食用菌生产技术-食用菌菌种制作讲义.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,第一节 食用菌菌种概述,第二节 菌种培养基,第五章 食用菌菌种生产,第一节 食用菌菌种概述,一、菌种的概念,二、菌种类型,三、制种程序,第一节 食用菌菌种概述,一、菌种的概念,菌种（广义）,：是指以保藏、试验、栽培和其它用途为目的，具有繁衍能力，遗传特性相对稳定的,孢子,、,组织,或,菌丝体,及其营养性或非营养性的载体。,菌种（狭义）,：是指以适宜的营养培养基为载体进行纯培养的,菌丝体,，也就是培养基质和菌丝体的联合体。或者说是指人工培养，并供进一步繁殖的食用菌的纯菌丝体。,首先是制作菌种，即通过孢子或菇体组织分离出菌丝体，并加以扩大繁殖形成生产菌种；其次是将制好的菌种接于培养基质，生产出食用菌子实体。,孢子,菇体组织,菌丝体,菌 种,子实体,萌发,分离,食用菌的栽培一般包含几个步骤：,培养基质,菌种按生产程序,一级种,(,母种）,二级种,（原种）,三级种,(,栽培种,）,菌种分为母,种,、原种和栽培种,:,一级种,一级种又称,母种,、,试管种,。,将经孢子分离法或组织分离法得到的纯培养物，移接到试管斜面培养基上培养而得到的纯种。,一支长满菌丝体的试管母种可分移成,10,多支新试管。试管种如果不马上使用，可放于,4,的冰箱中保存。,二级种,二级种又称,原种,，这是由母种转接到装有麦粒等固体培养基质的专有菌种瓶中经过培养后形成。原种可采用,750mL,菌种瓶,或,500mL,罐头瓶,作为培养容器。一般一支母种可扩大繁殖,6,8,瓶原种。,实践中，原种直接用于生产吗？,如果原种直接用于生产，则成本太高，因此，原种还必须进一步扩大繁殖成三级种，使菌种数量增多，才能用于栽培。由于原种的培养基质接近栽培所用的基质，因此原种也可用于小规模的栽培。,三级种,三级种又称,栽培种,，它是由二级种进一步扩大繁殖而得到。,栽培种的培养基质与二级种相似，更接近于栽培基质。三级种数量多、成本低。,栽培种一般采用固体培养基，用聚乙烯塑料袋或玻璃瓶作培养容器。通 常一瓶原种可繁殖,30,50,袋栽培种。,二、菌种类型,使用目的的不同,保藏用菌种,实验用菌种,生产用菌种,物理性状,固体菌种,液体菌种,外观形态,颗粒状菌种,片状菌种,砖状菌种,培养容器,袋装菌种,瓶装菌种,培养基的主料,木屑菌种,木块菌种,粪草菌种,谷粒菌种,棉籽壳菌种,菌种生产是指通过无菌操作，大量培养繁殖菌种的过程。,三、制种程序,食用菌菌种有特定的制作程序，只有掌握了制种技术，才能生产出优良菌种，使食用菌栽培获得成功。,1,、菌种生产的主要设备,（,l,）,配料设备,切片机是将本材切成一定规格木片的专用机械，是食用菌培养基质粉碎处理的预前工序设备。,切 片 机,（,l,）,配料设备,粉碎机,是将木片、秸秆等原料粉碎成一定粗细度碎屑的专用机械。,粉 碎 机,自动上料加水搅拌机,（,l,）,配料设备,搅拌机是将培养料通过搅拌使其分布充分均匀的专业机械,。,搅 拌 机,（,l,）,配料设备,装袋机是将搅拌混合均匀后的培养料装入塑料薄膜筒内的机械。,装 袋 机,（,l,）,配料设备,将培养料装入料瓶的机械。生产上采用的均匀螺旋挤入式装瓶机。,装 瓶 机,（,2,）,灭菌设备,高压灭菌锅是密闭耐压的金属灭菌容器。其工作原理是在驱尽锅内空气的前提下，通过加热把密闭锅内的水蒸气压力升高，从而使蒸汽温度相应提高到,100,以上。压力在,98MPa,时，蒸汽温度可达,121,。,常见的高压灭菌锅有,手提式,、,立式,与,卧式,，也有自制的高压灭菌锅。,手提式,主要用于一级种灭菌，,立式和卧式,主要用于二级种、三级种和栽培瓶、袋的灭菌。,（,2,）,灭菌设备,手提式高压灭菌锅的,容积小,，适用于,试管培养基,、,三角瓶,或,平皿,、,无菌水,、少量,菌种瓶,及一些,器皿,的灭菌。,手提式高压灭菌锅,（,2,）,灭菌设备,立式高压灭菌锅,容量大,，可用于,菌种瓶,、,罐头瓶,及,塑料袋,装培养基的灭菌。,立式高压灭菌锅,（,2,）,灭菌设备,卧式高压灭菌锅,容量大,、,盛物多,，,灭菌彻底,，,效果好,。,卧式高压灭菌锅,（,2,）,灭菌设备,常压灭菌灶是在自然压力下产生,100,蒸汽进行灭菌的炉灶，如土蒸锅。常压灭菌灶,制作简单造价低,，很受菇农欢迎。,常压灭菌灶,（,3,）,接种设备,超净工作台,是一种局部层流,(,平行流,),装置，它能在局部造成高洁净度的工作空间；使小房间内的空气经预过滤器和高效过滤器除尘、洁净后，以垂直或水平层流状态通过操作区，因此，可使操作区保持既无尘又无菌的环境。,超净工作台,（,3,）,接种设备,接种箱是用木材与玻璃制成密闭箱。有,单人式,或,双人对接式,。接种箱前后斜面为玻璃窗，便于操作时观察，可开启，以便取放物品,。,玻璃窗下的木板有一对椭圆形开孔，操作孔装有白布袖套，一端固定在圆孔上，另一端套口用松紧带箍住操作者的手腕，以防杂菌进入。箱内可安装,20W,日光灯和,30W,紫外线灯管。,接种箱,（,3,）,接种设备,A,、,接种针,B,、,接种钩,C,、,接种环,D,、,接种铲,E,、,接种锄,G,、接种刀,H,、接种勺,I,、接种镊,F,、接种耙,接种工具,（,4,）,培养设备,在制作一级种和少量二级种时，可采用,电热恒温箱,或,隔水式电热恒温箱,，目的是控制温度，适温培养,恒 温 箱,2,、,制种用品及材料,(1),药品,基物药品,制作母种时常用的药品有,琼脂、葡萄糖、蔗糖、磷酸二氢钾、硫酸镁、蛋白胨、麦芽汁、酵母膏和维生素,B1,等。,原种和栽培种常用药品有,石膏粉、碳酸钙、过磷酸钙、蔗糖、红糖、尿素、硫酸铵等。,2,、,制种用品及材料,(1),药品,消毒及杀菌药品,5,甲醛,5,石碳酸,0.l,高锰酸钾,75,酒精,2,5,漂白粉,0.1,升汞,1,2,煤酚皂溶液,(,又称来苏尔,),0.25,新洁尔灭,2,、,制种用品及材料,(2),配料用具,常见的配料用具有,搅拌机,天平,杆秤,水桶,铁铲、铝锅、铁锅、搪瓷杯、大烧杯、筐、木箱、塑料箱,脸盆,(3),分装用具,分装用具有,铁架台,漏斗,试管筐,菌种袋,(17cmX 33cm,、,14cmX 28cm,等的聚乙烯或聚丙烯插角、平底袋,),试管,(,18mmXl80mm,、,20mmX200mm,),量杯,(100,、,250,、,500mL),菌种瓶,(750mL,、,500mL,盐水瓶或罐头瓶),培养皿,(d,9cm),三角瓶,250mL,2,、,制种用品及材料,(3),分离及其用具,常用分离用具,钟罩,棉花,纱布,记录本、标签纸、笔,尖头镊子,酒精灯,广口瓶,手术剪,95,酒精,其他用具及材料有：,纱布、工作衣、托鞋、口罩、无菌水、颈圈、绳线、回形针、钉书机等。,第二节 菌种培养基,一、培养基,(,料,),的配制原则,二、培养基的类型,三、菌种培养基的制备,四、消毒与灭菌,第二节 菌种培养基,一、培养基,(,料,),的配制原则,选择适宜的营养物质,食用菌所需的营养物质，不外是,碳源,、,氮源,和,矿质元素,等，对每一种营养物质的种类和数量要求又有所不同。,如培养,木耳、猴头,等木腐菌原种和栽培时，多采用木屑、棉籽壳等为主要原料的培养基；而培养,双孢蘑菇、草菇,等草腐菌的原种和栽培种时，要采用粪草为主要原料的培养基。,在整个菌种制备过程中，从母种，原种到栽培种各个阶段的目的和要求不同，所选用的培养基营养成分也应有不同。,母种,的初生菌丝比较嫩弱，分解养分能力差，因此要求营养丰富、完全，氮源和维生素的比例要高，需选用容易被菌丝吸收利用的物质，如,葡萄糖,、,蔗糖,、,马铃薯,、,玉米粉,、,麦芽汁,、,酵母膏,、,蛋白胨,、,无机盐类,和,生长素,等为原料。,原种、栽培种,所需培养基数量较多，而且菌丝分解物质能力强，可利用大量,农作物秸秆,、,粪草,，,锯木屑,、,棉籽壳,、,麸皮,和,米糠,等原料作为培养基。,一、培养基,(,料,),的配制原则,注意各种营养成分的比例,培养基,(,料,),中各种营养物质的比例是影响菌丝生长的重要因素。营养物质比例适当，菌丝生长发育就好，否则就差。,应根据不同培养对象的需要，配以适当比例。菌丝生长要求培养基,(,料,),有一定的碳氮比，一般碳氮比,(C,：,N),以,20:1,为好。,如培养基,(,料,),中碳源供应不足时，容易引起菌丝的过早衰老和自溶，如氮源过多或过少时，会引起菌丝的过于旺盛生长或生长缓慢，对菌丝生长造成不良影响。,调节适宜的酸碱度,(pH),培养基,(,料,),需要保持菌丝生长发育所需要的酸碱度，因此配制培养基,(,料,),时，要用,氢氧化钠,、,石灰,或,过磷酸钙,等调节,pH,值。,各种食用菌所需要的,pH,值不同，培养基,(,料,),的酸碱度也应不同。,如,猴头,菌丝喜欢酸性环境，需调节,pH,值为,4.0,5.0;,又如,草菇,菌丝喜碱性环境，需将,pH,值调为,7.5,8.0,。,一、培养基,(,料,),的配制原则,一、培养基,(,料,),的配制原则,选择经济实用的原料,制做培养基,(,料,),的原料，有些价格比较贵、成本高，可用一些价格低廉的代用原料理，,可用一些农副产品代替化学药品，常用的有马铃薯、麦芽，玉米面、麦麸等。,在食用菌制种中，原种和栽培种因原料用量较大，选择合适的代用原料，其经济意义就更大。,过去多用麦粒和玉米，现在可用锯木屑和棉籽壳等来代替。但是选用代用料时，必须就地取材，来源丰富、价格便宜的原则，而且原料没有毒性。,二、,培养基的类型,培养基的类型,营养来源,物理状态,表面形式,用途,天然培养基,合成培养基,半合成培养基,固体培养基,液体培养基,半固体培养基,斜面培养基,平面培养基,高层培养基,母种培养基,原种培养基,栽培种培养基,三、菌种培养基的制备,1,、母种（一级种）培养基的配制,种菇或种木的,选择和处理,孢子、组织、种木分离,马铃薯、琼脂、葡萄糖等原料,装入,试管的培养基,排成,斜面的培养基,母 种,接种,配制,灭菌,培养,2,、,母种（一级种培养基的配制方法,工艺流程,计算,配方各物用量,按比例称量各物质,配制,调,pH,分装试管,塞棉塞,灭菌及摆斜面,无菌检查,2,、,母种（一级种）培养基的配制方法,工 艺 流 程,3,、二级种、三级种,培养基的配制方法,工艺流程,设计培养基质配方,按比例称量各物质,天然材料如棉籽壳、木屑等主料的预处理,混合,调节含水,量,装瓶装袋,灭菌,冷却使用,3,、,二级种、三级种,培养基的配制方法,为便于观察和接种，原种容器一般采用透明的专用菌种瓶；瓶口内径为,3225MM,，,瓶径高度为,40MM,，,容量为,750ML,。,也可采用,500ML,罐头瓶；但因其瓶径大，易造成污染和干燥，且瓶颈过短，棉塞塞不牢固，易脱落。,四、,消毒与灭菌,1,、消毒与灭菌的概念,物品上存在着的微生物，为培养出食用菌的纯菌体，必须对食用菌栽培的各环节进行杀菌，这是生产中的一项基本技术。,消毒,具有杀死致病微生物的作用或方法，称为消毒。就食用菌菌种生产而言，消毒是指用物理或化学方法杀灭或消除对食用菌生长发育有害的微生物，通常只能消灭,物体表面,或,环境,中的,一部分微生物,，不能达到消灭所有微生物。,灭菌,指彻底杀菌，用物理或化学等方法，杀死物体上的,一切微生物,，以及它们的,芽孢,和,孢子,，使物体成为无菌状态。,2,、常用消毒和灭菌方法,常用灭菌法,干热灭菌,烘烤灭菌法,焚烧灭菌法,湿热灭菌,高压蒸汽灭菌法,常压蒸汽灭菌法,常用消毒法,紫外线消毒法,煮沸消毒法,化学消毒法,谢谢！,