1、单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,制作泡菜并检测亚硝酸盐含量,JLSSY,BYH,一、乳酸菌,乳酸菌,是,发酵糖类,主要产物为,乳酸,的一类细菌的总称。,属于,原核生物,乳酸菌,种类很多,,常见乳酸菌有乳酸链球菌和乳酸杆菌。,乳酸链球菌(球状),分布:,在自然界分布,广泛,,空气、土壤、植物体表、人或动物肠道内部都有,繁殖:,以二分裂方式进行繁殖,代谢类型:,异养厌氧型,在无氧条件下,将葡萄糖分解成,乳酸,乳酸发酵,:,C,6,H,12,O,6,2C,3
2、H,6,O,3,+,能量,(泡菜原理),酶,二、亚硝酸盐,自然界中,亚硝酸盐,分布广泛,,蔬菜、咸菜、豆粉中均含有。,亚硝酸盐为,白色粉末,,外观与食盐相似,有咸味,易溶于水,可作,食品添加剂,。,亚硝酸盐为,强氧化剂,,能够把血液中携带氧的低铁血红蛋白转变为高铁血红蛋白,从而导致缺氧性中毒症状。,膳食中的亚硝酸盐,一般不会危害人体健康,,但是,当人体摄入的亚硝酸盐总量达到,0.3,0.5g,时,会,引起中毒,,当摄入总量达到,3g,时,会,引起死亡,。,膳食中的绝大部分亚硝酸盐随尿排出,只有在特定的条件下,(,适宜的,pH,、温度和一定的微生物作用,),才会转变成致癌物,亚硝胺,,亚硝胺对
3、动物还具有致畸和致突变作用。,我国卫生标准规定:亚硝酸盐的残留量,在,肉制品,中不得超过,30mg/kg,,,酱菜,中不超过,20mg/kg,,,而,婴儿奶粉,中不得超过,2mg/kg,。,三、泡菜的制作,原料加工,修整、洗涤、晾晒、切分成条状或片状,加调味料装坛,加盐,盐水冷却,泡菜盐水,发酵,成品,测亚硝酸盐含量,制作泡菜,实验操作过程,1,、加入白酒有什么作用?,白酒可抑制泡菜表面杂菌的生长,它也是一种调味剂,可增加醇香感。,思考:,2,、用水封闭坛口起什么作用?不封闭有什么结果?,水,封闭坛口起着使坛内与坛外空气隔绝的作用,空气中,21,是氧气,这是最简易的造成无氧环境的方法。这样,坛
4、内可利用蔬菜中天然存在的乳酸菌进行乳酸发酵。如不封闭,则会有许多需氧菌生长,蔬菜会腐烂。,3,、为什么泡菜坛内有时会长一层白膜,这层白膜是怎么形成的?,形成白膜是由于产膜酵母的繁殖。酵母菌是兼性厌氧微生物,泡菜发酵液营养丰富,其表面氧气含量也很丰富,适合酵母菌的繁殖。,4,、为什么日常生活中要多吃新鲜蔬菜,不吃存放时间过长、变质的蔬菜?,有些蔬菜,如小白菜和萝卜等含有丰富的硝酸盐。当这些蔬菜放置过久时发生变质(发黄、腐烂)或者煮熟后存放太久时,蔬菜中的硝酸盐会被微生物还原成亚硝酸盐,危害人体健康。,腌制条件,腌制过程中,要注意控制腌制的时间、温度和食盐的用量。,温度过高、食盐用量不足,10,、
5、腌制时间过短,容易造成细菌大量繁殖,亚硝酸盐含量增加。一般在腌制,10,天后,,亚硝酸盐的含量开始下降。,测定亚硝酸盐含量的原理:,在,盐酸酸化,条件下,亚硝酸盐与,对氨基苯磺酸,发生重氮化反应后,再与,N-1,萘基乙二胺盐酸盐,结合生成,玫瑰红,溶液。将经过反应显色后的待测样品与,标准液,比色,即可计算出样品中的亚硝酸盐含量。,四、,亚硝酸盐含量的测定,亚硝酸钠标准显色液,步骤,(,1,)配置溶液,(,2,)配制标准液,(,3,)制备泡菜样品处理液,(,4,)比色,(,1,)配置溶液,对氨基苯磺酸溶液:,称取,0.4,克对氨基苯磺酸,溶解于,100ml,体积分数为,20,的盐酸中,避光保存,
6、4mg/ml),。,N-1,萘基乙二胺盐酸盐溶液:,称取,0.2,克,N-1,萘基乙二胺盐酸盐,溶解于,100ml,的,水中,避光保存,(2mg/ml),。,亚硝酸钠溶液:,称取,0.10,克于硅胶干燥器中干燥,24,小时的亚硝酸钠,用水溶解至,500ml,,,再转移,5,ml,溶液至,200 ml,容量瓶,定容至,200ml,(5ug/ml),(,2,)制备标准显色液,用移液管吸取,0.20ml,、,0.40ml,、,0.60ml,、,0.80ml,、,1.00ml,、,1.50ml,亚硝酸钠溶液,分别置于,50ml,比色管中,再取,1,支比色管作为空白对照。并分别加入,2.0ml,对氨基
7、苯磺酸溶液,混匀,静置,3,5,分钟后,再分别加入,1.0ml N-1,萘基乙二胺盐酸盐溶液,加蒸馏水至,50ml,,,混匀,观察亚硝酸钠溶液颜色的剃度变化。,提取剂:,分别称取,50,克,氯化镉、氯化钡,,溶解于,1000ml,蒸馏水中,用盐酸调节,pH,至,1,。,氢氧化铝乳液和,2.5mol/l,的氢氧化钠溶液。,(,2,)配制标准显色液的基本步骤是:,用,刻度移液管,吸取体积,0.2,、,0.4,、,0.6,、,0.8,、,1.0,、,1.5mL,的,亚硝酸钠,溶液分别置于比色管中,另取,1,支比色管为,空白对照,。,向各管加入,2.0mL,对氨基苯磺酸溶液,混匀静置,3,5,分钟。,
8、向各管加入,1.0mL,N-1-,萘基乙二胺盐酸盐,溶液。,最后用,蒸馏水,定容到,50mL,。,(,3,)制备样品处理液的步骤是:,称取,0.4 kg,泡菜,粉碎榨汁,过滤得约,200mL,汁液。,取,100mL,汁液倒入,500mL,容量瓶,添加,200mL,蒸馏水,和,100mL,提取剂,,摇床振荡,1h,,再加,40mL,氢氧化钠溶液,,最后用 蒸馏水 定容到,500mL,并立刻,过滤,获得滤液。,将滤液,60mL,移入,100mL,容量瓶,用,氢氧化铝乳液,(吸附脱色),定容后过滤,获得,无色透明,的滤液。,(,4,)比色,吸取,40ml,透明澄清的滤液,转移到,50ml,比色管中,
9、将比色管做好标记。按步骤,2,的方法分别加入,对氨基苯磺酸溶液和,N-1,萘基乙二胺盐酸盐溶液,并定容至,50ml,,,混匀,静置,15,分钟后,观察样品颜色的变化,并与标准显色液比较,找出与标准液最相近的颜色,记录对应的亚硝酸钠含量,并计算。每隔,2,天测一次,将结果记录下来。,比色的步骤是:,将,40mL,滤液移入,50mL,比色管中,并编号。,分别依次加入,2.0mL,的对氨基苯磺酸溶液 和,1.0mL,的,N-1-,萘基乙二胺盐酸溶液,并定容到,50mL,,混匀静置,15min,。,观察颜色变化,并与,标准显色液,比较,记录亚硝酸盐含量。,计算样品滤液(,40mL,)中亚硝酸盐含量。,
10、计算公式是:,样品中亚硝酸盐含量(,mg,),取样量(,40mL,滤液的质量,,Kg,),基本知识,实验设计,乳酸菌发酵,定义,分类,分布,亚硝酸盐,操作提示,泡菜坛选择,腌制条件,泡菜的制作及亚硝盐检测,发酵原理,能从,葡萄糖,或乳糖的发酵过程中产生乳酸的细菌,乳酸杆菌 乳酸链球菌,葡萄糖,乳酸,国家标准,危害,泡菜制作,亚硝酸盐含量测定,时间、温度、食盐用量、微生物,测定亚硝酸盐含量的操作,结果分析与评价,课堂小结,果酒,果醋,腐乳,泡菜,微生物类型,原理,反应条件,检测方法,酵母菌,真菌,兼性厌氧,醋酸菌,细菌,好氧菌,毛霉,真菌,好氧,乳酸菌,细菌,厌氧菌,酵母菌的无氧呼吸产生酒精,2
11、0,,无氧,重铬酸钾与其反应呈灰绿色,醋酸菌的有氧呼吸产生醋酸,3035,,通入氧气,品尝、,pH,试纸检测,毛霉产生蛋白酶和脂肪酶,15,18,接种,酒精含量控制在,12,左右,乳酸菌无氧呼吸产生乳酸,常温,无氧条件,pH,检测,亚硝酸盐的检测方法,练习,1.,下列关于乳酸菌的叙述,不正确的是,A.,乳酸菌的种类很多,常见的有乳酸链球菌乳酸杆菌,B.,在自然界广发分布,空气、土壤、植物体表、人和动物的肠道内均有,C.,乳酸菌是兼性厌氧菌,无氧时产生乳酸,D.,乳酸菌是厌氧细菌,在无氧的条件下,将葡萄糖分解成乳酸,C,2.,下列关于亚硝酸盐的叙述中,正确的是,A.,亚硝酸盐为白色粉末,易溶于水
12、在食品生产中用作食品添加剂,可多加,B.,绿色食品中不会含有亚硝酸盐,C.,亚硝酸盐在人体胃肠内易变成亚硝胺,D.,水煮越久亚硝酸盐含量越少,C,3.,家庭制作泡菜时并无刻意的灭菌环节,在发酵过程中,乳酸菌产生的乳酸可以抑制其他微生物的生长。当环境中的乳酸积累到一定浓度时,又会抑制乳酸菌自身的增殖。下列对这些现象的描述不正确的是,A.,在发酵初期,泡菜坛内微生物的种内关系主要表现为种内互助,B.,在发酵初期,泡菜坛内的发酵环境使乳酸菌在种间斗争中占据优势,C.,随着发酵的进行,由于乳酸量的积累,种内斗争趋于激烈,D.,发酵后期,泡菜坛内各种微生物的抵抗力维持在较高的水平,D,4.下列关于泡菜
13、发酵过程的叙述中,正确的是,(),A.发酵时间越长,亚硝酸盐的含量越高,B.发酵过程中只有乳酸菌的发酵作用,C.发酵过程中乳酸菌可分解蛋白质和果胶,D.发酵过程中要经常补充水槽中的水,D,1,将接种有乳酸菌的牛奶,100,mL,各,4,份分别装在,100,mL,、,200,mL,、,300,mL,,和,400,mL,的烧瓶内,将口密封,置于适宜温度下培养。,24 h,后产生乳酸最多的是(,),A,100,mL,B,200,mL,C,300,mL,D,400,mL,2,下列关于亚硝酸盐的叙述中,错误的是(,),A,亚硝酸盐为白色粉末,易溶于水,B,亚硝酸盐的分布广泛,其中蔬菜中亚硝酸盐的平均含量约为,4 mg,kg,C,咸菜中的亚硝酸盐的平均含量在,7 mg/kg,以上,所以尽量少吃咸菜,D,亚硝酸盐具有防腐作用,所以在食品中应多加些以延长食品的保质期,A,D,做一做,3,某人利用乳酸菌制作泡菜因操作不当泡菜腐烂。下列原因中正确的是,罐口密闭缺氧,抑制了乳酸菌的生长繁殖 罐口封闭不严,氧气抑制了乳酸菌的生长繁殖 罐口封闭不严,氧气抑制了其他腐生菌的生长和繁殖 罐口封闭不严促进了需氧腐生菌的生长和繁殖(),A,、,B,、,C,、,D,、,B,






