血小板单采血小板(platelet pheresis)l浓缩白细胞浓缩白细胞(WBC concertrate)l辐照血辐照血血液成份制品的种血液成份制品的种类悬浮红细胞24669.5 U全血3050 U血浆29355.4 U冷沉淀3242 U单采血小板4667 人份洗涤红细胞435 U解冻红细胞100.5 U注：血浆以100ml为1单位某院2009年用血一览表l是全血通过离心的方法将大部分血浆移去后，加入适量添是全血通过离心的方法将大部分血浆移去后，加入适量添加剂的红细胞成分加剂的红细胞成分 l主要成份：红细胞、添加剂、稳定的凝血因子，也含有白主要成份：红细胞、添加剂、稳定的凝血因子，也含有白血球和血小板但无功能。血球和血小板但无功能。l悬浮红细胞由于移去了大部分血浆，悬浮红细胞由于移去了大部分血浆，可减少血浆引起的副可减少血浆引起的副作用作用。由于加入保存液，不仅能更好地保存红细胞，还具。由于加入保存液，不仅能更好地保存红细胞，还具有稀释作用，使输注更流畅。有稀释作用，使输注更流畅。l功能：每单位功能：每单位MAP可提升可提升Hb 5 g/L，可提高血液携氧能力。，可提高血液携氧能力。l适应症：适应症：1、慢性贫血、慢性贫血 2、急性失血、急性失血 添加添加剂红细胞（胞（悬浮浮红细胞、胞、红细胞胞悬液）液）优点：除去血液中优点：除去血液中95%的白细胞的白细胞,可避免因白细胞凝集所致可避免因白细胞凝集所致的发热反应及避免受血者产生白细胞抗体的发热反应及避免受血者产生白细胞抗体,有效防止有效防止非溶血非溶血性发热性输血反应性发热性输血反应的发生。的发生。适用疾病适用疾病:1.临床应用于多次输血或妊娠临床应用于多次输血或妊娠,体内产生抗白细胞或血小板体内产生抗白细胞或血小板抗体的患者抗体的患者2.预计需要长期或反复输血的患者预计需要长期或反复输血的患者3.反复出现原因不明的输血发热反应反复出现原因不明的输血发热反应4.准备做骨髓或器官移植的患者准备做骨髓或器官移植的患者;5.有免疫缺陷或免疫抑制的贫血患者有免疫缺陷或免疫抑制的贫血患者去白去白细胞的胞的红细胞胞悬液液l主要成份：主要成份：保留了保留了70%以上红细胞以上红细胞,去除去除98%以上的以上的血浆血浆,90%以上的白细胞、血小板以上的白细胞、血小板,同时也去除了保同时也去除了保存过程中产生的钾、氨、乳酸等代谢产物存过程中产生的钾、氨、乳酸等代谢产物,l功能：每单位可提升功能：每单位可提升Hb 4 g/L。l适应证：临床用于因多次输血而产生白细胞抗体的适应证：临床用于因多次输血而产生白细胞抗体的贫血病人，以及器官移植后病人，减少排斥反应。贫血病人，以及器官移植后病人，减少排斥反应。洗洗涤红细胞胞单采血小板采血小板l主要成份：单一供血者血小板浓缩液，主要成份：单一供血者血小板浓缩液，含高纯度、高浓含高纯度、高浓度的血小板度的血小板，少量白细胞，少量白细胞l功能：提升血小板计数功能：提升血小板计数l适应症：防止和纠正适应症：防止和纠正血小板功能异常血小板功能异常和和血小板计数减少血小板计数减少所造成的严重出血或具有出血倾向的疾病所造成的严重出血或具有出血倾向的疾病 1.血小板血小板10-20109/L，白血病、癌症、，白血病、癌症、AA 2.血小板血小板50109/L，具出血倾向的病人，具出血倾向的病人 3.血小板血小板70109/L，接受外科手术的病人，接受外科手术的病人 4.血小板血小板100109/L，需要脑部开刀的病人，需要脑部开刀的病人 5.先天性血小板机能无力症先天性血小板机能无力症新鲜冰冻血浆 FFPl主要成份：血浆，含所有凝血因子，无白细胞和血主要成份：血浆，含所有凝血因子，无白细胞和血小板。小板。l功能：补充凝血因子功能：补充凝血因子l适应症：心脏手术后有出血现象或大手术后有出血适应症：心脏手术后有出血现象或大手术后有出血现象；大量输血造成的凝血因子稀释；溶血性尿毒现象；大量输血造成的凝血因子稀释；溶血性尿毒症症 冰冻血浆 FPl主要成份：血浆，含稳定的凝血因子；缺乏因子主要成份：血浆，含稳定的凝血因子；缺乏因子、；无白细胞和血小板；无白细胞和血小板l功能：除因子功能：除因子、，其余皆可补充，其余皆可补充l适应症：适应症：1.烫伤病人烫伤病人 2.Ig缺乏缺乏l新鲜冷冻血浆在新鲜冷冻血浆在1-6复融后留下冰渣状不溶性成分，复融后留下冰渣状不溶性成分，高速离心后获得的白色沉淀物高速离心后获得的白色沉淀物l主要成份：凝血因子主要成份：凝血因子、纤维蛋白原、纤维蛋白原l适应症：轻型甲型血友病、血管性血友病、先天性适应症轻型甲型血友病、血管性血友病、先天性或获得性纤维蛋白原缺乏症及因子或获得性纤维蛋白原缺乏症及因子缺乏症病人。缺乏症病人。冷沉淀冷沉淀(三）血三）血浆蛋白制品蛋白制品P105，NP126血血浆水分水分 92%蛋白蛋白质 6-7%白蛋白（白蛋白（Alb）+免疫球蛋白（免疫球蛋白（IgG）=65%免疫球蛋白（免疫球蛋白（IgM）+纤维蛋白原（蛋白原（Fg）+补体（体（C3）+转铁蛋白（蛋白（Tr）+巨球蛋白巨球蛋白（a2M）+触珠蛋白（触珠蛋白（Hp）+a1抗胰蛋白抗胰蛋白酶（a1AT）+血色素血色素结合蛋白（合蛋白（Hpx）+a1-酸酸性糖蛋白性糖蛋白G（a1AG）=25%其它百余种微量蛋白其它百余种微量蛋白质和多和多肽成份成份=10%组组成人体血成人体血成人体血成人体血浆浆的成份：的成份：的成份：的成份：1.白蛋白白蛋白类2.免疫球蛋白免疫球蛋白类3.凝血系凝血系统蛋白蛋白4.补体系体系统蛋白蛋白5.蛋白蛋白酶抑制物抑制物类6.血血浆运运载蛋白蛋白类7.其他血其他血浆蛋白制品蛋白制品血血浆蛋白制品种蛋白制品种类：v（一）白蛋白类制剂（一）白蛋白类制剂P105，NP127v 1、白蛋白的作用、白蛋白的作用（1 1）维持和调节血液渗透压）维持和调节血液渗透压白蛋白是血浆中含量最高的蛋白质，约占血浆总蛋白的一半白蛋白是血浆中含量最高的蛋白质，约占血浆总蛋白的一半多，易大量、高纯度地提取。白蛋白产生的渗透压大而粘度低多，易大量、高纯度地提取。白蛋白产生的渗透压大而粘度低，是最有效的血容扩张剂。，是最有效的血容扩张剂。（2 2 2 2）为组织提供营养）为组织提供营养）为组织提供营养）为组织提供营养白蛋白能结合阳离子，也能结合阴离子，故能输送性质不同白蛋白能结合阳离子，也能结合阴离子，故能输送性质不同的物质，如脂肪酸、激素、金属离子、酶和药物的物质，如脂肪酸、激素、金属离子、酶和药物（3）运输和解毒运输和解毒运输和解毒运输和解毒结合有毒物质运送至解毒器官，然后排出体外；结合有毒物质运送至解毒器官，然后排出体外；l白蛋白在白蛋白在肝肝脏内内产生。每个肝生。每个肝细胞每秒胞每秒钟能合成能合成约7000个个白蛋白分子，正常人每天可合成白蛋白白蛋白分子，正常人每天可合成白蛋白15g，而在失血的情，而在失血的情况下，合成速率可提高况下，合成速率可提高2-3倍。故在肝功能正常，倍。故在肝功能正常，营养充足养充足的情况下，白蛋白的情况下，白蛋白损失后失后补充很快，一般充很快，一般丧失失400ml血血浆，1-2天即可恢复。天即可恢复。v2、白蛋白制剂的种类、白蛋白制剂的种类目前白蛋白类制剂主要有两种：目前白蛋白类制剂主要有两种：人血白蛋白人血白蛋白和和血浆蛋白成血浆蛋白成分分，两者的区别主要在于含白蛋白的，两者的区别主要在于含白蛋白的纯度不同纯度不同，前者为，前者为96%以上，后者为以上，后者为83%以上。以上。（1）人血白蛋白）人血白蛋白v人血白蛋白人血白蛋白是目前国际上使用最多的血液制品是目前国际上使用最多的血液制品，是经是经低温乙醇法低温乙醇法或经批准的其他分离方法，从健康人或经批准的其他分离方法，从健康人静脉血浆中提纯，并经静脉血浆中提纯，并经6010小时加温灭活病毒后制小时加温灭活病毒后制成。有液体和冻干两种剂型。成。有液体和冻干两种剂型。（2）血浆蛋白成分）血浆蛋白成分 是经是经低温乙醇低温乙醇或其它适当的方法提取的血浆蛋白制剂，或其它适当的方法提取的血浆蛋白制剂，一般蛋白质浓度为一般蛋白质浓度为4%或或5%，其中白蛋白占，其中白蛋白占83%以上。以上。2：免疫球蛋白类制品P106，NP127免疫球蛋白构成机体防御感染的体液免疫系免疫球蛋白构成机体防御感染的体液免疫系统。免疫球蛋白种免疫球蛋白种类：IgG、IgA、IgM、IgD、IgE。v正常人免疫球蛋白（肌注免疫球蛋白）正常人免疫球蛋白（肌注免疫球蛋白）v静脉注射免疫球蛋白静脉注射免疫球蛋白v特异性球蛋白特异性球蛋白（1）正常人免疫球蛋白）正常人免疫球蛋白又称又称丙种球蛋白丙种球蛋白或或多价免疫球蛋白多价免疫球蛋白(简称称丙球丙球)，仅供肌肉供肌肉注射用，所以又称肌注免疫球蛋白制注射用，所以又称肌注免疫球蛋白制剂。是采用低温乙醇。是采用低温乙醇法从大量混合血法从大量混合血浆（药典要求典要求1000人份以上）中分离制得人份以上）中分离制得的免疫球蛋白的免疫球蛋白浓缩剂。有。有液体液体剂型型和和冻干干剂型型两种。两种。v1、免疫球蛋白制、免疫球蛋白制剂的种的种类v主要作用：主要作用：主要用来主要用来预防一些病毒性感染防一些病毒性感染，如甲肝、丙肝、麻疹等，如甲肝、丙肝、麻疹等疾病的疾病的预防以及丙种球蛋白缺乏症的治防以及丙种球蛋白缺乏症的治疗。但是国内但是国内滥用正常免疫球蛋白的用正常免疫球蛋白的现象比象比较严重。一些人重。一些人认为经常使用丙种球蛋白可以常使用丙种球蛋白可以“增增强抵抗力抵抗力”或或“有益无害有益无害”。事。事实上上滥用丙球不但无益，而且可能用丙球不但无益，而且可能产生免疫依生免疫依赖等副作用等副作用。是由是由对某些病原微生物具有高效价特异抗体的血某些病原微生物具有高效价特异抗体的血浆制制备的的特异的高效价免疫球蛋白。与正常免疫球蛋白不特异的高效价免疫球蛋白。与正常免疫球蛋白不同，此同，此类制制剂必必须具有至少一种高效价特异抗体具有至少一种高效价特异抗体，用，用于于临床上特定床上特定疾病的疾病的预防和治防和治疗。目前用于目前用于临床的特异性免疫球蛋白有十余种，床的特异性免疫球蛋白有十余种，较常用的如常用的如乙肝免疫球蛋白、甲肝免疫球蛋白、破乙肝免疫球蛋白、甲肝免疫球蛋白、破伤风免疫球蛋白、免疫球蛋白、狂犬免疫球蛋白、狂犬免疫球蛋白、风疹免疫球蛋白、抗疹免疫球蛋白、抗Rh免疫球蛋白、水免疫球蛋白、水痘免疫球蛋白等痘免疫球蛋白等。（2）静脉注射免疫球蛋白）静脉注射免疫球蛋白v（3）特异性免疫球蛋白）特异性免疫球蛋白3.补体系统蛋白制品P107，NP128补体系体系统是机体的主要防御系是机体的主要防御系统之一。之一。（1）补体系体系统在在细胞吞噬、胞吞噬、调理、理、趋化性、化性、细胞凋亡胞凋亡过程中程中起重要作用。起重要作用。（2）补体系体系统在在自身性免疫疾病自身性免疫疾病中，起着中，起着损伤机体机体的作用。的作用。4.凝血系统蛋白制品P107凝血系凝血系统蛋白蛋白维持机体的正常凝血机制。分持机体的正常凝血机制。分为：（1）凝血因子，凝血系）凝血因子，凝血系统共有共有13种凝血因子种凝血因子（2）抗凝血因子。抗凝血因子有）抗凝血因子。抗凝血因子有纤溶溶酶原（原（Pg），当它被），当它被尿激尿激酶激活之后，就具有溶解血栓的作用。激活之后，就具有溶解血栓的作用。13种凝血因子因子因子1-纤维蛋白原（蛋白原（Fg）因子因子2-凝血凝血酶原（原（FII）因子因子3-组织因子（因子（FIII）因子因子4-钙离子离子因子因子5-前加速素，易前加速素，易变因子（因子（FV）因子因子6-因子因子7-前前转化素，化素，稳定因子（定因子（FVII）因子因子8-抗血友病因子（抗血友病因子（AHF）因子因子9-血血浆凝血激凝血激酶成份（成份（PTC）因子因子10-Stuart因子（因子（FX）因子因子11-血血浆凝血激凝血激酶前前质因子因子12-接触因子（接触因子（FXII）因子因子13-纤维蛋白蛋白稳定因子（定因子（FSF）、激）、激肽酶原（原（pK）、高）、高分子量激分子量激肽酶原（原（HMW）、）、纤溶溶酶原（原（Pg）、蛋白）、蛋白C（PC）。）。由于先天性由于先天性遗传缺陷，可缺陷，可发生各种凝血因子缺乏症（生各种凝血因子缺乏症（质和和量的缺陷）。最常量的缺陷）。最常见的是甲型血友病：缺乏因子的是甲型血友病：缺乏因子；其次；其次是乙型血友病：缺乏因子是乙型血友病：缺乏因子；发病率病率约为甲型血友病的甲型血友病的1/4；丙型血友病：缺乏因子；丙型血友病：缺乏因子；一些肝病疾患可引起；一些肝病疾患可引起继发性性凝血因子缺乏，凝血因子缺乏，导致凝血机能障碍。致凝血机能障碍。这些疾患可些疾患可选用相用相应的凝血因子制的凝血因子制剂来治来治疗。v1、凝血因子、凝血因子类制剂类制剂P108（1）凝血因子）凝血因子的作用的作用甲型血友病甲型血友病是是染色体伴性染色体伴性隐性性遗传病，一般病，一般仅为男性患病，男性患病，由于血由于血浆内缺乏内缺乏F：C而而发生出血症状，生出血症状，临床表床表现分分为重重型型、中型、中型、轻型和型和亚临床型，需床型，需输用用F制制剂进行治行治疗（2）生）生产方法方法目前我国生目前我国生产的凝血因子的凝血因子是将健康人新是将健康人新鲜冰冰冻血血浆，经批准的生批准的生产工工艺制得冷沉淀，然后分离、提制得冷沉淀，然后分离、提纯，并，并经病毒病毒灭活活处理、理、冻干制成，称干制成，称为“人凝血因子人凝血因子”。v重组重组F制剂：制剂：是利用基因工程重是利用基因工程重组技技术获得的，在美国已通得的，在美国已通过临床研究，床研究，现已投放于市已投放于市场，用于甲型血友病的治，用于甲型血友病的治疗 2、凝血因子、凝血因子及凝血因子及凝血因子制剂制剂（1）凝血因子）凝血因子的作用的作用乙型血友病乙型血友病是先天性的是先天性的F质量缺陷所引起，多量缺陷所引起，多为男性患病。男性患病。乙型血友病可用乙型血友病可用F制制剂进行治行治疗。（2）生）生产方法方法我国目前生我国目前生产的凝血因子的凝血因子制制剂主要是人凝血主要是人凝血酶原复合物，原复合物，是将健康人血是将健康人血浆经低温乙醇蛋白分离法或批准的其它分离方低温乙醇蛋白分离法或批准的其它分离方法分离法分离纯化，并化，并经病毒病毒灭活活处理、理、冻干制成。干制成。v(2)凝血酶原复合物浓缩剂P108为一一组维生素生素K依依赖性凝血因子性凝血因子、因子、因子、因子、因子、因子因子的混合物，主要的混合物，主要为因子因子。应用：多种原因所致出血用：多种原因所致出血(3)纤维蛋白原制剂一种糖蛋白，是血浆黏滞性的主要决定因素。存在于组分 中。用于低纤维蛋白原血症治疗，可有效纠正因纤维蛋白原缺乏所致的出血。（4）组织纤溶酶原激活剂是一种是一种单链多多肽。激活激活纤溶溶酶原原转变纤溶溶酶，纤溶溶酶水解水解纤维蛋白凝蛋白凝块（纤维蛋白性血栓）成蛋白性血栓）成为纤维蛋白降解蛋白降解产物，从而物，从而溶解溶解血栓。血栓。（5）蛋白酶抑制剂类制品1-1-抗抗胰胰蛋蛋白白酶：一一种种糖糖蛋蛋白白。它它是是血血清清中中最最主主要要的的蛋蛋白白酶抑抑制制剂，对凝凝血血酶、尿尿激激酶等等其其他他酶也也有有抑抑制制作作用用；也也是是一一种种急急性性时相相反反应蛋蛋白白，在在炎炎症症性性疾疾患患时，11抗抗胰胰蛋蛋白白酶可可透透过毛毛细血血管管进入入组织液液，在在炎炎症症局局部往往部往往浓度很高，度很高，对急性炎性疾病有一定限制作用。急性炎性疾病有一定限制作用。抗凝血抗凝血酶：一种由肝：一种由肝脏产生的糖蛋白，是体内的一生的糖蛋白，是体内的一种重要抗凝物种重要抗凝物质，属于，属于丝酶抑制蛋白。能不可逆地抑制抑制蛋白。能不可逆地抑制凝血因子凝血因子a、a、a、a以及由以及由a与与组织因子所因子所形成的复合体，故具有形成的复合体，故具有防止血栓防止血栓的作用。的作用。用于治用于治疗先天性抗凝血先天性抗凝血酶缺乏症，缺乏症，获得性得性抗凝血抗凝血酶缺乏（如肝病引起的缺乏（如肝病引起的酶水平降低），或一些血栓性疾病水平降低），或一些血栓性疾病。2-2-巨球蛋白：是血巨球蛋白：是血浆中分子量最大的蛋白中分子量最大的蛋白质，由肝，由肝细胞与胞与单核核-巨噬巨噬细胞系胞系统合成。具有合成。具有酶抑制抑制剂的作用的作用。抑制炎症抑制炎症组织释放的各种蛋白放的各种蛋白酶，同，同时对不同的病原菌不同的病原菌释放的毒素也起到抑制作用。放的毒素也起到抑制作用。6.血浆运载蛋白类血血浆运运载蛋白是指能蛋白是指能够对机体的机体的营养物养物质、代、代谢产物、激素、物、激素、药物物进行行转输的血的血浆蛋白。具体有：蛋白。具体有：（1）白蛋白）白蛋白-转输脂肪酸、色素、阳离子、脂肪酸、色素、阳离子、药物、物、VC（2）前白蛋白）前白蛋白-转输甲状腺素甲状腺素结合蛋白、合蛋白、视黄醇黄醇结合蛋白合蛋白（3 3）-类脂蛋白脂蛋白-转输脂脂质、胆固醇、激素、胆固醇、激素（4 4）-类脂蛋白脂蛋白-转输脂脂质、胆固醇、激素、胆固醇、激素（5 5）触珠蛋白）触珠蛋白-转输游离血游离血红蛋白蛋白（6 6）血血红蛋白蛋白结合蛋白合蛋白-转输游离血游离血红蛋白蛋白（7 7）转铁蛋白蛋白-将将铁转输给网网织红细胞和其它胞和其它组织（8）铜蓝蛋白蛋白-转输铜，调节铜吸收形成吸收形成酶（9）转钴胺蛋白胺蛋白-转输VB12（10）GC球蛋白球蛋白-转输维生素生素D病毒名称病毒名称大小大小（nm）病病 毒毒包包 膜膜核核 酸酸传传 播播 介介 质质全全 血血血液制品血液制品乙型肝炎病毒（乙型肝炎病毒（HBV）42 DNA丙型肝炎病毒（丙型肝炎病毒（HCV）30-60 RNA 人类免疫缺陷病毒（人类免疫缺陷病毒（HIV）100RNA人嗜人嗜T淋巴细胞病毒淋巴细胞病毒（HTLV）90-140 RNA 巨细胞病毒（巨细胞病毒（CMV）200DNAEB病毒（病毒（EBV）150-180DNA甲型肝炎病毒（甲型肝炎病毒（HAV）27-32RNA丁型肝炎病毒（丁型肝炎病毒（HDV）28-39 RNA人细小病毒（人细小病毒（HPV）18-26DNA克雅氏病（克雅氏病（CJD）蛋白质源性的传染因子（朊蛋白蛋白质源性的传染因子（朊蛋白Prion Protein)二、血液制品的安全性P111）1.可由血液制品可由血液制品传播的病毒播的病毒国家药监局规定：血液制品生产工艺必须包括病毒国家药监局规定：血液制品生产工艺必须包括病毒灭活灭活/去除步骤去除步骤血浆蛋白制品的生产：包括一步或两步病毒灭活血浆蛋白制品的生产：包括一步或两步病毒灭活/去去除工艺步骤除工艺步骤病毒灭活病毒灭活/去除方法：去除方法：须经国家药品管理部门批准后须经国家药品管理部门批准后方可使用方可使用2.2.血液制品的病毒灭活血液制品的病毒灭活 /去除工艺去除工艺v病毒病毒灭活方法：（活方法：（1）加热法v巴氏消毒法（巴氏消毒法（60/10h）即在即在600.5连续加热连续加热10-11小时小时。白蛋白白蛋白采用这个方法进行病毒灭活，通常是在除菌过滤、采用这个方法进行病毒灭活，通常是在除菌过滤、分装到最终容器以后进行加热处理。通常，为防止蛋白分装到最终容器以后进行加热处理。通常，为防止蛋白质变性，在除菌过滤前要加入低浓度的辛酸钠或辛酸钠质变性，在除菌过滤前要加入低浓度的辛酸钠或辛酸钠与与N-乙酰色氨酸作为保护剂。乙酰色氨酸作为保护剂。几十年的临床使用情况证明，采用低温乙醇法和巴氏灭几十年的临床使用情况证明，采用低温乙醇法和巴氏灭活方法生产的白蛋白对肝炎病毒和活方法生产的白蛋白对肝炎病毒和HIV是安全的。是安全的。v干干热法法(80/72h)冻干品加热法冻干品加热法蛋白质冻干除去水分以后可以耐受蛋白质冻干除去水分以后可以耐受60-80或更高温度。在或更高温度。在80以上以上加热可以产生令人满意的对加热可以产生令人满意的对HBV、HCV、HIV和和HAV的病毒灭活效果。的病毒灭活效果。冻干品加热法一般多用于凝血因子类产品。由于冻干后病毒也更稳定，冻干品加热法一般多用于凝血因子类产品。由于冻干后病毒也更稳定，因此，必须进行在规定条件下的病毒灭活验证。因此，必须进行在规定条件下的病毒灭活验证。冻干品加热法的病毒灭活效果受产品的水分残留量、组成成分如蛋白冻干品加热法的病毒灭活效果受产品的水分残留量、组成成分如蛋白质、糖、盐和氨基酸的含量以及冰冻与冻干时间的影响。质、糖、盐和氨基酸的含量以及冰冻与冻干时间的影响。由于病毒灭活对水分残留量特别敏感，因此要根据验证结果设置允许由于病毒灭活对水分残留量特别敏感，因此要根据验证结果设置允许的水分残留限度，并保持瓶间残留水分的差异处于限度内。的水分残留限度，并保持瓶间残留水分的差异处于限度内。v（2）有机溶有机溶剂/表面活性表面活性剂（S/D法）法）P112S/D法法磷酸三丁脂磷酸三丁脂（TNBP）(0.3%)+Cholate(0.2%)（30/6h）TNBP(0.3%)/Tween-80(1%)（24/6h）TNBP(0.3%)/Triton-100(1%)（24/46h）有机溶剂与去污剂的混合物（有机溶剂与去污剂的混合物（S/D）能够破坏包膜病毒）能够破坏包膜病毒的脂膜结构导致受到破坏的病毒无法与感染细胞结合。的脂膜结构，导致受到破坏的病毒无法与感染细胞结合。但该方法不能灭活非脂包膜病毒。但该方法不能灭活非脂包膜病毒。（3）-丙内酯法 P113-丙内丙内酯自自1984年作年作为狂犬疫苗的狂犬疫苗的灭活活剂以来，以来，已被广泛已被广泛应用于多种人和用于多种人和动物疫苗的生物疫苗的生产。但但-丙内丙内酯可能具有致癌性可能具有致癌性（5）低pH法（pH：.000.20;24,21天）低低pH法法在某些酸性条件下在某些酸性条件下,脂包膜病毒可以被灭活。免脂包膜病毒可以被灭活。免疫球蛋白经低疫球蛋白经低pH如如pH4）处理，可以有效灭活几种脂）处理，可以有效灭活几种脂包膜病毒。如在免疫球蛋白生产中，通常采用包膜病毒。如在免疫球蛋白生产中，通常采用20-22，pH4.1培育培育21天。天。灭活条件如灭活条件如pH值、孵放时间和温度、胃酶含量、值、孵放时间和温度、胃酶含量、蛋白质浓度、溶质含量等因素，可能影响灭活效果，蛋白质浓度、溶质含量等因素，可能影响灭活效果，应确定这些参数允许变化的幅度。应确定这些参数允许变化的幅度。（6）美蓝/荧光照射法 P114可可杀灭大多数脂大多数脂质包膜病毒包膜病毒对非脂非脂质包膜病毒包膜病毒杀灭效果不佳效果不佳v病毒去除方法病毒去除方法1.层析（离子交换或亲和层析）层析（离子交换或亲和层析）2.纳米膜过滤纳米膜过滤(使用20nm或50nm的膜过滤。)血液制品常用病毒血液制品常用病毒灭活方法活方法1.人血白蛋白：巴氏消毒法人血白蛋白：巴氏消毒法（60/10小时）小时）2.IVIG/IMIG（包括特异性免疫球蛋白）：（包括特异性免疫球蛋白）：-低低pH孵放法孵放法（pH4）-巴氏消毒法巴氏消毒法-低低pH孵放法加纳米膜过滤孵放法加纳米膜过滤-巴氏消毒法加低巴氏消毒法加低pH孵放法孵放法-S/D（有机溶剂（有机溶剂/去污剂）法去污剂）法3.人凝血因子人凝血因子:-S/D法法-S/D法法/100、30分钟，分钟，干热法：干热法：80、72小时。小时。血液制品常用病毒灭活方法血液制品常用病毒灭活方法第五节 人源性生物制品制备实例P119 NP156v白蛋白又称清蛋白，白蛋白是血浆蛋白中白蛋白又称清蛋白，白蛋白是血浆蛋白中含含量最高、分子量最小、分子数最多量最高、分子量最小、分子数最多的一类蛋白的一类蛋白质。质。v白蛋白对治疗因失血、创伤、烧伤等引起的白蛋白对治疗因失血、创伤、烧伤等引起的休克，脑水肿和大脑损伤性所致的脑压增高，休克，脑水肿和大脑损伤性所致的脑压增高，防止低蛋白血症，肝硬化或者由肾病引起的水防止低蛋白血症，肝硬化或者由肾病引起的水肿与腹水等严重疾病具有良好疗效。肿与腹水等严重疾病具有良好疗效。一、人血浆白蛋白制剂的制备一、人血浆白蛋白制剂的制备白蛋白为白蛋白为单链分子单链分子，由，由584个氨基酸残基个氨基酸残基组成，组成，N端为天门冬氨酸，端为天门冬氨酸，C端为亮氨酸，端为亮氨酸，分子量为分子量为6.6104，在离子强度为，在离子强度为0.15时，时，pI为为4.7，易溶于水，在，易溶于水，在60%硫酸铵饱和度硫酸铵饱和度以上沉淀。对酸较稳定，受热变性。以上沉淀。对酸较稳定，受热变性。v从人体中分离的白蛋白有两种：从人体中分离的白蛋白有两种：一种是一种是从从健康人血浆健康人血浆中分离制得的中分离制得的人血白蛋白人血白蛋白，另一种是从另一种是从健康产妇胎盘健康产妇胎盘中分离制得的中分离制得的胎胎盘血白蛋白盘血白蛋白。常用的血常用的血浆蛋白分离蛋白分离纯化技化技术v1、低温乙醇沉淀法分离血低温乙醇沉淀法分离血浆蛋白蛋白v（1）原理）原理a)在介在介电常数大的溶液中，蛋白常数大的溶液中，蛋白质的溶解度大，在介的溶解度大，在介电常数小的溶液中常数小的溶液中蛋白蛋白质的溶解度就小。的溶解度就小。乙醇能乙醇能显著地降低蛋白著地降低蛋白质水溶液的介水溶液的介电常数，常数，从而使蛋白从而使蛋白质从溶液中沉淀析出从溶液中沉淀析出。b)蛋白蛋白质分子量越大，越先析出；蛋白分子量越大，越先析出；蛋白质分子量越小，越后析出分子量越小，越后析出v乙醇为有机溶剂的优点1.化学性质稳定，毒性低化学性质稳定，毒性低2.可与水任意混合，使用方便可与水任意混合，使用方便3.易得，易回收，污染小易得，易回收，污染小4.冰点低，在生产条件下不产生具有爆炸性危险的气体混冰点低，在生产条件下不产生具有爆炸性危险的气体混合物合物5.抑制细菌生长，对病毒有较强的杀灭作用抑制细菌生长，对病毒有较强的杀灭作用6.对蛋白活性影响小对蛋白活性影响小v1.pHv2.乙醇乙醇浓度度v3.温度温度v4.蛋白蛋白质浓度度v5.离子离子强度度v在五变系统中，对蛋白分离最重要的变化因素是在五变系统中，对蛋白分离最重要的变化因素是pHpH和乙和乙醇浓度醇浓度。v（2）低温乙醇法中影响蛋白）低温乙醇法中影响蛋白质沉沉淀反淀反应的因素的因素A、pH当当pH位于等位于等电点点时，蛋白，蛋白质的溶解度最小，所以最易沉淀的溶解度最小，所以最易沉淀以根据蛋白以根据蛋白质的等的等电点不同点不同顺序沉淀出不同的血序沉淀出不同的血浆蛋白。蛋白。通常低温乙醇法是在通常低温乙醇法是在pH 4.4-7.4之之间进行分离行分离.B、温度、温度温度低，蛋白温度低，蛋白质的溶解度低。的溶解度低。溶液中加入乙醇，因乙醇的水合作用，会溶液中加入乙醇，因乙醇的水合作用，会产生放生放热现象，而温度升高可能造象，而温度升高可能造成蛋白成蛋白质的的变性，所以在低温乙醇工性，所以在低温乙醇工艺中，整个中，整个过程均程均应控制在控制在0-8。如如温度控制不当，温度控制不当，轻则会影响蛋白会影响蛋白质的得率，重的得率，重则引起蛋白引起蛋白质变性。性。C、蛋白、蛋白质浓度度如果溶液的蛋白如果溶液的蛋白质浓度度较大，容易引起多种蛋白共同沉淀，所大，容易引起多种蛋白共同沉淀，所以在分离以在分离过程中，可将蛋白程中，可将蛋白质溶液作适当的稀溶液作适当的稀释，以减少蛋白，以减少蛋白质之之间的相互作用，避免多种蛋白共同沉淀，但的相互作用，避免多种蛋白共同沉淀，但过分稀分稀释，蛋，蛋白白质易易变性，同性，同时增大分离的容量，也不可取。所以增大分离的容量，也不可取。所以应选择适适宜的宜的浓度。度。在低温乙醇工在低温乙醇工艺中，蛋白中，蛋白质浓度范度范围为：0.2-6.6%D、离子、离子强度度盐类与蛋白与蛋白质的互相影响随离子的互相影响随离子强度而度而变化。在低化。在低盐溶液中，溶液中，盐浓度的很小改度的很小改变即可引起蛋白即可引起蛋白质溶解度的极大溶解度的极大变化。离子化。离子强度用度用r/2表示。表示。低温乙醇法工低温乙醇法工艺中离子中离子强度的度的变化范化范围在在0.01-0.16。正常人血清的离子正常人血清的离子强度接近于度接近于0.15。E、乙醇、乙醇浓度度乙醇能降低蛋白乙醇能降低蛋白质溶液的介溶液的介电常数，随着乙醇常数，随着乙醇浓度的增加，度的增加，蛋白蛋白质溶液的介溶液的介电常数逐常数逐渐降低，而其溶解度急降低，而其溶解度急剧下降。下降。在低温乙醇工在低温乙醇工艺中，乙醇的中，乙醇的浓度范度范围在在0-40%。v低温乙醇法优点相对简单的操作，产量高适宜工业化规模生产。保持蛋白质的天然特性。抑菌作用。同时分离多种血浆成分，适于血浆综合利用。乙醇作为主要原材料，价格低廉，易于获得。血血浆EOH：8%，PH：7.2，T：-3，PC：5.1%上清上清沉淀沉淀EOH：25%，PH：6.9，T：-5，PC：3.0%上清上清+沉淀沉淀+（供分离（供分离Ig用）用）EOH：18%，PH：5.2，T：-5，PC：1.6%上清上清-1沉淀沉淀-1Cohn6法法工工艺流流程程上清上清-4沉淀沉淀-4EOH：40%，PH：4.8，T：-5，PC：0.8%上清液上清液沉淀沉淀EOH：40%，PH：4.5，T：-3，PC：3%上清液上清液不不纯物物质EOH：40PH：5.0，T：-5，PC：10%Cohn6法法工工艺流流程程EOH：40%，PH：5.2，T：-5，PC：2.5%上清液上清液白蛋白白蛋白Cohn6法工法工艺流程流程（1）离子交）离子交换层析析（2）凝胶）凝胶过滤层析析（3）亲和和层析法析法层析法析法常用层析载体常用层析载体纤维素（纤维素（cellulose）葡聚糖凝胶（葡聚糖凝胶（Sephadex）琼脂糖凝胶（琼脂糖凝胶（Sepharose）聚丙烯酰胺凝胶（聚丙烯酰胺凝胶（Bio-gel）多孔玻璃珠（多孔玻璃珠（Bio-Glass）v重组人血白蛋白（补）人血清白蛋白人血清白蛋白(humanserumalbumin，HSA）是迄）是迄今今为止止产量最大、用量最多的血量最大、用量最多的血浆蛋白蛋白药物，在物，在临床和床和生物生物产品中的广泛品中的广泛应用使其在国内外均具有很大市用使其在国内外均具有很大市场。v由于由于rHSA批次之批次之间的的产品品均一度好、均一度好、纯度高、生度高、生产规模不受限制、无病毒模不受限制、无病毒传播播风险，从而，从而赋予其巨大的市予其巨大的市场前景。前景。v重组人血白蛋白的种类1.输注用注用rHSA2.辅料料级rHSA3.重重组白蛋白融合蛋白白蛋白融合蛋白药物物v天天天天然然然然尿尿尿尿激激激激酶酶酶酶（UKUKUKUK）是是是是由由由由两两两两条条条条肽肽肽肽链链链链通通通通过过过过二二二二硫硫硫硫键键键键连连连连接接接接而而而而成成成成。是是是是丝丝丝丝氨氨氨氨酸酸酸酸蛋蛋蛋蛋白白白白酶酶酶酶，丝丝丝丝氨氨氨氨酸酸酸酸、组组组组氨氨氨氨酸酸酸酸是是是是活活活活性性性性中中中中心心心心必必必必需需需需的的的的氨氨氨氨基基基基酸酸酸酸。血血血血纤纤纤纤维维维维蛋蛋蛋蛋白白白白溶溶溶溶酶酶酶酶原原原原是是是是唯唯唯唯一一一一的的的的天然蛋白质底物，天然蛋白质底物，天然蛋白质底物，天然蛋白质底物，使纤溶酶原转为纤溶酶使纤溶酶原转为纤溶酶使纤溶酶原转为纤溶酶使纤溶酶原转为纤溶酶。v尿激酶用于治疗各种尿激酶用于治疗各种尿激酶用于治疗各种尿激酶用于治疗各种新血栓形成或血栓梗塞新血栓形成或血栓梗