第一课时-动物细胞培养.ppt

单击此处编辑母版标题样式,单击此处编辑母版文本样式,第二级,第三级,第四级,第五级,*,*,专题,2,细胞工程,2.,2.1,动物细胞培养,2.,2,动物细胞工程,取烧伤病人的健康皮肤进行,自体移植,取该患者的皮肤进行细胞培养,获得足量的细胞后再移植。,Q1,：烧伤病人通常怎么治疗呢？,Q2,：但对于大面积烧伤病人来讲，健康皮肤很有限，请同学们想一想如何来治疗该病人？,植物组织培养,动物细胞培养,结果,原理,完整的植株,植物细胞的全能性,细胞增殖,动物细胞,阅读,P44,页“动物细胞培养”概念，回答问题,从动物机体中,取出相关组织,，,将它们,分散,成单个细胞，,然后放在,适宜的培养基,中，,让这些细胞,生长和增殖。,动物细胞培养,聚焦一、动物细胞培养过程,所以，通常取,动物胚胎或幼龄动物的组织、器官,因为其分化程度低、增殖能力强，更容易培养,。,1.,取动物组织块,1,）幼龄与老龄动物的组织细胞比较，分化程度低（胚胎细胞）的与分化程度高（体细胞）的组织细胞比较，哪一种更易于培养？为什么？,1.,取动物组织块,2,）为什么在培养前要将组织分散成单个细胞？,使细胞和培养液接触更充分，便于物质交换。,（,营养容易供应，代谢产物容易排出）,方法：用,胰蛋白酶,或,胶原蛋白酶,处理,1.,取动物组织块,2.,剪碎组织，并分散细胞,蛋白质,3,）用胰蛋白酶分散成细胞，说明细胞间的物质主要是什么？用胃蛋白酶处理可以吗？（,Tip,：动物细胞培养液,PH7.2,7.4,）,4,）细胞膜的成分是什么？胰蛋白酶不会把细胞消化掉吗？为什么？,胰蛋白酶除了可以消化细胞间的蛋白外，长时间的作用也会消化细胞膜蛋白，因此必须控制好,胰蛋白酶的处理时间,。,小知识：由蛋白质构成的细胞外基质将动物细胞粘连在一起构成组织,胃蛋白酶，不可以。,1.,取动物组织块,2.,剪碎组织，并分散细胞,3.,原代培养,阅读,P44,最后一段，找出以下术语并并理解它们的含义,。,细胞贴壁,细胞的接触抑制,原代培养,悬液中分散的细胞贴附在瓶壁上,贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞就会停止分裂增殖,细胞悬浮液第一次在瓶中培养即没有分瓶培养之前的细胞培养,1.,取动物组织块,2.,剪碎组织，并分散细胞,3.,原代培养,4.,传代培养,传代培养,：,将原代细胞从培养瓶中取出，配制成细胞悬浮液，,分装到两个或两个以上的培养瓶中继续培养，称为传代培养。,分瓶之前为原代，分瓶之后为传代,用什么处理贴满壁的细胞，使其分散？,方法：用,胰蛋白酶,或,胶原蛋白酶,处理,1.,取动物组织块,2.,剪碎组织，并分散细胞,3.,原代培养,4.,传代培养,10,代,衰老死亡,大部分,少数,50,代（,细胞株,）,大部分,少数,增殖停止，衰老死亡，核型可能改变,细胞系,（,50,代，无限增殖,）,保持二倍体核型,核型：表现出染色体的数目和形态的模型,动物细胞,原代培养细胞,细胞株,（,10-50,代）,细胞系,50,代,传代到,10,代,原代培养,传代培养,核型保持二倍体,核型可能改变,癌变,5,）目前使用的或冷冻保存的是哪类细胞呢？为什么？,10,代以内的细胞。,因为,10,50,代部分细胞的细胞核型可能发生变化，,有少部分还发生突变向癌细胞方向发展。,6,）细胞培养有接触抑制现象，可能跟细胞膜上的什么物质有关呢？,细胞系,有无接触抑制现象呢？为什么？,当细胞互相挨在一起的时候,糖蛋白,识别了这种信息,就会使细胞停止继续繁殖。,失去接触抑制,多细胞动物和人体的细胞都生活在内环境中，根据你所学的内环境的知识，思考以下问题1.体外培养细胞时需要提供哪些物质和环境条件呢,？,（提示：跟植物组织培养的条件类比）,讨 论,植物组织培养,物质：营养和激素,环境条件：温度；光照；无菌,请阅读课本,P46,页,“,动物细胞培养的条件,”,聚焦二、动物细胞培养条件,1,、无菌、,无毒的环境,对培养液和培养用具进行,；,在培养液中添加一定量的,;,定期更换培养液，,；,2,、营养,糖、氨基酸、无机盐、促生长因子、微量元素等,动物血清、血浆,3,、温度和,pH,4,、气体环境,是一类具有刺激细胞生长活性的物质,无菌处理,抗生素,以清除细胞的代谢产物,俺无糖醋，微雪,血清可以补充合成培养基中缺乏的物质,聚焦二、动物细胞培养条件,1,、无菌、,无毒的环境,2,、营养,3,、温度和,pH,温度,36.5,0.5,度，,pH7.2,7.4,4,、气体环境,O,2,和,CO,2,（,95%,空气和,5%CO,2,）,O,2,是细胞代谢所必需的。,CO,2,维持培养液的,pH,。,聚焦三、动物细胞培养的应用,1,、生产生物制品,病毒疫苗、干扰素、单克隆抗体,等；,2,、动物基因工程离不开动物细胞的培养；,因为动物细胞可作为基因工程的受体细胞,许多致畸、致癌物质加入培养液后，培养细胞会发生,染色体结构和数目的变异,。,3,、用于检测有毒物质及毒性；,苏丹红,号”，,三类致癌物。,4,、培养正常或各种病变的细胞，用于生理、病理药理等方面的研究。,如用于筛选抗癌药物等，为治疗和预防癌症,及其他疾病提供依据,细胞的全能性,大量细胞,植物体,培养结果,相同点,营养、,促生长因子,动物血清,营养、植物激素,培养基成分,液体培养基,固体培养基,培养基性质,细胞增殖,原理,动物细胞培养,植物组织培养,比较项目,植物组织培养和动物细胞培养的比较,均进行有丝分裂，无减数分裂,均无菌操作，需适宜的温度、,PH,等条件,小试牛刀：,1,、用于动物细胞培养的细胞，最好选用（）,A,、任何个体的细胞,B,、成熟个体的体细胞,C,、动物的受精卵,D,、胚胎或幼龄动物的器官和组织细胞,2,、,动物细胞培养过程的顺序是（）,原代培养,传代培养,用胰蛋白酶处理组织，形成分散的细胞悬液,A,、,B,、,C,、,D,、,3,、动物组织培养中胰蛋白酶所起的作用是（）,A,、消化细胞膜易于融合,B,、分散培养基的蛋白质供给细胞营养,C,、使组织分散成单个细胞,D,、用于细胞内物质的分解,D,D,C,4,、贴壁细胞的分裂方式属于（）,A,、无丝分裂,B,、有丝分裂,C,、减数分裂,5,、为了使培养的动物组织细胞分散开以便配制成一定浓度的细胞悬液，对选取的动物组织块应用哪种物质处理（）,A,、胃蛋白酶,B,、胰蛋白酶,C,、盐酸,D,、胰脂肪酶,B,B,