人感染H7N9禽流感病毒病原学特点及实验室检测.ppt

人感染人感染H7N9H7N9禽流感病毒禽流感病毒病原学特点及实验室检测病原学特点及实验室检测王王 大大 燕燕世界卫生组织流感参比与研究合作中心世界卫生组织流感参比与研究合作中心(WHO CC)(WHO CC)国家流感中心国家流感中心(CNIC)(CNIC)病毒病预防控制所病毒病预防控制所(IVDC)(IVDC)中国疾病预防控制中心中国疾病预防控制中心 (China CDC)(China CDC)20132013年年4 4月月1 1日日病例病例1病例病例2病例病例3既往禽既往禽H7Nx病毒简介病毒简介HPAI H7N7、H7N3、H7N1LPAI H7Nx、H7N2、H7N3、H7N1、H7N9HPAI H7N7、H7N3、H7N4HPAI H7N3（Pakistan）HPAI H7N3LPAI H7N9HPAI H7N3LPAI H7N9禽中暴发的禽中暴发的H7H72006年前暴发的均为HPAI H7欧洲：意大利、英国、德国、比利时、荷兰、丹麦、挪威、捷克、西班牙、瑞典LPAI H7N8、H7N9（Korea）LPAI H7N9近年来人感染禽流感病毒病例病毒亚型病毒亚型病原来源病原来源时间时间/国家国家病例数病例数/临床表现临床表现A/H7N7鸥鸥1980/美国美国3/结膜炎结膜炎A/H7N7鸭鸭1996/英国英国1/结膜炎结膜炎A/H5N1禽禽1997/香港香港18/ILI，肺炎，肺炎A/H9N2鸡鸡1998/中国广东中国广东5/ILI，肺炎，肺炎A/H9N2禽禽1999/香港香港 2/ILIA/H7N2禽禽2002/北美北美（Virginia）1/ILI，血清学诊断，血清学诊断A/H9N2禽禽2003/香港香港 1/ILIA/H5N1禽禽2003/香港香港2/ILI，肺炎，肺炎A/H7N7禽禽2003/荷荷兰兰89/结膜炎结膜炎、ILI、肺炎肺炎;1名死亡病例名死亡病例A/H5N1禽禽2003至今至今,15个国家个国家602/ILI,肺炎肺炎A/H7N2(NY/107)来源不清来源不清2003/北北美美(New York)，1/肺炎肺炎A/H7N3禽禽2004/加拿大加拿大2/结膜炎结膜炎、ILI;1名名LPAI；1名名HPAIA/H5N2禽禽2005/日本日本(Ibaraki)13/无临床症状，血清学诊断无临床症状，血清学诊断A/H7N2禽禽2007/英国英国(Wales)1/结膜炎结膜炎、ILIA/H9N2来源不清来源不清2007/香港香港1/ILIA/H10N7鸭鸭2004/埃及埃及(Ismaillia)2/ILIA/H10N7来源于疫区的鸟来源于疫区的鸟2010/悉悉尼尼(New South Wales)7/上呼吸道感染症状上呼吸道感染症状、结膜炎结膜炎CDC.Avian Influenza A Virus Infections of Humans.http:/www.cdc.gov/flu/avian/gen-info/avian-flu-humans.htm.血清学证据：人感染H4,H5,H6,H7,H9,H10,H11 AIVs.H7H7感染人（感染人（100人人）美国、英国、意大利、荷兰、加拿大HPAILPAI19591/USA H7N719771/USA H7N71979-19804/USAH7N719961/EnglandH7N720021/USAH7N220031/USAH7N27/ItalyH7N389/NetherlandsH7N71 died20041/CanadaH7N31/CanadaH7N320061/NorfolkH7N320074/WalesH7N22/MexicoH7N3H7N9H7N9病毒病毒美洲美洲,1313欧洲欧洲,5,5亚洲亚洲,7,7共25株均为LPAI无感染人病例亚洲：7株均来自野禽5株韩国2株蒙古H7N9H7N9的致病力和传播力的致病力和传播力LPAI H7N9Nose(white bars),lung(black bars)HPAI H7N3和LAPI H7N9均不需经过适应便可在小鼠体内有效复制，且均能在雪貂上下呼吸道有效复制。HPAI H7N3LPAI H7N9LPAI H7N9HPAI H7N3高致病性的HPAI H7N3致小鼠死亡，在雪貂模型中可通过接触传播，但LAPI H7N9在雪貂模型中不传播。中国地区中国地区H7 AIVH7 AIVA/Baers pochard/HuNan/414/2010(H7N1)A/chicken/Hebei/1/2002(H7N2)A/duck/Guangdong/1/1996(H7N3)A/duck/Hubei/126/1985(H7N8)A/duck/Jiangxi/1742/03(H7N7)A/duck/Jiangxi/1760/03(H7N7)A/duck/Jiangxi/1786/03(H7N7)A/duck/Jiangxi/1814/03(H7N7)A/duck/Nanchang/1904/1992(H7N1)A/duck/Nanchang/1944/92(H7N1)A/duck/Zhejiang/10/2011(H7N3)A/duck/Zhejiang/12/2011(H7N3)A/duck/Zhejiang/2/2011(H7N3)A/magpie-robin/China/28710/93(H7)亚型：H7N1,H7N2,H7N3,H7N7,H7N8野禽居多LPAI人感染人感染H7N9H7N9禽流感病毒禽流感病毒实验室检测实验室检测核酸检测核酸检测从3个病例中分离到3株病毒A/Shanghai/1/2013(H7N9)A/Shanghai/2/2013(H7N9)A/Anhui/1/2013(H7N9)病毒分离病毒分离三株H7N9病毒为同一基因类型PB2PB1HANPNAMPNSPA6个内部片段来源于H9N2序列测定序列测定序列特点序列特点l l耐药耐药耐药耐药性分析性分析性分析性分析 对烷胺类药物是耐药对烷胺类药物是耐药的，即的，即M2M2蛋白蛋白25-4225-42位氨基酸发生位氨基酸发生S31NS31N突变突变。l lHAHAHAHA连接肽分析连接肽分析连接肽分析连接肽分析 HA HA蛋白蛋白339339位连接肽由单个（位连接肽由单个（PKGPKGPKGPKGR R R RGLFGGLFGGLFGGLFG）碱性氨基酸组成）碱性氨基酸组成，根据既往根据既往研究，具有这种序列特点的病毒对禽类呈低致病性。研究，具有这种序列特点的病毒对禽类呈低致病性。l l受体结合位点及其它受体结合位点及其它受体结合位点及其它受体结合位点及其它重要位点分析重要位点分析重要位点分析重要位点分析 ShanghaiShanghai/1/2013/1/2013的的HAHA蛋白蛋白 226-228 226-228位氨基酸属于禽源受体结合位点位氨基酸属于禽源受体结合位点（为（为Q Q Q QS SG G G G）。）。Shanghai/2/2013Shanghai/2/2013和和Anhui/1/2013Anhui/1/2013的的HAHA蛋白蛋白 226-228 226-228位氨基位氨基酸受体结合位点（酸受体结合位点（为为L L L LS SG G G G）l lPB2PB2蛋白蛋白627627位氨基酸为位氨基酸为K K K K，提示致病性增强。，提示致病性增强。l lNS1NS1蛋白蛋白9292位氨基酸为位氨基酸为D D D D，与禽流感病毒一致，而与人流感病毒不同。，与禽流感病毒一致，而与人流感病毒不同。HA核酸同源性比较H7进化树红色标记为本次病例H7 人感染病例N9 进化树红色标记为本次病例PB2进化树红色标记为本次病例H7 人感染病例检测方法检测方法2010年及之前下发的年及之前下发的H7引物不再用于引物不再用于检测。检测。今天下发新的今天下发新的H7和和N9检测引物（检测引物（real-time PCR）。）。检测策略检测策略不明原因肺炎不明原因肺炎不明原因肺炎不明原因肺炎病例标本检测：病例标本检测：病例标本检测：病例标本检测：建议各流感监测网络实验室收到不明原因肺炎标建议各流感监测网络实验室收到不明原因肺炎标本后，要在本后，要在1212小时内进行标本处理和核酸检测，小时内进行标本处理和核酸检测，同时进行甲型通用引物，同时进行甲型通用引物，甲型甲型H1N1H1N1流感病毒，季流感病毒，季节性节性H3N2H3N2流感，流感，A A（H5H5）、）、A(H7N9)A(H7N9)亚型流感亚型流感病毒的检测。如果病毒的检测。如果H5H5或或H7H7亚型检测阳性，在生物亚型检测阳性，在生物安全三级实验室进行流感病毒的分离鉴定，安全三级实验室进行流感病毒的分离鉴定，无病无病毒分离条件的实验室，将标本在毒分离条件的实验室，将标本在2424小时内送国家小时内送国家流感中心进行复核鉴定和病毒分离。流感中心进行复核鉴定和病毒分离。谢谢！谢谢！